运动训练对脊髓损伤后痉挛大鼠脊髓内钾-氯离子协同转运体2表达的影响

目的:研究运动训练对脊髓损伤(SCI)后痉挛大鼠行为学表现及脊髓内钾-氯离子协同转运体2(KCC2)表达的影响,探讨KCC2在运动训练的解痉效应中的作用。方法:将30只雌性SD大鼠随机分为假手术组、对照组、实验组。采用改良Allen撞击法建立脊髓损伤后痉挛模型,使用BBB评分、Ashworth评分来评估三组大鼠术后行为学变化,并于术后5周用免疫组化技术检测各组大鼠损伤远段脊髓KCC2表达。结果:假手术组术后行为学评分一直保持正常。术后1d—5周,对照组和实验组的BBB评分均持续升高,且2组组内不同时间点的BBB评分差异均有显著性意义(P0.05)。术后2—5周,实验组评分均高于对照组,且差异均有显著性意义(P0.05)。对照组和实验组在术后1周左右出现痉挛,后痉挛程度逐渐加重,至术后5周左右降低,2组组内不同时间点的Ashworth评定结果差异均有显著性意义(P0.05)。术后3—5周,对照组评定等级均高于实验组,差异有显著性意义(P0.05)。三组大鼠脊髓运动神经元胞膜上KCC2表达水平比较,组间差异有显著性意义(P0.05)。与假手术组相比,其余两组大鼠KCC2蛋白表达下调(P0.05);与对照组相比,实验组能够明显上调KCC2蛋白的表达(P0.05),但仍低于假手术组(P0.05)。结论:运动训练可以促进脊髓损伤后运动功能恢复,有效缓解痉挛,并可抑制KCC2表达的下调,运动训练的解痉效应可能是通过增加KCC2表达实现的。     

早期运动训练对脊髓损伤大鼠痛觉阈值及脊髓后角胶质细胞活化的影响

目的:观察早期运动训练对T10不完全性SCI大鼠机械性及热刺激痛觉阈值、脊髓后角小胶质细胞和星形胶质细胞活化的影响。方法:将24只成年雌性SD大鼠随机分为:假手术组(Sham组)、SCI-对照组(SCI-Sed组)和SCI-运动组(SCI-TT组)。SCI-Sed组和SCI-TT组使用改良Allen’s法制作T10不完全SCI模型,Sham组只暴露脊髓。SCI-TT组于SCI第8天行减重平板训练。于SCI术前、术后第1、7、14、21、28、35天使用Von Frey单丝及热刺激痛觉测试仪对大鼠的痛觉阈值进行评估。SCI 5周后,使用免疫组化技术对所有大鼠L4—5脊髓进行染色,观察脊髓后角小胶质细胞及星形胶质细胞活化情况,并对大鼠痛觉阈值与胶质细胞活化之间的相关性进行分析。结果:机械性痛觉阈值评估结果显示,SCI术后第1天,SCI-Sed组和SCI-TT组阈值均较Sham组增加(P0.05);之后两组阈值均低于Sham组(P0.05);第21—35天,SCI-TT组阈值明显高于SCI-Sed组(P0.05)。热刺激痛觉阈值结果显示,SCI术后第1天,SCI-Sed组和SCI-TT组痛觉阈值较Sham组均增加(P0.05);SCI 7天后,两组大鼠痛觉阈值均低于Sham组(P0.05);术后14—35天,SCI-TT组痛觉阈值明显高于SCI-Sed组(P0.05)。小角质细胞及星形胶质细胞免疫组化结果显示,SCI-Sed组和SCI-TT组脊髓后角内的阳性细胞数量多于Sham组(P0.05);而SCI-TT组明显少于SCI-Sed组(P0.05)。相关性分析显示,SCI后第35天,痛觉阈值与脊髓后角胶质细胞活化数量之间呈负相关(P0.001)。结论:早期运动训练对缓解SCI大鼠NP的发生有一定作用,其机制可能与抑制脊髓后角胶质活化相关。     

阻断BDNF-TrkB信号通路后运动训练对脊髓损伤后大鼠痉挛状态及腰髓内GAD65表达的影响

目的:探讨阻断脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)-酪氨酸激酶受体B(tropomyosinrelated kinase B,Trk B)信号通路后运动训练对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠后肢痉挛以及腰髓内谷氨酸脱羧酶65(glutamic acid decarboxylase 65,GAD65)表达的影响。方法:将60只雌性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、损伤+磷酸盐缓冲液组(Sed-PBS组)、运动+磷酸盐缓冲液组(TT-PBS组)、损伤+Trk B阻滞剂组(Sed-Trk B/Fc组)以及运动+Trk B阻滞剂组(TT-Trk B/Fc组)。采用改良Allen撞击法建立T10不完全脊髓损伤后痉挛模型,在SCI后第7天,于Sed-Trk B/Fc组和TT-Trk B/Fc组植入灌有Trk B阻滞剂(Trk B/Fc)的Alzet渗透压泵,其余三组渗透压泵中则注入0.01M磷酸盐缓冲液(phosphate-buffered saline,PBS)进行对照。SCI后第8天,TT-PBS组和TT-Trk B/Fc组进行减重平板训练(treadmill training),每周使用H反射的H_(max)/M_(max)比值对术后大鼠后肢的痉挛状态进行评估,于术后5周采用Western Blot和免疫组化技术检测各组大鼠损伤远段脊髓GAD65的表达情况,并对大鼠小腿三头肌H_(max)/M_(max)比值与脊髓前角GAD65相对表达量之间的相关性进行分析。结果:术后,除假手术组外,其余4组大鼠后肢痉挛程度均逐渐加重。从第3周开始,与Sed-PBS组、Sed-Trk B/Fc组和TT-Trk B/Fc组相比,TT-PBS组H_(max)/M_(max)比值明显降低(P0.05);在术后第4—5周,TT-Trk B/Fc组比值也有下降(P0.05)。5组大鼠GAD65免疫组化和Western Blot结果显示,各组GAD65的相对蛋白含量均低于假手术组(P0.05),但TT-PBS组明显多于除Sham组外的其他3组(P0.05);TT-Trk B/Fc组GAD65的相对蛋白表达量与SedPBS组和Sed-Trk B/Fc组相比也有所增加(P0.05)。相关性分析显示,SCI后第35天,大鼠小腿三头肌H_(max)/M_(max)比值与脊髓前角GAD65相对表达量之间呈负相关(P0.001)。结论:运动训练可以改善SCI后的痉挛状态,而阻断BDNF-Trk B信号通路可抑制运动训练对不完全性SCI大鼠后肢痉挛的缓解和损伤远段脊髓GAD65表达的促进作用,且SCI后的痉挛状态的改善可能与脊髓前角GAD65相对表达量相关。     

超短波对急性脊髓损伤大鼠神经功能及BDNF-TrkB表达的影响

目的:观察无热量超短波对急性脊髓损伤大鼠神经功能恢复和BDNF-TrkB表达的影响,并探讨其可能作用机制。方法:成年雌性SD大鼠72只,随机分为Sham组(24只)、SCI组(24只)和USW组(24只)。应用改良Allen法制备大鼠脊髓损伤模型。Sham组仅行椎板切除术暴露硬脊膜,不予打击,直接缝合,术后不给予任何治疗。USW组在脊髓损伤造模后24h给予受损部位无热量超短波治疗(最大输出功率40W,实际输出功率11.58W),10min/次,1次/d,至取材前。SCI组造模后不给予任何治疗。在造模后1d、7d、14d和21d用BBB评分、体感诱发电位(SEPs)和运动诱发电位(MEPs)评定脊髓损伤后后肢功能恢复情况并获取损伤段脊髓标本,术后4周取材,用免疫组织化学方法检测SCI组和USW组脊髓在损伤后不同时段BDNF及TrkB的表达,并行阳性细胞计数。结果:BBB评分结果提示,USW组大鼠7d、14d、21d时的运动功能恢复较SCI组明显提高(P0.01);SEPs和MEPs结果显示,USW组大鼠7d、14d、21d时的神经功能较SCI组明显改善(P0.05);免疫组织化学方法提示,与SCI组相比,USW组在一定时间段能上调损伤脊髓区BDNF-TrkB的表达(P0.05)。结论:无热量超短波能在一定程度上促进损伤脊髓的神经功能恢复,其机制可能与超短波上调损伤区脊髓BDNF-TrkB的表达有关。     

跑台运动训练对脊髓损伤大鼠肺功能及HMGB-1表达的影响

目的：探讨跑台运动训练对脊髓损伤（SCI）后大鼠肺功能及高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)表达的影响。方法：选取96只SD雌鼠，随机分成4组，即正常组、假手术组、脊髓损伤非训练组、脊髓损伤训练组。脊髓损伤训练组大鼠于术后第3天开始进行跑台运动训练。分别在术后第3天、术后第14天检测4组大鼠动脉血气分析，肺组织湿/干重比值、大鼠肺损伤评分及肺组织中HMGB1的表达情况。结果：动脉血气分析结果显示术后第14天，脊髓损伤训练组血氧分压值（PaO2）显著高于SCI非训练组、二氧化碳分压值（PaCO2）显著低于SCI非训练组（P<0.05）；术后第14天SCI训练组肺组织湿/干重比值较SCI非训练组明显降低（P<0.05）。肺组织HE染色结果显示，与SCI非训练组相比，术后第14天SCI训练组肺损伤评分明显降低（P<0.05）。免疫组化结果显示SCI非训练组与SCI训练组术后第3天肺组织中HMGB1表达水平均显著增加（P<0.05）；术后第14天，与SCI非训练组相比，SCI训练组HMGB1表达水平显著降低（P<0.05）。结论：跑台运动训练可改善脊髓损伤后大鼠肺功能障碍，其机制可能与抑制HMGB1的表达有关。     

咯利普兰治疗大鼠脊髓横断损伤的实验研究

目的探索咯利普兰治疗大鼠脊髓横断损伤的可行性。方法取健康成年雌性Sprague-Dawley大鼠30只,随机分为假手术组(Sham组)、损伤组(SCI组)、咯利普兰治疗组(R组),每组10只。R组建立大鼠脊髓横断损伤模型后立刻皮下注射咯利普兰;Sham组仅打开椎板;SCI组及Sham组皮下注射相同体积二甲基亚砜(DMSO)。于损伤后2、4、6、8周采用BBB评分法观察大鼠后肢运动功能情况,损伤后2周时应用免疫组织化学染色检测各组生长相关蛋白-43(GAP-43)及胶质细胞酸性蛋白(GFAP)的表达。结果损伤后6周、8周时,R组BBB评分优于SCI组(P<0.05)。损伤后2周,R组GAP-43表达高于SCI组(P<0.05),GFAP表达量低于SCI组(P<0.05)。结论咯利普兰能提高大鼠脊髓横断损伤神经功能评分,提高GAP-43表达,抑制GFAP表达。     

重复经颅磁刺激叠加运动训练对脊髓损伤大鼠运动功能和神经元可塑性的影响

目的:观察重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)叠加运动训练对不完全性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠运动恢复和神经元可塑性的影响。方法:60只大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脊髓损伤对照组(SCI组)、单纯运动训练组(SCI-ET组)、先运动后rTMS组(SCI-ET+rTMS组)、先rTMS后运动组(SCI-rTMS+ET组)。Sham组仅进行T9水平椎板切除术,无SCI;SCI组建立脊髓挫伤模型,不进行训练干预;在SCI后,SCI-ET组仅进行跑台运动训练,SCI-ET+rTMS组每次在运动训练结束后立即进行rTMS,SCI-rTMS+ET组则在运动训练前进行rTMS。术前及术后采用BBB、神经电生理评价运动及神经元功能,并用Western Blot法检测腰髓(L2-4)处脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及synapsin I的蛋白表达。结果:8周干预后,(1)与SCI组相比,SCI-ET+rTMS组(P0.05)和SCI-rTMS+ET组(P0.01)的BBB评分升高,F波波幅减小(P0.05),腰髓BDNF蛋白表达增高(P0.01),但仅SCI-rTMS+ET组synapsin I表达增高(P0.01);(2)与SCIET组相比,SCI-rTMS+ET组BBB评分和BDNF表达显著升高(P0.05)。结论:rTMS叠加运动训练可显著提升不完全性SCI大鼠的后肢运动功能,通过诱导促进BDNF和synapsin I表达,改善中枢运动控制及运动神经元可塑性。     

电针结合超短波疗法对大鼠全横断脊髓损伤后GAP-43和Caspase-3表达的影响

目的:观察电针结合超短波疗法对脊髓全横断损伤大鼠损伤部位神经生长相关蛋白(GAP-43)、神经细胞凋亡相关蛋白(Caspase-3)的影响。探讨电针结合超短波疗法对脊髓全横断损伤大鼠运动功能恢复的机制。方法:复制并评价SCI大鼠模型。将75只大鼠随机分为5组:假手术组、脊髓损伤组(SCI组)、SCI+电针治疗组(电针组)、SCI+超短波治疗组(超短波组)、SCI+电针治疗组+超短波治疗组(联合组),每组15只大鼠。检测各组1周、2周、3周、4周、5周5个时间点GAP-43、Caspase-3的表达,对各组大鼠进行BBB评分。结果:在不同时间点各治疗组的脊髓损伤大鼠BBB评分均有所提高(P0.05)。与SCI组相比,电针组、超短波组和联合组GAP-43的表达显著增加,Caspase-3的表达显著减少(P0.05)。联合组在术后第1周、2周、3周、4周、5周较其他组GAP-43的表达显著增加,Caspase-3的表达显著减少(P0.05)。结论:(1)电针疗法和超短波疗法都可以促进大鼠损伤区脊髓组织内GAP-43表达增多和抑制大鼠损伤区脊髓组织内Caspase-3表达增多。(2)联合治疗对大鼠运动功能的恢复更为有效。     

慢性神经痛大鼠脊髓缝隙连接蛋白43基因表达变化的实验研究

目的：研究慢性神经痛大鼠脊髓缝隙连接蛋白43（Connexin43，Cx43）基因表达的变化。方法：18只成年SD大鼠随机分为两组（n=9），分别接受右侧坐骨神经结扎手术（CCI组）和假手术（Sham组）。手术前、后观察大鼠疼痛行为学并测定右后肢热刺激抬脚潜伏期（PWTL）、电刺激抬脚阈值（PWET）的变化，于术后14天取大鼠L4/5右侧脊髓，以β-肌动蛋白（β-actin）为内参照基因，采用RT-PCR半定量分析CCI组和Sham组Cx43表达的差异。结果：CCI组大鼠表现为行走步态异常，与Sham组相比CCI组术后5～14天疼痛阈值明显降低（P＜0．01）。Sham组Cx43扩增产物量极少，而CCI组L4/5 Cx43扩增产物量约为Sham组的3倍。结论：慢性神经痛大鼠脊髓Cx43基因表达显著增加，提示脊髓缝隙连接可能在慢性病理性痛过程中发挥重要的作用。     

PPAR-β激动剂治疗大鼠脊髓损伤的观察

目的：探讨过氧化物酶增殖物激活受体-β（peroxisome proliferater activated receptors-beta,PPAR-β）对脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）大鼠脊髓组织及运动功能的影响。方法45只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、脊髓损伤组（SCI组）和PPAR-β受体激动剂GWO742治疗组（GWO742组）。Sham组大鼠仅做椎板切除术不损伤脊髓组织,GWO742组和SCI组大鼠分别采用改良Allens打击法制作SCI模型,并于术后1h开始分别通过腹腔注射同等剂量0.3mg/（kg＆#183;d）的PPAR-β受体激动剂GWO742和生理盐水。各组大鼠分别于术后1、3、7、14、21d随机抽取大鼠行BBB评分;术后24h随机抽取大鼠10只,处死取脊髓组织行HE染色观察脊髓组织病理变化,TUNEL法染色检测细胞凋亡。结果 BBB评分结果显示,术后3、7、14、21d,GWO742组大鼠较SCI组大鼠BBB评分高,且差异均有统计学意义（P〈0.05）;HE染色结果显示SCI组大鼠脊髓组织充血、水肿、损伤中心区出现液化坏死并伴有炎性细胞浸润,GWO742组大鼠脊髓出血、坏死范围及炎性细胞浸润明显轻于SCI组;TUNEL染色显示伤后24h,SCI组和GWO742组损伤脊髓组织均可发现TUNEL阳性细胞,而GWO742组TUNEL阳性细胞数明显少于SCI组（P〈0.05）。结论 PPAR-β受体激活后能够减轻SCI大鼠脊髓组织充血、水肿等病理学改变,抑制神经元凋亡,促进大鼠后肢运动功能恢复。     

减重步行激活SCI大鼠腰膨大前角神经元效应的激光共聚焦镜检研究

目的探讨减重平板步行训练（BWSTT）促进脊髓损伤（SCI）功能恢复的脊髓可塑性机制。 方法将84只成年雌性Wistar大鼠随意分为假手术组（Sham组,n=18）、胸髓横断模型组（SCI组,n=33）和减重平板步行训练组（BWSTT组,n=33）,每组大鼠再随机分为7,15,45 d 3个亚组。建立大鼠胸髓完全横断模型,观察BWSTT对SCI大鼠后肢运动功能的影响。采用激光共聚焦镜检免疫荧光双标技术,研究SCI大鼠腰髓前角腹内侧区神经元酪氨酸蛋白激酶受体（EphA4）、囊泡膜谷氨酸转运体2（VGluT2）的表达,以及两者双标免疫阳性细胞比率的变化。 结果BWSTT组大鼠的后肢运动功能较SCI组大鼠明显改善。胸髓横断大鼠BWSTT后,腰髓前角腹内侧区EphA4和VGluT2的表达以及EphA4/VGluT2双标免疫阳性细胞比率均显著增加。 结论BWSTT通过增强胸髓横断大鼠腰髓前角神经元EphA4/VGluT2的表达,促进后肢运动功能的恢复。     

大鼠急性脊髓损伤中热休克蛋白47的Western Blot分析

目的研究大鼠急性脊髓损伤（SCI）中热休克蛋白47（HSP47）的表达情况。方法用Wistar大鼠制作钳夹型SCI模型,在SCI后3天及每周评价BBB评分,并在1周,3周,5周用Western Blot方法分析脊髓中HSP47的表达情况。结果正常Wistar大鼠脊髓组织低表达HSP47,在SCI后表达明显提高,且在第5周仍有上升趋势（P〈0.01）。结论Wistar大鼠SCI后HSP47表达增加,HSP47可能参与到SCI的病理改变过程中。     

阻断脑源性神经营养因子-酪氨酸激酶受体B通路后运动训练对脊髓损伤大鼠功能恢复的影响研究

目的:探讨阻断脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)-酪氨酸激酶受体B(tropomyosin-related kinase B,TrkB)信号通路后运动训练对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠运动功能恢复和突触可塑性的影响。方法:32只雌性SD大鼠被随机分为4组:损伤+PBS组(Sed-PBS组)、运动+PBS组(TT-PBS组)、损伤+TrkB/Fc组(Sed-TrkB/Fc组)及运动+TrkB/Fc组(TT-TrkB/Fc组)。于SCI术前1周进行L3-4鞘内置管。置管1周后使用改良Allen法制作T10不完全性SCI模型。于SCI术后第7天植入渗透压泵,并在Sed-PBS组和TT-PBS组的渗透压泵中灌入0.01M PBS,Sed-TrkB/Fc组和TT-TrkB/Fc组的渗透压泵中灌入TrkB阻滞剂(TrkB/Fc)。SCI后第8天,对TTPBS组和TT-TrkB/Fc组进行减重平板训练。术后第1天、3天、7天、14天、21天、28天和35天进行BBB评分。实验结束后取材,使用Western Blot和免疫组化染色技术分析检测突触后膜密度蛋白-95(postsynaptic density protein-95,PSD-95)及突触素(synaptophysin,SYP)表达情况。结果:术后14天,TT-PBS组BBB评分明显高于其他3组(P0.05);术后21—35天,TT-PBS组BBB评分显著高于其他3组(P0.001);术后28—35天,TT-TrkB/Fc组BBB评分高于Sed-PBS组及Sed-TrkB/Fc组(P0.05)。蛋白免疫印迹结果显示,TT-PBS组PSD-95及SYP相对蛋白表达量显著高于其他3组(P0.001);TT-TrkB/Fc组PSD-95及SYP相对蛋白表达量多于Sed-PBS组和Sed-TrkB/Fc组(P0.05)。免疫组化结果显示,与Sed-PBS组、Sed-TrkB/Fc组和TT-TrkB/Fc组相比,TT-PBS组的PSD-95相对蛋白密度明显增高(P0.01、P0.001、P0.01),且SYP相对蛋白密度也明显增高(P0.001);TT-TrkB/Fc组的PSD-95及SYP相对蛋白密度也高于Sed-TrkB/Fc组及Sed-PBS组(P0.05)。结论:阻断BDNF-TrkB信号通路可明显抑制运动训练对不完全性SCI大鼠运动功能恢复和腰髓突触标记蛋白表达的促进作用。     

早期应用阿仑膦酸钠对脊髓损伤大鼠骨密度及生物力学特性的影响

目的探讨早期应用阿仑膦酸钠(ALN)对脊髓损伤(SCI)大鼠股骨骨密度及生物力学特性的影响。方法将36只3月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、SCI组、SCI ALN组，假手术组仅行T10椎板切除，其余组行T10椎板切除、脊髓横断术。SCI ALN组于术后1周开始腹腔注射ALN，每周3次。术后8周取股骨，进行骨密度及生物力学检测。结果脊髓横断术后8周大鼠股骨骨密度及生物力学参数与Sham组相比发生了显著性改变；与SCI组相比，SCI ALN组股骨骨密度值显著升高(P＜0．01)；弹性载荷值、最大载荷值显著升高(P＜0．01)，最大应力值升高(P＜0．05)。结论脊髓横断术后8周的大鼠可用于SCI后骨质疏松的研究；早期应用ALN可减少SCI大鼠股骨的骨量丢失，改善SCI大鼠股骨的生物力学特性。     

人脂肪间充质干细胞移植结合跑台训练对脊髓损伤大鼠运动功能的影响及机制

摘要 目的：探讨人脂肪间充质干细胞（hADSCs）结合跑台训练对脊髓损伤（SCI）大鼠运动功能的影响。 方法：成年雄性SD大鼠60只,采用改良Allen打击法制作T10不完全SCI模型。术后随机分为损伤组（模型组,未行处理）、细胞移植组（细胞组,行细胞移植）、跑台训练组（训练组,行跑台训练）和跑台训练结合细胞移植组（联合组,行跑台训练及细胞移植）。术前及术后采用BBB评分和Tarlov评分行运动功能评定,术后1、2、4周取脊髓行免疫荧光染色检测细胞存活,炎症反应相关细胞（ED1阳性巨噬细胞）,胶质瘢痕[胶质纤维酸性蛋白,GFAP及神经丝蛋白（NF-200）,5-羟色胺（5-HT)]。 结果：治疗组行为学评分及荧光定量检测均优于模型组（P＜0.05）;但联合组最明显,训练组和细胞组间无明显区别（P＞0.05）。 结论：hADSCs移植联合跑台训练对不完全性SCI大鼠运动功能恢复具有协同功效,治疗机制可能与进一步减轻伤后炎症反应,减少损伤面积,促进轴突再生有关。     

低频振动对脊髓损伤继发骨质疏松的影响

目的了解低频振动对脊髓损伤（SCI）继发骨质疏松（OP）大鼠骨代谢和骨质量的影响。方法50只SD大鼠采用脊髓全切横断法在第10胸椎处横断脊髓制作完全性SCI模型,并随机分为SCI6周对照组（SCI6w）、SCI12周对照组（SCI12w）、振动6周组（Vi6w）、振动12周组（Vi12w）和SCI6-12周振动组（Vi6-12w）,每组10只;振动组分别于SCI后第4天（Vi6w组、Vi12w组）、第7周（Vi6-12w组）开始接受振动干预,振动频率20Hz,加速度0.15g,10min/次,2次/d,6d/周,Vi6w组和Vi6-12w组共振动6周,Vi12w组振动12周。分别在振动结束1d后处死动物,进行骨代谢血生化指标、骨密度（BMD）、骨形态计量学和生物力学性能测试。结果Vi6w组大鼠血Ca和股骨近端BMD较对照组改善（P〈0.05）;Vi12w组第5腰椎最大载荷较对照组升高（P〈0.05）;Vi6-12w组大鼠骨代谢和骨质量未见明显变化。结论早期开始的低频振动干预可改善SCI继发OP,但存在部位差异;后期进行的振动干预不能改善SCI继发OP,但可防止其进展。     

神经干细胞移植促进大鼠脊髓损伤后前角运动神经元存活及后肢运动功能恢复的实验研究

目的:研究神经干细胞(NSCs)移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后前角神经元的作用及后肢运动功能的恢复.方法:5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法标记处于对数生长期的NSCs,采用电控脊髓损伤打击装置制作大鼠SCI模型.实验分为BrdU+NSCs组、NSCs组、SCI组、假手术组(Sham组)4组.SCI后3 d进行NSCs移植.应用免疫组化法观察BrdU标记的移植细胞的存活及迁移情况,Nissl染色法观察脊髓前角运动神经元存活情况,采用行为学(BBB)评分法观察大鼠后肢运动功能的恢复情况.结果:BrdU+NSCs组在损伤脊髓区域可检测到BrdU标记的阳性NSCs,BrdU+NSCs组和NSCs组脊髓前角存活运动神经元较SCI组明显增多(P＜0.05),BBB评分亦明显高于SCI组(均P＜0.05).结论:体外培养的胚胎大鼠NSCs在移植到SCI区域后可存活、迁移,对SCI后前角运动神经元具有保护作用,从而促进了大鼠后肢运动功能的恢复.     

步行训练联合BMSCs移植对脊髓损伤模型大鼠神经和运动功能修复的影响

目的探讨步行训练联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脊髓损伤(SCI)大鼠模型功能修复的影响。方法取4周龄SD雌性大鼠5只,取骨髓,分离培养BMSCs,按1︰2传代扩增,用3～4代细胞进行移植。采用随机数字表法将SD雄性大鼠80只分为模型组(伤后不干预)、BMSCs移植组(SCI大鼠模型制备成功后1周进行BMSCs移植)、步行训练组(模型制备成功后的第2天开始步行训练)、联合组(模型制备成功后进行步行训练联合BMSCs移植),各20只。采用医用动脉瘤夹钳夹脊髓的方法制备SCI模型,伤后按分组进行BMSCs移植和步行训练,分别于伤后1周、2周、3周、4周采用BBB评分评估四组大鼠后肢神经运动功能,评估结束后用免疫组化染色的方法检测脑源性神经生长因子(BDNF)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)阳性表达,并观察四组损伤区脊髓组织神经纤维恢复情况。结果SCI后1周,步行训练组、联合组BBB评分均明显高于BMSCs移植组、模型组,干预三组SCI后2周、3周、4周BBB评分均明显升高; SCI后2周、3周、4周,干预三组BBB评分均高于模型组,联合组BBB评分均高于步行训练组、BMSCs移植组; BMSCs移植组SCI后3周、4周BBB评分高于步行训练组,差异均有统计学意义(P 0. 05);步行训练组、BMSCs移植组、联合组SCI后4周BDNF、NSE阳性表达均明显高于模型组,联合组明显高于步行训练组、BMSCs移植组,BMSCs移植组高于步行训练组,差异均有统计学意义(P 0. 05)。结论步行训练联合BMSCs移植能促进SCI大鼠神经功能和运动功能的恢复,可能与调控神经细胞因子的表达有关。     

脊髓损伤继发骨质疏松大鼠后肢骨质量变化

目的：探讨脊髓损伤对大鼠后肢骨质量的影响，揭示SCI继发骨质疏松特点。方法：60只SD大鼠按体重随机分为6组．对20只采用脊髓横断法在第10胸椎处横断脊髓制作完全性SCI模型，分为SCI6周和12周组；20只在同水平处切断棘突、椎板制作似手术对照组（sham），分为Sham6周和12周组；另20只分为正常6周和12周对照组。分别在脊髓损伤后6周和12周时取材，进行股骨生物力学性能和胫骨上端骨形态计量学测试。结果：脊髓损伤6周时，大鼠胫骨E端骨小梁厚度、骨小梁面积百分比明显降低（P〈0.01、P〈0．05），单位面积破骨细胞数明显增加（P〈0．05）：股骨中段最大载荷明显降低（P＜0．05）。脊髓损伤12周时，除上述改变外，胫骨上端骨体积百分比也明显降低（P〈0．05）：股骨最大载荷进一步降低（P＜0．001），结构刚度也明显下降（P〈0．05）。其他指标无明显改变（P〉0．05）。结论：脊髓损伤6周时，大鼠后肢骨已出现损害，12周时，其损害进一步加重。     

大鼠脊髓损伤后早期应用孕酮联合减重步行训练的干预作用

目的：观察早期应用孕酮和减重步行训练对大鼠脊髓损伤（SCI）后的运动功能、脊髓形态学及脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA表达的影响。方法：120只雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组、孕酮组、训练组、联合组（孕酮＋训练）,前三组各30只大鼠（每组分为第1、3、7、14、21、28天6个亚组各5只）,后两组各15只大鼠（每组分为第14、21、28天3个亚组各5只）;采用改良的Allen’s撞击法制成SCI模型;孕酮在术后30 min、6 h、24 h、48 h、72 h时以4 mg/kg的剂量腹腔注射;减重步行训练在术后1周开始,训练14 d;术后不同时间点采用BBB法进行后肢运动功能评分,HE染色观察脊髓形态学的变化,RT-PCR法检测BDNF mRNA的表达水平。结果：孕酮和训练均可促进大鼠后肢功能恢复和受损脊髓的出血吸收、神经再生,并且具有协同效应。RT-PCR结果显示假手术组BDNF mRNA低表达;模型组在3 d内升高;孕酮组在1周内高表达,高峰在第3天;训练组从第14天开始表达明显增高,训练停止1周后仍维持在高水平;联合组BDNF mRNA的表达水平较孕酮组或训练组更高（P0.01）。结论：早期应用孕酮和减重步行训练均能促进SCI大鼠的运动功能恢复,其机制之一可能是上调局部BDNF mRNA的表达,促进神经再生;两者联合应用的效果比单一应用更好。