rhG-CSF cDNA高表达质粒的构建及其在COS7细胞中的表达

目的：构建一个能在哺乳动物细胞中高表达人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）ｃＤＮＡ的重组质粒。方法：利用化学合成引物，进行ＰＣＲ，对人Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ５＇ＡＵＧ侧翼序列进行翻译优化突变。测序确证后，重组入表达载体ｐＥＤ，构建成质粒ｐＥＤ－ＧＣＳＦ，用ＤＥＡＥ－Ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ７细胞，ＥＬＩＳＡ法定量测定ｒｈＧ－ＣＳＦ表达水平。结果：转染ＣＯＳ７细胞后４８ｈ收集的上清ｒｈＧ－ＣＳＦ表达量为５２ｎｇ／ｍｌ，７２ｈ为２３０ｎｇ／ｍｌ，显示ｒｈＧ－ＣＳＦ获得了暂时性高表达。结论：ｐＥＤ－ＧＣＳＦ是一个能在哺乳动物细胞中高效表达ｒｈＧ－ＣＳＦ的真核表达质粒。     

人食管癌细胞抗药机制的探讨

目的：在建立 体外多药抗药细胞株的基础上，研究其抗药性形成机制，寻求克服抗药性的方法。方法：用人食管癌上皮细胞Ｅｃａ－１０９细胞，在无诱导剂的情况下，以递加培养液中阿霉素（ＡＤＭ）质量浓度的方法，建立了Ｅｃａ－１０９／ＡＤＭ多药抗药细胞株。用荧光光度法测定抗药细胞内还原性谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量及ＡＤＭ的累积量。结果：研究发现Ｅｃａ－１０９／ＡＤＭ细胞内ＧＳＨ含量增加、降低细胞内ＧＳＨ的含量，细胞的     

精神分裂症氯氮平治疗前后中枢单胺递质含量的对比研究

目的：观察氯氮平治疗精神分裂症对中枢单胺递质系统的影响。方法：应用高效液相色谱测定２８例精神分裂症氯氮平治疗前后脑脊液ＮＥ、ＤＡ、５－ＨＴ、ＭＡＰＧ、ＨＶＡ、５－ＨＬＡＡ的含量。结果：治疗前后脑脊液中单胺神经递质及其代谢产物差异无显著性;应用中枢神经递质代谢产物ＮＨＰＧ／ＨＶＡ、５－ＨＬＡＡ／ＨＶＡ、ＭＨＰＧ／５－ＨＬＡＡ的比值作为两个中枢递质系统之间相互作用的功能态,发现精神分裂症治疗前ＭＧＰＧ     

RGDS肽抑制活化血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa磷酸化

目的：研究Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ａｓｐ－Ｓｅｒ（ＲＧＤＳ）肽对血小板聚集和血小板膜ＧＰⅡ／Ⅲａ反磷酸化的影响。方法：免疫沉淀提取血小板膜ＧＰⅡｂ／Ⅲａ反磷酸化测定。结果：５０μｍｏｌ．Ｌ＾－１，ＡＤＰ引起血小板聚集时，其ＧＰⅡｂ／Ⅲａ反磷酸化明显降低，而应用１００和２００μｍｏｌ．Ｌ＾－１ＲＧＤＳ肽与ＡＤＰ共同孵育，呈浓度依赖抑制血小板聚集的同时，可逆转ＡＤＰ引起的蛋白反磷酸经改变（Ｐ〈０．０１）。其抑     

重组人造血生长因子对骨髓增生异常综合征造血干细胞集落分化的研究

用体外细胞培养法，观察重组造血生长因子（Ｇ－ＣＳＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、ＰＨＡ－ＬＣＭ）对骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）造血干细胞集落分化进行研究。结果表明：ＭＤＳ造血干细胞对正常造血生长因子Ｇ－ＣＳＦ、ＧＭ－ＣＳＦ的感受性低于正常组而高于再障（ＡＡ）组，其丛／集比值明显高于正常组和ＡＡ组，在ＭＤＳ转化为白血病过程中，其造血干细胞对正常造血生长因子的感受性降低尤为显著，而对白血病克隆源性细胞生长所需要的条     

高血压病患者血清脂蛋白,载脂蛋白与胰岛素的关系

通过检测４１例高血压病患者和２７例正常对照者血清脂质、脂蛋白、载脂蛋白、葡萄糖及胰岛素含量。结果表明：与正常对照者比较，高血压病患者血清甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－ＣＨ）、ＡｐｏＢ、Ｉ及Ｉ／Ｇ比值均显著增加，高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－ＣＨ）、ＨＤＬ２－ＣＨ、ＡｐｏＡＩ及ＡｐｏＡｉ／ＡｐｏＢ比值均显著降低。相关性分析显示，高血压病Ｉ与ＴＧ和ＡｐｏＢ均呈正相关，与ＨＤＬ２－ＣＨ和ＡｐｏＡＩ     

ALT,AST,ALP,γ—GT,LDH联合检测在肝病诊断中的意义

对１８９例各种肝病患者血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＡＬＰ、γ－ＧＴ及ＬＤＨ等５种酶活性进行测定，结果显示：急性肝炎时以ＡＬＴ变化最为显著，阳性率达９６．７％；ＡＳＴ／ＡＬＴ比值可以区别急性肝炎和慢性肝炎。重症肝炎时，转氨酶均显著增高，并与病情轻重有关，其上升幅度可作为判断预后的比值。ＡＬＰ活性变化在肝硬化中较其它血清酶更为敏感。γ－ＧＴ也较灵敏，可作为辅助诊断。肝癌时，血清酶改变以γ－ＧＴ最为显著，阳性     

去纤酶对冠心病患者自由基相关酶活性的影响

本文对６９例冠心病（ＣＡＤ）患者测定了自由基相关酶的活性，并对其中１６例患者用去纤酶进行了治疗。结果表明：ＣＡＤ患者血中脂质过氧化物（ＬＰＯ）明显高于正常人（Ｐ＜０．０１），并与心肌缺血损伤程度呈正相关（Ｐ＜０．００１），谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）明显低于正常人，ＧＳＨ－Ｐｘ和ＧＳＨ－Ｐｘ／ＬＰＯ比值与心肌缺血损伤程度呈负相关（Ｐ＜０．００１），超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）无明显变化（Ｐ＜０．０５）。去纤酶用药前后上述酶进行了比较发现，去纤酶能提高ＧＳＨ－Ｐｘ／ＬＰＯ比值（Ｐ＜０．０１）和ＳＯＤ活性（Ｐ＜０．０５）降低ＬＰＯ的损伤（Ｐ＜０．０１）。提示ＣＡＤ缺血性损伤与ＬＰＯ升高，即自由基产生过多或／和抗自由基不足有关。去纤酶可通过降低ＬＰＯ和提高ＧＳＨ－Ｐｘ和ＳＯＤ的活性用于治疗ＣＡＤ。     

RGDS肽抑制活化血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa磷酸化

目的：研究ＡｒｇＧｌｙＡｓｐＳｅｒ（ＲＧＤＳ）肽对血小板聚集和血小板膜ＧＰⅡｂ／Ⅲａ反磷酸化的影响。方法：免疫沉淀提取血小板膜ＧＰⅡｂ／Ⅲａ，反磷酸化测定。结果：５０μｍｏｌ·Ｌ－１ＡＤＰ引起血小板聚集时，其ＧＰⅡｂ／Ⅲａ反磷酸化明显降低。而应用１００和２００μｍｏｌ·Ｌ－１ＲＧＤＳ肽与ＡＤＰ共同孵育，呈浓度依赖抑制血小板聚集的同时，可逆转ＡＤＰ引起的蛋白反磷酸化改变（Ｐ＜０．０１），其抑制血小板聚集和ＧＰⅡｂ／Ⅲａ反磷酸化呈明显的负相关（ｒ＝－０．７６，Ｐ＜０．０１）。结论：ＲＧＤＳ肽抑制血小板聚集是通过抑制血小板膜ＧＰⅡｂ／Ⅲａ磷酸化所致     

谷氨酸脱羧酶抗体的测定在1—型糖尿病中的临床意义

目的：了解并分析ＧＡＤ抗体与糖尿病分型的关系。方法：应用酶联免疫法对１１０例１－型糖尿病患者及１３２例２－型糖尿病患者进行ＧＡＤ抗体及ＩＣＡ的测定。     

无创性心功能检查临床应用的几点体会

用颈动脉搏动图（ＣＰＩ）、心尖搏动图（ＡＣＧ）和心阻抗血流图（ＩＣＧ）对７１例“健康人”和９０例陈旧性心肌梗塞患者进行左室收缩功能及舒张功能的测定。收缩功能以ＣＰＩ法测得射血前期与射血时间比值（ＰＥＰ／ＬＶＥＴ），舒张功能ＡＣＧ法测得Ａ／Ｄ，Ａ／Ｒ，Ａ／Ｅ－Ｏ准确，可应用于临床。     

单克隆抗体F（ab‘）2片段2种纯化方法的建立及比较

目的：建立纯化（ｍＡｂ）Ｆ（ａｂ‘）２片段的有效方法。方法：在ｐＨ５．５环境下，用ＤＴＴ激活木瓜酶，在没有ＤＴＴ存在下消化抗人肝癌ｍＡｂ ＨＡｂ１８ ＩｇＧ１，３７℃，反应８ｈ，然后分别用Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ－２００（１ｃｍ×６５ｃｍ）凝胶过滤柱和ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－ＦＦ（２ｃｍ×１８ｃｍ）阴离子交换柱纯化。结果：经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ（１００ｇ／Ｌ）电泳测定，２种方法纯化的Ｆ（ａｂ’）２     

rhG—CSF cDNA表达质粒的构建及其在COS7细胞中的表达

目的：构建一个能在哺乳动物细胞中高表达人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）ｃＤＮＡ的重组质粒。方法：利用化学合成引物，进行ＰＣＲ，对人Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ５ＡＵＧ侧翼序列进行翻译优化突变。测序确证后，重组人表达载体ｐＥＤ，构建成质粒ＰＥＤ－ＧＣＳＦ，用ＤＥＡＥ－Ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ７细胞，ＥＬＩＳＡ法定量测定ｒｈＧ－ＣＳＦ表达水平。结果：转染ＣＯＳ７细胞后４８ｈ收集的上清ｒｈＧ－ＣＳＦ表达量为５     

高血压脂蛋白的测定

测定１３８例高血压患者血脂总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、高密度脂蛋白（ＨＤＬ－Ｃ），载脂蛋白ＡＰＯＡ、ＡＰＯＢ，与对照组对比，结果表明：高血压组ＴＣ、ＴＧ、ＡＰＯＢ明显增高（Ｐ＜００５）。ＨＤＬ－Ｃ、ＡＰＯＡ降低。各组中女性的ＨＤＬ－Ｃ水平较男性增高。提示高血压患者随着ＴＧ、ＴＣ及ＡＰＯＢ增高和ＡＰＯＡ／ＡＰＯＢ比值的下降促使动脉硬化的程度加重。女性ＨＤＬ－Ｃ增高与雌激素水平无明显关系，与睾丸酮的水平有关。脂代谢紊乱与高血压的分期无相关性。     

绝经前后妇女性激素水平与血脂和免疫的关系

测定９６例绝经前后无冠心病（ＣＨＤ）妇女的性激素、血脂和免疫蛋白水平，并对１８例绝经后妇女进行尼尔雌醇干预治疗。结果显示：绝经后妇女的Ｅ２，Ｅ２／Ｔ，ＨＤＬ及ＡｐｏＡＩ降低，Ｔ，ＴＧ，ＴＣ，ＬＤＬ－Ｃ，ＡｐｏＢ，Ｌｐ（ａ），ＩｇＧ及ＡｃＡＩｇＧ升高；Ｅ２与ＨＤＬ－Ｃ呈正相关，与ＴＣ，ＡｐｏＢ，Ｌｐ（ａ），ＬＤＬ－Ｃ，ＩｇＧ，ＡｃＡＩｇＧ呈负相关；Ｔ与ＬＤＬ－Ｃ，ＩｇＧ，ＡＣＡＩｇＧ呈正相关，与ＨＤＬ－Ｃ呈负相关；尼尔雌醇治疗后ＴＧ，ＴＣ，ＬＤＬ－Ｃ，ＩｇＧ，ＡＣＡＩｇＧ下降，ＨＤＬ－Ｃ上升。提示Ｅ２是ＣＨＤ保护性因子。绝经后Ｅ／Ｔ比例失调，使ＣＨＤ发病危险性增加，而尼尔雌醇是绝经后妇女防治ＣＨＤ有效的雌激素替代剂     

非胰岛素依赖型糖尿病患者血清中抗GAD抗体的临床意义

目的：探讨谷氨酸脱羧酶抗体（ＧＡＤ－Ａｂ）对糖尿病诊断的临床意义。方法：用间接ＥＩＡ法测定了１１０例初诊为非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者血清中ＧＡＤ－Ａｂ。结果：１１０例ＮＩＤ－ＤＭ患者中ＧＡＤ－Ａｂ总阳性率为１９．１％，胰岛细胞抗体（ＩＣＡ）阳性率１２．７％，ＩＣＡ阳性者全部检出ＧＡＤ－Ａｂ，而ＧＡＤ－Ａｂ阳性者ＩＣＡ的阳性率６６．７％，而且ＧＡＤ－Ａｂ阳性的病人具有胰岛素依赖型糖尿病（ＩＤＤＭ）的临床特点，即低体重指数及低胰岛素分泌功能。结论：血清中ＧＡＤ－Ａｂ的测定是早期预报及诊断ＩＤＤＭ的最灵敏的免疫标志，而且对于早期诊断“成人晚发自身免疫性糖尿病（ＬＡＤＡ）”，及时给予胰岛素治疗，防止糖尿病眼、肾、神经并发症具有重要的临床意义。     

EBV—EA IgG抗体测定在鼻咽癌诊断和筛查中的应用

目的：探讨ＥＢ病毒早期抗原（ＥＡ）ＩｇＧ抗体测定在鼻咽癌诊断和筛查中的应用。方法：对４５４例鼻咽癌和３００例健康人的血清分别用免疫酶法测定抗ＥＡ抗原的ＩｇＡ／ＥＡ抗体,用ＥＬＩＳＡ法测定ＩｇＧ／ＥＡ抗体,以及用抗酶率法测定抗ＥＢＶ－ＤＮＡ酶抗体。并用免疫酶法测定ＩｇＡ／ＶＣＡ和ＥＬＩＳＡ法测定ＩｇＧ／ＥＡ的方法的对鼻咽癌高发区人群的９５３６例血清进行鼻咽癌筛查。结果：３例方法中ＥＬＩＳＡ法检测Ｉｇ     

快速免疫比浊法检测尿微量白蛋白肌酐比值及其临床意义

目的：探讨快速免疫法浊法检测尿微量白蛋白肌酐比值对糖尿病肾病（ＤＮ）早期诊断的价值。方法：选用免疫法测定尿微素量白蛋白（ｍＡｌｂ／Ｃｒ）比值，其中３０例ＤＭ患者同时用放射免疫法测定ｍＡｌｂ，碱性苦味酸法测定尿Ｃｒ作方法对照。结果：１０２例ＤＭ患者ｍＡｌｂ／Ｃｒ值高于对照组（Ｐ〈０．０１），３０例ＤＭ患者用放射免疫法和快速免疫比浊法测定的ｍＡｌｂ，ｍＡｌｂ／Ｃｒ结果一致，ｒ＝０．９７１０。结论：快速     

急性脑血管意外血清高密度脂蛋白及载脂蛋白含量变化与临床观察

观察７０例缺血性脑梗塞、５５例脑出血患者和健康人血脂、脂蛋白及ＡｐｏＡ_１、Ｂ含量，结果显示急性脑血管意外病人ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ－Ｃ虽有升高，但无非常显著差异；而ＨＤＬ－Ｃ及ＡｐｏＡ_１水平下降，ＨＤＬ－Ｃ／ＴＣ、ＨＤＬ－Ｃ／ＬＤＬ－Ｃ比值异常非常显著。认为对高危病人行ＨＤＬ－Ｃ及ＡｐｏＡ_１测定以及使用能提高ＨＤＬ及ＡｐｏＡ１水平的药物改善脂类代谢异常对预防脑血管意外有一定意义。     

结直肠癌Dukes各期局部免疫功能变化研究

采用ＡｐＡＡＰ法、ＥＬＩＳＡ和ＲＩＡ法检测４５例结直肠癌（ＣＲＣ）患者外周血和局部动静脉血Ｔ细胞亚群（ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋）、ｓＩＬ－２Ｒ、ＴＮＦα和ＰＧＥ２，结果发现，局部动静脉血中ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋比值随Ｄｕｋｅｓ分期进展而下降；ｓＩＬ－２Ｒ和ＰＧＥ２浓度则随Ｄｕｋｅｓ分期进展而升高，各期差异显著，局部静脉血ＰＧＥ２浓度显著高于局部动脉血；ＴＮＦα水平也随Ｄｕｋｅｓ分期不同而变化，Ｄｕｋ