肝癌中医证型与野生型p53mRNA、N-ras蛋白表达相关性研究

目的：观察肝癌中医证型与野生型p53mRNA、N-ras表达相关性。方法：选择肝癌脾虚证36例和湿热证患者24例，应用原位杂交和免疫组化方法分别检测其肝癌组织野生型p53mRNA和N—ras蛋白表达，比较2组之间的差异。结果：脾虚证组野生型p53mRNA表达水平显著低于湿热证组（P〈0.05）；脾虚证组N—rss蛋白表达水平略低于湿热证组（P〉0．05）。结论：野生型p53mRNA表达与肝癌中医证型有关，野生型p53mRNA低表达是区别脾虚证和湿热证的特征之一。     

实验性大鼠肝癌脾虚证和湿热证主要肝功能指标的对比研究

目的：探讨肝癌脾虚证和湿热证大鼠主要肝功能指标血清含量的差异。方法：通过建立肝癌脾虚证和湿热证大鼠模型，并设正常健康对照组，测定和比较各组主要肝功能指标血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、碱性磷酸酶（ALP）、白蛋白（ALB）的含量。结果：肝癌脾虚证组中血清ALT、AST、TBIL、ALB的含量均显著低于肝癌湿热证组（P〈0．05或P〈0．01），但血清ALP的含量均高于肝癌湿热证组，两组比较无显著性意义。结论：血清ALT、AST、TBIL、ALB的含量变化是反映肝癌脾虚证和湿热证的客观内涵指标之一。     

肝气郁结证模型大鼠T细胞增殖能力改变与分子机制研究

目的：研究体外培养肝气郁结证（肝郁证）模型大鼠T淋巴细胞增殖能力的改变及其可能的分子机制。方法：制备肝郁证模型大鼠T淋巴细胞，分别应用MTT法、RT-PCR法检测肝郁证模型大鼠以及运用柴胡疏肝散、四君子汤治疗后T细胞的增殖能力、NFATc mRNA的表达。结果：与正常组比较，肝郁证模型大鼠T淋巴细胞的增殖能力下降，其增殖指数明显降低（P〈0．05）；NFATc mRNA表达水平明显降低（P〈0．05）。用柴胡疏肝散治疗后，与正常组相比较，各项免疫指标基本恢复了正常水平（均P〉0．05）。结论：肝郁证模型大鼠T淋巴细胞的增殖能力下降，并有可能通过NFATc介导的信号传导途径进行。     

溃疡性结肠炎大鼠模型CD44、CD62p和CD54表达与中医证候相关性研究

目的：探讨溃疡性结肠炎脾虚及肝郁脾虚模型大鼠与黏附分子表达的相关性。方法：建立溃疡性结肠炎脾虚及肝郁脾虚动物模型，观察两种证候大鼠病理组织形态学的改变，并采用流式细胞仪检测CD44（外周血中吞噬细胞膜糖蛋白）、CD62p（可溶性黏附分子P选择素）及CD54（可溶性细胞间黏附分子）表达情况。结果：脾虚型模型的病理组织形态学表现较肝郁脾虚型更为明显，两种模型大鼠的CD44、CD62p表达均高于空白组，差别有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；脾虚组的CD54表达高于空白组，而肝郁脾虚组的CD54表达虽高于空白组，但无统计学意义。肝郁脾虚组大鼠的CD44、CD62p表达均高于脾虚组（P〈0．05），CD54表达没有差异。结论：CD44、CD62p表达情况可能是溃疡性结肠炎脾虚和肝郁脾虚的客观化证本质指标之一。     

加味补肝汤对糖尿病大鼠坐骨神经中蛋白激酶Cβ亚型表达的影响

目的观察加味补肝汤对糖尿病大鼠坐骨神经中蛋白激酶Cβ亚型（PKC-βⅡ）mRNA表达的影响，探讨其对实验性糖尿病大鼠周围神经病变的防治作用。方法65只大鼠适应性喂养1周后，随机取20只为正常组，45只造模，以链脲佐菌素诱发糖尿病模型，将造模成功后的40只大鼠随机分为模型组、加味补肝汤组。分别于治疗后4、8周处死大鼠，用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术测定坐骨神经中PKC—βⅡmRNA的表达。结果治疗后4、8周模型组大鼠PKC—βⅡmRNA表达明显高于正常对照组（P〈0．05），加味补肝汤组PKC-βⅡmRNA表达明显低于同期模型组（P〈0．05）。结论加味补肝汤对实验性糖尿病大鼠周围神经病变有一定的防治作用。     

慢性乙型肝炎患者的生存质量与其中医辨证分型的关系探讨

目的测量并评价慢性乙型肝炎湿热蕴脾证和肝郁脾虚证患者的生存质量（QOL）。方法采用SF-36量表，对40例慢性乙型肝炎湿热蕴脾证患者，40例慢性乙型肝炎肝郁脾虚证患者和40例正常对照进行QOL测量与评价。结果湿热蕴脾证组与肝郁脾虚证组和正常组比较QOL总分明显下降，有统计学意义（P〈0．05），肝郁脾虚证组得分最低，与湿热蕴脾证组比较有统计学意义（P〈0．05）；湿热蕴脾证组与正常对照组比较QOL各项得分均下降，以BP，GH，VT，SF，MH明显，有统计学意义（P〈0．05）；肝郁脾虚证组与湿热蕴脾证组比较，QOL各项得分均下降，除VT下降不甚明显外，其余得分均明显低于湿热蕴脾证组，有统计学意义（P〈0．05）；肝郁脾虚证组与正常对照组比较，QOL各项得分均明显下降，有统计学意义（P〈0．05）。结论湿热蕴脾证组、肝郁脾虚证组和正常对照组比较，患者的生活质量下降，生理、心理、社会机能受到很大影响；湿热蕴脾证组患者由于情感问题所造成的职能限制较轻微；肝郁脾虚证组虽然其与湿热蕴脾证组相比肝损害较轻，病情相对稳定但生活质量却明显低于湿热蕴脾证组。     

Regulating effects of different moxibustion therapies on bax and Bcl-2 in rats with ulcerative colitis

目的：探讨不同灸法对溃疡性结肠炎（ulcerativecolitis，UC）大鼠结肠损伤的改善作用，以及对Bcl-2mRNA、BaxmRNA表达的影响。方法：采用免疫学方法加局部刺激制备实验性UC大鼠模型。造模后采用不同灸法治疗14次，实时荧光定量PCR技术检测结肠组织Bcl-2mRNA、BaxmRNA表达。结果：（1）各治疗组结肠大体形态损伤积分和光镜下组织学损伤积分较模型组比较有明显改善（Jp〈0．05，P〈0．01）：（2）uc模型大鼠结肠组织Bcl-2mRNA的表达显著高于正常大鼠沪〈0．01），而BaxmRNA的表达显著低于正常大鼠（P〈0．01）；（3）治疗后，隔药灸组、隔姜灸组、隔蒜灸组大鼠结肠组织Bcl．2mRNA的表达明显下调，与模型组比较有显著差异（P〈0．05或P〈0．01）；隔药灸组、隔姜灸组BaxmRNA的表达明显增高，与模型组比较有显著差异（P〈0．05）。结论：初步研究结果提示隔药灸、隔姜灸、隔蒜灸、温和灸治疗均能有效改善UC大鼠结肠病理损伤，隔药灸、隔姜灸、隔蒜灸可不同程度抑制UC大鼠结肠组织Bcl-2mRNA和BaxmRNA的表达，调节Bcl-2／BaxmRNA的比例关系。     

加味补肝汤对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经VEGF表达的干预作用

目的：观察中药加味补肝汤对糖尿病大鼠坐骨神经VEGF表达的干预作用，探讨其对实验性糖尿病大鼠周围神经病变的防治作用。方法：采用链脲佐菌素诱发糖尿病模型，治疗组予加味补肝汤，分别于治疗后第4、8周末2个时间点用MS302多媒体生物信号记录分析系统测定神经传导速度，免疫组织化学法检测坐骨神经中血管内皮细胞生长因子（VEGF）蛋白的表达，通过Motic Images Advanced彩色图文分析系统分析结果。结果：模型组和加味补肝汤组大鼠的神经传导均明显慢于正常对照组（P〈0．05），加味补肝汤组快于模型对照组（P〈0．05）。在4、8周末模型对照组坐骨神经中VEGF阳性的表达比正常对照组增多（P〈0．05），经加味补肝汤治疗4周后VEGF的阳性表达比模型组表达明显增多（P〈0．05），治疗8周后比模型组减少（P〈0．05）。结论：加味补肝汤对糖尿病大鼠周围神经病变有一定的防治作用，其机制与调节VEGF表达有关。     

肝郁脾虚证模型大鼠HPA轴中枢相关受体的表达及疏肝健脾方药的干预作用

目的观察肝郁脾虚证模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质激素（HPA）轴中枢相关受体的变化及疏肝健脾方药的干预作用。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、肝郁脾虚模型组、疏肝组（柴胡疏肝散组）、健脾组（四君子汤组）、疏肝健脾组（柴疏四君子汤组），后4组大鼠采用慢性束缚＋饮食失节＋游泳疲劳的方法，连续造模4周，正常组不予处理。于造模第15天，中药各组分别给予柴胡疏肝散4．2g／kg、四君子汤4．53g／kg、柴疏四君汤4．27g／kg灌胃，连续14d。检测大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素受体（ACTHR）、糖皮质激素受体（GR）和垂体下丘脑促皮质素释放激素受体（CRHR）、GRmRNA表达水平。结果与正常组相比，模型组大鼠下丘脑ACTHR、GRmRNA及垂体CRHR、GRmRNA表达水平明显降低（P〈0．05，P〈0．01）；与模型组比较，柴疏四君汤组下丘脑ACTHR、GRmRNA及垂体CRHR、GRmRNA表达水平均呈显著性增加（P〈0．05，P〈0．01），柴胡疏肝散组大鼠下丘脑GR和垂体CRHR、GRmRNA的表达水平均见显著性增加（P〈0．05），四君子汤组大鼠垂体CRHR、GRmRNA的表达水平显著性增加（P〈0．05）。与四君子汤和柴胡疏肝散比较，柴疏四君汤组大鼠下丘脑ACTHR、GRmRNA的表达水平显著性增加（P〈0．05），其中柴胡疏肝散组较四君子汤比垂体GRmRNA的表达水平增加更显著（P〈0．05）。结论肝郁脾虚证模型大鼠HPA轴中的中枢相关受体表达呈全面下调，中药三方对模型大鼠下丘脑ACTHR、GRmRNA及垂体CRHR、GRmRNA的表达均有不同程度或选择l生上调作用，其中柴疏四君汤的作用最优，其次是柴胡疏肝散，四君子汤则作用较差。     

脑缺血后抑郁大鼠海马NMDA受体表达及中药的干预作用

目的：观察脑缺血后抑郁模型大鼠脑内NMDA受体NR1、NR2 BmRNA的表达及中药颐脑解郁方的干预作用。方法：复制脑缺血后抑郁大鼠模型，采用逆转录PCR（RT—PCR）的方法，观察大鼠海马NMDA受体NR1、NR2BmRNA的表达。结果：脑缺血后抑郁模型大鼠海马的NR1、NR2BmRNA的表达较正常组明显升高（P〈0．01），经中药颐脑解郁方干预后海马NR1mRNA表达较模型组显著降低（P〈0．01），NR2BmRNA表达较模型组降低（P〈0．05）。假手术大鼠海马NR1mRNA表达明显升高（P〈0．01），NR2BmRNA表达升高（P〈0．05）。结论：脑缺血后抑郁模型大鼠脑内NMDA受体NR1、NR2BmRNA表达升高，中药颐脑解郁方能使之明显下调，提示颐脑解郁方治疗脑缺血后抑郁状态的作用机制可能与下调脑内NMDA受体NR1、NR2BmRNA表达有关。     

肝郁脾虚证模型大鼠甲状腺轴的变化及柴疏四君汤的作用观察

目的：探查中医肝郁脾虚证甲状腺轴的变化及柴胡疏肝散合四君子汤方（简称柴疏四君汤）的作用。方法：大鼠采用慢性束缚应激＋过度疲劳＋饮食失节法建立肝郁脾虚证模型，测定造模3周、自然恢复1周及柴疏四君汤治疗1周后大鼠血清TSH、T3、T4的变化。结果：与正常对照组相比，造模第3周大鼠血清TSH显著降低（P〈0．01），T3显著降低（P〈0．05），T4显著升高（P〈0．01）；自然恢复1周后模型大鼠血清TSH仍显著降低（P〈0．05），T3和T4均显著降低（P〈0．05或P〈0．01）；与模型恢复组比较，柴疏四君汤组大鼠血清TSH、T3、T4均显著升高（P〈0．05或P〈0．01）。结论：肝郁脾虚证模型大鼠存在下丘脑-垂体-甲状腺轴功能的紊乱，柴疏四君汤具有纠正或调节肝郁脾虚证模型大鼠甲状腺轴功能紊乱的作用。     

补脾方药对脾虚大鼠壁细胞胃泌素受体及细胞内钙离子浓度的影响

目的：观察补脾方药对脾虚模型大鼠壁细胞胃泌素受体及细胞内钙离子浓度的影响。方法：采用EDTA—Pronase酶法消化大鼠壁细胞，放射配基结合实验检测胃泌素受体，双波长荧光法测定壁细胞内钙离子浓度（[Ca^2＋]i）变化。结果：模型组大鼠壁细胞胃泌素受体结合位点数显著降低（P〈0．05），经补脾方药治疗后有所升高；同时模型组大鼠壁细胞内静息[Ca^2＋]i明显低于正常对照组（P〈0．01），经胃泌素刺激后壁细胞内[Ca^2＋]i有所升高，且模型组与党参组升高幅度明显高于正常对照组（P〈0．05），经治疗后此状态有所恢复，但差异无显著性。结论：脾虚证可能与胃泌素受体低表达相关，且壁细胞内钙离子处于低代谢状态，但对于胃泌素刺激的反应性增强，进而可能导致酸分泌敏感性相对增高，胃黏膜易损性增强，而补脾方药对其有一定的调节作用。     

健脾益肾方对5／6肾切除大鼠肾组织Lox-1mRNA表达的影响

目的：探讨健脾益肾方治疗CRF及其抗肾纤维化的作用机制，为临床应用提供实验依据。方法：将Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组（N组）、模型组（M组）、低剂量治疗组（L组）、高剂量治疗组（H组），除N组外均行5／6肾切除手术制作CRF动物模型。于造模后一周开始干预，干预8周后取血清及肾组织标本，全自动生化分析仪检测血清尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）；RT-PCR法检测肾组织血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1（Lox-1）mRNA的表达。结果：各组大鼠肾脏均有Lox-1 mRNA表达，N组有较弱表达，M组、L组及H组大鼠肾组织表达较N组均明显增加（M组及L组-N组：P〈0．01，H组-N组：P〈0．05）；L组及H组表达较M组明显减少（P〈0．01）；H组表达较L组均明显减少（P〈0．05）。结论：健脾益肾方可以降低CRF大鼠血清BUN和Cr，抑制肾脏组织Lox-1 mRNA的表达，表明健脾益肾方是治疗CRF的有效方剂，其机理可能与抑制大鼠肾组织内Lox-1等细胞因子的表达，从而抑制参与肾纤维化的细胞增殖和转分化，延缓肾纤维化的进展，达到治疗和延缓CRF进展的目的。     

慢性萎缩性胃炎不同证型与胃肠激素关系的实验研究

目的：探讨慢性萎缩性胃炎（CAG）不同证型与胃肠激素的相关性。方法：建立脾虚、肝郁和湿热证cAG证病结合模型，并以中药干预，采用放射免疫法观察不同证型CAG模型鼠血胃肠激素胃泌素（Gas）和内皮素（ET）的水平。结果：脾虚CAG鼠血清Gas水平最低（P〈0．05），血浆ET水平最高（P〈0．01）；中药干预后，脾虚、肝郁和湿热证CAG3组鼠血清Gas和血浆ET都有所改善（P〈0．05或P〈0．01）。结论：证病结合CAG模型与胃肠激素的水平具有相关性，为CAG中医证型的诊断以及疗效评价提供了实验依据。     

肝舒乐片对乳腺增生病大鼠性激素受体的影响

目的：通过动物实验观察肝舒乐片对乳腺增生病大鼠性激素受体的影响，探讨其对乳腺增生病的防治作用。方法：以雌、孕激素注射大鼠右下肢肌肉内建立乳腺增生病模型。将72只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、乳癖消组、肝舒乐组、疏肝组和健脾组6组，每组12只，运用免疫组化测定法测定各组大鼠雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）含量变化。结果：模型组ER、PR的表达均明显高于正常组，（P〈0.05）。肝舒乐片组、乳癖消组雌、孕激素受体（PR）的表达明显降低，趋于正常（P〈0．05），但两组间无显著性差异（P〉0．05）。疏肝组、健脾组ER、PR的表达均无明显改善。结论：肝舒乐片对模型动物的ER、PR含量紊乱有显著调节作用。     

二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化中医方证研究

目的：探讨二甲基亚硝胺（DMN）大鼠肝纤维化的中医方证。方法：腹腔注射法制备DMN大鼠肝纤维化模型，分别采用5首不同功效的经典方治疗两周，观察各组大鼠肝组织病理学、羟脯氨酸（Hyp）含量及肝功能变化。结果：造模4周后大鼠形成典型小结节性肝硬化，6周后模型组大鼠肝组织损伤较4周时有所缓解。与6周模型组相比，茵陈蒿汤组大鼠肝组织病理变化、Hyp含量及肝功能均显著改善（P〈0．05或P〈0．01）；黄芪汤组大鼠肝组织病理变化、Hyp古量亦显著改善（P〈0．05或P〈0．01）。结论：茵陈蒿汤、黄芪汤能够有效逆转DMN大鼠肝纤维化，成型期DMN肝纤维化大鼠的主要中医方证为湿热、瘀热内蕴兼气虚。     

寒痹康汤对实验性关节炎大鼠血清TNF—α的影响

目的：观察寒痹康汤对实验性关节炎大鼠的血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响，探讨其作用机理。方法：采用牛Ⅱ型胶原蛋白诱导实验性关节炎模型，以甲氨喋呤作对照，观察大鼠的关节肿胀指数的变化，采用放射免疫法检测各组大鼠血清TNF-α水平。结果：寒痹康汤能显著减轻大鼠关节肿胀指数、显著降低大鼠血清TNF-α水平（P〈0．05或P〈0．01），其作用优于甲氨喋呤（P〈0．05或P〈0．01）。结论：寒痹康汤能下调实验性关节炎大鼠血清TNF-α的水平，是其治疗类风湿关节炎的作用机理之一。     

甘露消毒丹对温病湿热证大鼠SIgA、TNF-α、IL-1β调控的实验研究

目的：观察甘露消毒丹对温病湿热证大鼠的免疫指标SIgA、TNF-α、IL-1β的调控。方法：分为正常组、湿热模型组、清热化湿组；运用放免法观察SIgA、TNF-α、IL-1β的变化。结果：湿热模型组SIgA、TNF-α、IL-1β水平显著升高，模型组经过治疗后，水平显著降低（P〈0．05），与正常组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：甘露消毒丹对温病湿热证大鼠的免疫指标SIgA、TNF-α、IL-1β水平显著升高具有调节降低作用。     

Effect on the Akt2 in skeletal muscle of rats with insulin resistance treated by acupuncture

目的：观察针刺对胰岛素抵抗模型大鼠骨骼肌Akt2mRNA表达的影响。方法：将24只SD大鼠随机分为空白组、模型组和针刺组，用葡萄糖氧化酶法、ELISA、实时荧光定量PCR等方法，检测比较各组大鼠空腹血糖（Fasting Plasma Glucose，FPG）、血浆胰岛素（FastingInsulin，FINS）、胰岛素敏感性指数（InsulinSensitivityIndex，ISI）、血清c-肽（cPeptide，C—P）和骨骼肌Akt2mRNA的表达。结果：模型组大鼠的FPG、FINS、C—P较空白组显著升高（P〈O．01），ISI和骨骼仙Akt2mRNA表达显著降低（P〈0．01，P〈0．05）；针刺组的FPG、FINS、C—P较模型组显著降低（P〈0．01，P〈0．01，P〈0．05），ISI和骨骼肌Akt2mRNA表达显著升高（P〈0．01）。结论：针刺治疗胰岛素抵抗的作用机理可能与上调Akt2mRNA的表达，改善PI3K通路的信号转导有关。     

止喘胶囊对哮喘大鼠气道TGF-β1信号转导的干预作用

探讨止喘胶囊对哮喘大鼠气道TGF-β1信号转导的干预作用。通过长期反复给予致敏大鼠吸入不同浓度的卵蛋白，建立大鼠慢性哮喘模型。40只大鼠随机分为5组：正常对照组、模型组、中药组、西药组和中西结合组。原位杂交技术检测Smad．2mRNA、Smad．7mRNA表达水平。结果：各治疗组均可下调Smad-2mRNA的表达，与模型组比较有显著性差异（P〈0．05），其中尤以中西医结合组疗效最佳，中药组与西药组效果相当（P〉0．05）。中药组可显著上调Smad-7mRNA表达水平，与模型组比较差异显著（P〈0．05）；而西药组与模型组比较，无显著性差异（P〉0．05）。结论：止喘胶囊能通过下调Smad-2mRNA，上调Smad-7mRNA的表达，阻断TCF-β1的信号转导，从而阻断哮喘气道重塑的发展。