HPLC-MSn法测定加拿大原产地西洋参不同入药部位的人参皂苷含量

目的:采用HPLC-MSn法对加拿大原产地采收的西洋参根、茎和叶中的10种人参皂苷的含量进行测定.方法:采用HPLC-MSn法,色谱柱为DIKMA diamonsil(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05％磷酸水和乙腈-0.05％乙酸水,流速0.3 mL· min-1,柱温35℃,检测波长203 nm.质谱条件:正离子检测模式,鞘气10 L·min-1,辅助气10 L·min-1,喷雾电压4.5 kV,毛细管温度320℃,毛细管电压30 V.结果:10种人参皂苷的含量在一定范围内线性关系良好(r＞0.999),平均回收率为95％～102％,RSD ＜2.68％.西洋参不同入药部位单体人参皂苷含量差异较大,西洋参叶的总皂苷与西洋参根的总皂苷相当,西洋参叶样品S1的总皂苷甚至高于西洋参根的总皂苷;西洋参茎的总皂苷含量则远低于叶和根中的含量;单体人参皂苷则以Rb2、Rb3在西洋参叶中有很高的含量,Re,Rb1在根中有很高的含量.结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于西洋参的定量定性检测;建议西洋参叶可以作为人参皂苷的新来源.     

不同来源西洋参中人参总皂苷及人参皂苷Rb1含量的比较

目的：比较不同来源西洋参的质量。方法：采用比色法测定西洋参中人参总皂苷的含量，以HPLC法测定人参皂苷Rb1的含量，综合此二项指标评价西洋参的质量。结果：7种西洋参市售品中，加拿大西洋参中人参总皂苷及人参皂苷Rb1含量最高，北京怀柔较之略低。结论：7种市售西洋参中所含人参总皂苷均大于4％，人参皂苷Rb1均大于1％，且总皂苷含量越高，Rb1含量越高。     

12种西洋参中总皂苷及人参皂苷Rb1的测定比较

目的建立西洋参中人参皂苷Rb1含量测定的现代分析方法,并对12种西洋参中的总皂苷及人参皂苷Rb1进行测定,以观察不同产地对其含量变化的影响.方法人参总皂苷含量测定采用比色法,人参皂苷Rb1含量测定采用高效液相色谱法.结果人参皂苷Rb1含量在62～1 230μg·ml-1之间呈良好线性,平均回收率为99.2%(RSD=1.69%).12种西洋参中,有10种西洋参所含人参总皂苷均大于4%,人参皂苷Rb1含量大于1%.结论该法操作简便,快速,重现性好,结果准确,可作为西洋参质量控制方法.     

人参与西洋参皂苷类成分的比较研究

目的：研究人参和西洋参中人参皂苷含量的差异性.方法：采用高效液相法测定人参与西洋参中的各单体皂苷含量.结果：西洋参中人参总皂苷大约是人参中的2 倍以上;西洋参中人参皂苷Rb1 含量远高于人参中Rb1 的含量,人参皂苷Re 含量是人参中Re 的4.8 倍,人参皂苷Rd 含量是人参中Rd 的2 倍.而人参中人参皂苷Rg1 含量是西洋参中Rg1 的2.4 倍,人参皂苷Rf、Rg2、Rb2 的含量明显高于西洋参中相应单体皂苷的含量,而人参单体皂苷Rc、Rb3 在人参和西洋参中的含量相差不大.结论：人参与西洋参的总皂苷和各单体皂苷的含量差异性较大,期望结合人参单体皂苷的药理活性,更合理地指导临床应用.     

老参地土壤中的酚酸类化合物对4种作物的化感作用

目的:探讨种植过西洋参的老参地土壤中积累的酚酸类化感物质对其他作物的影响,为选择合适的后茬作物提供依据。方法:以田间实测的酚酸种类和含量为依据,对比老参地土壤中9种混合酚酸(总酚酸)对小麦、玉米、萝卜、紫花苜蓿4种作物种胚萌发及生长的作用,并与其中含量最高的p-香豆酸进行比较。结果:总酚酸在接近老参地田间浓度的实验浓度下(0.55~2.2 mg·m L-1),仅对小麦、紫花苜蓿的发芽率有弱的抑制作用,对其他作物均无影响(P0.05);对4种作物的胚根、胚芽的生长均有抑制作用,2.2 mg·m L-1浓度下分别比对照降低62%~92%、27%~58%(P0.05)。根据IC50值,总酚酸对4种作物胚根的毒力依次为:紫花苜蓿萝卜玉米小麦;对胚芽的毒力依次为:萝卜紫花苜蓿小麦玉米。对比总酚酸与p-香豆酸的毒力发现,总酚酸对萝卜和玉米胚根的毒力低于p-香豆酸,而对紫花苜蓿胚根、萝卜胚芽的毒力高于p-香豆酸。结论:老参地土壤中存在的酚酸类化合物对萝卜、紫花苜蓿等直根系作物毒力较强,对小麦、玉米毒性相对较弱,轮作应优先考虑禾本科须根系作物。     

西洋参微粉加工与人参皂苷Rb1含量的相关性研究

目的:比较不同粒度西洋参超微粉粉体中人参皂苷Rb1含量来确定粉碎工艺.方法:用HPLC法测定西洋参微粉中人参皂苷Rb1含量.结果:常温、低温粉碎的西洋参微粉中人参皂苷Rb1含量均随粉碎粒度变细而增高,低温粉碎的西洋参微粉中人参皂苷Rb1含量明显高于常温粉碎的西洋参微粉.结论:低温粉碎西洋参优于常温粉碎.     

西洋参冠瘿组织与西洋参药材人参皂苷含量比较研究

目的:比较西洋参冠瘿组织与西洋参药材人参总皂苷含量及各人参皂苷含量的差异,为采用生物技术方法生产人参皂苷提供理论依据.方法:采用香草醛-冰醋酸-高氯酸紫外显色法测定西洋参冠瘿组织与西洋参药材中总皂苷含量;用HPLC法测定西洋参冠瘿组织与西洋参药材中人参皂苷Rb1、Rb3、Rc、Re的含量.结果:(1)培养27 d西洋参冠瘿组织总皂苷积累量达到最高,与西洋参药材总皂苷含量相当;(2)西洋参冠瘿组织中人参皂苷Rb1、Re的含量约为西洋参药材的50%,人参皂苷Rc的含量约为西洋参药材的80%,人参皂苷Rb3的含量远远高于西洋参药材,约为西洋参药材的16倍.结论:西洋参冠瘿组织可作为大规模生产人参皂苷的新途径.     

不同土壤浸提物对人参种子生长抑制作用的研究

目的 研究新林土、老参地土、人参根际土浸提物对萌芽人参种子胚根和胚轴生长的影响.方法 用甲醇浸提土壤样品,每种土壤浸提物样品分6个浓度梯度对萌芽人参种子进行处理,培养一段时间后,测量人参种子胚根和胚轴长度,通过与对照对比.分析不同土壤浸提物及浓度对人参种子生长的影响.结果 人参根际土浸提物对人参种子生长的抑制作用最强;种植人参、西洋参的老参地土浸提物对萌芽人参种子的生长有一定影响,表现为低浓度促进、高浓度抑制的特点;未曾种植人参、西洋参的新林土对萌芽人参种子生长的抑制作用不明显.结论 人参根际土壤和老参地土中存在自毒性化学物质,对人参种子生长的抑制作用与其浓度有密切关系.     

人参Rb组皂苷对实验性心梗大鼠血粘度和游离脂肪酸水平的影响

人参Rb组皂苷(简称G-Rb)系从五加科人参属植物人参及西洋参茎叶提取的总皂苷中分离而得.人参皂苷单体Rb1、Rb2、Rb3虽均具有钙通道阻滞作用,但在抗心肌缺血、抗氧化、调节血脂及改善血粘度等药理作用上有所不同[1～3].     

培养条件对西洋参悬浮细胞生物量和 活性成分的影响

目的:研究主要理化因子对西洋参细胞悬浮培养的影响.方法:利用组织培养技术结合高效液相色谱法和紫外分光光度法,考察接种量、培养基种类、基质pH和光照条件对西洋参悬浮细胞生长,人参皂苷Re,Rb1以及西洋参多糖含量的影响.结果:当接种量为25 g·L~(-1)时,西洋参细胞的干重增殖倍数显著增加;通过考察Ms,SH,B_5 3种培养基对西洋参细胞的影响,结果表明MS培养基最有利于西洋参细胞生长,B_5培养基最有利于人参皂苷和西洋参多糖的合成.3种培养基中西洋参细胞多糖含量均高于栽培西洋参;pH变化对西洋参细胞生长影响不大,pH 6.0时,最有利于人参皂苷Re和西洋参多糖的合成;光照培养显著促进西洋参细胞次生代谢物的合成,但对多糖合成没有太大影响.结论:接种量、培养基种类、基质pH和光照条件对西洋参悬浮细胞生长,人参皂苷Re,Rb_1以及西洋参多糖合成有显著影响.     

重金属铅胁迫对人参光合特征与皂苷含量的影响

为阐明Pb胁迫对人参光合作用与次生代谢产物的影响,探讨药用植物对重金属胁迫的响应机制,采用筒栽试验方法,对不同浓度铅（Pb）处理（0,100,250,500,1 000 mg·kg^-1）下人参的光合特征参数与皂苷含量进行了测定与分析。结果表明,低浓度Pb处理（≤250 mg·kg^-1）时,人参叶片净光合速率和SPAD的变化并不显著,当Pb质量分数达到500 mg·kg^-1时,叶片净光合速率和SPAD均显著下降（P<0.05）,当Pb质量分数为1 000 mg·kg^-1时,二者达到最低,降低幅度分别为57.8%,11.0%。从人参根部总皂苷含量来看,Pb胁迫浓度为100 mg·kg^-1时,总皂苷含量的变化并不显著,而当Pb质量分数达到250 mg·kg^-1时,总皂苷含量显著增加（P<0.05）,并在Pb质量分数为1 000 mg·kg^-1时,达到最高。在Pb质量分数为0~1 000 mg·kg^-1时,Pb浓度与叶片净光合速率和SPAD均呈现极显著的负线性相关（P<0.01）,而与人参总皂苷含量呈现出显著的正线性相关关系（P<0.05）。由此说明,人参叶片光合作用与根部次生代谢对Pb胁迫的响应规律是反向的,高浓度Pb胁迫将抑制人参叶片的光合能力,但能够促进人参根部的次生代谢过程。     

水杨酸对春季全光照下人参光合特性、生理生化及皂苷含量的影响

为了探讨提高人参产量新途径,采用春季全光照并施用不同浓度水杨酸的方法,比较人参叶片的净光合速率(P_n)、抗氧化酶活性、丙二醛(MDA)含量及人参皂苷含量。结果显示,全光照下0.05,0.2 mmol·L^-1水杨酸组可明显提高SOD,CAT,POD的活性,降低MDA含量,净光合速率大幅度提高。阴天条件下净光合速率平均高于传统遮荫的对照组127.8%,155.0%,高于未施水杨酸全光照的空白组13.9%,27.5%;晴天条件下高于传统遮荫的对照组23.5%,30.4%,高于空白组8.6%,14.6%,特别是早晚的差异更加明显,这种差异主要是由于全光照条件下增加外光量子密度及光饱和点增加和补偿点降低造成的。全光照条件下人参苷含量降低,但施水杨酸后,皂苷含量有显著提高。人参皂苷含量0.2 mmol·L^-1水杨酸组Rg₁与Re含量之和、Rb₁含量及6种人参皂苷含量之和远高于对照组、空白组及其他组。在春季短时期内对人参进行全光照并喷施0.2 mmol·L^-1浓度的水杨酸溶液处理,可增强人参抗逆性,可较好的提高人参产量和质量。     

基于高分离度和对照图谱的红参中9种人参皂苷类成分“一测多评”质量评价研究

采用反相高效液相色谱法,Ultimate~C_(18)色谱柱,对红参中9种人参皂苷类成分进行了具有高分离度和高色谱峰纯度的同步色谱分离。采用"一测多评"中药质量评价模式,经一系列方法学考察,以人参皂苷Rb_1为内参物,建立了人参皂苷Rg_1,Re,Rf,Rb_1,Rc,Rb_2,Rb_3,Rd和20(S)-人参皂苷Rg3与人参皂苷Rb1间的相对校正因子与相对保留值,在红参对照图谱的辅助定位下,最终实现了仅采用人参皂苷Rb1一个中药对照品对红参中上述9种人参皂苷类成分的同步质量控制。     

款冬叶柄愈伤组织培养与再生体系建立

以款冬幼嫩叶柄为材料,研究植物生长调节剂对其离休培养与植株再生的影响,建立了款冬离体快繁技术体系。结果表明:款冬叶柄切段较理想的灭菌方法为75%乙醇浸泡30 s,转入饱和漂白粉上清液浸泡15 min;适合愈伤诱导的培养基为MS+6-BA 3.0 mg·L~(-1)+2,4-D 2.0 mg·L~(-1),诱导率96.2%;在培养基MS+ZT 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.3 mg·L~(-1)上芽苗分化效果较好,分化率91%,平均芽数8.26个;较佳的不定芽增殖培养基为MS+KT 1.0 mg·L~(-1)+IBA 0.3 mg·L~(-1),增殖倍数为11.81,平均苗高4.9 cm;生根培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg·L~(-1),生根数平均为5.68条,生根率为95.22%以上;瓶苗移栽于河沙-有机肥3∶1的基质中生长良好,成活率达90%以上;大田试验表明:同等栽培条件下款冬组培株、栽培株和野生株在生长量与花粒产量等方面存在显著差异,以组培株生长量与花粒产量相对较高。组培品与野生品有效成分含量基本一致。     

一氧化氮途径介导人参总皂苷对大鼠右室肥厚的抑制作用

目的: 观察人参总皂苷(TG)对野百合碱(MCT)所致大鼠右心室肥厚的影响并探讨其与一氧化氮途径的关系. 方法: 雄性SD大鼠随机分为:正常对照组、模型组、TG低、中、高剂量组(20,40,60 mg·kg^-1·d^-1)以及L-精氨酸组(L-arg,200 mg·kg^-1·d^-1,L-a组);另外,为探讨TG的作用与NO释放的关系,另设TG+L-N(NOS合酶抑制剂N^G-硝基-L-精氨酸-甲酯,L-NAME)组和L-a+L-N组.在腹腔注射TG 40 mg·kg^-1·d^-1或L-arg 200 mg·kg^-1·d^-1的同时分别灌胃NOS抑制剂L-N 20 mg·kg^-1·d^-1,各组动物均给药18 d.测定各组大鼠的右心室收缩压(RVSP)、右室肥厚指数(RVHI)、右心重/体重(RVW/BW);透射电镜观察心肌细胞超微结构的改变;硝酸还原法检测心肌组织NO₂^-/ NO₃^-的含量;Real time RT-PCR检测心肌组织心房利钠因子(ANF)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达. 结果: TG低、中、高剂量和L-arg预防给药均使RVSP,RVSP,RVHI,RV/BW及ANF mRNA表达明显降低(P<0.05),改善细胞线粒体肿胀、变性,L-N能阻止L-arg对上述指标的影响,而同样剂量的L-N并不能影响TG 40 mg·kg^-1对上述指标的降低作用;TG 20,40 mg· kg^-1不影响eNOS mRNA的表达,但60 mg· kg^-1可提高eNOS mRNA的表达. 结论: TG能明显改善MCT诱导的大鼠右心室肥厚,其抗心肌肥厚作用部分是通过NO途径实现的.     

不同激素配比对远志愈伤诱导及其黄酮积累的影响

目的:研究不同激素配比对远志根、茎、叶愈伤组织诱导的影响,并对远志根、茎、叶愈伤组织中的黄酮量进行测定分析。方法:以MS为基本培养基,分别以远志无菌苗的根、茎、叶为外植体,应用正交试验法确定2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),萘乙酸(NAA),6-苄氨基嘌呤(6-BA)这3种激素对远志根、茎、叶不同部位愈伤组织诱导及其黄酮积累量的影响。结果:2,4-D,NAA,6-BA对远志根、茎、叶愈伤诱导率均有显著影响。叶的最佳愈伤诱导组合为MS+3. 0 mg·L~(-1)2,4-D+1. 0 mg·L~(-1)NAA+1. 5 mg·L~(-1)6-BA;茎的最佳愈伤诱导组合为MS+1. 0 mg·L~(-1)2,4-D+3. 0 mg·L~(-1)NAA+1. 5 mg·L~(-1)6-BA;根的最佳愈伤诱导组合为MS+1. 0 mg·L~(-1)2,4-D+1. 0 mg·L~(-1)NAA+1. 0 mg·L~(-1)6-BA。2,4-D,NAA,6-BA对远志茎愈伤组织中黄酮积累均影响显著,以MS+3. 0 mg·L~(-1)2,4-D+1. 0 mg·L~(-1)NAA+0. 5 mg·L~(-1)6-BA为最佳黄酮积累组合; NAA,6-BA对远志叶愈伤组织中黄酮积累影响均显著,而2,4-D则无明显影响,以MS+3. 0 mg·L~(-1)2,4-D+2. 0 mg·L~(-1)NAA+1. 0 mg·L~(-1)6-BA为最佳黄酮积累组合; 3种激素分别对远志根愈伤组织中黄酮积累无明显影响,以MS+2. 0 mg·L~(-1)2,4-D+1. 0 mg·L~(-1)NAA+1. 5 mg·L~(-1)6-BA为最佳黄酮积累组合。结论:在该条件下远志根、茎、叶愈伤组织诱导率均达100%,其中尤以远志叶愈伤组织长势最好,其次分别是远志茎和远志根。在该条件下远志根、茎、叶愈伤组织中黄酮量分别达到21. 31,24. 56,23. 61 mg·g-1。     

瘤果黑种草子总黄酮抗炎及平喘作用

目的：观察瘤果黑种草子总黄酮（TFNG）的抗炎及平喘作用。方法：选择昆明种小鼠、SD大鼠及健康豚鼠为实验动物,随机分为生理盐水组、阳性药对照组、TFNG低、高剂量组（小鼠100,400 mg·kg^-1,大鼠71.5,286 mg·kg^-1）。采用二甲苯致小鼠耳 廓肿胀、大鼠棉球肉芽肿实验观察总黄酮抗炎作用;采用整体动物小鼠喷雾致喘实验、离体豚鼠肺支气管灌流实验及离体回肠实验考察总黄酮的平喘作用。结果：TFNG 100,400 mg·kg^-1可明显抑制小鼠二甲苯所致的耳廓肿胀度,TFNG 71.5,286 mg·kg^-1可抑制大鼠棉球肉芽肿（P<0.01）;TFNG 100,400 mg·kg^-1可明显延长小鼠哮喘反应的潜伏期（P<0.01）;TFNG 3,6,12 g·L^-1可明显增加豚鼠肺灌流量,降低豚鼠回肠平滑肌收缩张力（P<0.01）。结论：瘤果黑种草子总黄酮具有一定的抗炎及平喘作用。     

冰片促进葛根素和梓醇口服吸收入脑的研究

从细胞水平和动物水平考察冰片对葛根素和梓醇口服吸收及穿透血脑屏障入脑的影响,筛选适合梓葛复方口服制剂的冰片浓度。采用原代大鼠脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞共培养建立体外血脑屏障模型,利用此模型研究6.25~100mg·L~(-1)冰片对葛根素、梓醇转运的影响。小鼠分别灌胃给予0,25,50,100 mg·kg~(-1)冰片溶液后再立即灌胃给予葛根素(200mg·kg~(-1))、梓醇(45 mg·kg-1)纳米晶混悬液,比较葛根素、梓醇在血浆和脑组织中的药动学参数。脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞共培养7 d后,屏障功能基本形成。与未加入冰片组相比,冰片质量浓度为12.5~100 mg·L~(-1)时,葛根素、梓醇跨血脑屏障模型的渗透系数显著增大(P0.05),冰片作用于共培养模型2 h后的跨内皮细胞电阻值极显著降低(P0.01)。小鼠灌胃50 mg·kg-1和100 mg·kg~(-1)冰片能显著促进葛根素的口服吸收,但冰片对梓醇的口服吸收无显著影响。100 mg·kg~(-1)冰片组葛根素的AUC脑/AUC血显著高于其余3组(P0.05),梓醇则是50 mg·kg~(-1)组最高(P0.05)。就脑组织AUC而言,葛根素以100 mg·kg~(-1)组最大,显著高于其余各组(P0.05);梓醇以50 mg·kg~(-1)组最大,但与100 mg·kg~(-1)组无显著性差异。可见,冰片能促进葛根素、梓醇口服给药的入脑量,质量浓度以100 mg·kg~(-1)为佳。     

藜芦配伍人参对未成熟小鼠雌激素样作用的影响

目的:观察藜芦配伍人参对未成熟小鼠子宫系数、性激素水平、靶器官子宫和阴道的病理学变化的影响。方法:昆明种雌性小鼠120只,随机分为正常组、特异性雌激素受体拮抗剂ICI组(5 mg·kg-1)、藜芦组(0.045 g·kg-1)、人参低、中、高剂量组(12,18,24 g·kg-1)、ICI和人参低剂量混合组(混合低剂量组)、ICI和人参中剂量混合组(混合中剂量组)、ICI和人参高剂量混合组(混合高剂量组)、藜芦和人参低剂量配伍组(配伍低剂量组)、藜芦和人参中剂量配伍组(配伍中剂量组)、藜芦和人参高剂量配伍组(配伍高剂量组),每组10只,给药5 d后分别观察小鼠子宫系数,血清中雌二醇(E2),黄体生成素(LH),促卵泡生成素(FSH)的水平及子宫、阴道的病理学变化。结果:与正常组比较,人参各剂量组能使未成熟小鼠的子宫系数显著增加(P0.05),E2含量明显升高(P0.05,P0.01),LH,FSH的水平显著降低(P0.05,P0.01),还能明显促进靶器官子宫、阴道的生长发育。配伍藜芦后,人参各剂量组的子宫系数明显降低(P0.05,P0.01),血清E2,LH和FSH水平明显升高(P0.05,P0.01),子宫和阴道的促生长发育作用减弱。结论:藜芦与特定剂量的人参配伍能够妨害人参的雌激素样作用。     

火绒草降糖有效成分的筛选

目的:通过对火绒草不同提取物处理高血糖小鼠血糖的测定,探讨火绒草提取物降血糖的有效部位和剂量。方法:火绒草用70%乙醇回流提取,提取物上D101大孔树脂柱,依次用50%,70%,95%的乙醇洗脱,得到50%,70%,95%的乙醇提取物。采用链脲佐菌素(STZ)诱导高血糖小鼠,7 d后分别用二甲双胍(300 mg·kg-1),50%乙醇提取物(100 mg·kg-1),70%乙醇提取物(100 mg·kg-1)和95%乙醇提取物(100 mg·kg-1)ig给药,模型组和空白组以等量的蒸馏水代替给药,10 d后测定高血糖小鼠的空腹血糖。将筛选出的有效降糖部位分为高、中、低(400,200,100 mg·kg-1)剂量处理高血糖小鼠,10 d后测定空腹血糖。结果:与空白组比较,模型组血糖显著升高(P0.01)。与模型组比较,火绒草的不同提取物均能降低高血糖小鼠血糖,50%乙醇提取物具有显著的降血糖效果,且以中剂量为佳(P0.01)。结论:火绒草的降血糖有效部位为50%乙醇提取物。