低分子肝素对急性坏死性胰腺炎并肝损伤P-选择素和E-选择素表达的影响

目的研究低分子肝素（LWMH）对大鼠急性坏死性胰腺炎（ANP）并肝损伤中P-选择素和E-选择素表达的影响及其对急性坏死性胰腺炎的保护作用。方法将96只雄性SD大鼠随机分为三个组：对照组（C组,n=32）、急性坏死性胰腺炎组（A组,n=32）、低分子肝素干预组（G组,n=32）。A组以1．5％脱氧胆酸钠溶液逆行注入胰胆管建立急性坏死性胰腺炎模型（1ml／kg）,G组于造模后给予皮下注射低分子肝素（10U／100g）,C组仅翻动胰腺后关腹。各组分别于造模后6、12、24、48h四个时点分批处死大鼠,测定血清淀粉酶水平;ELISA检测血清TNF-α、IL-6水平,取胰腺及肝脏组织光镜下进行病理学评分;RT-PCR检测肝脏P-选择素和E-选择素mRNA表达。结果三组间和不同时点之间各项观察指标比较均有统计学意义（P〈0．01）,A组6、12、24、48h各时点胰腺及肝脏病理评分、血清淀粉酶及TNF-α、IL-6水平,P-选择素和E-选择素mRNA表达均较C组相应时点显著升高（P〈0．05）;G组各时点胰腺及肝脏病理评分、血清淀粉酶及TNF—α、IL-6水平,P-选择素和E-选择素mRNA表达均较A组对应时点显著降低（P〈0．05）。结论P-选择素和E-选择素在急性坏死性胰腺炎并肝损伤时的表达可能与病变严重程度有关;LWMH可能是通过下调P-选择素和E-选择素表达减轻急性坏死性胰腺炎的胰腺和肝脏病变。     

吸烟大鼠脑血管内皮细胞P-选择素、E-选择素表达在脑血栓形成中的作用

目的观察吸烟大鼠脑动脉内皮细胞P-选择素、E-选择素表达,探讨吸烟致脑血栓形成的机制.方法建立吸烟动物模型,将50只大鼠随机分为正常对照组,短期大量吸烟组,长期小量吸烟组,长期大量吸烟组,戒烟组.免疫组织化学法检测大鼠脑动脉内皮细胞p-选择素、E-选择素和TNF-α的表达.结果吸烟大鼠脑血管内皮细胞P-选择素、E-选择素和TNF-α表达较不吸烟鼠明显增加(P＜0.05).长期大量吸烟组P-选择素、E-选择素和TNF-α表达比其他各组明显增多,戒烟组P-选择素、E-选择素和TNF-α表达下降,与其他各吸烟组相比有显著性差异(P＜0.05).结论吸烟致大鼠脑血管内皮细胞P-选择素、E-选择素和TNF-α表达升高是脑血栓形成的重要机制之一.     

Levels of soluble adhesion molecules in patients with various clinical presentations of coronary atherosclerosis

Background Adhesion molecules play an important role in the development and progression of coronary atherosclerosis. The aim of this study was to compare concentrations of soluble forms of adhesion molecules in patients with different clinical presentations of coronary artery disease （CAD）.Methods One hundred and twenty-eight patients with CAD were divided into three groups; the first group was acute myocardial infarction group （AMI group, n=45）, the second group was unstable angina pectoris group （UAP group, n=48）,the third group was stable angina pectoris group （SAP group, n=35）. We compared them with patients with normal coronary arteries （control group, n=31）. The serum levels of vascular cell adhesion molecule （VCAM-1）, intercellular adhesion molecule-1 （ICAM-1）, E-selectin and P-selectin were measured in all subjects.Results The serum level of VCAM-1 in the AMI group was significantly higher than in the UAP, SAP and control groups （P 〈0.01）. The level in the UAP group was significantly higher than the SAP group and control group （P 〈0.01） and the level in the SAP group was significantly higher than in the control group （P 〈0.01）. The serum ICAM-1 level was significantly elevated in the AMI, UAP and SAP groups as compared to the control group （P 〈0.01）. The levels of serum E-selectin and P-selectin in the AMI and UAP groups were significantly higher than in the SAP and control groups （P〈0.01）.Conclusions Increased levels of VCAM-1 and ICAM-1, E-selectin and P-selectin, as markers of inflammation, showed the importance of inflammatory processes in the development of atherosclerosis and clinical expression of CAD. Soluble ICAM-1, VCAM-1, E-selectin and P-selectin concentrations are useful indicators of the presence of atherosclerosis and the severity of CAD clinical presentation.     

妊高征患者蜕膜组织粘附分子表达的变化

目的分析妊高征(PIH)患者蜕膜粘附分子表达的变化。方法分别取PIH(30例)和正常足月妊娠(23例)病例产后蜕膜,免疫组化SP法进行VCAM-1、P-选择素、L-选择素、E-选择素染色分析。结果VCAM-1主要表达于蜕膜血管内皮细胞膜,合体滋养细胞和间质细胞均未见表达;三种选择素主要定位于蜕膜血管内皮细胞、合体滋养细胞、间质细胞胞浆和胞膜。PIH组VCAM-1及P-选择素表达阳性的病例百分率明显高于正常妊娠组(分别为73.3%vs30.4%,P<0.01;83.3%vs43.5%,P<0.05),其中,中、重度PIH组明显高于轻度和正常妊娠组(分别为P<0.01,P<0.05);E-选择素、L-选择素的表达在各组间均无显著性差异(均P>0.05)。结论VCAM-1和P-选择素在PIH蜕膜中的表达明显升高,且表达水平与疾病严重程度相关;患者存在蜕膜局部血小板活化,P-选择素可能参与了PIH胎盘缺血缺氧病理损伤机制;PIH体内粘附分子水平变化在疾病的形成中可能发挥了重要作用。     

大鼠脑缺血后1H磁共振波谱分析的实验研究

目的:1H磁共振波谱(1HMRS)分析大鼠大脑中动脉梗塞后1周脑内代谢物的动态变化,并随访2个月.方法:18只Wistar大白鼠随机分为正常对照组,假手术组和永久性脑缺血组,每组各6只.脑缺血组右侧颈内动脉栓塞制作永久性脑缺血模型.采用1H磁共振波谱(1HMRS)于脑缺血后30min、1、3、6、12、24h、3、7、15d、1、2月对梗塞区域和对侧半球相应区域进行代谢物的波谱分析.结果:正常对照组和假手术组双侧代谢物无异常改变,分布对称(P＞0.05);脑缺血组梗塞区与对照区N-乙酰基天门冬氨酸(N-acetyl-aspartate,NAA),胆硷(choline,Ch)和肌酸(creatine,Cr)均于脑缺血后30min开始升高,3～6h后逐渐降低,但梗塞区与对照区NAA,Ch和Cr没有显著性差别(P＞0.05),24h双侧NAA达最低水平,Ch和Cr于3天后降到最低,随缺血时间的延长,NAA,Ch和Cr逐渐增加,尤其是NAA增加最明显,2个月时NAA较24h增加2.5倍(P＜0.01).患侧最早于脑缺血后10min检测到乳酸(lactate,Lac),随后Lac持续增加3天后开始降低.随访中未发现Lac再次升高.结论:(1)1H MRS能及早反映动物脑缺血后脑内代谢物的改变.(2)1HMRS能客观反映脑缺血慢性期脑内代谢物的异常,为临床评价脑保护药物疗效提供重要信息.     

米诺环素对大鼠脑缺血半暗带脑血流量及内皮素-1蛋白表达的影响

目的：探讨米诺环素对大鼠脑缺血再灌注损伤后缺血半暗带脑血流量及内皮素-1（endothclin-1,ET-1）蛋白表达的影响。方法采用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注损伤模型,将35只 SD 大鼠随机分为假手术组（n＝10）、模型组（n＝15）及米诺环素组（n＝15）。再灌注24 h 后,采用 Longa 法评估大鼠神经功能,激光多普勒血流仪监测大鼠脑缺血半暗带局部脑血流量,免疫组织化学法观察缺血侧皮质 ET-1蛋白的分布情况,再灌注6、24 h 时放射免疫法定量测定 ET-1蛋白的水平。结果同假手术组相比,模型组大鼠神经功能评分增加（P＜0．05）;缺血半暗带脑血流量明显减少（P ＜0．05）,ET-1蛋白表达显著增加（P ＜0．05）,米诺环素组较模型组大鼠神经功能评分明显降低（P＜0．05）,脑缺血半暗带局部脑血流量增加（P＜0．05）,ET-1蛋白的表达显著降低（P＜0．05）。结论米诺环素可增加大鼠脑缺血后局部脑血流量,抑制 ET-1蛋白的表达,减轻大鼠神经功能损害,从而发挥神经保护作用。     

线栓法大鼠局灶脑缺血模型的改进与评价

目的 评价改进后的线栓法大鼠永久性大脑中动脉阻塞局灶脑缺血模型(PMCAO)的使用价值.方法 SD大鼠随机分为3组,即正常对照组(n=8)、假手术组(n=8)、脑缺血组(n=16);脑缺血组分别取术后6 h、24 h为观察点,每个时间点各8只大鼠.通过改进颈部血管暴露方法、线栓进入技巧等实验技术,线栓法建立PMCAO后,2%红四氮唑溶液(TTC)染色观察各组缺血侧脑梗死变化和苏木素-伊红(H-E)染色观察各组缺血侧病理改变.结果 脑缺血组术后6 h、24 h脑缺血侧脑梗死和脑组织病理改变随时间加剧,而正常对照组和假手术组未见脑梗死和相应的病理改变.造模成功率达90%.结论 改进后的线栓法PMCAO方法操作简单,结果稳定可靠,重复性好,脑梗死与临床病理过程一致,是研究局灶脑缺血损伤比较理想、简易的实验动物模型.     

心肺复苏后患者血清内皮选择素和S100b蛋白水平的变化及其临床意义

目的 观察心肺复苏后患者的可溶性粘附分子P选择素(P-selectin)、E选择素(E-selectin)和S100b的变化,并探讨其临床意义.方法 收集2014年10月至2016年10月期间海南省人民医院急救中心收治的院内52例心肺复苏患者的血清样本,其中以循环恢复时间超过48 h的14例患者为生存组,而48 h内循环未恢复的38例患者为死亡组,比较两组患者在不同时间点的P-selectin、E-selectin和S100b变化规律.结果 复苏后30 min时,患者的血清P-selectin在死亡组高于生存组[(357.1±109.7)ng/mL vs(264.8±53.5)ng/mL],差异有统计学意义(P<0.05);复苏后E-selectin在生存组30 min[(52.5±11.8)ng/mL vs(52.5±11.8)ng/mL]、12 h[(50.1±7.4)ng/mL vs(92.8±16.3)ng/mL]和24 h[(65.0±10.8)ng/mL vs(119.0±9.3)ng/mL]均低于死亡组(P<0.05),而生存组S100b血清水平在12 h[(0.67±0.11)ng/mL vs(1.21±0.32)ng/mL]和24 h[(0.39±0.06)ng/mL vs(0.84±0.07)ng/mL]均低于死亡组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 心肺复苏后粘附分子P-selectin、E-selectin和S100b的变化对心肺复苏患者的预后判断具有重要的临床意义.     

丙泊酚及缺血预处理对大鼠肝缺血－再灌注损伤时细胞凋亡的影响

目的：探讨丙泊酚及缺血预处理对大鼠肝脏缺血－再灌注损伤时细胞凋亡的影响。方法：成年健康SD大鼠72只，随机分为4组：假手术组（Sham组）、缺血－再灌注组（IR组）、缺血预处理组（IP组）、丙泊酚组（P组）。制作70％肝脏缺血－再灌注模型，实验结束后即刻取肝左叶。用免疫组化法检测Bcl-2与Bax蛋白表达量，TUNEL法检测肝细胞凋亡指数（AI）。结果：与Sham组比较，各组肝组织Bcl-2、Bax蛋白表达水平、凋亡指数均增加（P〈0．05）；与IR组比较，IP、P组Bcl-2蛋白表达增加、Bax蛋白表达和AI减少（P〈0．05）；与IP组比较，P组Bcl-2蛋白表达增加、Bax蛋白表达和AI减少（P〈0、05）。结论：丙泊酚及缺血预处理通过调节Bcl-2、Bax蛋白表达，使肝细胞凋亡减轻，对大鼠缺血再灌注肝脏可能有一定的保护作用。     

创伤性休克时左旋精氨酸降低P-选择素的表达

OBJECTIVE: To investigate the changes of P-selectin distribution in the vital organs and plasma during traumatic shock and explore the significance of these changes. METHODS: Twenty-four normal SD rats were randomly assigned into 3 groups (n=8), namely traumatic shock group, L-arginine (L-Arg) treatment and control group. The rats in the former 2 groups were subjected to traumatic shock with L-Arg treatment group given 100 mg/kg L-Arg during resuscitation while the other receiving no medication. The control group received only intubation without trauma or phlebotomy. P-selectin expression in the vital organs including the heart, lungs, spleen, liver and small intestine was determined by means of streptavidin-biotin (SABC) immunocytochemical staining technique and serum P-selectin level assayed by enzyme-linked immunosorbent assay. RESULTS: Before traumatic shock, P-selectin was scarcely detected in the vital organs except the lungs, and the serum was positive for P-selectin expression. Four hours after shock, intense P-selectin expression was observed in almost all the vital organs and the serum P-selectin level was significantly higher than that of the control group. In L-Arg treatment group, P-selectin levels were significantly lowered than those of shock group. CONCLUSIONS: P-selectin expression in the vital organs and serum is up-regulated during traumatic shock in rats, possibly due to severe microcirculatory disorder and endothelial dysfunction in this condition. L-Arg may decrease the expression of P-selectin very likely through promoting endothelial NO synthesis.     

NF-κB抑制剂对大鼠AMI再灌注后无再流及ICAM-1，P-选择素表达的影响

目的：探讨核因子κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC）对大鼠急性心肌梗死（AMI）再灌注后无再流及细胞间粘附分子-1（ICAM-1）,P-选择素表达调控的影响．方法：将36只成年sD大鼠随机分为假手术组、对照组及PDTC组．结扎冠脉左前降支3h继而松解2h建立无再流动物模型．再灌注后2h采用病理染色法检测无再流范围;采用免疫荧光组化、RT-PCR方法检测ICAM-1,P-选择素蛋白及mRNA的表达．结果：对照组缺血区ICAM-1,P-选择素蛋白及mRNA表达较假手术组显著升高（P〈0．01）,而PDTC使缺血区ICAM-1,P-选择素蛋白及mRNA表达较对照组显著减弱（P〈0．05）;PDTC组无再流范围较对照组显著减小（P〈0．05）．结论：NF-κB抑制剂PDTC能显著减小大鼠AMI再灌注后无再流范围,其作用可能与抑制再灌注后缺血区ICAM-1及P-选择素的表达有关．     

MMP-2在糖尿病模型大鼠视网膜组织中的表达

目的：采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）法复制糖尿病大鼠模型,观察糖尿病模型大鼠不同时期视网膜组织中基质金属蛋白酶2（MMP-2）表达水平,阐明MMP-2在糖尿病大鼠糖尿病视网膜病变（DR）中的作用。方法：雌性SD大鼠分为正常对照组（n=24）、4周模型组（n=30）、6周模型组（n=30）和8周模型组（n=30）,模型组大鼠连续5 d腹腔注射小剂量STZ复制糖尿病大鼠模型,正常对照组大鼠注射等量的柠檬酸钠溶液。4、6和8周时检测各组大鼠体质量和血糖水平。末次检测后麻醉获取大鼠右眼视网膜组织,采用RT-PCR和Western blotting法检测MMP-2 mRNA及蛋白表达水平,免疫组织化学染色观察大鼠视网膜组织中MMP-2表达情况。结果：造模前,各组大鼠体质量和禁食12 h的空腹血糖值比较差异均无统计学意义（P > 0.05）。4周模型组大鼠死亡3只,6周时死亡5只,8周时死亡7只,存活动物继续进行实验。各模型组大鼠体质量均明显低于同时期正常对照组（P < 0.05或P < 0.01）,而空腹血糖值明显升高（P < 0.05或P < 0.01）。各模型组大鼠视网膜组织中MMP-2 mRNA和蛋白表达水平均明显高于正常对照组（P < 0.05）。正常对照组大鼠视网膜结构层次清晰分明、细胞排列整齐,可见单层排列的神经节细胞,核圆形或椭圆形状,核较大;与正常对照组比较,模型组大鼠视网膜组织结构松散,内核层及视杆细胞层细胞外界膜模糊,数量减少。MMP-2阳性细胞可见棕黄色颗粒沉淀,在神经节细胞层胞浆和血管内皮细胞尤为集中。4、6及8周模型组MMP-2阳性表达水平均高于正常对照组（P < 0.05）。结论：MMP-2在糖尿病模型大鼠视网膜上表达,并随着糖尿病大鼠模型维持时间的延长呈递增趋势,说明MMP-2与DR有关。     

肌苷对脑缺血再灌注损伤神经细胞巢蛋白表达的影响

①目的　研究大鼠缺血性脑损伤后神经细胞巢蛋白 (Nestin)变化的规律 ,探讨肌苷治疗中枢神经缺血性损伤的作用机制。②方法　成年健康雌性SD大鼠 6 8只 ,以线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型。随机分为治疗组 (腹腔注射 5 0 g/L肌苷 10 0mg/kg)和对照组 (腹腔注射生理盐水 10 0mg/kg) ,每组再随机分为缺血1.5h再灌注 2h、6h、12h、2 4h、2d、3d、7d、14d组 (n =4 ) ,另取 4只作假手术组。应用原位杂交技术检测脑缺血再灌注后脑组织Nestin的表达。③结果　假手术组皮质、纹状体和室旁区Nestin表达很弱。对照组缺血侧皮质除 2h以外、纹状体除 2、6h以外、室旁区除 2h、6h、14d以外各时间点Nestin的表达均明显高于假手术组 (t =1.95～4 7.2 1,P <0 .0 5 )。治疗组Nestin表达较对照组在皮质于 2h、6h、7d、14d、在纹状体于 14d有所降低 ,在皮质、纹状体及室旁区于 3d均显著升高 ,在纹状体、室旁区于 7d显著升高 (t=4 .37～ 18.0 3,P <0 .0 5 )。④结论　肌苷可以促进大鼠脑缺血再灌注后Nestin的表达 ,可能具有促进神经干细胞生成的作用。     

失血性休克复苏大鼠心脏P-选择素表达与心脏功能的关系

目的 观察失血性休克复苏大鼠左心室功能与心肌组织中P-选择素表达的关系以及左旋精氨酸(L-Arg)对其影响,探讨失血性休克复苏大鼠心脏的损伤及保护机制.方法 健康SD大鼠30只,随机均分成正常对照组(NC组)、失血性休克复苏组(HS组)和左旋精氨酸治疗组(L-Arg组),通过生理记录仪观察左心功能的变化,采用酶联免疫吸附试验测定血清、心肌组织P-选择素含量,免疫组化方法检测心肌P-选择素蛋白表达.结果 休克大鼠复苏后3 h,HS组和L-Arg组血浆、心肌的P-选择素含量明显高于NC组;左心室内压最大变化速率、左心室内收缩压明显低于NC组,左心室舒张末期压明显高于NC组.但L-Arg组血浆、心肌组织中的P-选择素含量低于HS组,上述心功能指标的异常变化明显减轻.结论 大鼠失血性休克复苏后,P-选择素参与心脏损伤过程,L-Arg对P-选择素表达有抑制作用,对心脏功能具有保护作用.     

骨髓基质细胞经颈内动脉移植对短暂脑缺血大鼠VEGF表达和学习记忆的影响

目的 观察骨髓基质细胞（BMSCs）经颈内动脉移植对短暂脑缺血大鼠的脑组织血管内皮生长因子（VEGF）表达及学习记忆的影响.方法 5只短暂脑缺血模型大鼠移植标记有18F-FDG的BMSCs,仅用于正电子发射型计算机断层显像（positron emission computed tomography,PET）观察.16只模型大鼠采用数字表法随机分为移植组（n=8）和对照组（n =8）,另设假手术组（n=8）.移植组由颈内动脉种植BMSCs,对照组种植PBS,假手术组无特殊处理.14天后行脑组织HE染色,VEGF免疫组化染色.另设3个组,于移植后14和90天行Morris水迷宫实验.结果 BMSCs注射后3h,细胞主要分布于双侧颅内.移植后第14天,HE染色观察,与对照组比较,移植组神经元缺失较少,微血管增生明显.移植组在海马脑组织的VEGF阳性细胞数高于另两组,移植组为12.14±1.53个,对照组为9.53±1.31个,假手术组为7.23±0.77个,差异有统计学意义（P＜0.05）.移植后第14天,移植组的定位航行潜伏期和穿越平台的次数为46.55±6.92s和4.50±1.05次,对照组为44.50±5.09s和5.50±1.05次,假手术组为27.83±5.80s和7.17±1.17次.移植组和对照组的定位航行潜伏期延长,穿越平台的次数减少,与假手术组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.移植后第90天,移植组的定位航行潜伏期和穿越平台的次数为25.85±2.20s和7.50±1.05次,对照组为39.25±4.02s和5.83±0.75次,假手术组为24.62±2.63s和7.67±0.82次.对照组的定位航行潜伏期仍延长,穿越平台的次数仍减少,与另两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 BMSCs移植可以减少短暂脑缺血大鼠神经细胞的丢失,促进脑组织VEGF的表达和血管增生,改善学习和记忆功能.     

缺血后处理对大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤的保护作用及其机制

目的: 观察缺血后处理(I-postC)对大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后肺损伤的影响,探讨I-postC的器官保护作用及可能机制。方法: 24只Wistar大鼠随机分为对照组、缺血再灌注组(IR组)和I-postC组(n=8)。橡皮带结扎动物双后肢根部4h后松解橡皮带恢复血流灌注4h,制作大鼠肢体缺血再灌注动物模型。对照组橡皮带松弛环绕大鼠双后肢根部,不阻断血流。I-postC组大鼠在血流再灌注前,行缺血5 min-再灌注5 min,重复3次,再恢复血流灌注4h。实验结束留取血液及肺组织标本,测定各组大鼠血液中性粒细胞CD18阳性细胞百分率、血浆可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)和P-选择素(P-selectin)水平以及肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和P-selectin水平,测定各组大鼠动脉血气指标氧分压(PaO₂)和二氧化碳分压(PaCO₂),光镜及电镜下观察各组大鼠肺组织的形态学改变。结果: 与对照组比较,IR组大鼠外周血中CD18阳性细胞百分率明显升高(P<0.01);血浆和肺组织中sICAM-1及P-selectin水平均升高(P<0.01);肺组织中MPO活性升高(P<0.01);PaO₂和PaCO₂明显降低(P<0.01)。IR组大鼠肺组织镜下可见肺间质内血管扩张、充血,中性粒细胞浸润,血管周间隙增大,肺泡间隔增宽,肺泡腔内有渗出液,支气管上皮细胞脱落坏死。与IR组比较,I-postC组上述生化指标检测值明显降低(P<0.01),PaO₂和PaCO₂明显升高(P<0.01);血浆及肺组织炎性因子活性降低(P<0.01);镜下可见肺组织损伤减轻。结论: I-postC可通过抑制炎症反应减轻大鼠LIR后的肺损伤。     

创伤性休克时左旋精氨酸降低P-选择素的表达

目的探讨创伤性休克时血浆及重要脏器P-选择素的分布、变化及其意义。方法复制大鼠创伤性休克模型,24只大鼠分为实验对照组、创伤休克组、左旋精氨酸(L-Arg 100 mg/kg·b.w.)治疗组,采用免疫组化方法(SABC法)检测大鼠心脏、肝脏、肺及小肠P-选择素的表达,同时采用ELISA测定大鼠血清中P-选择素水平。结果对照组大鼠重要脏器中P-选择素除了在肺中有少量表达外,其他脏器未见阳性表达,血清中的P-选择素有表达。休克后4 h,大部分脏器及血清中的P-选择素表达显著升高,L-Arg治疗组较休克组P-选择素明显下降,有统计学意义。结论创伤性休克可导致体内血清及重要脏器P-选择素大量表达,这与休克时存在明显的微循环紊乱和内皮功能障碍有关。L-Arg减少了P-选择素的合成其原因可能是促进了内皮性NO的合成。     

脑出血模型大鼠脑组织胰岛素样生长因子-1表达的实验研究

目的：观察脑出血模型大鼠脑组织胰岛素样生长因子-1（IGF-1）的表达及其对细胞凋亡的影响。方法随机将105只大鼠分为正常对照组、假手术组及脑出血组,应用立体定向技术,将自体未抗凝血注入大鼠基底节区制备脑出血模型;分别在造模后6、24、48、72h和1周将大鼠断头取脑制作标本,采用TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡、荧光定量RT-PCR检测IGF-1 mRNA表达,免疫组化分析IGF-1表达。结果脑出血后6h血肿周围脑组织IGF-1及TUNEL染色阳性细胞表达升高,其中IGF-1在24h达高峰,48h开始下降,而细胞凋亡于72h达高峰,1周开始下降,表达均明显高于假手术组和正常对照组（P〈0.05,P〈0.01）;且IGF-1表达与细胞凋亡数呈正相关（P〈0.05）。结论脑出血后IGF-1表达上调,参与了脑出血的病理生理过程,可能对脑出血继发神经损伤起重要的保护作用。     

EPO对大鼠脑缺血-再灌注后炎症损伤的保护作用

目的探讨促红细胞生成素(EPO)对大鼠脑缺血-再灌注的保护作用。方法将216只雄性大鼠随机分为3组(n=72):假手术组,模型组,EPO干预组;每组再分为缺血-再灌注后3、6、12、24、48和72h6个亚组,每亚组大鼠各12只,采用线栓法制备一侧大脑中动脉缺血模型。模型组和EPO干预组缺血2h后再灌注,EPO干预组于缺血2h后腹腔注射EPO(3 000U/kg),假手术组和模型组于同一时间点注射等量生理盐水,然后分别于上述6个时间点断头取材,标本分别用于免疫组化、Westernblot分析海马组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)的表达。结果与假手术组比较,模型组ICAM-1和VCAM-1蛋白的表达明显增多(P<0.05);与模型组比较,EPO干预组ICAM-1和VCAM-1蛋白的表达明显减少(P<0.05)。结论 ICAM-1和VCAM-1蛋白在大鼠脑缺血-再灌注后的炎症反应中起重要作用,EPO对此过程具有抑制作用,从而发挥其神经保护作用。     

对大鼠脑缺血再灌注后tTG表达的影响

目的   研究胱氨酸（Cystamine）对全脑缺血再灌注损伤后大鼠海马组织型转谷氨酰胺酶（tTG）表达的影响。方法    用四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型。将SD大鼠随机分为假手术组（n=8）,全脑缺血组（n=48）及全脑缺血治疗组（n=48）,全脑缺血组和全脑缺血治疗组按照缺血再灌注时间点的不同再将大鼠随机分为6h、12h、1d、3d、5d、7d六个亚组,每个亚组8只。全脑缺血治疗组大鼠给予Cystamine腹腔注射（0.15mg/g）,全脑缺血组和假手术组大鼠给予生理盐水腹腔注射。TUNEL染色法观察细胞凋亡水平的变化,免疫组织化学方法分析再灌注后不同时间点海马CA1区tTG表达水平的变化。另取52只大鼠随机分为假手术组（n=4）、全脑缺血组（n=24）及全脑缺血治疗组（n=24）,全脑缺血组和全脑缺血治疗组按照不同时间点每个亚组4只,免疫印迹方法测定tTG的表达。结果   缺血组再灌注24h后TUNEL阳性细胞明显增加,1、3、5、7d亚组与假手术组差异有统计学意义（P<0.05）;治疗组与缺血组相比,在1、3、5、7d相应时间点亚组TUNEL阳性细胞数减少（P<0.05）。治疗组海马CA1区tTG平均阳性细胞数于全脑缺血后12h开始下降,3、5、7d亚组均明显低于缺血组（P<0.05）。治疗组海马tTG蛋白水平于缺血再灌注后1d开始降低,3、5和7d亚组显著低于缺血组（P<0.05）。结论   Cystamine可以降低大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区tTG的表达,从而对神经元细胞起到一定的保护作用。