急性脑缺血大鼠海马CA1区细胞凋亡与Caspase-3及Caspase-10蛋白表达的相关性

目的探讨急性脑缺血大鼠海马CA1区细胞凋亡与Caspase-3及Caspase-10蛋白表达的关系。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)再灌注模型。应用原位末端标记法检测细胞凋亡,免疫组化法及Western-blotting蛋白印记技术分别检测Caspase-3及Caspase-10蛋白表达。结果①脑缺血大鼠海马CA1区3h出现凋亡阳性细胞,48 h达到高峰,72 h凋亡阳性细胞的数量开始下降。②脑缺血大鼠海马CA1区3 h可见Caspase-3及Caspase-10蛋白阳性细胞,48 h表达达高峰,72 h表达开始减少。③脑缺血大鼠海马CA1区Caspase-3及Caspase-10蛋白表达的变化与细胞凋亡数呈正相关(r=0.976,P﹤0.01;r=0.986,P﹤0.01)。结论脑缺血大鼠海马CA1区存在细胞凋亡,且与Cas-pase-3及Caspase-10蛋白表达的变化一致,Caspase-3及Caspase-10蛋白可促进细胞凋亡发生。     

Survivin、Caspase-3在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的:探讨凋亡相关蛋白Survivin(生存素)和Caspase-3(半胱氨酸蛋白酶-3)在子痫前期患者与正常妊娠妇女胎盘组织中的表达规律及其在子痫前期发病过程中可能的机制。方法:随机选取子痫前期患者60例(轻度组25例,重度组35例)和正常妊娠孕妇30例作为病例组和对照组,应用免疫组织化学(SABC)法对3组胎盘的Survivin、Caspase-3进行标记,通过彩色病理图像分析系统对染色结果进行定量检测并分析。结果:①Survivin在子痫前期重度组表达低于轻度组及对照组,差异有统计学意义(P<0.01);轻度组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);②Caspase-3在子痫前期重度组表达高于轻度组及对照组,轻度组表达高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);③Survivin与Caspase-3在3组胎盘组织中表达呈负相关(r=-0.370,P<0.05)。结论:子痫前期患者胎盘组织中凋亡相关蛋白Survivin表达下调、Caspase-3表达上调,Survivin及Caspase-3的表达变化可能与子痫前期的发病机制有关。     

米非司酮对子宫肌瘤及子宫肌层组织Caspase-3与Survivin表达的影响

目的:研究米非司酮对子宫肌瘤及子宫肌层组织中Caspase-3与Survivin表达的影响。方法:2009年2月～2010年2月于宁波市北仑区人民医院妇科门诊就诊且有手术指征的80例子宫肌瘤患者分为低剂量组和高剂量组,每组各40例。两组患者术前分别服用米非司酮10 mg/d和20 mg/d,共12周。采用彩色多普勒超声测量用药前后的肌瘤体积,术后用免疫组化技术检测子宫肌瘤和子宫肌层组织中Caspase-3与Survivin的表达水平。结果:用药前两组患者的肌瘤体积比较差异无统计学意义(P>0.05);用药后两组患者的肌瘤体积比较差异有统计学意义(P<0.05);两组患者用药前后肌瘤体积比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组子宫肌瘤组织中Caspase-3与Survivin的表达水平比较差异具有统计学意义(P<0.05),而子宫肌层中Caspase-3与Survivin的表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:米非司酮可抑制子宫肌瘤的生长,可能与增强子宫肌瘤组织中Caspase-3的表达以及降低Survivin的表达有关。     

大鼠肺动脉高压中Survivin及Caspase-3的作用及其相关性分析

目的通过建立3种大鼠肺动脉高压(PAH)模型,研究生存素(Survivin)及半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)在肺动脉高压中肺组织的作用及其相关性。方法采用单纯A-VF、MCT、MCT+A-VF 3种方法建立大鼠PAH模型;检测模型大鼠平均肺动脉压力(m PAP)、右心肥厚指数RV/(LV+S)比值,观察三组肺动脉高压严重程度;采用免疫组化检测Survivin及Caspase-3在三组动物模型肺组织中的表达水平。结果三组PAH模型m PAP及RV/(LV+S)较对照组均有不同程度的升高(P<0.05),MCT+A-VF组较MCT组及A-VF组升高更明显(P<0.05),而MCT组比A-VF组高(P<0.05),其中MCT组及MCT+A-VF组形成肺动脉高压。三组PAH模型组都在动脉内、外膜及周围出现Survivin阳性表达细胞,而在对照组中未出现;在MCT+A-VF组中阳性细胞的数量及着色强度均较MCT组和A-VF组高(P<0.05),MCT组比A-VF组高(P<0.05)。Caspase-3在四组动脉内、中、外膜及周围中均为阳性表现,对照组均比模型组阳性强度高(P<0.05),A-VF组较MCT组及MCT+A-VF组高(P<0.05),MCT组较MCT+A-VF组高(P<0.05),MCT+A-VF组最低。两个因子之间呈负相关。结论Survivin及Caspase-3都参与了肺动脉高压的形成,Survivin可能是通过抑制Caspase-3的活化而抑制细胞凋亡,Survivin及Caspase-3有望成为治疗肺动脉高压的两个新靶点。     

Caspase-3及Survivin与心肌细胞凋亡的研究进展

Caspase-3是细胞凋亡的关键元件,Survivin具有抑制细胞凋亡的功能,而细胞凋亡是心肌缺血再灌注损伤发病机制中的重要环节。本研究对Caspase-3及Survivin与细胞凋亡进行综述,以期在分子水平控制细胞凋亡,达到保护心肌的目的。     

病毒性肝炎患者外周血单个核细胞中Caspase-3与凋亡

肝炎病毒的感染及复制不仅发生在肝细胞中，而且也发生在免疫细胞中，包括骨髓及外周血单个核细胞(PBMC)。凋亡的发生与肝细胞的变化及肝脏的病理过程密切相关。Caspases家族是凋亡的重要控制基因之一，而其中Caspase-3是凋亡过程中的一个重要调节子。Caspase-3的活性与病毒性肝炎的炎症程度及病情发展有关，通过Caspase-3对凋亡的调控，可能会对病毒性肝炎的治疗和控制起重要作用，     

不同分期胃癌患者Survivin和Caspase-3表达差异分析

目的分析不同分期胃癌患者Survivin和Caspase-3蛋白表达的差异。方法2019年12月-2020年12月,以72例胃癌患者为研究对象。将Ⅰ期和Ⅱ期胃癌患者纳入早期组,将Ⅲ期和Ⅳ期胃癌患者纳入晚期组。采用免疫组织化学法,检测胃癌组织和正常组织的Survivin和Caspase-3的表达。结果在胃癌组织标本与正常组织标本比较方面,胃癌组织标本Survivin阳性率63.89%,正常组织Survivin阳性率为0.00%,胃癌组织标本Survivin阳性率高于正常组织。胃癌组织标本Caspase-3阳性率为38.89%,正常组织Caspase-3阳性率为85.00%,胃癌组织标本Caspase-3阳性率低于正常组织。在不同分期胃癌组织标本中,早期组Survivin阳性率为45.16%,晚期组Survivin阳性率为78.05%,晚期组Survivin阳性率高于早期组。早期组Caspase-3阳性率为61.29%,晚期组Caspase-3阳性率为21.95%,晚期组Caspase-3阳性率低于早期组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Survivin和Caspase-3蛋白表达,可在一定程度上作为判定胃癌患者病情发展的依据。     

原花青素对宫颈癌HeLa细胞Caspase-3和Survivin基因表达的影响

目的 探讨原花青素对官颈癌HeLa细胞Caspase-3和Survivin基因表达的影响.方法 将按照不同终浓度原花青素(0,37.5μmol/L,75.0 μmol/L,150.0μmol/L,300.0μmo/L和600.0 μmol/L)处理宫颈癌HeLa细胞,分别纳入对照组(空白对照),37.5μmol/L PC组,75.0μmol/L PC组,150.0μmol/L PC组,300.0 μmol/L PC组和600.0 μmol/L PC组.继续培养24 h,收集细胞进行实验.采用RT-PCR检测Caspase-3 mRNA和Survivin mRNA表达变化.采取Western blot检测caspase-3和survivin蛋白表达的变化.采用比色法检测caspase-3相对活性.结果 随着原花青索浓度增加,Caspase-3 mRNA和caspase-3蛋白表达水平逐渐增加,而Survivin mRNA和survivin蛋白表达水平逐渐减少;随着处理官颈癌HeLa细胞原花青素浓度升高,caspase-3相对活性逐渐增加,且差异有显著意义(P＜0.05),在原花青素为600.0/μmol/L 时,活性最大.结论 原花青素可剂量依赖性地增加Caspase-3 mRNA和caspase-3蛋白表达水平及caspase-3活性,并且可剂量依赖性减少Survivin mRNA和survivin蛋白表达水平.     

内耳免疫反应中细胞凋亡及Caspase-3表达的研究

目的研究内耳免疫反应过程中是否存在细胞凋亡，以及细胞凋亡是否与Caspasr-3信号转导有关方法选用雌性白色豚鼠16只，随机分为实验组和对照组各8只，以钥孔虫戚血蓝蛋白(kryhole limpet hemoryanin．KLH)全身免疫后，实验组以相同抗原进行内耳免疫，对照组内耳注射等量的磷酸盐缓冲生理盐水(PRS)，在内耳免疫5tl后处死动物，取内耳免疫侧耳蜗做石蜡切片。通过TUNEL法检测内耳凋亡细胞，免疫组化检测内耳Caspase-3的表达结果实验组Corti器，血管纹、螺旋韧带和螺旋神经节存在TUNEL染色阳性细胞，而对照组仅在支持细胞、血管纹和螺旋神经节中发现极少数TUNEL染色阳性细胞免疫组化染色实验组Caspase-3表达阳性，而对照组表达阴性结论内耳免疫反应可以诱导细咆凋亡的发生；内耳免疫反应诱导细胞凋亡的发生中有Caspase-3的激活。     

Caspase-3与肝癌细胞凋亡

肿瘤细胞增殖与凋亡的失衡是肿瘤发生和发展的重要环节。Caspase-3（半胱天冬酶-3）是介导细胞凋亡的一类蛋白水解酶，即Caspase中的关键效应酶，是凋亡执行的重要效应分子，广泛表达于正常人体组织及多种肿瘤组织中。大量研究表明Caspase-3蛋白酶激活与肝癌细胞凋亡有密切联系。现就Caspase-3与肝癌细胞凋亡的关系综述如下。     

Survivin、VEGF与Caspase-3在乳腺癌中的表达研究

目的观察存活素(Survivin)、血管内皮生长因子(VEGF)与细胞凋亡酶-3(Caspase-3)在乳腺癌中的表达变化。方法选择本院2009至2012年乳腺癌患者病理标本40例(a组),乳腺癌组织旁5厘米正常乳腺组织(b组),乳腺良性增生标本12例(c组),进行免疫组织化学检测Survivin、VEGF与Caspase-3表达。结果 Survivin阳性表达率在a、b、c组分别为77.50%,2.50%,16.67%(P<0.01),VEGF阳性表达率在a、b、c组分别为72.50%,7.50%,25.00%(P<0.01),Caspase-3阳性表达率在a、b、c组分别为70.00%,7.50%,33.33%(P<0.01)。结论 Survivin、VEGF及Caspase-3在a组的表达明显高于b组和c组,在乳腺癌发生、发展中可能起重要作用。     

Caspase-3和Caspase-8在氟化钠致人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡中的作用

目的探讨半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(Caspase)家族中的Caspase-3和Caspase-8对氟化钠(NaF)致人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法先用不同浓度NaF(20、40、80μg/ml)对SH-SY5Y细胞进行染毒,24h后检测细胞存活率、凋亡率、Caspase-3活性以及Caspase-3和Caspase-8 mRNA表达水平;再选择适宜的40μg/mlNaF染毒剂量组,观察在Fas受体激动剂CH11或拮抗剂ZB4作用下其细胞凋亡率、Caspase-3活性及Caspase-3和Caspase-8 mRNA表达水平的改变。结果与对照组比较,40、80μg/ml染毒组细胞存活率降低,差异有统计学意义(P<0.01);细胞凋亡率随染毒剂量的升高呈上升趋势,且40、80μg/ml染毒组细胞凋亡率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);40、80μg/ml染毒组Caspase-3活性及Caspase-3和Caspase-8 mRNA表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);激动剂CH11与NaF共培养对细胞凋亡显示出协同效应,拮抗剂ZB4可部分阻断NaF致SH-SY5Y细胞的凋亡。结论NaF可通过上调死亡受体Fas途径的关键酶Caspase-3和Caspase-8的表达,促进SH-SY5Y细胞凋亡。     

RNA干扰Caspase-3基因对镉诱导转化人胚肾293细胞凋亡的影响

目的 研究RNA干扰Caspase-3基因对镉致转化人胚肾293细胞凋亡的影响,探讨Caspase-3基因在镉致细胞凋亡中的作用.方法 选择转化人胚肾293细胞进行体外培养,以小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)处理细胞36 h后,再以40 μmol/L氯化镉分别处理12～24 h,以四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞活力,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western-blot法分别检测Caspase-3基因表达水平和蛋白表达水平,以流式细胞仪Annexin-V-PI双染法检测细胞凋亡率.结果 40μmol/L氯化镉处理转化人胚肾293细胞12 h后,Caspase-3基因mRNA水平显著增高,相对分子质量为20 kDa的活性亚单位条带显著增强;24 h后,细胞凋亡率显著增加(n=4,P＜0.01),RNA干扰显著抑制镉诱导的细胞Caspase-3基因mRNA和相对分子质量为20 kDa的蛋白表达水平,使细胞凋亡率显著降低(n=4,P＜0.01).结论 体外实验表明,RNA干扰Caspase-3基因对镉诱导转化人胚肾293细胞凋亡具有明显的抑制作用,Caspase-3基因在镉诱导转化人胚肾293细胞凋亡过程中起着重要的作用.     

醋酸铅对人股动脉内皮细胞凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3表达的影响

目的探讨醋酸铅对人股动脉内皮细胞凋亡和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）活性的影响。方法醋酸铅染毒人股动脉内皮细胞后,用Hochest 33258染色法检测细胞形态学变化,用细胞免疫化学法检测caspase-3、P53、Bax、Bc l-2的表达;用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果经10μmol/L醋酸铅处理24、48 h后,Hochest 33258-PI染色显示醋酸铅组细胞呈凋亡形态学改变。动脉内皮细胞的细胞免疫化学结果都显示醋酸铅组的caspase-3、P53和Bax阳性表达升高,而Bc l-2的阳性表达下降。其流式细胞仪检测结果表明醋酸铅组细胞凋亡率较对照组显著升高（P〈0.05）。结论醋酸铅可促进动脉内皮细胞凋亡,其机制可能与capase-3的活化有关。     

Effect of Aged Garlic Extract on Caspase-3 Activity,In Vitro

Abstract

In neurodegeneration, such as Alzheimer's disease (AD), apoptosis results in the loss of valuable neurons. A key mechanism in apoptosis is the activation of caspase-3. Caspase-3 activity first becomes detectable early in apoptosis, continues to increase as cells undergo apoptosis, and rapidly declines in late stages of apoptosis. Its activity is an early marker of cells undergoing apoptosis. Caspase-3 catalyzes the formation of β-amyloid peptide, a hallmark of AD. The purpose of the study was to determine whether dietary aged garlic extract (AGE), with known antioxidant properties and neuroprotection against Alzheimer's β-amyloid cytotoxicity, inhibits the caspase-3 activity in vitro. Caspase-3 activity was assayed according to the prescribed protocol and incubated overnight at ambient temperature. We report that AGE inhibits caspase-3 in dose dependent manner. Caspase-8 was not inhibited by AGE. As a caspase-3 inhibitor, AGE may be effective in reducing apoptotic death of neurons since caspase inhibitors have been shown to inhibit neuronal cell death. We propose a scheme for the ameliorative effect of AGE on deleterious effects of β-amyloid and possibly uncontrolled caspase-3 activity.