艾灸抗炎免疫作用及对神经递质影响的实验研究

目的 :探讨灸法治疗 RA抗炎免疫作用的中枢神经递质调控机理。方法 :建立 AA大鼠模型 ,观察艾灸肾俞穴对炎症肿胀、细胞因子 IL- 6、IL- 2以及下丘脑内神经递质 NE、5- HT和 NO的影响。结果 :1 .灸治 AA大鼠能减轻炎症肿胀 ,降低 IL- 6,提高 IL- 2 ,与对照组比较差异显著 ( P<0 .0 1 ) ,表明灸疗能抗炎消肿 ,抑制炎症因子 ,提高机体免疫功能 ;2 .灸疗能上调 NE、5- HT的水平 ,降低 NO的含量 ,提示艾灸能激活或调整 HPA轴抗炎免疫的功能活动 ,有利于 AA的缓解与转归。结论 :艾灸有抗炎免疫的作用 ,下丘脑神经递质参与对该作用的中枢调节。     

止痹痛酒治疗类风湿性关节炎的实验研究

目的:评价止痹痛药酒治疗类风湿性关节炎(RA)的有效性与安全性.方法:运用弗氏完全佐剂所致大鼠关节炎作为类风湿性关节炎的模型,观察止痹痛药酒对模型鼠关节肿胀度和关节组织病理变化的影响.结果:止痹痛药酒能减轻模型鼠关节肿胀度,对免疫注射后继发病变具有良好的治疗作用,说明该药具有抗炎免疫作用,病理学观察证实该药能减轻关节滑膜的充血水肿和炎细胞浸润、抑制滑膜细胞增生,减轻关节软骨和软骨下骨组织的破坏程度,抑制模型鼠患肢的致残.     

隔物温和灸对完全弗氏佐剂关节炎大鼠滑膜病变的影响

目的：探讨隔物温和灸的疗效及作用机制。方法：以AA模型大鼠作为实验动物,组织病理学入手,观察隔物温和灸对滑膜病变的影响。结果：各个治疗组均可以均能有效减轻AA大鼠滑膜炎症,抑制滑膜细胞增殖。结论：隔物温和灸能有效地改善AA大鼠关节炎原发病变,达到与MTX相似的效果,且与MTX联合应用有协同作用,其作用机制可能与抑制关节滑膜细胞的增生有关。     

艾灸治疗类风湿性关节炎抗炎免疫作用机理的研究

为了探讨艾灸治疗RA抗炎免疫作用的机理 ,我们建立免疫性炎症———大鼠佐剂性关节炎模型等 ,从神经 内分泌 免疫调控入手 ,在整体、器官、细胞水平开展灸治RA的实验研究。结果艾灸“肾俞”、“足三里”穴具有抗炎免疫作用 ,其机理与灸疗抑制TNF、IL 1等炎症因子的释放 ,增强与改善机体的免疫功能 ,保护胸腺、脾脏等免疫器官 ,纠正炎症时自由基代谢的紊乱 ,调整NO、NE、5 HT神经递质的失衡 ,促进内环境稳定等多方面因素有关。实验证实 ,外周交感神经参与艾灸对免疫的调节 ;灸疗的部分作用是通过肾上腺皮质系统发挥的 ;海马可能是灸疗信息中枢整合的重要环节 ;HPA轴是灸疗作用中一条重要的神经体液性途径 ;松果体 (MT)可能是艾灸抗炎免疫的一个高位调节点。提示灸疗抗炎免疫作用是其治疗RA的主要机制之一     

雷公藤对实验性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的影响

雷公藤是临床治疗类风湿性关节炎(rheuma-toid arthritis,RA)的公认药物,具有抗炎、抗风湿、免疫抑制及镇痛作用.RA是一种自身免疫性疾病,其早期病变主要在于滑膜.RA滑膜过度增生、增厚是造成关节损害的主要病理基础之一.现在有学者认为,滑膜细胞凋亡机制障碍可能是滑膜组织增生的另一重要机制.本研究通过观察雷公藤对CIA大鼠滑膜细胞凋亡的影响,进一步研究其治疗RA的可能机制.     

艾灸抗炎免疫作用中松果腺褪黑素高位调节的研究

目的研究松果腺褪黑素(MT)对炎症与免疫的调节,探讨艾灸抗炎免疫作用的机理.方法建立佐剂性关节炎大鼠模型,分别损毁其海马内NA神经和摘除肾上腺,观察艾灸对MT及细胞因子IL-6、IL-2的影响.结果艾灸"肾俞"穴能恢复和促进大鼠MT的分泌,使IL-6降低、IL-2升高,与对照组比较差异显著(P＜0.05,P＜0.01).失去肾上腺和海马交感神经的支配,松果腺MT增多,IL-6、IL-2含量上升,灸疗的抗炎免疫作用被削弱或部分阻断.结论提示松果腺MT参与艾灸抗炎免疫作用的高位调节.     

切断迷走神经对艾灸调控实验性类风湿性关节炎家兔关节滑膜液细胞因子水平的影响

目的:探索艾灸对实验性RA家兔关节滑膜液细胞因子水平的影响及其胆碱能神经调控机制。方法:将日本大耳白兔随机分为空白对照组、RA模型组、艾灸治疗组、艾灸治疗迷走神经切断组、艾灸治疗假手术组,用福氏完全佐剂塑造RA疾病模型,运用颈部左侧迷走神经干切断术作为干预手段,艾灸肾俞、足三里治疗,采用ELISA法检测滑膜液TNF-α、IL-1、IL-6、HMGB1含量。结果:与空白对照组相比较,RA模型组关节滑膜液中TNF-α、IL-1、IL-6、HMGB1含量显著增高(P<0.01);与RA模型组比较,艾灸治疗组、艾灸治疗假手术组关节滑膜液中TNF-α、IL-1、IL-6、HMGB1含量明显降低(P<0.01),而艾灸治疗迷走神经切断组无明显降低(P>0.05);与艾灸治疗组比较,艾灸治疗迷走神经切断组滑膜液中TNF-α、IL-1、IL-6、HMGB1含量显著增高(P<0.01),但艾灸治疗假手术组无明显增高(P>0.05)。结论:艾灸能抑制实验性RA家兔关节滑膜液促炎细胞因子水平从而减轻RA滑膜炎症,其机制可能与兴奋胆碱能抗炎通路有关。     

走马胎石油醚提取物抗类风湿性关节炎的作用机制

目的:对走马胎石油醚提取物抗类风湿性关节炎(RA)的作用机制进行研究。方法:采用完全弗氏佐剂(CFA)诱导大鼠佐剂性关节炎(AA)模型;利用评分法和病理评估RA大鼠炎症病变的程度;利用爪肿测定仪测定AA大鼠足爪肿胀度;利用大鼠MDA定量酶联检测试剂盒测定AA大鼠血清MDA含量;利用氢氧化钾-甲醇溶液法测定AA大鼠肿胀足前列腺素E2(PEG2)的含量。结果:走马胎石油醚提取物能降低AA大鼠全身炎症评分和关节炎症肿胀度评分,改善踝关节组织病理学;减少继发侧足爪肿胀度;降低血清MDA含量和致炎侧足组织中PGE2含量;降低胸腺、脾脏及肝脏的脏器指数。结论:走马胎石油醚提取物可能通过改善AA大鼠炎症状态和踝关节组织病变、抑制机体免疫反应、降低氧化损伤和下调炎性介质PGE2表达来发挥抗类风湿性关节炎作用。     

汝无糯鸡抗类风湿性关节炎的机制

目的:研究彝族药汝无糯鸡对佐剂性关节炎(AA)大鼠模型的滑膜病变及滑膜细胞核转录因子-κB(NF-κB),基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9表达的影响,探讨其抗类风湿性关节炎(RA)的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分成空白组,模型组,尼美舒利组,汝无糯鸡高、中、低剂量组(按生药量计5.0,2.5,1.25 g·kg-1),采用完全弗氏佐剂建立AA大鼠模型,灌胃给药28 d后取样并处死大鼠,苏木素-伊红(HE)染色光镜下观察大鼠踝关节滑膜组织形态学变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清白细胞介素(IL)-1β,IL-6,IL-10,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),一氧化氮(NO),前列腺素E2(PGE2)含量,免疫组化法检测大鼠滑膜组织中NF-κB,MMP-2,MMP-9的表达水平。结果:彝族药汝无糯鸡组明显减轻滑膜细胞的异常增殖,减少炎性细胞浸润,各剂量组不同程度降低AA大鼠血清中IL-1β,IL-6,TNF-α,NO,PGE2的含量和升高IL-10的含量,降低关节滑膜组织NF-κB,MMP-2,MMP-9的蛋白含量(P0.05,P0.01)。结论:彝族药汝无糯鸡治疗RA的作用机制可能是通过下调AA大鼠滑膜组织中NF-κB,MMP-2,MMP-9的蛋白表达,抑制炎性细胞因子生成,从而加速细胞凋亡,改善滑膜病变。     

补阳还五汤对佐剂性大鼠关节炎病理形态学的影响

为探讨补阳还五汤治疗类风湿性关节炎的功效,观察了其对AA大鼠的关节病理形态学的影响.结果显示补阳还五汤能减轻大鼠关节皮下软组织及滑膜组织的充血、水肿程度,抑制滑膜细胞的增生,缓解炎性细胞的浸润.表明补阳还五汤在缓解RA关节炎症方面疗效确切,值得做进一步的研究.     

艾灸治疗实验性RA大鼠的抗炎效应及对滑膜组织mPD-1表达影响的研究

目的观察艾灸对实验性RA滑膜组织mPD-1表达的影响,深入探索阐释艾灸治疗RA抗炎效应的作用机理。方法健康成年SD大鼠45只,随机分为空白对照组、RA模型组、艾灸治疗组,每组各15只。采用弗氏完全佐剂进行RA模型复制。在造模后第7天,对艾灸组大鼠采用麦粒灸"肾俞"、"足三里"各5壮,每天1次,6天为1疗程,共治疗3个疗程。分别于造模前1天和造模后的第7天及治疗第21天测量各组大鼠的右后足容积,并计算其足肿胀度。并对其滑膜组织进行病理形态学检测,分级评分,用免疫组化法测定滑膜组织中mPD-1的表达。结果艾灸"肾俞"、"足三里"可明显改善RA模型大鼠的足肿胀度;艾灸能有效降低关节滑膜组织、纤维组织增生,炎性细胞浸润(P0.01)及滑膜组织mPD-1表达(P0.01)。结论艾灸对实验性RA具有明显的抗炎效应;艾灸通过调节滑膜组织mPD-1的表达,可能是其发挥抗炎效应的重要机制之一。     

基于PI3K/Akt/mTOR通路探究马钱子总生物碱对类风湿性关节炎大鼠的作用及机制

目的:分析马钱子总生物碱对类风湿性关节炎(RA)大鼠的作用及对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)通路的影响。方法:50只Wistar大鼠随机分为对照组、RA组、RA+马钱子总生物碱组(100 mg·kg^(-1))、RA+PI3K抑制剂组(20 mg·mL^(-1)LY294002)、RA+马钱子总生物碱+PI3K激活剂组[100 mg·kg^(-1)马钱子总生物碱+20μg·kg^(-1)胰岛素样生长因子1(IGF-1)],除对照组外,其余各组均构建RA模型并根据剂量给药,计算每只大鼠关节评分,测定大鼠血清抗瓜氨酸化蛋白抗体(ACPA)、丙二醛(MDA)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察评估大鼠膝关节滑膜组织病理,比较各组Mankin评分、炎细胞浸润数、软骨厚度;测定滑膜组织白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核转录因子(NF)-κB受体活化因子配体(RANKL)水平;蛋白免疫印迹(Western blot)测定大鼠滑膜组织PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达。结果:1)对照组大鼠关节软骨组织结构正常,表面光滑完整,腔隙内组织有良好的完整软骨细胞;RA组关节表面广泛侵蚀,形态无规则,软骨细胞明显丢失,炎性细胞大量浸润,关节软骨厚度低,细胞间基质显著丢失,滑膜中单核炎性细胞浸润可见;RA+马钱子总生物碱组、RA+PI3K抑制剂组呈现保护性体征,关节表面侵蚀降低,炎性细胞浸润减轻,关节软骨厚度增加;与RA+马钱子总生物碱组相比,RA+马钱子总生物碱+PI3K激活剂组关节软骨损伤加重。2)与对照组相比,RA组大鼠关节炎症评分、血清ACPA及MDA水平、Mankin评分、炎细胞浸润数、滑膜组织IL-1β、IL-6、TNF-α、RANKL升高(P<0.05),软骨厚度降低(P<0.05);与RA组相比,RA+马钱子总生物碱组、RA+PI3K抑制剂组大鼠关节炎症评分、血清ACPA及MDA水平、Mankin评分、炎细胞浸润数、滑膜组织IL-1β、IL-6、TNF-α、RANKL降低(P<0.05),软骨厚度升高(P<0.05);与RA+马钱子总生物碱组相比,RA+马钱子总生物碱+PI3K激活剂组大鼠关节炎症评分、血清ACPA及MDA水平、Mankin评分、炎细胞浸润数、滑膜组织IL-1β、IL-6、TNF-α、RANKL升高(P<0.05),软骨厚度降低(P<0.05)。3)与对照组相比,RA组大鼠滑膜组织磷酸化(p)-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR升高(P<0.05);与RA组相比,RA+马钱子总生物碱组、RA+PI3K抑制剂组大鼠滑膜组织p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR降低(P<0.05);与RA+马钱子总生物碱组相比,RA+马钱子总生物碱+PI3K激活剂组大鼠滑膜组织p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR升高(P<0.05)。结论:马钱子总生物碱可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路缓解RA大鼠炎症。     

壮医药线点灸对佐剂关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的影响

目的通过建立大鼠类风湿关节炎模型,予以壮医药线点灸干预,观察治疗效果,并进一步探讨其对大鼠关节滑膜细胞凋亡的影响。方法建立佐剂关节炎大鼠模型,予以甲氨蝶呤(MTX组)、壮医药线点灸(ZHM组)和两者联合(CT组)干预。观察并评估大鼠关节炎指数和肿胀度;HE染色观察关节滑膜病理变化;TUNEL染色观察大鼠关节滑膜细胞凋亡率;Western blotting检测滑膜组织中Bcl-2/Bax的表达。结果 MTX组(P0.05)、ZHM组和CT组(P0.05)大鼠关节炎系数相比于关节炎模型组(RA组)均有不同程度的降低,其中CT组降低最为显著,ZHM组与MTX组相比差异亦具统计学意义(P0.05);HE染色结果显示MTX组、ZHM组和CT组大鼠滑膜衬里层细胞增生和炎性细胞浸润与RA组相比均有不同程度的改善;MTX组(P0.05)、ZHM组(P0.05)和CT组(P0.05)与RA组相比细胞凋亡数量显著增加,差异具有统计学意义,CT组和ZHM组与MTX组比较,细胞凋亡现象显著,差异具有统计学意义(P0.05);MTX组(P0.05)、ZHM组(P0.05)和CT组(P0.05)与RA组相比大鼠关节滑膜组织中Bcl-2蛋白表达显著下调,Bax显著上调,CT组和ZHM组与MTX组相比Bcl-2下调、Bax上调均更为显著,差异具统计学意义(P0.05)。结论壮医药线点灸干预能够在一定程度上改善佐剂关节炎大鼠症状,联合甲氨蝶呤使用效果更为显著;而且其作用机制可能是通过Bcl-2信号通路调控关节滑膜细胞凋亡来实现的。     

不同灸法对类风湿性关节炎家兔肿胀关节及滑膜液中白介素-1、肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:观察不同灸法对实验性类风湿性关节炎(RA)家兔关节滑膜液中白介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,探讨不同灸法治疗实验性RA的作用机制。方法:日本大耳白兔40只,随机分为对照组、模型组、直接灸组、隔姜灸组及温和灸组,每组8只。采用弗氏完全佐剂法复制实验性RA模型,于造模后第7天开始,分别用直接灸、隔姜灸、温和灸施灸"肾俞""足三里"穴各5壮,两侧交替进行,每日1次,6d为1个疗程,共3个疗程。在造模前、造模后第7天及治疗第7、14、21天分别测量各组后肢的左、右膝关节周长;用酶联免疫法检测滑膜液中IL-1、TNF-α的含量。结果:直接灸、隔姜灸、温和灸均能明显降低RA白兔左、右膝关节周长(P<0.01),其中以隔姜灸作用最为明显(P<0.05);直接灸、隔姜灸、温和灸均能明显降低RA模型动物关节滑膜液中IL-1、TNF-α含量(P<0.01,P<0.05),以隔姜灸作用最为明显(P<0.05)。结论:不同灸法治疗实验性RA均有明显的抗炎效应,且以隔姜灸作用最为显著;不同灸法抑制IL-1、TNF-α炎性反应因子表达可能是其发挥抗炎效应的重要机制之一。     

针灸对佐剂性关节炎大鼠痛反应和β-内啡肽含量的影响

目的:探索针灸治疗RA在抗炎镇痛、免疫调节方面的β-Ep机制。方法:以佐剂性关节炎(AA)大鼠为模型,用艾灸和电针两种方法,观察大鼠痛反应的变化,并以放射免疫方法检测血浆、炎症组织中β-Ep含量。结果:AA大鼠痛阈降低,炎症组织中β-Ep含量升高,治疗后痛阈升高,血浆及炎症组织中β-Ep含量升高,且两者结合疗效明显好于单针单灸组。结论:针灸可以通过增加血浆及炎症组织中β-Ep含量实现对AA大鼠外周镇痛效应和免疫调节作用。神阙穴应作为提高机体免疫功能的有效穴,在RA的治疗中被广泛应用。     

不同灸法对实验性RA模型IL-6、IL-8、MCP-1表达影响的研究

目的:观察不同灸法对实验性RA模型关节滑膜液中炎症因子IL-6、IL-8、MCP-1表达的影响,探索不同灸法治疗实验性RA的作用机制。方法:日本大耳兔40只,体重(2.5±0.25)kg,雌雄各半,分为空白对照组、RA模型组、直接灸治疗组、隔姜灸治疗组、温和灸治疗组,每组8只日本大耳兔。采用福氏完全佐剂塑造实验性RA模型,于造模后第7天开始,分别用直接灸、隔姜灸、温和灸3种不同方法施灸日本大耳兔"肾俞"、"足三里"穴各5壮,两侧交替进行,每日1次。6天为1个疗程,共3个疗程。结果:直接灸、隔姜灸、温和灸均能明显降低RA模型动物关节滑膜液中IL-6、IL-8、MCP-1含量(P0.05,0.01),其中尤以隔姜灸作用最为明显。结论:不同灸法治疗实验性RA均有明显的抗炎效应,且以隔姜灸作用最为显著;不同灸法抑制IL-6、IL-8、MCP-1炎症因子表达可能是其发挥抗炎效应的重要机制之一。     

艾灸对类风湿性关节炎家兔滑膜细胞CyclinD1及CDK4蛋白表达的影响

目的:观察艾灸对实验性类风湿性关节炎(RA)家兔滑膜细胞的细胞周期蛋白D1(CyclinD1)及周期蛋白依赖激酶CDK4的影响,探索艾灸调控实验性RA家兔滑膜细胞增殖的分子信号机制。方法:以佐剂性关节炎(AA)作为RA疾病模型,艾灸实验性RA家兔双侧"肾俞"穴,采用Western-blot方法检测治疗前后家兔关节滑膜细胞的cyclinD1和CDK4蛋白表达。结果:RA模型组CyclinD1和CDK4蛋白表达明显高于空白组(P0.01),艾灸组CyclinD1和CDK4蛋白表达明显低于模型组(P0.01)。结论:艾灸抑制RA滑膜细胞CyclinD1及CDK4蛋白的过度表达,可能是其调控RA滑膜细胞增殖的重要分子机制。     

悬灸与直接灸治疗类风湿关节炎小鼠的对比研究

目的:比较悬灸与直接灸对类风湿关节炎小鼠治疗作用的异同。方法:DBA/1J小鼠36只随机分为正常组、模型组、不治疗组、悬灸组、直接灸组和安慰治疗组。复制Ⅱ型胶原诱导的小鼠类风湿关节炎模型并予以艾灸治疗,观察悬灸与直接灸对关节肿胀、关节滑膜病理表现的影响,流式细胞术分析Th17、Treg细胞变化,ELISA检测相关细胞因子IL-1β/IL-6/IL-10/IL-17/TGF-β的含量。结果:经两次免疫后,小鼠足踝关节及脚掌、足趾关节出现红肿,CIA模型成功建立。治疗15天后,悬灸组小鼠关节肿胀有明显消退,关节评分低于模型组、不治疗组、直接灸组、安慰治疗组(P 0. 05)。病理表现上,悬灸组小鼠病变关节面粗糙较前缓解,滑膜层较治疗前变厚,与正常组病理表现较为接近;直接灸组关节面有一定恢复,但较悬灸组差;不治疗组及安慰治疗组无明显变化。ELISA检测发现CIA模型小鼠脾脏中IL-1β、IL-6、IL-17等致炎细胞因子表达增高、抑炎因子IL-10、TGF-β表达降低(均P 0. 01);悬灸和直接灸治疗后致炎因子含量与模型组比较相应降低、抑炎因子含量明显提高(均P 0. 01),且两组之间无统计学差异(均P 0. 05)。流式细胞术显示:与正常小鼠相比,CIA模型小鼠调节性T细胞下降,而Th17细胞则上升(均P 0. 01);治疗后悬灸组Treg细胞的数量显著上升、Th17细胞的数量显著下降(均P 0. 01);而直接灸组、不治疗组、安慰治疗组Treg细胞、Th17数量与模型组比较无显著统计学差异(P 0. 05)。结论:悬灸、直接灸均能减轻CIA小鼠关节滑膜病变、下调炎症因子和上调抗炎细胞因子含量;但与悬灸治疗比较,直接灸治疗对CIA小鼠关节肿胀度和脾Treg/Th17细胞失衡状态无显著作用。直接灸治疗CIA小鼠的疗效及作用机理还需进一步研究。     

维吾尔药新疆假龙胆对大鼠关节炎的作用机制研究

目的考察新疆假龙胆抗类风湿性关节炎(RA)的药理作用及作用机制。方法建立佐剂性关节炎(AA)动物模型,观察新疆假龙胆对AA大鼠足肿胀、踝关节组织病理变化及血清中促炎细胞因子TNF-α水平的影响。结果新疆假龙胆能有效抑制关节肿胀及减轻炎症的发展,降低AA大鼠血清中促炎细胞因子TNF-α的水平。结论新疆假龙胆具有良好的抗RA作用,其作用机制与抑制促炎细胞因子TNF-α的水平有关。     

艾灸对实验性RA家兔关节滑膜液FGF EGF PDGF含量的影响

目的:观察艾灸对实验性RA家兔滑膜液中FGF、EGF、PDGF的影响,探讨灸法治疗类风湿性关节炎的作用机理。方法:以佐剂性关节炎(AA)作为RA疾病模型,艾灸家兔双侧“肾俞”穴,运用ELISA双抗夹心法测定滑膜液中FGF、EGF和PDGF含量。结果:RA模型组滑膜液中FGF、EGF和PDGF含量显著高于空白对照组(P<0.05);艾灸治疗组滑膜液中FGF、EGF和PDGF含量明显低于RA模型组(P<0.05)。结论:艾灸治疗能明显抑制RA滑膜组织产生FGF、EGF和PDGF。