ThinPrep玻片扫描分析影像系统在子宫颈细胞学中的临床应用

  目的  探讨ThinPrep玻片扫描分析影像系统(ThinPrep Imaging System, TIS)在子宫颈细胞学中的临床应用效果。  方法  回顾性分析中国医学科学院北京协和医院妇产科门诊2016年12月至2017年5月宫颈液基细胞学(liquid-based cytology, LBC)样本人工阅片结果以及2017年12月至2018年5月LBC样本TIS辅助阅片结果,分析两种阅片方式的异常细胞学检出率,并随访细胞学异常患者的组织学活检结果以及异常鳞状上皮细胞标本的高危型人乳头瘤病毒(high risk-human papillomavirus, Hr-HPV)阳性率。  结果  人工阅片共计17 407例,TIS辅助阅片共计16 564例。与人工阅片相比,TIS辅助阅片的总体异常细胞学检出率显著提高(15.21%比9.58%,P＜0.001),其中非典型鳞状上皮细胞、不除外高度鳞状上皮内病变的非典型鳞状上皮细胞、低度鳞状上皮内病变、高度鳞状上皮内病变、不典型腺细胞和腺癌的检出率分别提高了2.77%、0.28%、2.08%、0.35%、0.08%和0.08%,差异均具有统计学意义(P均＜0.05)。对细胞学异常患者进行组织学随访,TIS辅助阅片较人工阅片的组织学符合率有所提升,但差异均无统计学意义(P均＞0.05)。TIS辅助阅片异常腺细胞的检出数量是人工阅片的1.89倍(53例比28例),经组织学证实的腺癌数量是人工阅片的2.3倍(37例比16例)。TIS辅助阅片与人工阅片鳞状上皮细胞异常患者的Hr-HPV阳性率均无统计学差异(P均＞0.05)。同时,TIS辅助阅片时间减少了33%~50%,阅片效率显著提升。  结论  使用TIS辅助阅片不仅显著提高了宫颈LBC异常检出率和工作效率,组织学符合率亦有所提升,值得临床进一步推广应用。     

一例PTEN新生杂合突变患儿临床表型与免疫特征分析

  目的  探讨一例PTEN杂合突变患儿的临床表型及免疫特征，丰富PTEN突变相关临床表型谱。  方法  收集患儿门诊及住院期间的病史资料、生化检查及影像学检查结果，抽取外周静脉血进行医学全外显子组综合检测，Sanger测序验证患儿及其父母PTEN基因突变位点，采用流式细胞术进行T细胞PI3K/Akt/mTOR通路磷酸化水平及T细胞亚群与其耗竭相关表面分子检测，采用蛋白质印迹法检测外周血单个核细胞PTEN蛋白表达水平，健康对照为患儿父亲。  结果  患儿以大头畸形(头围＞P99)、疣状表皮痣、精神运动发育迟缓、学语延迟为主要临床表现，PTEN基因(NM_000314.8) c.388C＞T(p.R130X)新生杂合突变，PTEN蛋白表达减少，血清IgA水平稍低(0.177 g/L)，精细免疫分型CD4⁺终末分化效应记忆T细胞、CD8⁺终末分化效应记忆T细胞、过渡性B细胞比例及绝对数均增加，但T细胞PI3K/Akt/mTOR通路磷酸化水平正常。患儿以PTEN错构瘤综合征相关表型为主要表现，无明显PI3Kδ过度活化综合征样表型。  结论  该患儿PTEN基因的突变位点为国内首例，有助于丰富临床医生对该疾病的认识，提高诊治水平。     

胸腺原发上皮肌上皮癌首例报告并文献复习

  目的  探讨上皮肌上皮癌的临床症状、影像学特征、病理组织学特征和治疗方法。  方法  回顾性分析北京协和医院肿瘤内科收治的1例胸腺原发上皮肌上皮癌患者临床资料,并进行文献复习。  结果  患者为中年男性,是目前国内外报道的首例被诊断为胸腺原发上皮肌上皮癌的患者。该患者经手术、化疗、放疗、分子靶向治疗等综合治疗后仍出现疾病进展,从手术确诊至死亡时间为22个月。  结论  胸腺原发上皮肌上皮癌极为罕见,临床表现不典型,诊断主要依靠病理组织学检查,目前首选手术治疗,多学科综合治疗有助于延长患者的生存期。     

孤独症谱系障碍患儿不同血清总25-羟维生素D水平与肠道菌群的差异性研究

  目的  探究孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)患儿维生素D正常与缺乏状态下的肠道菌群差异及血清总25-羟维生素D[total 25-hydroxyvitamin D,T-25(OH)D]水平与肠道菌群的相关性。  方法  回顾性纳入2019年10月至2022年2月于北京协和医院风湿免疫科门诊就诊的1~12岁ASD患儿的临床资料。采用液相色谱串联质谱法检测ASD患儿的血清T- 25(OH)D水平,并根据血清T- 25(OH)D水平将其分为维生素D正常组[T-25(OH)D＞30 μg/L]、不足组[20 μg/L≤T-25(OH)D ≤30 μg/L]和缺乏组[T-25(OH)D＜20 μg/L]。应用生物信息学方法分析ASD患儿的肠道宏基因组测序结果。  结果  共46例符合纳入和排除标准的ASD患儿纳入本研究,维生素D正常组、不足组、缺乏组分别为15例、16例、15例。线性判别分析发现,维生素D缺乏组的沃氏嗜胆菌、Adlercreutzia equolifaciens、Asaccharobacter celatus、大肠埃希菌显著升高;而脆弱拟杆菌和Hungatella hathewayi丰度显著降低。沃氏嗜胆菌和Adlercreutzia equolifaciens丰度与血清T- 25(OH)D水平均呈负相关(r=-0.45, fdr=0.055, P=0.002; r=-0.44, fdr=0.055, P=0.003);脆弱拟杆菌丰度与血清T- 25(OH)D水平呈正相关(r=0.42, fdr=0.073, P=0.004)。  结论  ASD患儿的维生素D缺乏状态可能加重肠道菌群紊乱,血清T-25(OH)水平降低可能使潜在有害菌定植增加、益生菌定植减少。本研究为ASD患儿积极补充维生素D提供了证据支持。     

隐球菌脑膜炎患者脑脊液宏基因组二代测序结果分析

  目的  评价脑脊液宏基因组二代测序(metagenomic next-generation sequencing, mNGS)技术在隐球菌脑膜炎诊断中的潜在应用价值。  方法  回顾性收集北京协和医院2014年1月至2016年12月采用脑脊液mNGS技术辅助确诊的6例隐球菌脑膜炎患者临床资料, 包括脑脊液常规、生化、细胞学、培养、墨汁染色等实验室检测结果, 应用BGISEQ-100测序平台进行脑脊液病原测序, 综合分析患者的临床、实验室和辅助检查结果。  结果  6例患者中, 男性4例, 女性2例, 年龄26~53岁, 中位年龄51岁。6例患者均无免疫缺陷性疾病, 有头痛、脑膜刺激症状及颅内压增高表现, 5例患者出现发热, 2例患者出现复视。脑脊液常规检查示白细胞和蛋白轻度升高, 糖正常或轻度降低; 5例患者脑脊液墨汁染色阳性, 4例患者脑脊液隐球菌抗原检测阳性, 2例患者脑脊液真菌培养阳性。脑脊液mNGS检测隐球菌核酸序数为108~25 361, 基因覆盖率0.19%~29.00%;5例提示新型隐球菌感染, 其中3例经PCR检测证实为新型隐球菌感染; 1例提示格特隐球菌感染, 经生物质谱仪检测证实为格特隐球菌感染。  结论  脑脊液mNGS技术可准确判断隐球菌感染, 并对鉴别格特隐球菌具有一定优势, 有助于降低免疫功能正常人群隐球菌脑膜炎的漏诊率。     

抗肿瘤药物安全管理系统的建立与运行效果分析

  目的  设计抗肿瘤药物安全管理系统, 从处方源头拦截超剂量医嘱, 保障抗肿瘤药物临床应用的安全性。  方法  制订88种抗肿瘤药物阈值拦截/警示策略, 建立抗肿瘤药物安全管理系统, 对超剂量抗肿瘤药物医嘱进行拦截/警示。调取2021年1—6月抗肿瘤药物安全管理系统中的拦截/警示数据并进行统计分析。  结果  抗肿瘤药物安全管理系统共拦截/警示医嘱665条, 其中触发拦截功能的医嘱共642条(96.54%), 触发警示功能的医嘱共23条(3.46%); 拦截/警示的药品以口服片剂为主(74.29%); 被拦截医嘱中, 频次错误占比最高(64.22%), 其次为途径错误(11.73%)和剂量错误(9.92%)。拦截超剂量医嘱564条, 涉及抗肿瘤药物28种; 拦截次数最多的抗肿瘤药物为甲氨蝶呤片, 平均超剂量7倍; 注射用培美曲塞二钠平均超剂量倍数排名第1, 平均超剂量1000倍。拦截超途径医嘱78条, 涉及5种抗肿瘤药物。  结论  抗肿瘤药物安全管理系统从处方环节杜绝了医嘱超剂量用药错误, 切实保障了抗肿瘤药物的用药安全。     

新型冠状病毒肺炎疫情下线上继续医学教育模式的教学效果分析

  目的  探讨新型冠状病毒肺炎疫情下教学模式由线下转为线上的教学效果。  方法  依托“妇女保健技术提升工程北京行”教学项目,计划于2020年9月至2025年12月对北京市16个行政区的16家妇幼保健院妇产科临床医生同时开展线上与线下继续医学教育活动。本研究回顾性收集2021年3月至2021年12月期间(第1年教学计划)2种教学模式的实施情况及考核成绩,比较教学效果。  结果  线上教学完成了3期共30次线上直播课程,参与学习25 000人次,其中包括16家妇幼保健院妇产科临床医生4757人;线下教学共举办82次现场教学活动,16家妇幼保健院参与学习的妇产科临床医生共1771人。线上教学与线下教学的考核成绩分别为(90.88±4.88)分和(88.65±4.35)分。  结论  线上教学与线下教学考核成绩相当,但线上教学具有便捷、高效、经济等诸多优势,新型冠状病毒肺炎疫情下值得推广应用。     

胰腺淋巴上皮囊肿的临床诊治特点

  目的  分析胰腺淋巴上皮囊肿(pancreatic lymphoepithelial cyst,PLEC)的临床诊治特点,为提高其诊疗水平提供借鉴和参考。  方法  回顾性分析2015年1月至2019年12月在北京协和医院基本外科行手术治疗并最终确诊为PLEC的患者临床资料,分析其临床表现、影像学特征及治疗效果。  结果  共7例患者确诊为PLEC,年龄31~65岁,其中男性4例,女性3例;5例患者肿物位于胰体尾部,1例位于胰颈部,1例位于胰头部;2例患者血清CA19-9水平增高;3例患者术后出现胰瘘导致腹腔引流管拔除延迟;1例随访中出现体重下降。  结论  PLEC是一种罕见的胰腺囊性病变,临床表现不典型,术前诊断较为困难,手术可完整切除,预后良好;无症状者可考虑保守治疗和随访观察。     

全要素外科模拟手术教学在实习医生技能培训中的应用初探

  目的  设计真实、全面的全要素外科模拟手术教学模式用于实习医生的临床技能培训,并观察该模式与传统规范化培训的效果差异。  方法  将实习医生随机分为试验组(全要素外科模拟手术教学组)与对照组(传统规范化培训教学组)。试验组依据课题组编写的《全要素外科模拟手术教学》教程进行培训,对照组则依据传统教材中的方法进行培训。培训完成后对学生的外科基本技能操作进行考核,以调查问卷形式收集学生对自我学习效果及教学方式接受度等反馈结果。  结果  共纳入80名实习医生,其中试验组与对照组各40名。试验组在外科临床技能操作考核中,消毒铺巾、切开缝合、结扎止血、换药拆线、清创、脓肿切开、胸腔闭式引流拔除成绩均高于对照组(P均＜0.01),且试验组对自我操作能力、自我临床思维能力、自我学习效率、教学方式接受度评分均高于对照组(P均＜0.05)。  结论  全要素外科模拟手术教学能够显著提高实习医生的临床操作水平,且实习医生对该教学模式的接受度更好,满意度更高。     

胸导管结扎术治疗原发性乳糜胸失败病例临床特征分析

  目的  对胸导管结扎术(thoracic duct ligation, TDL)治疗原发性乳糜胸失败病例的临床特征进行总结。  方法  本研究为回顾性分析。研究对象为2007年5月至2021年10月首都医科大学附属北京世纪坛医院淋巴外科收治的经外院TDL治疗失败的原发性乳糜胸患者。对其入院后临床表现及直接淋巴管造影(结合淋巴管造影后CT影像学资料)结果进行总结。  结果  共入选38例符合纳入和排除标准的原发性乳糜胸患者。TDL治疗后, 50.0%(19/38)的患者胸腔积液引流量增加, 36.8%(14/38)的患者出现了新症状。直接淋巴管造影结果显示, 所有患者的胸导管结扎均较彻底, 但患者普遍存在不同程度的淋巴回流障碍, 表现为淋巴管扩张(94.7%, 36/38)和不同形式的淋巴管反流(92.1%, 35/38)。  结论  TDL治疗失败的原发性乳糜胸患者的渗漏点应位于乳糜池及其属支淋巴管与结扎点之间, 治疗失败的原因可能与胸导管结扎加重了原本存在的淋巴回流障碍有关。建议原发性乳糜胸患者于TDL术前均行淋巴管造影检查, 以指导治疗方案的制订。     

同位素稀释超高效液相色谱串联质谱法检测血浆18-羟皮质酮方法的建立及初步临床应用

  目的  建立一种同位素稀释超高效液相色谱串联质谱法(isotope dilution ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry, ID-UPLC-MS/MS)检测血浆18-羟皮质酮(18-Hydroxycorticosterone,18-OHB)的方法。  方法  取血浆标本或标准溶液200 μL置于离心管中,然后加入同位素氚标记的18-OHB为内标,用甲醇沉淀血浆蛋白,离心后取上清液,用Prime HLB Elution 96孔SPE板进行萃取,收集洗脱液,在正离子电喷雾离子化的多离子反应监测模式下检测18-OHB。评价该方法的精密度、加标回收率、定量检测下限、线性和基质效应。2019年11月起招募表观健康志愿者,采用ID-UPLC-MS/MS检测其血浆18-OHB水平,并验证梅奥医学实验中心提供的18-OHB参考区间。  结果  该方法检测血浆18-OHB的分析时间约为3.0 min,检测低、中、高3个水平18-OHB的重复性变异系数和实验室内不精密度分别为2.2%~3.5%和3.7%~5.0%,平均加标回收率为98.1%~101.7%,定量检测下限为0.01 μg/L,在0.1~10 μg/L范围内线性良好(r＞0.990),血浆基质效应为86.83%~119.00%。基于本研究建立的ID-UPLC-MS/MS方法,73名表观健康人群血浆18-OHB第2.5、97.5百分位数分别为0.01、0.60 μg/L,其中66%(48/73)血浆18-OHB水平处于梅奥医学实验中心提供的参考范围外。  结论  本研究建立了一种ID-UPLC-MS/MS测定血浆18-OHB的方法,该方法检测快速、结果准确可靠,性能满足临床需求。     

气动物流传输系统致白血病患者假性高钾血症

  目的  探讨采用气动物流传输系统运输白细胞显著升高白血病患者的血液标本对血钾检测结果的影响。  方法  分析2013年7月至2015年7月北京协和医院检验科急诊生化实验室发现的4例白血病患者假性高钾血症相关临床指标,包括临床诊断、标本运输方式、白细胞数量、血浆钾离子浓度、血气钾离子浓度、部分血清钾离子浓度、化疗情况、心电图等临床信息。以同期10例感染性疾病合并类白血病反应患者和50例白细胞数量正常非血液系统疾病患者的以上临床指标作为对照组,比较气动运输和人工运输对白细胞不同功能状态、不同标本类型、不同容器标本血钾结果的影响。  结果  4例白细胞数量显著升高(206.8×10⁹/L~652.1×10⁹/L)白血病患者肝素锂抗凝静脉血标本通过气动传输导致血钾明显升高(5.9~14.8 mmol/L);气动传输对血气标本、血清管标本的血钾无明显影响;而气泵运输方式对于对照组的肝素锂抗凝静脉血标本和血气标本的血钾水平无显著影响(P＞0.05)。  结论  对于白细胞显著升高的白血病患者,采用气动物流传输系统运输肝素锂抗凝的静脉血标本可导致血钾假性升高。     

一起GⅡ.4 ［P16］ 型诺如病毒感染暴发疫情调查

  目的   分析2021年山东省某小区一起诺如病毒感染暴发疫情流行因素,为制定有效的防控措施提供科学依据。  方法   采用现场流行病学方法调查、分析疾病的流行情况,采集水样本、典型病例的粪便或呕吐物、密切接触者的肛拭子标本进行胃肠炎病毒检测,对阳性样本进行基因分型。  结果   搜索到病例69例（9例为小区内幼儿园儿童,60例为社区居民）, 临床表现主要为呕吐（76.81%）,腹泻（69.57%）。 0～5岁儿童罹患率最高（21.18%）。 17份病例标本和2份密切接触者标本GⅡ组诺如病毒阳性,基因型均为GⅡ.4［P16］。  结论   本次事件是由GⅡ.4［P16］型诺如病毒引起的暴发疫情,是由患病儿童呕吐物造成环境污染,社区人员密切接触导致,及时识别和妥善处置是疫情防控的关键。     

检测胎儿弯曲菌三种亚种的多重PCR方法建立及初步应用

  目的  建立一种检测胎儿弯曲菌胎儿亚种、性病亚种和龟亚种的多重PCR检测方法。  方法  使用针对胎儿弯曲菌、性病亚种和龟亚种的特异性引物,优化反应体系及反应条件,使用38株菌株（18株胎儿弯曲菌和20株非胎儿弯曲菌）验证其特异性,并将该方法应用于53份爬行动物粪便筛查。  结果  针对3种亚种均可扩增相应的片段,胎儿亚种只有1条359 bp大小的条带、性病亚种有2条分别为359 bp和156 bp大小的条带,龟亚种有2条分别为359 bp和266 bp大小的条带。 优化后的最佳扩增条件:退火温度58 ℃,引物MG3f和Cf359r浓度为0.1 μmol/L,ISC2mf和ISC2mr、CoA266f和CoA266r的浓度0.2 μmol/L。 对胎儿亚种、性病亚种和龟亚种的检出限分别为0.40 ng/μL、0.39 ng/μL和0.47 ng/μL。 使用18株胎儿弯曲菌和20株非胎儿弯曲菌其特异性为100%。 对53份爬行动物粪便进行筛查中有1份龟亚种阳性并分离出了相应的菌株。  结论  本研究建立的多重PCR方法能利用1个反应体系同时鉴别3种亚种,从而为菌株快速鉴定、流行病学调查和溯源研究提供技术支持。     

尿碘代谢评价指标识别孕前碘暴露女性妊娠期碘过量的价值

  目的  探讨不同尿碘代谢指标在识别孕前有碘暴露史女性妊娠期碘过量的临床价值。  方法  收集并分析2018年1—12月于北京协和医院临床营养科进行孕期营养咨询或管理,且孕前行子宫输卵管碘油造影(hysterosalpinography, HSG)检查孕妇的临床资料。以血清碘＞90 μg/L为诊断碘过量的金标准,比较血清碘＞90 μg/L与≤90 μg/L孕妇随机尿碘、尿碘肌酐比、24 h尿碘排泄量差异,并采用Spearman相关法分析上述尿碘指标与血清碘的相关性。采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析随机尿碘、尿碘肌酐比、24 h尿碘排泄量诊断碘过量的临床价值。  结果  共70例符合纳入和排除标准的孕妇入选本研究。血清碘中位数为138.00(79.00,510.50)μg/L,其中50例(71.43%)＞90 μg/L,20例(28.57%)≤90 μg/L。血清碘＞90 μg/L孕妇的随机尿碘、尿碘肌酐比、24 h尿碘排泄量均显著高于血清碘≤90 μg/L孕妇(P均＜0.001)。Spearman相关法分析显示,随机尿碘(r_s=0.749,P＜0.001)、尿碘肌酐比(r_s=0.794,P＜0.001)、24 h尿碘排泄量(r_s=0.768,P＜0.001)均与血清碘呈显著正相关。ROC曲线结果显示,随机尿碘(最佳诊断界值654 μg/L)、尿碘肌酐比(最佳诊断界值307.5 μg/g)、24 h尿碘排泄量(最佳诊断界值340.5 μg)诊断碘过量的曲线下面积分别为0.732(95% CI: 0.619~0.846)、0.780(95% CI: 0.662~0.898)、0.802(95% CI: 0.697~0.907),且两两比较均无显著差异(P均＞0.05)。  结论  孕前有碘暴露史的女性,妊娠期碘过量比率较高。随机尿碘、尿碘肌酐比、24 h尿碘排泄量对识别孕前有碘暴露史的女性妊娠期碘过量具有一定的应用价值,由于尿碘肌酐比检测方便,其值＞307.5 μg/g可能有助于进一步提高妊娠期碘过量的识别率。     

活性雾离子对分枝杆菌的消毒效果评价

目的 评价活性雾离子智能空气消毒机对分枝杆菌的灭菌效果,为分枝杆菌感染的有效控制提供新的技术。方法 依据《消毒技术规范》（2002版）进行活性雾离子消毒效果评价试验。采用分枝杆菌评价代表菌株龟分枝杆菌脓肿亚种ATCC93326株,常规培养,制备108 cfu/mL的菌液,取10μL菌液滴加在布片及不锈钢片两种载体上,经活性雾离子智能空气消毒机喷雾消毒2、6、12、24 h后洗脱,洗脱液倍比稀释后,取100μL涂布于7H10+10%油酸–牛血清白蛋白–葡萄糖–过氧化氢酶（OADC）平板,培养4 d,菌落计数,计算杀灭率及杀灭对数值。结果 消毒作用6 h时,活性雾离子对分枝杆菌的杀灭率达97.95%;延长消毒时间至12及24 h,杀灭率>99.99%,杀灭对数值>3.0。不同材质的载体效果有差异,对钢片上结核菌的杀灭效果略好于布片。结论 人机共存型活性雾离子能有效杀灭分枝杆菌,活性雾离子智能空气消毒机适用于分枝杆菌的空气及物表消毒,有效控制分枝杆菌感染。     

不同方法提取血培养瓶培养的抗凝血中布鲁氏菌核酸的比较

  目的   比较不同提取方法对血培养瓶培养的抗凝血中布鲁氏菌检出率的影响。  方法   将定量检测的灭活菌液/基因组DNA梯度添加至含抗凝血的血培养瓶中,选择不同的方法提取核酸,利用荧光定量检测其含量。  结果   磁珠法和裂解法最低能检测添加102 CFU/mL的灭活菌液以及10?3 ng/μL的基因组DNA;离心柱法无法检测未经红细胞裂解液处理的添加106 CFU/mL的灭活菌液以及10 ng/μL的基因组DNA,经红细胞裂解液处理后也只能检测到添加104 CFU/mL的灭活菌液以及1 ng/μL的基因组DNA的模拟样品。  结论  红细胞裂解液处理模拟样品能够增加核酸的提取量,裂解法提取效果最好,其次是磁珠法,再次是离心柱法。 本研究为疑似布鲁氏菌病样品血培养物的核酸检测提供了方法参考,为提高布鲁氏菌病的诊断率提供了新的思路。     

影像学指导下同型半胱氨酸与脑梗死TOAST分型的相关性

  目的  结合影像学检查探讨脑梗死患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平与TOAST分型之间有无相关性。  方法  结合影像学表现,将736例脑梗死患者按照TOAST分型标准进行亚型分型,大动脉粥样硬化型333例,小动脉闭塞型374例,心源性栓塞9例,其他病因型11例,不明原因型9例,按照性别进行分组,分别测定Hcy水平与TOAST分型亚型的相关性。  结果  心源性栓塞型、其他病因型、不明原因型3个亚组样本太小,差异无统计学意义;男性大动脉粥样硬化组Hcy水平高于小动脉闭塞组(13.65±9.65 μmol/L vs 11.27±5.52 μmol/L),差异有统计学意义(P < 0.05)。  结论  整体患者中Hcy水平与TOAST分型不具有相关性。从性别来看,男性脑梗死患者中,更高的血浆Hcy水平更可能通过促进大动脉粥样硬化进而引起脑梗死。      

恙虫病东方体环介导等温扩增可视化快速检测方法的建立

目的 利用环介导等温扩增（LAMP）可视化检测技术,建立一种灵敏、特异和简便的恙虫病检测方法。方法 利用LAMP在线引物设计软件Primer Explorer V4,以恙虫病东方体热休克蛋白groEL基因作为靶序列,设计扩增引物,优化反应条件。利用恙虫病东方体标准株评估灵敏度和特异度;收集42份恙虫病血样,分别采用LAMP、普通PCR和实时荧光定量PCR方法进行验证。结果 建立的LAMP方法可在61～65℃80 min内完成恙虫病东方体的快速检测,最低检测限为10拷贝/μL,高于普通PCR方法 2个数量级,高于荧光定量PCR方法 1个数量级;对8种常见的自然疫源性疾病病原体检测均为阴性,特异度为100%;对42份恙虫病血样采用3种方法检测,阳性率一致,均为21.4%(9/42)。结论 本研究建立的恙虫病东方体LAMP可视化检测反应快速,操作简便,灵敏特异,可在基层医疗卫生机构运用推广。