雷公藤多苷及其主要活性成分抑制类风湿性关节炎的作用机制研究进展

雷公藤多苷是从雷公藤Tripterygium wilfordii根部提取出的总苷,其现代制剂雷公藤多苷片在临床上对类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）有确切疗效,雷公藤甲素和雷公藤红素是雷公藤多苷的主要活性成分。现代研究发现雷公藤多苷治疗RA的机制包括抑制血管生成、维持调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）和辅助性T细胞17(T helper type 17,Th17)之间的平衡、抑制基质金属蛋白酶表达和促进成纤维样滑膜细胞凋亡等。而其主要活性成分雷公藤甲素和雷公藤红素除了调节Treg和Th17细胞之间的平衡外,还可以通过调节细胞自噬、抑制多条炎症相关信号通路活化等多种途径发挥抑制RA的作用。首先回顾RA的发病机制,并重点对雷公藤多苷及其主要活性成分抑制RA的作用机制进行总结和阐述,以期为有关雷公藤多苷抗RA的研究提供参考。     

雷公藤甲素抗类风湿性关节炎机制研究进展

对雷公藤甲素治疗类风湿性关节炎（RA）的分子机制研究进行了综述。雷公藤甲素具有免疫抑制、抗炎反应、诱导细胞凋亡、抑制血管增生、保护软骨以及基因调控等多方面的作用,是一种有良好应用前景的新型免疫抑制剂。     

类风湿关节炎滑膜细胞增殖、凋亡实验研究进展

目的:研究类风湿关节炎(RA)病变过程中滑膜细胞增殖与凋亡的变化,明确RA的发病机制及中西药物的作用机制。方法:对近年来有关RA滑膜细胞相关研究的文献报道进行总结分析。结果:炎性介质、NK细胞等均能促进滑膜细胞增殖;抑制促炎细胞因子或提高抗炎细胞因子水平皆可抑制滑膜细胞的增殖和迁移;加强滑膜细胞凋亡的促进因素是滑膜细胞促凋亡的重要途径;西医常用药、微创技术及多种中药单方、复方均可抑制滑膜细胞增殖、迁移,促进其凋亡。结论:虽然对RA滑膜细胞的研究较全面,但是滑膜细胞的增殖途径、促凋亡途径需进一步探索;今后当重视生物制剂对滑膜细胞的影响的实验研究;鼓励蒙医药等民族医学对滑膜细胞影响的实验研究。     

通痹灵、雷公藤多苷及青藤碱对CIA大鼠滑膜细胞凋亡与P53表达的比较研究

目的 :研究通痹灵、雷公藤多苷及青藤碱对Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节炎模型 (CIA)滑膜组织细胞凋亡及P53蛋白表达的影响。方法 :原位细胞凋亡检测试剂盒检测各组原代大鼠滑膜细胞凋亡的水平 ,免疫组化法检测各组原代大鼠滑膜细胞P53的表达。结果 :通痹灵高低组、雷公藤高低组、青藤碱高低组、MTX高低组滑膜细胞凋亡的数量上明显高于造模组 ;P53蛋白的表达方面 ,造模组远远高于各组 ,与细胞凋亡的结果几乎相反。结论 :通痹灵、雷公藤多苷、青藤碱和MTX对RA滑膜细胞有较强的诱导凋亡作用 ,但并非通过对介导滑膜细胞P53的表达来诱导滑膜组织细胞凋亡。     

青藤碱对类风湿关节炎患者滑膜细胞周期的影响

目的探讨中药青藤碱(SN)治疗类风湿关节炎(RA)的相关机制,研究SN诱导滑膜细胞凋亡与细胞周期改变的关系。方法姬姆萨染色光学显微镜下观察滑膜细胞凋亡形态的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞周期的表达。结果光镜下可见细胞变圆、细胞质红染、核固缩等典型凋亡形态学变化。流式细胞仪结果显示,SN诱导滑膜细胞凋亡并主要作用于细胞周期G1—S期。结论SN可能通过诱导细胞凋亡而抑制滑膜细胞增殖,这种作用与细胞周期有关,这些有助于将来治疗类风湿关节炎方案的合理设计。     

野菊花总黄酮对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞的凋亡诱导作用

目的：研究野菊花总黄酮(TFC)对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜细胞的凋亡诱导作用，探讨TFC治疗AA的可能机制。方法：SD大鼠随机分成6组：正常组、模型组、TFC高、中、低剂量组和阳性药雷公藤多苷(TPT)组；SD大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂复制AA模型；MTT法检测滑膜细胞的增殖；原位末端标记检测(TUNEL)法观察滑膜组织中滑膜细胞的凋亡改变；流式细胞仪检测体外培养滑膜细胞的凋亡变化。结果：AA大鼠滑膜细胞出现凋亡抑制，增殖过度的类瘤样细胞特征，TFC可剂量依赖性地降低AA大鼠滑膜细胞的炎性增殖；TFC(168，336 mg·kg-1)治疗组大鼠滑膜细胞的凋亡率较模型组显著升高。结论：TFC可抑制AA大鼠滑膜细胞的过度增殖，诱导滑膜细胞凋亡，这可能是其治疗AA的机制之一。     

艾灸对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡及病理组织的观察

目的:探讨艾灸治疗类风湿性关节炎(RA)的作用机理.方法:复制佐剂性关节炎(AA)大鼠模型,应用放免、细胞凋亡和病理学等方法,观察艾灸"肾俞"穴的抗炎免疫作用和对关节滑膜组织形态学的影响.结果:(1)灸治能减轻关节的肿胀和多发性关节炎,减少血清中肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素I(IL-1)含量,提高IL-2和胸腺指数,与模型组比较差异显著(P＜0.05),表明艾灸具有抗炎免疫的作用;(2)艾灸能诱导AA大鼠关节滑膜细胞的调亡,能提高凋亡指数,减轻炎症反应;(3)病理学观察证实,灸治能减轻关节滑膜的充血水肿、炎细胞浸润、滑膜细胞增生、组织增厚等渗出性变.结论:艾灸主要通过抑制滑膜炎起到治疗关节炎的作用.抑制炎症细胞因子的产生、释放,诱导滑膜细胞凋亡、是艾灸治疗RA抗炎免疫作用的主要机制.     

关节镜下滑膜切除术后外用中药治疗类风湿性关节炎

类风湿性关节炎(RA)是以滑膜组织增生,其发病机制中抗原特异性T细胞引起慢性滑膜炎起重要作用被广泛地接受.免疫抑制剂对RA的滑膜炎临床症状有效.提示T淋巴细胞与关节炎症状有关.尽管很多人热衷于T细胞抑制疗法,但是临床对比研究大多另人失望.后期侵蚀软骨、骨和韧带的侵入区称为"血管翳",最后导致关节的变形和强直.本研究针对RA早、中、后期,关节镜下滑膜切除术治疗RA不同时期疗效评价如下.     

橙皮苷对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡及滑膜组织Bcl-2/Bax表达的影响

目的:研究橙皮苷(HDN)对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜细胞的凋亡诱导作用及滑膜组织Bcl-2/Bax表达的影响。方法:60只SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、HDN(40,80,160 mg.kg-1)剂量组和雷公藤多苷组;用弗氏完全佐剂诱导大鼠AA模型;DNA琼脂糖凝胶电泳观察滑膜组织凋亡情况;原位末端标记检测(TUNEL)法检测滑膜组织中滑膜细胞凋亡及凋亡指数;免疫组化法检测滑膜组织Bcl-2和Bax表达变化。结果:HDN(80,160 mg.kg-1)治疗组大鼠滑膜组织DNA经电泳分析可见凋亡细胞DNA梯状条带;HDN(80,160 mg.kg-1)组大鼠滑膜细胞凋亡指数较模型组显著升高;与模型组比较,HDN(80,160 mg.kg-1)组大鼠滑膜组织Bcl-2表达明显降低而Bax表达明显升高,各剂量HDN均可显著降低Bcl-2/Bax。结论:HDN能通过抑制滑膜组织Bcl-2和促进Bax的表达、降低Bcl-2/Bax,诱导AA大鼠滑膜细胞凋亡,这可能是其治疗AA的作用机制之一。     

风湿宁胶囊对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞超微结构及细胞凋亡相关基因表达的影响

目的探讨风湿宁胶囊治疗类风湿关节炎(RA)的作用机制。方法 60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、雷公藤多苷片组、风湿宁低剂量组、风湿宁中剂量组、风湿宁高剂量组各10只,除正常对照组外其余各组建立胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型,雷公藤多苷片组给予雷公藤多苷片0.03g/(kg.d),风湿宁低、中、高剂量组分别给予风湿宁胶囊0.33、0.66、1.32g/(kg.d),正常对照组和模型组给予蒸馏水,各组按20ml/kg体重灌胃,每天1次,连续4周。透射电镜观察大鼠滑膜细胞超微结构,RT-PCR检测凋亡相关基因caspase 3mRNA、caspase 9mRNA的表达水平。结果电镜下风湿宁低、中、高剂量组大鼠的滑膜细胞超微结构均较模型组有不同程度的改善,尤以风湿宁中剂量组效果明显。雷公藤多苷片组及风湿宁低、中剂量组caspase 3mRNA的表达较模型组上调(P<0.05或P<0.01);风湿宁中、高剂量组及雷公藤多苷片组caspase 9mRNA表达较模型组上调(P<0.05或P<0.01)。结论风湿宁胶囊治疗RA机制可能与改善大鼠滑膜细胞的超微结构、上调凋亡相关基因caspase 3mRNA、caspase 9mRNA有关。     

中药对类风湿关节炎成纤维滑膜细胞的影响

类风湿关节炎(RA)是以关节滑膜为主要靶组织的炎症性自身免疫疾病。其病因病机不明,但研究表明成纤维滑膜细胞(FLS)是关节滑膜组织的主要细胞,在RA发生发展中扮演重要角色。尽管随着生物制剂的产生,RA有了较好的治疗方法,但仍不能终止病情。通过对相关文献的复习和基础实验的总结,发现中药直接以FLS为治疗靶点可能是治疗类风湿关节炎的新策略。通过总结FLS在RA中的发病机制,探讨中药对RA-FLS的治疗作用,为今后RA的实验研究及临床应用提供了新思路和依据。     

雷公藤治疗类风湿关节炎细胞和分子生物学机制的研究与进展

雷公藤治疗类风湿关节炎(RA)至今已40余年,其对RA具有显著疗效〔1〕。现认为〔2〕RA是易感机体由不明病因激活免疫系统后,在综合因素作用下,产生一种以破坏关节为主要特征的自身免疫性疾病,即便病因不复存在,但因分子模拟机制作用于自身抗原而发生的自身免疫反应性。研究表明〔3〕,雷公藤具有抗炎、免疫抑制及抗增殖等作用,从细胞基因水平更深入地揭示其治疗RA作用机制已成为雷公藤研究中较为活跃的领域,现将雷公藤治疗RA分子生物学机制研究与进展介绍如下。1对免疫活性细胞的影响1·1对T细胞影响1·1·1抑制激活T细胞双信号系统T细胞激活需要双信号系统的作用,而雷公藤对激活T细胞的双信号均具有不同程度抑制作用。雷公藤甲素(TP)在高剂量条件下可阻止树突状细胞(DC)发育,引起细胞死亡;对成熟DC,中剂量可诱导半数以上细胞发生凋亡〔4〕。雷公藤多苷能显著抑制DC表面HLA-DR和CD80表达,使T细胞不能活化,同时还能抑制DC内白细胞介素(IL)-12 P40分泌和mRNA转录,从而抑制Th1细胞分化〔5〕。1·1·2抑制T细胞活化、增殖与分化T细胞特异性识别抗原后,在黏附分子和细胞因子协同作用下活化、增殖、分化为效应T细...     

当归拈痛汤加味膏外敷对AA大鼠关节中HIF-1α、滑膜细胞凋亡的影响

目的 探讨当归拈痛汤加味膏外敷在佐剂性关节炎(AA)大鼠关节中对低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及滑膜凋亡的影响.方法 40只wistar大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组及对照组.建立AA模型,给药后18d,取踝关节行HE染色及HIF-1α免疫组化染色,流式细胞仪检测滑膜细胞的凋亡变化.分析HIF1α、滑膜凋亡在AA中的相关性及与节炎活动指标、滑膜病理之间的关系.结果 给药18d后,治疗组HE染色显示明显减轻滑膜增殖以及炎症反应,免疫组化显示治疗组HIF-1α明显表达降低,流式细胞仪检定显示治疗组滑膜细胞凋亡率明显升高.结论 HIF-1α的表达与滑膜细胞凋亡率呈明显负相关,该膏剂通过抑制HIF-1α活性,从而调控一系列下游靶基因,如滑膜细胞凋亡等,此可能是其抑制滑膜增生的作用机制之一.     

青藤碱抑制类风湿关节炎滑膜细胞增殖与诱导凋亡的研究

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)特征之一就是滑膜组织表现为增生性侵蚀性生长,其生长性质和病理学行为在许多方面类似于肿瘤组织的特性,对软骨组织造成进行性破坏。因此延缓甚至抑制滑膜细胞异常增殖与诱导其凋亡将成为治疗RA的主要策略之一,具有十分重要的意义。青藤碱(sinomenine,SN)是青风藤中提取的生物碱单体,具有良好的抗炎、镇痛、免疫抑制等药理作用,临床用于治疗类风湿关节炎取得良好疗效。本文主要将近年来有关SN在RA抑制滑膜细胞异常增殖与诱导其凋亡方面的研究作一详细阐述,以期为后续的临床研究提供理论依据。     

从NF-κB/Bcl-2信号通路调控成纤维样滑膜细胞凋亡角度探讨中医药抑制类风湿关节炎滑膜炎症机制的研究进展

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种以关节滑膜炎症为主要特征的自身免疫性疾病,成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes, FLS)的抗凋亡是导致该病病情发展的主要因素。如何促进FLS凋亡并抑制炎症反应是目前RA治疗和研究的重点。核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)/B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)信号通路在RA发病过程中发挥了关键作用,其与FLS炎症倾向、抗凋亡等密切相关。研究并探讨NF-κB/Bcl-2信号通路调控FLS凋亡的机制及作用,介绍中医药靶向该通路促进FLS凋亡进而抑制RA滑膜炎症的研究现状,旨在为中医药治疗RA的研究提供一定基础。     

姜酚对类风湿关节炎模型大鼠血清白细胞介素-17及白细胞介素-23的影响

目的观察中药活性成分姜酚对类风湿关节炎(RA)模型大鼠血清白细胞介素(IL)-17、IL-23的影响,探讨其作用机制。方法 40只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、姜酚组和雷公藤组。采用胶原诱导制备RA模型,于造模第7日开始,姜酚组给予姜酚灌胃,雷公藤组给予雷公藤多苷灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃。治疗4周后采血并处死大鼠,镜下观察大鼠关节滑膜病理,ELISA检测大鼠血清IL-17、IL-23的表达。结果病理观察结果显示,与模型组比较,姜酚组关节滑膜组织血管新生及滑膜增生减轻,炎细胞浸润、水肿改善。模型组IL-17、IL-23表达明显高于正常组(P0.01);与模型组比较,姜酚组和雷公藤组均能下调IL-17、IL-23表达(P0.05,P0.01),姜酚组优于雷公藤组(P0.05)。结论姜酚通过下调RA大鼠血清IL-17、IL-23的表达起到一定的治疗作用。     

当归拈痛汤对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞自噬与凋亡的影响

目的:研究当归拈痛汤对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞自噬与凋亡的影响,进一步探讨当归拈痛汤防治RA的相关机制.方法:收集临床RA患者的滑膜组织,分离出成纤维样滑膜细胞(FLS)并进行培养,将RA-FLS细胞分为4组,分别为空白血清组、当归拈痛汤含药血清低、中、高剂量组.通过划痕实验,transwell侵袭实验检测...     

雷公藤多甙对胶原诱导型关节炎大鼠药效学研究

目的:实验观察药物雷公藤多甙(TG)对胶原诱导型大鼠关节病理学影响及放射学改变,提示药物雷公藤多甙临床治疗类风湿性关节炎(RA)的作用机制。方法:采用牛Ⅱ型胶原混合弗氏不完全佐剂于Wistar大鼠尾根部注射,足肿后随机分为造模加生理盐水组、甲氨喋呤(MTX)治疗组和雷公藤多甙治疗组,取左前肢和右后肢近端第3足趾关节,运用病理切片观察各组中性粒、淋巴细胞和浆细胞浸润、滑膜细胞增生、纤维组织增生和软骨破坏情况,并用乳腺钼靶机进行X光照片,比较各组大鼠关节破坏的差异。结果:病理切片观察到各组大鼠关节中中性粒细胞、淋巴细胞及浆细胞浸润无明显差异,而雷公藤多甙组大鼠关节滑膜组织增生、纤维组织增生及软骨破坏上与造模组相比较,各组指标明显低于造模组(P<0.05),但与MTX组比较无明显差异(P>0.05)。X光片显示,雷公藤多甙大鼠关节骨侵蚀情况明显优于造模组(P<0.01),且关节间隙与造模组相比较有明显差异(P<0.05);但与MTX组相比较,骨侵蚀与关节间隙变化均无明显差异(P>0.05)。结论:药物雷公藤多甙可通过抑制滑膜增生、拮抗软骨的破坏来减轻关节炎症和关节破坏情况,最终达到控制和改善骨关节的功能活动。本实验为临床运用药物雷公藤多甙治疗RA提供了实验依据。     

青蒿琥酯对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞周期及细胞形态的影响

目的:观察青蒿琥酯对类风湿关节炎 (rheumatoid arthritis, RA) 的动物模型--胶原诱导性关节炎(colla-gen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜细胞的影响,探讨其对RA的作用机制.方法:雄性Wistar大鼠皮内注射Ⅱ型胶原,建立CIA大鼠模型,然后取其滑膜组织用胶原酶消化法进行原代培养.取3～5代的传代细胞,进行后续实验.流式细胞仪检测青蒿琥酯和甲氨喋呤对滑膜细胞生长周期的影响,电镜观察青蒿琥酯作用下滑膜细胞的形态.结果:青蒿琥酯和甲氨喋呤作用下细胞停留在G<,1>期的比例比模型对照组明显增加(P<0.05),电镜下可以观察到青蒿琥酯引起滑膜细胞凋亡.结论:青蒿琥酯对RA的作用与抑制滑膜细胞的增殖,与诱导滑膜细胞凋亡有关.     

通痹灵、雷公藤多甙及青藤碱对实验性关节炎大鼠滑膜组织病理影响的比较研究

目的 :研究通痹灵、雷公藤多甙及青藤碱对Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节炎模型(CIA)滑膜组织病理的影响。方法 :滑膜组织常规脱水、包埋、制片、HE染色 ,观察炎性细胞浸润、纤维组织增生、滑膜细胞增生及巨噬样A型细胞增生情况。结果 :通痹灵组CIA大鼠滑膜组织的炎性细胞浸润、纤维组织增生和巨噬样A型细胞明显受抑制。四种细胞病理改变的总积分与造模组比较有非常显著的差异。结论 :通痹灵治疗类风湿性关节炎的机理可能与抑制炎性细胞浸润、纤维组织增生和巨噬样A型细胞增生有关。