基质金属蛋白酶及其抑制物在月经周期中表达的分析

目的观察子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)在正常月经周期中不同时期的表达,探讨其意义。方法月经正常者37例,子宫内膜组织分为增殖期、分泌早期、分泌中期,所有标本采用免疫组织化学法及RT-PCR技术检测MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表达,并采用病理图像分析技术进行半定量分析。结果 MMP-9、MMP-2及TIMP-1在各组子宫内膜中均呈阳性表达,在腺上皮细胞和间质细胞胞浆均可见棕黄色颗粒沉着,以腺上皮细胞表达为著。分泌中期MMP-9、MMP-2及TIMP-1在子宫内膜腺上皮中的表达明显高于增殖期和分泌早期(P0.05);分泌早期MMP-9、MMP-2及TIMP-1在子宫内膜腺上皮中的表达明显高于增殖期(P0.05)。子宫内膜间质中的表达无明显差异(P0.05)。结论人类月经周期中子宫内膜腺上皮中MMP-9、MMP-2及TIMP-1的表达呈周期性变化,其表达与子宫内膜功能相关。     

子宫内膜息肉中Bcl-2、Bax和Caspase3表达及其意义

组显著低于对照组(P<0.05).增生期研究组和对照组中Caspase3均有一定程度的表达,但两组相比无显著性差异(P>0.05),分泌期研究组和对照组中Caspase3的表达均增强,但研究组中Caspase3的表达显著低于对照组(P<0.05).结论:增生期Bel-2的高表达及分泌期Bax的低表达可能参与子宫内膜息肉的形成.分泌期子宫内膜息肉中Caspase3的表达增高,但明显少于正常子宫内膜,提示Caspase3可能参与子宫内膜息肉的发生、发展.     

Caspase-9与FLIP在子宫内膜息肉中的表达和意义

目的探讨Caspase-9和FLIP在子宫内膜息肉组织中的表达及意义。方法选取接受宫腔镜子宫内膜息肉(EMP)切除术的患者50例为试验组,要求患者术前月经规律,术前1年内未使用过性激素类及甾体类药物,重要器官心、肝、肾及血液系统无疾病;另选取正常子宫内膜标本20例为对照组。利用HE染色观察EMP及正常内膜组织的细胞形态,电子显微镜观察正常内膜组织和EMP线粒体、细胞核形态及有无凋亡小体形成,采用免疫组化法检测Caspase-9和FLIP在正常内膜组织和EMP标本中的表达情况。结果 FLIP在EMP和正常子宫内膜的腺上皮细胞的胞浆和胞膜中均有表达,在EMP中的表达呈强阳性,显著高于正常子宫内膜,差异有统计学意义(P<0.05)。Caspase-9在EMP和正常子宫内膜的腺上皮细胞的胞浆和胞膜中均有表达,但两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论 EMP中FLIP明显增高,但Caspase-9在EMP和正常子宫内膜中的表达无明显差异,提示EMP的发生可能与凋亡减少和FLIP/Caspase-9表达失调有关。     

骨桥蛋白和整合素在子宫内膜异位症中的表达

目的研究骨桥蛋白（OPN）和整合素αv亚基、β3亚基在子宫内膜异位症患者在位和异位内膜的表达。方法采用免疫组化方法检测22例子宫内膜异位症患者在位内膜和异位内膜中OPN、整合紊αv亚基、β3亚基的表达，正常月经周期子宫内膜OPN、整合素αv亚基、β3亚基的表达作为对照。结果异位内膜组织只能简单地分为增生期与分泌期，68．2％与在位内膜一致。OPN在正常子宫内膜分布于腺上皮及腔上皮细胞内，腺腔表面表达明显，分泌期强于增生期，间质几无表达。子宫内膜异位症患者在位内膜OPN的表达规律与正常子宫内膜相似。异位内膜OPN的表达失去周期性。异位内膜OPN的表达高于在位内膜，差异有统计学意义（P〈0．05）。主要分布于腺上皮的细胞膜上，增生期均强表达。分泌期腺体之间表达差异有统计学意义。子宫内膜异位症患者在位内膜与异位内膜整合素αv亚基表达差异无统计学意义。正常子宫内膜中整合素β3亚基主要表达于分泌中期、晚期腺上皮细胞的胞浆内及血管内皮，增生期无表达。子宫内膜异位症患者在位内膜增生期整合素β3亚基也有弱表达，分泌期的表达下调。异位内膜整合素β3亚基显著高于在位内膜。结论子宫内膜异位症患者异位内膜、在位内膜OPN、整合素β3亚基显著高表达，提示整合索αv、β3及配体OPN在子宫内膜异位症的发生发展中起一定的作用。     

Bcl-2蛋白在子宫内膜异位症的表达及意义

目的检测正常子宫内膜及内膜异位症的在位、异位内膜Bcl-2蛋白表达及细胞凋亡率,探讨其在子宫内膜异位症发生机制中的作用.方法采用免疫组化方法对50例同期因宫颈癌Ⅰ期,输卵管节育术患者及盆腔子宫内膜异位症患者47例的在位、异位内膜Bcl-2蛋白表达及应用流式细胞技术检测细胞凋亡率.结果①对照组子宫内膜的Bcl-2蛋白主要表达于子宫内膜腺上皮细胞浆和/或细胞膜上.增生期Bcl-2蛋白的表达显著高于分泌期(P＜0.01).②内膜异位症组在位内膜的Bcl-2蛋白亦主要表达于子宫内膜腺上皮细胞胞浆和/或胞膜上,增生期Bcl-2蛋白表达与分泌期有显著性差异(P＜0.01).异位症组异位内膜增生期、分泌期无显著性差异(P＞0.05).③异位症组异位内膜与在位内膜分泌期比较Bcl-2蛋白表达有显著性差异(P＜0.05).④内膜异位症组与对照组比较其分泌期Bcl-2蛋白表达显著高于对照组的分泌期(P＜0.01).内膜异位症在位内膜细胞凋亡率低于正常子宫内膜.异位内膜细胞AP峰明显低于异位症在位内膜细胞和正常子宫内膜细胞.结论①子宫内膜周期性生理变化与Bcl-2蛋白表达水平有关.子宫内膜的周期性变化可能与凋亡有关.Bcl-2蛋白的表达水平越高,组织的抗凋亡性越强.②异位内膜细胞凋亡率低于在位内膜,更低于正常子宫内膜即子宫内膜异位症的异位内膜及在位内膜分泌期抗凋亡能力明显增强.     

药物流产后异常子宫出血妇女血管生成素-1和血管生成素-2的表达及子宫内膜病理组织学变化

目的探讨米非司酮药物流产后异常子宫出血妇女血管生成素-1 (Ang-1)与Ang-2表达及子宫内膜病理组织学变化。方法选择2018年10月-2019年10月间在浙江省台州医院和深圳市中医院因药物流产以后子宫异常出血行刮宫术妇女96作为观察组,选取同期药物流产以后未出现子宫异常出血妇女96例为对照组,分析子宫异常出血妇女病理组织类型和临床资料间联系状况,免疫组化法检测两组患者内膜组织中Ang-1、Ang-2表达情况。结果临床不同参数对比中,年龄高于35岁、孕次≥3次及产次在1次以上妇女其残留绒毛组织比例高于其他各组,子宫内膜或者锐膜组织伴随白细胞浸润比例则低于其他各组(均P0.05);免疫组化显示,Ang-2与Ang-1蛋白在分泌期与增生期子宫内膜内血管壁、腺上皮细胞、基质细胞和腔上皮细胞内均有表达,其中腺体内表达最显著,存在腺上皮细胞的胞浆内,观察组表达比对照组更强;观察组Ang-2蛋白、Ang-1蛋白表达量均高于对照组(P0.05)。结论残留绒毛组织为药物流产以后子宫出血量多、时间长主要因素,内膜组织内血管生成素表达量升高可能和出血时间延长有联系。     

子宫内膜异位症患者内膜组织Livin、半胱氨酸蛋白酶激活剂及Bcl-2蛋白的表达及意义

目的探讨Livin、半胱氨酸蛋白酶激活剂(Smac)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白在子宫内膜异位症患者内膜组织中的表达及相关性。方法选取2013年6月-2015年6月该院收治的30例子宫内膜异位症患者的在位内膜组织、异位内膜组织为研究对象,其中增生期13例,分泌期17例,以30例正常的子宫内膜组织作为对照。采用免疫组织化学法(SP法)检测Livin、Smac及Bcl-2蛋白在不同内膜组织中的表达,并采用Spearman相关性分析Livin、Smac及Bcl-2表达的相关性。结果在位内膜、异位内膜组织中的Livin、Bcl-2的阳性表达较正常内膜组织均明显增加,Smac的阳性表达较正常内膜组织下降,差异有统计学意义(均P0.05);Smac蛋白在异位内膜组织的阳性表达低于在位内膜组织,差异有统计学意义(P0.05);在位内膜组织和正常子宫内膜组织中,Livin和Bcl-2的阳性表达在分泌期显著低于增生期,差异有统计学意义(均P0.05);正常子宫内膜组织中,Smac在分泌期的阳性表达显著高于增生期的表达,差异有统计学意义(P0.05);Livin与Bcl-2表达呈正相关,Livin与Smac表达呈负相关,Bcl-2与Smac表达呈负相关(均P0.05)。结论 Livin、Smac及Bcl-2在子宫内膜异位症患者的内膜组织中表达异常,三者之间的协同表达可能在子宫内膜异位症的发生、发展中起着重要协调作用,有望成为该疾病诊断和基因治疗的靶点。     

子宫腺肌病患者在位及异位内膜中CD146的表达

目的:观察子宫腺肌病患者子宫在位及异位内膜组织CD146的表达与其微血管形成的关系,探讨子宫腺肌病患者微血管生成的变化。方法:手术切除子宫患者66例,其中子宫腺肌病40例(AM组),对照组26例。用免疫组织化学方法检测正常子宫内膜、腺肌病患者在位及异位内膜组织中CD146的表达及微血管数目和密度(MVD)值。结果:AM组在位内膜中MVD分泌期(33.7±4.9)明显高于增殖期(27.2±5.0)(P0.01),对照组子宫内膜中MVD分泌期(20.5±3.8)与增生期(17.9±3.6)比较差异无统计学意义(P0.05)。AM组与对照组相比无论是增殖期、分泌期及整个月经周期,在位内膜MVD均明显高于对照组内膜(P0.01)。AM组患者在位内膜(4.1±1.4)与异位内膜(4.9±1.4)CD146表达评分比较差异有统计学意义(P0.05),与在位内膜增殖期CD146表达评分(3.6±1.7)相比差异显著,与分泌期(4.7±0.6)相比评分增加,但差异无统计学意义(P0.05);而与对照组内膜整个月经周期(2.4±0.8)及增殖期(2.4±0.7)、分泌期(2.3±0.9)相比CD146表达评分均明显增加,CD146在AM患者在位内膜85%(34/40)、异位内膜90%(36/40)及对照组内膜62%(16/26)的表达阳性率与对照组相比差异有统计学意义(P0.01)。CD146与MVD具有明显的正相关性(r=0.567,P0.01)。结论:腺肌病患者子宫内膜和异位内膜CD146表达显著增强,提示CD146在子宫内膜异位症微血管形成过程中发挥了重要作用。     

血管生成素-2及其受体Tie-2在子宫内膜异位症中的表达

目的:探讨Ang-2及受体Tie-2在子宫内膜异位症(EMs)患者的在位内膜和异位内膜中的表达。方法:选取病理证实为EMs患者60例为研究组(异位内膜组、在位内膜组),选取同期因不孕症等行腹腔镜手术患者的子宫内膜组织36例为对照组。采用免疫组织化学染色方法检测Ang-2及受体Tie-2的表达。结果:①Ang-2主要表达于腺上皮细胞和血管内皮细胞,少数表达于间质细胞。Ang-2在EMs异位内膜、在位内膜的阳性表达率明显高于对照组(P<0.05);在位内膜同异位内膜间比较差异无显著性(P>0.05);EMs在位内膜组分泌期的阳性表达率高于增殖期(P<0.05);对照组增生期的阳性表达率高于分泌期(P<0.05)。Ang-2在EMs在位内膜组、正常对照组的表达均随月经呈周期性改变,差异均有显著性。②Tie-2主要表达于腺上皮细胞和血管内皮细胞,EMs组异位内膜和在位内膜Tie-2的表达明显高于对照组(P<0.05);EMs患者异位及在位内膜比较差异无显著性(P>0.05);Tie-2在正常子宫内膜、EMs在位内膜中的表达具有周期性,均为增生期高于分泌期(P<0.05)。结论:EMs患者异位及在位内膜中血管生成活跃,导致异位病灶组织中的血管数增加。异位内膜和在位内膜可能具有组织同源性。分泌期内膜更易在盆腹腔等处种植生长,增生期血管生成更为活跃。     

细胞核增殖抗原在子宫腺肌病子宫内膜-肌层交界区中的表达

目的通过检测不同月经周期子宫内膜-肌层交界区(endometrial-myometrial interface,EMI)组织中细胞核增殖抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达水平,探讨子宫腺肌病(adenomyosis, ADS)和非ADS子宫EMI区的增殖特点。方法选择2015年6月至2016年11月首都医科大学附属北京妇产医院因ADS行全子宫切除术患者的子宫标本30例为ADS组,同期因宫颈上皮内瘤变Ⅲ切除的子宫标本26例为对照组。取EMI区组织,采用免疫组化、qRT-PCR(quantificational real-time PCR)及western blot技术检测两组子宫EMI区组织中PCNA的表达情况。结果①PCNA表达的部位:内膜腺上皮细胞、间质细胞、血管内皮细胞及EMI区平滑肌细胞、异位内膜细胞中均可见PCNA的表达。②PCNA在ADS组中的表达:在ADS-EMI区组织中,PCNA mRNA持续性高表达,增殖期与分泌期比较,差异无统计学意义(P0.05);PCNA蛋白表达亦失去周期性变化,相对灰度值:(1.06±0.29)、(0.98±0.19);在位内膜和异位内膜中,PCNA蛋白增殖期与分泌期的表达差异无统计学意义(P0.05)。③PCNA在对照组中的表达:在EMI区中,PCNA mRNA表达随月经周期变化,增殖期是分泌期的2.06倍(P0.05);PCNA蛋白在增殖期的表达亦显著高于分泌期(P0.05),相对灰度值:(0.78±0.18)、(0.61±0.22)。在内膜组织中,增殖期PCNA的表达水平高于分泌期(P0.05)。④两组间PCNA表达对比:与对照组EMI区相比,ADS-PCNA mRNA呈持续性高表达,失去周期性变化,增殖期mRNA表达水平是对照组的2.965倍,分泌期是对照组的5.794倍;同样,ADS-PCNA蛋白亦呈持续性高表达,失去周期性变化。但两组中,EMI区PCNA的表达水平均低于同组的内膜组织(P0.05)。结论ADS子宫EMI区PCNA持续性高表达,失去周期性变化,造成交界区局部增生紊乱,这可能与ADS子宫不规则增厚密切相关,并且可能参与ADS的发生、发展。     

氟对大鼠切牙细胞凋亡以及Caspase-3和Caspase-8活力的影响

目的 研究在氟中毒引起氟斑牙时,氟对大鼠切牙细胞凋亡、天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)和Caspase-8活力的影响.方法 将20只健康成年SPF级雄性SD大鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组和低(10mg/L)、中(50mg/L)和高(100mg/L)浓度NaF染毒组,每组5只.采用自...     

Caspase-3和Caspase-8在氟化钠致人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡中的作用

目的探讨半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(Caspase)家族中的Caspase-3和Caspase-8对氟化钠(NaF)致人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法先用不同浓度NaF(20、40、80μg/ml)对SH-SY5Y细胞进行染毒,24h后检测细胞存活率、凋亡率、Caspase-3活性以及Caspase-3和Caspase-8 mRNA表达水平;再选择适宜的40μg/mlNaF染毒剂量组,观察在Fas受体激动剂CH11或拮抗剂ZB4作用下其细胞凋亡率、Caspase-3活性及Caspase-3和Caspase-8 mRNA表达水平的改变。结果与对照组比较,40、80μg/ml染毒组细胞存活率降低,差异有统计学意义(P<0.01);细胞凋亡率随染毒剂量的升高呈上升趋势,且40、80μg/ml染毒组细胞凋亡率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);40、80μg/ml染毒组Caspase-3活性及Caspase-3和Caspase-8 mRNA表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);激动剂CH11与NaF共培养对细胞凋亡显示出协同效应,拮抗剂ZB4可部分阻断NaF致SH-SY5Y细胞的凋亡。结论NaF可通过上调死亡受体Fas途径的关键酶Caspase-3和Caspase-8的表达,促进SH-SY5Y细胞凋亡。     

急性脑缺血大鼠海马CA1区细胞凋亡与Caspase-3及Caspase-10蛋白表达的相关性

目的探讨急性脑缺血大鼠海马CA1区细胞凋亡与Caspase-3及Caspase-10蛋白表达的关系。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)再灌注模型。应用原位末端标记法检测细胞凋亡,免疫组化法及Western-blotting蛋白印记技术分别检测Caspase-3及Caspase-10蛋白表达。结果①脑缺血大鼠海马CA1区3h出现凋亡阳性细胞,48 h达到高峰,72 h凋亡阳性细胞的数量开始下降。②脑缺血大鼠海马CA1区3 h可见Caspase-3及Caspase-10蛋白阳性细胞,48 h表达达高峰,72 h表达开始减少。③脑缺血大鼠海马CA1区Caspase-3及Caspase-10蛋白表达的变化与细胞凋亡数呈正相关(r=0.976,P﹤0.01;r=0.986,P﹤0.01)。结论脑缺血大鼠海马CA1区存在细胞凋亡,且与Cas-pase-3及Caspase-10蛋白表达的变化一致,Caspase-3及Caspase-10蛋白可促进细胞凋亡发生。     

Caspase-3及Survivin与心肌细胞凋亡的研究进展

Caspase-3是细胞凋亡的关键元件,Survivin具有抑制细胞凋亡的功能,而细胞凋亡是心肌缺血再灌注损伤发病机制中的重要环节。本研究对Caspase-3及Survivin与细胞凋亡进行综述,以期在分子水平控制细胞凋亡,达到保护心肌的目的。     

Caspase-3及Survivin与心肌细胞凋亡的研究进展

Caspase-3是细胞凋亡的关键元件,Survivin具有抑制细胞凋亡的功能,而细胞凋亡是心肌缺血再灌注损伤发病机制中的重要环节。本研究对Caspase-3及Survivin与细胞凋亡进行综述,以期在分子水平控制细胞凋亡,达到保护心肌的目的。     

半胱氨酸天冬氨酸特异性酶-1诱导的Pyroptosis及其在感染性疾病中的作用

半胱氨酸天冬氨酸特异性酶-1 (Caspase-1)的激活可诱导细胞通过一种称为Pyroptosis的方式死亡.Pyroptosis是一种程序性细胞死亡方式,其形态学特征有别于细胞凋亡或坏死,主要表现为包膜破裂,胞内容物外流.在许多感染性疾病中,Caspase-1诱导产生的细胞因子和细胞死亡可促进机体清除病原体;但在一些病原体感染中,Caspase-1活化引起的炎症反应和细胞死亡可能和病原体的致病机制有关.此文就细胞Pyroptosis时的形态学特征、机制及其在感染性疾病中的作用进行综述.     

Bcl-2基因转染对心脏移植排斥反应相关因素表达的影响

目的　探讨Bcl-2基因转染对心脏移植排斥反应中细胞色素C、caspase -8和caspase -3表达的影响。方法　采用小鼠颈部心脏移植模型 ,随机分为 3组 :对照组 ,移植组 ,Bcl-2组。术后第 5d取移植心脏 ,用免疫组化方法观察细胞色素C、caspase-8和caspase -3表达情况。结果　移植组细胞色素C、caspase -8和caspase -3表达均明显升高 (与对照组相比 ,P <0 0 1) ;与移植组相比 ,Bcl-2组细胞色素C、caspase -8和caspase -3表达明显降低 (P <0 0 1)。结论　心脏移植排斥反应中移植心肌细胞色素C、caspase -8和caspase -3表达均明显上升 ,Bcl -2基因转染抗心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡作用可能与其下调细胞色素C、caspase -8和caspase -3的表达有关。     

ASC与Caspase-1在结肠癌中的表达及临床意义

目的 探讨ASC与Caspase-1在结肠癌组织及癌旁组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化LSAB法对30例术前无放化疗的结肠癌标本及其相应的癌旁组织进行ASC、Caspase-1检测，并结合各指标进行分析。结果癌旁组织及肿瘤组织中ASC阳性率分别为60．00％（18／30）和13．33％（4／30），组间阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．01）；Caspase-1阳性率分别为60．00％（18／30）和30．00％（9／30），组间阳性表达率差异有显著性（P〈0．05）。ASC与Caspase-1两指标在肿瘤组织中的表达呈负相关，但无统计学意义（P〉0．05），在癌旁组织中表达高度正相关（P〈0．01）。结论结肠癌中有ASC、Caspase-1的低表达，且显著低于癌旁组织，提示ASC、Caspase-1在结肠癌的凋亡、发生及发展过程中有重要作用。     

Bcl-2、Caspase-3与阿尔茨海默病关系的研究进展

随着社会人口老龄化的发展,近年来,阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的发病率逐年攀升,是继心脏病、肿瘤和中风之后影响老年人健康、导致死亡的第4位原因,但AD病因和发病机制尚未完全清楚,而且也无有效的治疗方法.AD脑内神经元的丢失机制与细胞凋亡密切相关,在凋亡发生机制中最关键的环节之一是Caspase-3和Bcl-2对细胞凋亡的调控.本文从Bcl-2、Caspase-3与阿尔茨海默病关系的研究进展进行综述.     

醋酸铅对人股动脉内皮细胞凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3表达的影响

目的探讨醋酸铅对人股动脉内皮细胞凋亡和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）活性的影响。方法醋酸铅染毒人股动脉内皮细胞后,用Hochest 33258染色法检测细胞形态学变化,用细胞免疫化学法检测caspase-3、P53、Bax、Bc l-2的表达;用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果经10μmol/L醋酸铅处理24、48 h后,Hochest 33258-PI染色显示醋酸铅组细胞呈凋亡形态学改变。动脉内皮细胞的细胞免疫化学结果都显示醋酸铅组的caspase-3、P53和Bax阳性表达升高,而Bc l-2的阳性表达下降。其流式细胞仪检测结果表明醋酸铅组细胞凋亡率较对照组显著升高（P〈0.05）。结论醋酸铅可促进动脉内皮细胞凋亡,其机制可能与capase-3的活化有关。