熊果酸治疗急性胰腺炎大鼠的效果及作用机制

【摘要】目的 探讨熊果酸(UA)对急性胰腺炎(AP)大鼠的治疗作用以及可能的作用机制。方法 30只雄性SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、急性胰腺炎组（AP组）和熊果酸组（UA组）,每组10只。除假手术组外,其余两组采用逆行胰胆管注射5%牛黄胆酸钠（1 mL/ kg）诱导大鼠AP模型,假手术组注射等量生理盐水,造模30 min后,UA组给予熊果酸150 mg/kg灌胃,其余两组灌等体积蒸馏水,灌胃12 h后处死大鼠,收集胰腺和血清。酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清中白介素1β（IL 1β）、白介素6（IL 6）、肿瘤坏死因子α（TNF α）含量,全自动生化分析仪测定血清中淀粉酶含量,HE和TUNEL染色观察胰腺病理和凋亡情况,蛋白免疫印迹实验检测胰腺Bcl 2、Bax、cleaved caspase3、p38MAPK、p p38MAPK表达情况,实时荧光定量PCR检测p38MAPK mRNA表达水平。结果 与AP组相比,UA组血清淀粉酶、TNF α、IL 1β、IL 6水平显著下降（P＜001）,胰腺病理情况好转,凋亡细胞减少,Bax/Bcl 2、p p38MAPK/ p38MAPK比值和cleaved caspase3表达量显著降低（P＜001）。结论 熊果酸能降低血清炎性因子和淀粉酶水平,改善胰腺病理损伤和凋亡,其作用机制可能与抑制p38MAPK活性有关。     

水蛭素对大鼠缺血皮瓣血管生成的促进作用及机制

【摘要】目的 研究水蛭素对大鼠缺血皮瓣血管生成的促进作用及其可能机制。方法 取10只SPF级SD大鼠,分别于大鼠背部中线双侧制备缺血皮瓣模型,右侧皮下注射水蛭素2 ATU（实验组）,左侧皮下注射等量生理盐水（对照组）。分别于术后3、7 d,对皮瓣组织行HE染色,经免疫组织化学染色检测后计算血管密度值;术后7 d时,计算皮瓣成活率,用蛋白质免疫印迹法检测血管内皮细胞生长因子（VEGF）、血小板反应蛋白1（TSP l）、p38 MAPK及ERK1/2磷酸化表达情况。结果 HE染色显示,实验组术后3、7 d时皮瓣组织坏死较对照组明显减少,新生血管较对照组明显增多（P＜005）。与对照组比较,实验组术后7 d时皮瓣成活率明显增高（P＜001）。免疫组织化学染色结果显示,术后3 d对照组皮瓣组织表皮层、真皮层均出现明显坏死;术后7 d时,由于对照组皮瓣组织大面积坏死,未观察到成功染色的血管;实验组术后3、7 d时皮瓣组织均未见明显坏死区。实验组术后3、7 d时血管密度值较对照组明显增加（P＜001）,实验术后7 d时血管密度值明显高于术后3 d（P＜005）。实验组术后7 d时VEGF表达水平较对照组明显升高,TSP 1表达水平较对照组明显降低（P＜001）。与对照组比较,实验组术后7 d时p38 MAPK磷酸化表达水平明显降低,ERK1/2磷酸化表达水平明显升高（P＜005）。结论 水蛭素具有促进大鼠缺血皮瓣新生血管形成的作用,其作用机制可能在于诱导血管内皮生长促进因子VEGF的表达和下调血管内皮生长抑制因子TSP 1的表达,可能与p38 MAPK、ERK1/2信号通路密切相关。     

阿魏酸钠对神经病理痛大鼠痛觉的改善及对p38MAPK信号通路的影响

目的 研究阿魏酸钠对神经病理痛大鼠痛觉的改善作用及对p38MAPK信号通路的影响。方法 建立SD大鼠CCI模型,将40只SPF级健康SD雄性大鼠分为假手术组、模型组、阿魏酸钠组、p38MAPK抑制组,每组10只。观察各组大鼠疼痛行为学、脊髓背角5-HT、GABA浓度及p38MAPK、p-p38MAPK、CREB、p-CREB蛋白变化。结果 阿魏酸钠组及p38MAPK抑制组建模后MWT及脊髓背角5-HT、GABA浓度均低于假手术组而高于模型组,TWL短于假手术组而长于模型组,p-p38MAPK/p38MAPK、p-CREB/CREB均高于假手术组而低于模型组,差异均有统计学意义（P＜0.05）,阿魏酸钠组及p38MAPK抑制组上述指标比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 阿魏酸钠能抑制大鼠神经病理痛,其机制可能与抑制p38MAPK信号通路的激活有关。     

髓核源性坐骨神经痛大鼠背根神经节磷酸化 p38MAPK表达的变化

 【目的】 观察髓核源性坐骨神经痛大鼠模型中背根神经节磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)表达的变化及其与炎性反应和机械痛敏的关系,以探讨腰椎间盘突出症的病理机制｡ 【方法】 选择成年SD雄性大鼠66只随机分为空白组(12只)､假手术组(18只)和模型组(36只)｡模型组在左腰5神经背根神经节(L5DRG)自体髓核移植以建立大鼠非压迫性腰椎间盘突出模型,假手术组自体肌肉移植｡空白组不进行手术｡测量各组大鼠术前至术后21 d的左后肢50%机械性撤足阈值(50%PWT)以测定机械痛敏的变化,空白组､假手术组术后7 d及模型组术后7､14､21 d各12只大鼠取左腰5DRG用免疫组化法测定环氧化酶-2(COX-2)与p-p38MAPK的阳性细胞比率｡ 【结果】 假手术组50%PWT术后无明显变化,模型组术后7 d出现明显的50%PWT下降损伤,术后14 d达最低值,术后21 d部分恢复;空白组､假手术组术后7 d DRG 的 COX-2和p-p38MAPK微弱表达,模型组术后7 d DRG的COX-2和p-p38MAPK高表达,模型组术后14 d DRG的COX-2和p-p38MAPK表达更高,模型组术后21 d DRG的COX-2和p-p38MAPK表达减弱｡【结论】 背根神经节的p-p38MAPK的表达与非压迫性髓核所致炎性反应和坐骨神经病理性神经痛的变化密切相关｡     

大鼠脊神经选择性结扎镜像痛模型的筛选建立

目的:研究行为学观察和热辐射缩足反应潜伏期(PWTL)及机械缩足反应潜伏期(MWT)实验筛选建立脊神经选择性结扎(SNL)镜像痛大鼠模型。方法:选取100只成年雄性SD大鼠,将其随机分为SNL组90只和假手术组(Sham组)10只,于术前1 d和术后1、3、7、14、21、28 d进行行为学观察和双足PWTL及MWT实验检测。结果:两组术前行为学观察、PWTL及MWT值比较差异均无统计学意义(P0.05),术后SNL组手术足均出现添足、咬足等行为学现象,且PWTL值和MWT值术后1~28 d均明显低于Sham组,差异均有统计学意义(P0.05)。SNL组有14只大鼠为手术足,于术后7 d出现添足、咬足等行为学现象,术后14、21、28 d的MWT值均明显低于Sham组,且术后21、28 d的PWTL值均明显低于Sham组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:大鼠SNL镜像痛模型筛选和建立成功。     

嘌呤P2X7 受体介导对氯苯丙酸致大鼠 前额皮质蛋白激酶的变化

目的 探讨脑内5- 羟色胺（5-HT）含量下降后大鼠前额皮质受体后信号P38 MAPK、PKC 和 CaMK Ⅱ蛋白和基因表达的变化及P2X7 受体在其中的作用。方法 大鼠分为正常组、对照组、对氯苯丙氨酸 （PCPA）组、P2X7 受体拮抗剂及激动剂干预组。腹腔注射PCPA 使脑内5-HT 合成下降,脑室注射P2X7 受 体拮抗剂和激动剂,采用免疫组织化学、Western blot 和实时荧光定量PCR 检测前额皮质P38 MAPK、PKC 和 CaMK Ⅱ蛋白和mRNA 的表达。结果 与对照组比较,PCPA 组的P38 MAPK 蛋白和mRNA 表达增加,而PKC 和CaMK Ⅱ的蛋白和mRNA 表达水平下降。与PCPA 组比较,P2X7 受体拮抗剂能使P38 MAPK 蛋白和基因 mRNA 表达下降,PKC 和CaMK Ⅱ的蛋白表达水平升高及mRNA 表达水平上升;而P2X7 受体激动剂引起 P38 MAPK 蛋白和mRNA 表达水平升高,PKC 和CaMK Ⅱ的蛋白表达下降和基因mRNA 表达水平下降。结论 P2X7 受体介导了脑内5-HT 下降所致的前额皮质受体后信号P38 MAPK、PKC 和CaMK Ⅱ蛋白和基因表达 的变化。     

右美托咪定对神经病理性痛大鼠脊髓P2X3和P2X4受体表达的影响

摘要：目的  探讨右美托咪定对神经病理性痛大鼠脊髓P2X3和P2X4受体表达的影响。方法  60只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、神经病理性痛组（NP组）和右美托咪定干预组（DI组）,复制神经病理性痛大鼠模型。于模型复制即刻,DI组大鼠腹腔注射40μg/kg右美托咪定,间隔24 h给药1次,连续进行至模型复制成功后14 d,Sham组和NP组给予等量生理盐水腹腔注射。分别于复制模型前（T0）、复制模型后24 h（T1）、72 h（T2）、7 d（T3）和14 d（T4）,对大鼠机械缩足阈值（MWT）和热缩足潜伏期（TWL）进行测定。Western blot检测大鼠脊髓P2X3和P2X4受体总蛋白及膜蛋白的表达。结果  与Sham组比较,NP组和DI组大鼠T1、T2、T3、T4时MWT和TWL降低;与NP组比较,DI组大鼠T2、T3、T4时MWT和TWL升高,差异有统计学意义（P <0.05）。与Sham组比较,NP组大鼠脊髓P2X3和P2X4受体总蛋白及膜蛋白升高;与NP组相比,DI组大鼠脊髓P2X3和P2X4受体总蛋白及膜蛋白降低,差异有统计学意义（P <0.05）。结论  右美托咪定可有效改善神经病理性痛大鼠痛觉过敏症状,可能与抑制脊髓中P2X3和P2X4受体蛋白的表达有关。

     

普拉克索对颅脑损伤大鼠神经功能的保护作用

【摘要】目的 探讨普拉克索对颅脑损伤大鼠神经功能的保护作用。方法 健康成年SD大鼠60只,随机分为假手术组、模型组、普拉克索低（0125mg/kg）和高（025mg/kg）剂量四组,每组15只。模型组和普拉克索组大鼠固定在Feeney’s自由落体架构建大鼠颅脑损伤模型,假手术组只做头部窗口不予打击。模型构建后,普拉克索组灌胃相应剂量的普拉克索,假手术组和模型组灌胃等体积容量的生理盐水,治疗1次/1d,连续14d,分别在治疗第1d、第7d和14d用mNSS评分系统评估各组大鼠的神经功能;术后9～13d进行Morris水迷宫测试,记录各组大鼠逃避潜伏期、目标象限内的穿台次数和停留时间;术后15d取大鼠的脑组织进行免疫组化染色分析活化caspase 3和IL 6的表达;western blot检测大鼠脑组织中NF κB、MMP 9和VEGF蛋白表达量。结果 大鼠术后治疗第一天,各组mNSS评分比较差异无统计学意义（P＞005）,而第7d和14d普拉克索组大鼠mNSS评分显著降低（P＜005）;Morris水迷宫结果显示普拉克索组大鼠的逃避潜伏期显著低于模型组,目标象限的穿台次数和时间明显高于模型组（P＜005）;免疫组化染色结果显示普拉克索组活化caspase 3蛋白和IL 6的表达明显低于模型组;western blot结果显示普拉克索组NF κB、MMP 9和VEGF蛋白表达量显著高于模型组（P＜005）。结论 普拉索克能通过降低脑损伤模型大鼠活化IL 6和活化caspase 3蛋白表达,抑制细胞凋亡,通过激活NF κB信号通路上调MMP 9和VEGF蛋白表达,促进细胞增殖和血管生长,保护脑损伤大鼠神经功能。     

缪刺电针足三里穴、阳陵泉穴对CCI大鼠背根神经节P2X3受体表达的影响

目的观察缪刺电针和患侧电针足三里穴、阳陵泉穴对坐骨神经慢性缩窄性损伤(CCI)模型大鼠痛阈和背根神经节P2X3受体表达的影响。方法通过机械刺激法和热辐射法测定大鼠机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足反射潜伏期(TWL),采用Western blotting法观察大鼠造模侧L4-L6DRG上P2X3受体蛋白的表达。结果①与假模组比较,CCI术后各组大鼠在各时间点MWT和TWL明显降低(P均<0.001);电针7天后,与模型对照组相比,缪刺电针组和患侧电针组MWT和TWL升高(P均<0.05);缪刺电针组和患侧电针组MWT和TWL差异无统计学意义(P均>0.05);②CCI术后第14天,与假模组相比,各组大鼠P2X3受体蛋白表达上调(P均<0.05),与模型对照组相比,电针能够明显减少P2X3受体蛋白的表达(P均<0.001),缪刺电针组与患侧电针组相比,差异没有显著性(P>0.05)。结论缪刺电针和患侧电针足三里穴、阳陵泉穴,均可下调CCI大鼠DRG神经元中P2X3受体蛋白的表达,减轻CCI大鼠机械性痛觉过敏和热痛觉过敏。     

大鼠SNI神经痛模型不同时相脊髓背角 p-p38MAPK和p-ATF2表达的变化

目的观察坐骨神经分支选择性损伤(SNI)模型大鼠不同时间点术侧腰段L4~L6脊髓背角神经元磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)和磷酸化活化转录因子2(p-ATF2)的表达情况,探讨脊髓背角p-p38MAPK和p-ATF2在神经病理性痛模型不同阶段中的作用。方法健康雄性SD大鼠36只,完全随机分为空白对照组、假手术组和手术组,各12只。通过结扎腓总神经及切断胫神经,保留腓肠神经的方法建立SNI大鼠模型。观察造模前、造模后3天和14天术侧足跖缩足阈值(PWT);免疫荧光法检测造模后3天和14天术侧腰段脊髓背角p-p38MAPK和p-ATF2阳性细胞表达情况。结果选模后3天和14天,手术组大鼠术侧足跖PWT较假手术组与空白对照组明显降低(P0.01),假手术组大鼠与空白对照组大鼠比较差异无统计学意义(P0.05)。造模后3天和14天,手术组大鼠术侧腰段脊髓背角p-p38MAPK和p-ATF2阳性细胞表达率较假手术组和空白对照组均明显升高(P0.01),假手术组和空白对照组SNI模型大鼠造模后各时间点,术侧腰段脊髓背角p-p38MAPK和p-ATF2阳性细胞表达率差异均无统计学意义(P0.05)。结论 SNI模型神经病理痛的产生和维持可能与术侧腰段脊髓背角p-p38MAPK和p-ATF2表达上调有关。     

大鼠DRG上的P2X3受体在介导外周伤害刺激引起疼痛的作用机制研究

目的探讨P2X3受体在介导外周伤害刺激引起疼痛的作用及作用机制。方法雄性SD大鼠30只,随机分为A、Β、C、D、E组,每组6只。分组：A组正常对照组足底注射生理盐水;B组大鼠足底注射P2X3受体激动剂ATP;C组大鼠足底注射P2X3受体强效激动剂α、β-meATP;D组大鼠足底注射P2X3受体强效激动剂和P2X3受体拮抗剂α、β-meATP＋TNP-ATP,E组大鼠足底注射P2X3受体激动剂和P2X3受体拮抗剂ATP＋TNP-ATP,观察缩脚次数,每5 min作为一个观察单位持续观察一个小时,大鼠DRG急性分离。采用免疫组化的方法分别测定每组DRG上P2X3受体。结果1、大鼠足底注射生理盐水未出现伤害性行为学反应。而ATP、α、β-meATP组大鼠左足底注射约5 min左右出现明显的伤害性行为反应如咬尾、摆尾及缩脚,α、β-meATP组最为明显。两组缩脚次数有显著差异性P〈0.05。而应用抑制剂之后缩脚次数明显减少,A组和D组相比P〈0.05,A组和E组相比P〈0.01。D、E组相比P〈0.05。2、DRG的P2X3受体表达：P2X3在DRG中小神经元细胞的胞体,α、β-meATP组阳性细胞数表达显著占46%、ATP组占35%,生理盐水占28%,TNP-ATP占20%。α、β-meATP组胞浆呈棕褐色,而ATP组胞浆呈棕黄色。A和B组阳性细胞数差异性显著P〈0.05,α、β-meATP组与α、β-meATP-TNP＋ATP组相比阳性细胞数有显著差异P〈0.01。结论DRG上P2X3受体在介导感觉神经的伤害性信息的传递中起重要作用。     

脊髓背角P2X4、P2Y12和P2Y13受体参与AM1241对CCI大鼠的镇痛效应

目的 观察鞘内注射大麻素CB2受体激动剂AM1241对慢性坐骨神经结扎(CCI)大鼠机械痛阈、脊髓背角P2X4P2Y12和P2Y13受体表达变化的影响.方法 健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠40只随机分为5组(n=8):假手术组、CCI组(坐骨神经结扎+鞘内注射0.005％ DMSO生理盐水)、1 pmol/LAM1241处理组(坐骨神经结扎+鞘内注射AM1241 1pmol/L) 、10 pmol/LAM1241处理组(坐骨神经结扎+鞘内注射AM1241 10 pmol/L)、100 pmol/LAM1241处理组(坐骨神经结扎+鞘内注射AM1241 100 pmol/L).CCI组及不同浓度AM1241处理组大鼠均于鞘内置管7d之后行坐骨神经结扎,连续14 d鞘内注射,每天2次;分别在术前1d,术后第1、3、5、7、10、14天注射1h后测定机械痛阈(MWT),分别在术后第7,14天免疫印迹法(western blot)观察脊髓背角P2X4、P2Y12和P2Y13受体表达变化.结果 ①CCI组术后第1、3、5、7、10、14天MWT显著低于假手术组(P＜0.05),10 pmol/L AM1241和100 pmol/L AM1241处理组术后第1、3、5、7天MWT明显高于CCI组(P＜0.01);但10 pmol/L AM1241处理组术后第10、14天MWT与CCI组相比无明显差异(P＞0.05);100 pmol/LAM1241处理组术后第10、14天MWT仍高于CCI组(P＜0.05);②与假手术组相比,CCI组术后第7、14天脊髓背角P2X4、P2Y12和P2Y13受体表达显著上调(P＜0.01);与CCI组相比,100 mol/L AM1241处理组在术后第7天抑制脊髓背角P2Y12和P2Y13受体表达(P＜0.05),在术后第14天抑制背角P2X4受体表达(P＜0.05).结论 大麻素CB2受体激动剂AM1241的镇痛效应可能与抑制脊髓背角小胶质细胞P2X4、P2Y12和P2Y13受体表达有关.     

大鼠心肌梗死后与FSTL1和miRNA 200的表达及其机制

【摘要】 目的 探讨SD大鼠急性心肌梗死（AMI）与血清卵泡抑素样蛋白1（FSTL1）及其相关miR 200b 3p的表达情况。方法 20只SD大鼠分为AMI组和Sham组,AMI组结扎大鼠左冠状动脉前降支,而Sham组不结扎,术后1d收集两组大鼠静脉血和心脏组织,采用ELISA法检测大鼠血浆cTnI和FSTL1的表达,用qRT PCR法检测大鼠血浆、组织rno miR 200b 3p和组织FSTL1的表达,采用Western blot法检测组织FSTL1的表达。结果 AMI组大鼠心肌梗死后1d血浆FSTL1的表达较Sham组明显升高（P＜005）,其ROC曲线AUC为1000（P＜005）;而AMI组大鼠心肌梗死后1d心脏组织中FSTL1的表达无论在基因水平还是蛋白水平都较Sham组明显降低（P＜005）;AMI组大鼠术后1d血浆中rno miR 200b 3p的表达较Sham组明显降低（P＜005）,而AMI组大鼠术后1d心脏组织中rno miR 200b 3p较Sham组明显升高（P＜005）。结论 FSTL1和rno miR 200b 3p都可能与大鼠AMI有关,FSTL1可以作为AMI的心肌标志物,rno miR 200b 3p可能通过调控FSTL1的表达而参与AMI发病机制的炎症反应、氧化应激和细胞凋亡等过程。     

抑制TNFR/RIPK信号通路对神经细胞凋亡的影响及机制研究

【摘要】 目的 研究抑制TNFR/RIPK信号通路对急性脊髓损伤（ASCI）大鼠神经细胞凋亡的影响及作用机制。方法 160只雄性SD大鼠,随机分为空白对照组、假手术组、模型组、Nec 1组,每组又根据时间点分为12h、24h、3d、7d四个亚组。采用动脉夹钳夹法制作ASCI模型,空白对照组不做任何处理,假手术组仅暴露脊髓,不损伤脊髓,模型组和Nec 1组用动脉瘤夹脊髓全横截面1min,缝合伤口。空白对照组、假手术组和模型组注射给予生理盐水,Nec 1组注射坏死性凋亡抑制剂Necrostain 1（Nec 1）溶液1μl/kg,1次/d,分别给药12h、24h、3d、7d。给药后以BBB评分对各组大鼠后肢神经功能恢复情况进行评分,完成评分后,取10只给药7d的大鼠脊髓,进行HE染色、Nissl染色、碘化丙啶（PI）染色、Tunel染色;另取10只给药7d的大鼠,取脊髓,用Western Blot检测RIP1、RIP3、Bcl 2蛋白表达情况。结果 模型组和Nec 1组各时间点的BBB评分均显著低于空白对照组和假手术组（P＜005）,Nec 1组各时间点的BBB评分显著高于模型组（P＜005）。造模7d后,模型组脊髓出现坏死、空洞现象,大量炎性细胞浸润,坏死区域面积显著高于假手术组（P＜005）;尼氏体呈细颗粒状,神经元数量减少、染色浅、排列无序,坏死性凋亡细胞较多;PI红染细胞、Tunel阳性细胞数、凋亡小体数量,以及RIPK1、RIPK3、Bcl 2蛋白表达水平显著多于假手术组（P＜005）。给予Nec 1治疗7d后,Nec 1组脊髓坏死组织较模型组少,空洞现象得到改善,炎性细胞浸润现象好转,Nec 1组坏死区域面积显著低于空白对照组和假手术组（P＜005）;尼氏体着色的神经元细胞染色较深,颗粒变粗,存活神经元数量显著高于模型组（P＜005）;PI红染细胞数、凋亡小体数,以及RIPK1、RIPK3蛋白表达水平显著少于模型组（P＜005）,Bcl 2蛋白表达水平显著高于模型组（P＜005）。结论 坏死性凋亡抑制剂Nec 1能通过抑制TNFR/RIPK信号通路,下调RIPK1、RIPK3、上调Bcl 2的表达来缩小ASCI损伤面积,缓解炎症浸润,减少损伤周围神经元数量,改善神经元功能,提高损伤神经元及胶质细胞存活率,改善大鼠BBB评分,抑制坏死性凋亡。     

小剂量氯胺酮抑制慢性神经痛大鼠大脑皮质P2X4受体表达

目的观察小剂量氯胺酮腹腔注射对慢性坐骨神经收缩损伤（CCI）大鼠的镇痛效应及其对大鼠大脑皮质P2X4受体表达的影响．探讨其可能的镇痛机制。方法24只SD大鼠随机分为假手术组、CCI组及氯胺酮治疗组（n=8）。CCI组及氯胺酮治疗组大鼠均制备慢性坐骨神经痛CCI模型;术后3d测定热缩足反射潜伏期（thermal withdrawal latency,TWL）确定痛党过敏形成后,氯胺酮治疗组大鼠腹腔注射小剂量氯胺酮（10mg／kg）,CCI组腹腔注射等量的生理盐水,给药至术后7d。假手术组大鼠单纯坐骨神经暴露,不用肠线结扎．也不给药治疗。分别于术前1d、术后1、3、7d用热辐射法测定TWL;术后7d用免疫组织化学法检测大鼠大脑皮质P2X4受体的表达。结果术前1d三组大鼠TWL无统计学差异;假手术组术后术侧TWL轻度下降,但与术前相比无统计学差异。与术前及CCI组及假手术组相比．氯胺酮治疗组术后3d始TWL呈进行性下降,以术后7d为甚（P〈0．05）;术后7d氯胺酮治疗组TWL较CCI组显著升高（P〈0．05）,但仍低于假手术组（P〈0．05）。与假手术组相比,CCI组及氯胺酮治疗组大鼠术侧大脑皮质P2X4受体表达显著增加（P〈0．01）;氯胺酮治疗组P2X4受体表达明显少于CCI组（P〈0．05）。结论小剂量氯胺酮腹腔注射可部分缓解慢性神经痛大鼠的痛觉过敏症状,可能部分与其直接或者间接抑制大脑皮质P2X4受体表达有关。     

大鼠坐骨神经损伤后DRG神经元P2X3受体表达的变化

目的 应用免疫组织化学技术,探讨大鼠坐骨神经损伤后不同时间段L4～L5节段DRG神经元P2X3受体表达的变化.方法 实验动物分为对照组、损伤2d组和损伤7d组,分别建立大鼠坐骨神经离断模型,在2d、7d后按照组化方法常规取材、切片、染色,观察坐骨神经损伤后不同时间段DRG神经元P2X3受体表达的变化.结果 对照组、损伤2d组、损伤7d组DRG神经元P2X3受体阳性神经元百分比率分别为31.73%、35.26%、42.93%.坐骨神经损伤2d后DRG神经元P2X3受体表达差异无统计学意义(P＞0.05);而坐骨神经损伤7d后DRG神经元P2X3受体表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 坐骨神经损伤后不同时间段DRG神经元P2X3受体表达发生了不同的变化.     

金雀异黄酮对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响

【摘要】目的 探讨金雀异黄酮对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠心肌细胞凋亡Bcl 2、Bax和Caspase 3蛋白及mRNA表达的影响。方法 60只雄性SD大鼠分别为假手术组、模型组、阿司匹林组（10 mg·kg-1·d-1）、金雀异黄酮低剂量组（20 mg·kg-1·d-1）、中剂量组（40 mg·kg-1·d-1）和高剂量组（80 mg·kg-1·d-1）,每组10只。给药2周后经典方法构建MI/RI大鼠模型后HE染色检测心肌组织;采集血清测乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同功酶(CK MB)和α 羟丁酸脱氢酶（α HBD）,采集心脏检测丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、总抗氧化能力(T AOC)和一氧化氮合酶（NOS）;同时,RT PCR和Western Blotting检测心肌组织中Bcl 2、Bax和Caspase 3蛋白及mRNA表达。结果 假手术组心肌排列整齐无断裂,模型组出现大量断裂;与模型组相比,各治疗组明显改善;模型组大鼠血清LDH、CK、CK MB、α HBD高于假手术组（P＜005）,心肌MDA水平高于假手术组（P＜005）,心肌SOD、T AOC及 NOS水平均低于假手术组（P＜005）;与模型组比较,金雀异黄酮三个剂量组和阿司匹林组血清LDH、CK、CK MB、α HBD明显降低（P＜005）,心肌MDA明显降低（P＜005）,心肌SOD、T AOC及NOS明显升高（P＜005）;模型组大鼠心肌Bcl 2蛋白和mRNA表达均低于假手术组（P＜005）,Bax和Caspase 3蛋白和mRNA表达均高于假手术组（P＜005）,而金雀异黄酮三个剂量组和阿司匹林组Bcl 2显著上调（P＜005）,Bax和Caspase 3显著下调（P＜005）。结论 金雀异黄酮可抑制心肌细胞凋亡,同时提高心肌抗氧化能力,抑制MI/RI给心肌带来的损伤。     

吗啡联合不同剂量丁丙诺啡对大鼠骨癌痛疼痛行为学实验的影响

【摘要】目的 研究吗啡联合不同剂量的丁丙诺啡对大鼠骨癌痛疼痛行为学实验的影响。方法 取60只健康成年雌性Wistar大鼠,通过Walker 256细胞制备骨癌痛动物模型,将实验大鼠随机分为假手术组（皮下注射09%氯化钠溶液1 mL）、吗啡组（皮下注射吗啡10 mg/kg）、联合1组（皮下注射吗啡10 mg/kg联合丁丙诺啡20 μg/kg）,联合2组（皮下注射吗啡10 mg/kg联合丁丙诺啡40 μg/kg）、联合3组（皮下注射吗啡10 mg/kg联合丁丙诺啡60 μg/kg）,每组各12只,均连续给药1周。造模2周后,每日均进行热痛觉敏感度、机械性痛觉敏感度及甩尾实验,实验时间为1周。结果 吗啡组给药第1~4 d时热痛阈值明显高于假手术组（P＜005）,第5~7 d时热痛阈值与假手术组比较差异无统计学意义（P＞005）。联合1组、联合3组给药第1~3 d时热痛阈值明显高于假手术组(P＜005),联合1组第1~3 d、联合3组第2~3 d时热痛阈值均低于吗啡组（均P＜005）。第4~7 d时联合1组、联合3组热痛阈值与假手术组比较差异均无统计学意义（均P＞005）。吗啡组给药第5 d时出现热痛阈值明显下降,而联合2组在第6 d时出现热痛阈值下降,与假手术组比较差异均无统计学意义（均P＞005）。随着给药时间的延长,吗啡组与各联合组机械阈值和抗伤害痛阈值均明显下降（P＜005）。假手术组不同时间机械阈值和抗伤害痛阈值比较差异均无统计学意义（均P＞005）;吗啡组与各联合组不同时间的机械痛阈值和抗伤害痛阈值均明显高于假手术组（均P＜005）;联合1组、联合2组、联合3组给药1周机械痛阈值、抗伤害痛阈值与吗啡组比较差异均无统计学意义（均P＞005）。结论 吗啡联合不同剂量的丁丙诺啡对骨癌痛大鼠的镇痛效果相当,但吗啡10 mg/kg联合丁丙诺啡40 μg/kg应用时可延迟吗啡的耐受发生。     

祖师麻肠溶微丸对结扎坐骨神经所致痛觉敏感大鼠背根神经节P2X4受体及P38MAPK表达的影响

目的:观察灌胃给予祖师麻肠溶微丸对CCI大鼠的MWT以及背根神经节中P2X4和P38MAPK受体的影响,探究祖师麻肠溶微丸治疗坐骨神经痛的机制。方法:术后第8天按MWT值对位随机分配法分为7组:Control组、Sham组、Model组、Positive Drug组、HEPZ组、MEPZ组和LEPZ组,于术后第8天开始灌胃给药。给药14 d后灌注固定,取背根神经节,免疫组化观察P2X4和P38MAPK的表达情况。结果:Model组在第8、14和20天MWT明显降低(P0.01)。与Model组相比,其余各组第14天MWT值出现显著差异(P0.01),20 d以后差异持续存在(P0.01)。免疫组化P2X4在背根神经节中的表达情况,各组均与Model组有统计学差异(P0.01),P38MAPK的表达情况除Positive Drug组外,各组与Model组相比,有明显差异(P0.05)。结论:口服祖师麻肠溶微丸可明显改善CCI模型,提高MWT,且背根神经节中P2X4和P38MAPK受体表达下调,提示祖师麻肠溶微丸有治疗坐骨神经痛的作用,其止痛的效果与P2X4-P38MAPK通路有关。     

丁苯酞对缺血性脑卒中大鼠海马神经元凋亡的抑制作用及其对p38 MAPK信号通路的影响

目的：探讨丁苯酞对缺血性脑卒中大鼠海马神经元凋亡和p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号通路的影响,阐明丁苯酞对缺血性脑卒中的作用机制。方法： 102只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和丁苯酞组,每组34只。模型组和丁苯酞组大鼠采用改良Zea-Longa法制备局灶性脑缺血大鼠模型,丁苯酞组大鼠建模后给予丁苯酞（4.5 mg·kg^-1）治疗,假手术组大鼠每天相同时间点腹腔注射等量生理盐水。采用HE染色观察大鼠海马神经元细胞形态表现,原位末端转移酶标记（TUNEL）染色观察大鼠海马神经元凋亡情况,Western blotting法测定大鼠海马组织中激活型caspase-3（cleaved caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、p38、磷酸化p38（p-p38）和分裂原激活的蛋白激酶（MAPK）蛋白表达水平,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定大鼠海马组织中cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、p38和MAPK mRNA表达水平。结果：假手术组大鼠海马CA1区神经元排列整齐,细胞核和细胞膜正常;模型组大鼠海马CA1区神经元排列紊乱,细胞肿胀破裂,细胞核固缩;丁苯酞组大鼠海马CA1区部分神经细胞结构恢复正常。与假手术组比较,模型组大鼠海马CA1区神经元数量明显降低（P<0.01）,神经元凋亡指数明显增加（P<0.01）;与模型组比较,丁苯酞组大鼠海马CA1区神经元数量明显增加（P<0.01）,神经元凋亡指数明显降低（P<0.01）。与假手术组比较,模型组大鼠海马组织中cleaved caspase-3、Bax、p-p38和MAPK蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.01）;与模型组比较,丁苯酞组大鼠海马组织中cleaved caspase-3、Bax、p-p38和MAPK蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。与假手术组比较,模型组大鼠海马组织中cleaved caspase-3、Bax和MAPK mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,Bcl-2 mRNA表达水平明显降低（P<0.01）;与模型组比较,丁苯酞组大鼠海马组织中cleaved caspase-3、Bax和MAPK mRNA表达水平明显降低（P<0.01）,Bcl-2 mRNA表达水平明显升高（P<0.01）。结论：丁苯酞可通过抑制海马组织p38 MAPK信号通路抑制缺血性脑卒中大鼠海马神经元凋亡。