骨桥蛋白基因在两种颅咽管瘤中的表达差异及意义

目的 研究骨桥蛋白基因(OPN mRNA)在两种不同病理类型颅咽管瘤的表达差异及意义.方法 收集41例经手术切除的颅咽管瘤标本,采用SYBR荧光实时定量PCR法检测OPN mRNA在肿瘤组织的表达,并对表达结果 进行统计学分析.结果 造釉细胞型颅咽管瘤OPN mRNA表达量为(42.38±5.41)×103 copies/μg,鳞状乳头型颅咽管瘤OPN mRNA表达量为(1.26±0.14)×103 copies/μg,造釉细胞型颅咽管瘤OPNmRNA表达量显著性高于鳞状乳头型颅咽管瘤(P＜0.01).结论 两种病理类型颅咽管瘤OPN mRNA表达存在显著性差异,此差异性可能与两种病理类型颅咽管瘤的预后和复发风险有关.     

Cyclin D1在结缔组织生长因子诱导肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用

目的:探讨Cyclin D1在结缔组织生长因子(CTGF)促进肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖中的作用.方法:分离并培养SD大鼠肺动脉中膜平滑肌细胞,实验使用第3～7代细胞.经鉴定的PASMCs给予浓度分别为5 ng/ml、10 ng/ml、25 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml CTGF培养48 h.采用WST-1检测细胞增殖;实时荧光RT-PCR和Western blot方法检测Cyclin D1mRNA及蛋白的表达.结果:随着CTGF浓度的增加,各组PASMCs的OD值均逐渐升高,当浓度达到5 ng/ml时与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),呈浓度依赖性;随着CTGF浓度的增加,各组PASMCs的Cyclin D1 mRNA和蛋白均较对照组表达升高.结论:CTGF通过上调Cyclin D1表达促进PASMC增殖.     

CD45、ICAM-1和MIB-1在颅咽管瘤中的表达及意义

目的研究颅咽管瘤中白细胞共同抗原CD45、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和细胞周期相关核抗原Ki-67的抗体(MIB-1)蛋白的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测CD45、ICAM-1及MIB-1蛋白在30例颅咽管瘤组织中的表达。结果 CD45在颅咽管瘤组织普遍表达,ICAM-1主要在肿瘤内层细胞及间质细胞表达,MIB-1主要在颅咽管瘤基底细胞层表达。CD45、ICAM-1和MIB-1的阳性表达在不同病理类型的颅咽管瘤有明显差异,造釉细胞型颅咽管瘤的表达明显高于鳞状乳头型颅咽管瘤。结论不同病理类型颅咽管瘤组织炎症和细胞增殖性存在显著差异并可能影响其预后,颅咽管瘤细胞可产生ICAM-1参与炎症反应,颅咽管瘤组织炎症的差异与ICAM-1蛋白表达有关。     

颅咽管瘤中RARα及PPARβ/δ表达与RA作用的相关性

目的检测颅咽管瘤中RARα及PPARβ/δ的表达,分析其表达量与RA作用效果的相关性,探讨RA靶向治疗颅咽管瘤的分子机制.方法 RT-PCR法检测31例体外培养的颅咽管瘤细胞中PPARβ/δ、RARα的表达情况,MTT法测定RA对PPARβ/δ、RARα不同表达的颅咽管瘤细胞的抑制率,分析其表达情况与RA作用是否存在相关性.结果 (1)RT-PCR结果显示,不同颅咽管瘤细胞中PPARβ/δ、RARα表达存在差别.31例原代培养的颅咽管瘤细胞按其核受体表达不同分为PPARβ/δ>RARα、RARα>PPARβ/δ、RARα>>PPARβ/δ3组;(2)MTT结果显示在相同RA药物作用下RARα>>PPARβ/δ组的抑制率明显高于RARα>PPARβ/δ组、PPARβ/δ>RARα和对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 (1)PPARβ/δ、RARα的表达可作为评估RA治疗颅咽管瘤效果的有效指标.PPARβ/δ表达低的颅咽管瘤细胞对RA更敏感;(2)靶向升高RARα或者靶向降低PPARβ/δ的表达都有益于颅咽管瘤的治疗.     

颅咽管瘤p21及hnRNP A2/B1表达的研究

目的分析颅咽管瘤中细胞增殖相关基因p21及hnRNP A2/B1在蛋白水平的表达,探讨其在颅咽管瘤细胞增殖中的意义。方法采用免疫组化S-P法分别检测p21及hnRNP A2/B1在81例颅咽管瘤中的表达,分别计数p21标记指数(p21 LI)和hnRNP A2/B1标记指数(hnRNP A2/B1 LI),对检测结果进行统计学分析。结果①hnRNP A2/B1主要在颅咽管瘤细胞的核中表达,部分在胞浆中表达,造釉细胞型颅咽管瘤的hnRNP A2/B1 LI(51.723±8.313)%显著高于鳞状乳头型(45.347±7.513)%,P<0.05;②p21在颅咽管瘤细胞核中表达,鳞状乳头型颅咽管瘤中的p21 LI(34.047±6.772)%显著高于造釉细胞型肿瘤(28.235±4.600)%,P<0.05;③p21及hnRNPA2/B1之间在颅咽管瘤中的表达呈负相关(r=-0.238)。结论p21及hnRNP A2/B1在不同类型颅咽管瘤中的表达分别呈明显的差异性。造釉细胞型颅咽管瘤细胞活跃的增殖能力,可能是影响其预后的重要机制之一。     

CRABP-Ⅱ、FABP-5在颅咽管瘤中的表达

目的检测颅咽管瘤中CRABP-Ⅱ、FABP-5的表达,分析其与颅咽管瘤关系,探讨维甲酸靶向治疗颅咽管瘤的分子机制.方法采用荧光免疫组织化学技术(Fluorescent Immunostaining)分别检测39例AE、10例SP两种亚型颅咽管瘤及20例正常脑组织中CRABP-Ⅱ、FABP-5蛋白表达情况,分析2种类型颅咽管瘤细胞及正常脑组织细胞中其表达有无差异.结果 (1)49例颅咽管瘤与20例正常脑组织中CRABP-Ⅱ,FABP-5的表达差异无统计学意义(P>0.05);(2)在颅咽管瘤亚型中CRABP-Ⅱ及FABP-5表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 CRABP-Ⅱ、FABP-5不能作为RA作用颅咽管瘤细胞的靶点,CRABP-Ⅱ/FABP-5稳态在本实验中不存在.     

褐藻多糖硫酸酯对TGF-β1孵育的人肾小球系膜细胞MMP-2、TIMP-2表达的影响

目的观察褐藻多糖硫酸酯(Fucoidan FPS)对TGF-β1下刺激人肾小球系膜细胞MMP-2、TIMP-2分泌的影响,探讨其在慢性肾衰竭(Chronic Renal Failure CRF)防治中的意义。方法用TGF-β1作为刺激因子,孵育体外培养的人肾小球系膜细胞(Human Mesangial cell HMC),并分别用不同浓度的FPS干预,具体分组如下:模型组(TGF-β14 ng/ml)、FPS高剂量组(TGF-β14 ng/ml+FPS 100 ug/ml)、FPS中剂量组(TGF-β14 ng/ml+FPS 50 ug/ml)、FPS低剂量组(TGF-β14 ng/ml+FPS25 ug/ml)、FPS对照组(FPS 100ug/ml)、正常对照组。ELISA技术检测HMC培养上清液中MMP-2、TIMP-2蛋白表达水平,Re-altime PCR技术检测HMC的MMP-2、TIMP-2 mRNA表达水平。结果与正常对照组相比,TGF-β1能减少HMC的MMP-2蛋白及mRNA表达(P0.01),增加HMC的TIMP-2蛋白及mRNA表达(P0.01);FPS能阻断TGF-β1刺激下HMC的MMP-2蛋白及mRNA表达减少、TIMP-2蛋白及mRNA表达增加(P0.01,P0.05);FPS对照组与正常对照相比MMP-2、TIMP-2蛋白及mRNA表达差异无统计学意义(P0.05)。结论褐藻多糖硫酸酯能阻断TGF-β1刺激下人肾小球系膜细胞MMP-2、TIMP-2表达的比例失衡,阻断了由MMP-2、TIMP-2比例失衡导致的ECM积聚,从而延缓了慢性肾衰竭的进展。     

累及三脑室底部颅咽管瘤与下丘脑的生长关系

目的 通过检测累及三脑室底部颅咽管瘤组织中白细胞共同抗原CD45和细胞间粘附分子(ICAM-1)的表达来分析肿瘤组织与下丘脑的生长关系.方法 采用免疫组化SP法检测CD45及ICAM-1蛋白在30例累及三脑室底部颅咽管瘤组织中的表达.结果 CD45标记的炎症反应在累及三脑室底部的颅咽管瘤组织广泛存在,ICAM-1主要在肿瘤内层细胞及间质细胞表达,向三脑室底部生长的肿瘤基底层细胞无阳性表达.CD45及ICAM-1的阳性表达在不同病理类型的颅咽管瘤有明显差异,造釉细胞型颅咽管瘤的表达显著高于鳞状乳头型颅咽管瘤(P＜0.05).结论 累及三脑室底部颅咽管瘤与下丘脑间主要为炎症粘连而非侵袭性生长,不同病理类型颅咽管瘤炎症差异可能影响其预后.     

人肾小管上皮细胞转分化过程中血管内皮细胞生长因子及其受体表达的变化

目的探讨转化生长因子β1(TGFβ1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化过程中,血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体表达的变化.方法用不同浓度的TGFβ1诱导HK-2转分化,细胞免疫化学方法检测血管平滑肌肌动蛋白(α-SMA),反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测α-SMA和VEGF mRNA表达,酶联免疫分析(ELISA)检测上清中的VEGF,免疫印迹检测细胞裂解物中的VEGF及其受体.结果(1)HK-2细胞在TGFβ1(5、8 ng/ml)刺激后,α-SMA免疫染色均为阳性,以8 ng/ml时最强;TGFβ1呈剂量和时间依赖诱导α-SMA mRNA表达(P＜0.001).(2)TGFβ1诱导HK-2细胞转分化过程中,VEGF从基因到蛋白水平呈双相改变:0.1和1 ng/mlTGFβ1刺激后VEGF mRNA和蛋白表达强度均高于对照组(P＜0.001);而3、5和8 ng/ml TGFβ1刺激后表达强度则低于对照组(P＜0.001).8 ng/mlTGFβ1刺激较短时间(12和24h),VEGF mRNA和蛋白表达强度高于对照组(P＜0.001);而刺激较长时间(36、48和72 h),mRNA和蛋白表达强度均低于对照组(P＜0.001).(3)TGFβ1诱导HK-2细胞转分化过程中,以浓度和时间依赖性方式诱导VEGF受体表达增强(P＜0.001).结论TGFβ1诱导HK-2细胞转分化过程中,VEGF受体表达增强,而VEGF表达出现双相变化,高浓度的TGFβ1刺激可引起VEGF表达下调.     

GH/IGF1 轴对非酒精性脂肪肝病脂代谢的影响及可能机制研究

目的??探讨非酒精性脂肪肝病（NAFLD）中生长激素 / 胰岛素样生长因子 1（GH/IGF1）轴对肝内脂代谢的影响。方法??利用 1?nmol 的游离脂肪酸（FFA）诱导人肝细胞 HL-7702（L02）复制 NAFLD 细胞模型,检测模型中生长激素受体（GHR） 、胰岛素样生长因子 1（IGF1） 、胰岛素样生长因子结合蛋白 3（IGFBP3）基因及蛋白表达情况 ; 再将 NAFLD 细胞模型设为未加药组、25?ng/ml?rhGH 组、250?ng/ml?rhGH 组、50?ng/ml rhIGF1 组及 500?ng/ml?rhIGF1 组,分别检测各组用药 24?h 后脂肪酸合成酶（FASN） 、固醇调节元件结合蛋白 （SREBP-1C） 、 过氧化物酶体增殖剂激活受体 γ （PPAR-γ）的 mRNA 表达, 以及 GHR、 IGF1、 IGFBP3 mRNA水平 ; 同时检测 24、48 和 72?h 时模型三酰甘油（TAG）的变化。正常细胞作为各组的对照组（L02 组） 。结果?FFA 诱导 NAFLD 模型 24?h 后,各组细胞中 GHR、IGFBP3?mRNA 表达与 L02 组比较,差异有统计学意义（ P ?<0.05） ,GHR?mRNA 表达高于 L02 组,IGFBP3?mRNA 表达低于 L02 组,但 IGF1?mRNA 表达与 L02 组比较,差 异无统计学意义（ P ?>0.05） 。FFA 诱导 48?h 时 IGF1、IGFBP3 蛋白水平与 L02 组比较,差异有统计学意义（ P ?<0.05） ,IGF1、IGFBP3 蛋白水平均低于 L02 组。正常肝细胞与 NAFLD 细胞在 25?ng/ml?rhGH、250?ng/ml?rhGH、50?ng/ml?rhIGF1 及 500?ng/ml?rhIGF1?4 种干预 24?h 后,细胞内 TAG 含量与未加药组比较,差异有统计学意义（ P ?<0.05） ,TAG 含量均高于未加药组 ; 但 72?h 后细胞内 TAG 含量低于未加药组（ P ?<0.05） 。干预 24?h 时NAFLD 细胞的 PPAR-γ?mRNA 与未加药组比较, 差异有统计学意义（ P ?<0.05） , PPAR-γ?mRNA 水平低于未加药组; NAFLD 细胞中 4 种干预后 GHR、IGF1、IGFBP3?mRNA 表达与未加药组比较, 差异有统计学意义（ P ?<0.05） ,GHR、IGF1、IGFBP3?mRNA 表达高于未加药组,但 NAFLD 细胞组 GHR、IGF1、IGFBP3?mRNA 表达低于 L02 组（ P ?<0.05） 。结论??NAFLD 中 GH/IGF1 轴表达抑制 ; GH/IGF1 轴参与调控肝内 TAG 代谢,并通过抑制 PPAR-γ 参与调控 NAFLD 中脂代谢 ; GH/IGF1 轴与 FFA 之间可能存在负反馈调节。     

颅咽管瘤组织炎症的研究及意义

目的研究不同病理类型颅咽管瘤组织炎症的差异、机制及意义。方法收集30例颅咽管瘤临床病例标本，采用免疫组化S—P法检测白细胞共同抗原CD45以标记炎症细胞，并检测细胞间黏附分子ICAM-1的表达。结果CD45标记的炎症反应在颅咽管瘤组织广泛存在，ICAM-1在肿瘤细胞、炎症细胞及血管内皮细胞都有表达。造釉细胞型颅咽管瘤组织炎症反应及ICAM-1的阳性表达显著高于鳞状乳头型颅咽管瘤（P〈0．05），肿瘤炎症与ICAM-1表达显著相关（P〈0．05）。结论不同病理类型颅咽管瘤组织炎症存在显著差异，颅咽管瘤组织炎症的差异与ICAM-1蛋白表达有关，颅咽管瘤细胞可产生ICAM-1参与炎症反应，不同病理类型颅咽管瘤组织炎症差异可能影响其预后。     

骨形成蛋白-7对肾小管上皮细胞转分化及结缔组织生长因子表达的影响

目的 观察骨形成蛋白-7(BMP-7)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人近端肾小管上皮细胞(HK-2)向间充质细胞转分化(EMT)及表达结缔组织生长因子(CTGF)的影响,探讨其抑制、逆转肾间质纤维化的可能机制.方法 将体外培养的HK-2细胞分为对照组,3 ng/ml TGF-β1组,TGF-β1同时加不同浓度BMP-7(100～400 ng/ml)组.相差显微镜观察细胞形态改变;间接免疫荧光测定E-cadherin的表达;RT-PCR和Western印迹分别检测α-SMA、E-cadherin、CTGF mRNA和蛋白的表达.结果 3 ng/ml TGF-β1刺激48 h后,HK-2细胞由立方形铺路石样转变为梭形长条样;去除TGF-β1,再加入200 ng/ml BMP-7干预48 h,可见到大部分细胞逆转回原来的形态.免疫荧光显示,E-cadherin蛋白在正常HK-2细胞质膜高表达;3 ng/ml TGF-β1刺激后,E-cadherin表达明显减弱;去除TGF-β1,再加入200 ng/ml BMP-7干预后,E-cadherin表达重新恢复.RT-PCR及Western印迹显示,3 ng/mlTGF-β1刺激48 h后,α-SMA mRNA及蛋白表达明显上调、E-cadherin mRNA及蛋白表达明显减少,同时CTGF mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.01);BMP-7与TGF-β1共同刺激48 h后,BMP-7呈剂量依赖性抑制TGF-β1诱导下α-SMA mRNA及蛋白的表达,并逐渐恢复E-cadherin mRNA及蛋白的表达,同时下调CTGF mRNA及蛋白的表达,400 ng/ml BMP-7组与TGF-β1组相比差异有统计学意义(P<0.01).结论 BMP-7能阻断并逆转TGF-β1诱导的EMT,下调CTGF的表达,这可能是其逆转肾间质纤维化的重要作用机制.     

颅咽管瘤组织炎症和CD45表达及意义

目的 探讨颅咽管瘤组织炎症和白细胞共同抗原(CD45)的表达及意义.方法 检测30例颅咽管瘤组织病理,采用免疫组化SP法检测CD45蛋白在30例颅咽管瘤组织炎症中的表达,并计算CD45标记指数(CD45 LI).结果 CD45在颅咽管瘤组织普遍表达,造釉细胞型颅咽管瘤CD45 LI显著高于鳞状乳头型颅咽管瘤(P＜0.05).结论 颅咽管瘤炎症可能是肿瘤与周围组织结构粘连的重要因素,不同病理类型颅咽管瘤组织炎症差异存在显著性,不同病理类型颅咽管瘤组织炎症差异可能影响其手术切除及预后.     

视黄结合蛋白4与脂肪酸合成酶及肝脂肪酶的相关研究

目的 研究视黄醇结合蛋白4(RBP4)对脂肪酸合成酶及肝脂肪酶的影响.方法 用不同质量浓度(0、10、100及1 000 ng/mL)RBP4培养基于预肝母细胞癌(HepG2)细胞,采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测脂肪酸合成酶(FAS)及肝脂肪酶(HL)基因mRNA表达水平,采用分光光度法分析FAS及HL活性.结果 ①不同质量浓度RBP4处理12 h后,100 ng/mL RBP4处理组HepG2细胞FAS mRNA表达较对照组有升高趋势(P=0.087);以100 ng/mL RBP4处理12 h后的HepG2细胞FAS mRNA表达较培养1 h显著升高(P＜0.05);培养24 h较培养1 h有升高趋势(P=0.098).②不同质量浓度,RBP4刺激HepG2细胞10 min后,1 000 ng/mL RBP4处理组HL mRNA表达较对照组及10、100 ng/mL RBP4处理组显著升高(P值分别＜0.01、0.05);20 min后,1 000及10 ng/mL RBP4处理组较对照组显著升高(P值均＜0.01);30 min后,各组间的差异无统计学意义(P＞0.05).③HepG2细胞体外培养给予不同质量浓度RBP4孵育24 h后,10、1 000 ng/mL RBP4处理组的FAS酶活性均较对照组显著升高(P值均＜0.05),随着RBP4浓度升高FAS酶活性呈升高趋势;而HL酶活性无明显变化.结论 100 ng/mL RBP4能增加FAS mRNA的表达,RBP4可能影响FAS酶活性,FAS酶活性随着RBP4质量浓度的增加有增强趋势.高质量浓度RBP4短时间干预可增加HepG2细胞HL mRNA的表达,未见RBP4对HL酶活性有影响.     

颅咽管瘤中RARα及PPARβ/δ表达与RA作用的相关性

目的检测颅咽管瘤中RARα及PPARβ/δ的表达,分析其表达量与RA作用效果的相关性,探讨RA靶向治疗颅咽管瘤的分子机制.方法 RT-PCR法检测31例体外培养的颅咽管瘤细胞中PPARβ/δ、RARα的表达情况,MTT法测定RA对PPARβ/δ、RARα不同表达的颅咽管瘤细胞的抑制率,分析其表达情况与RA作用是否存在相关性.结果 RT-PCR结果显示,不同颅咽管瘤细胞中PPARβ/δ、RARα表达存在差别.31例原代培养的颅咽管瘤细胞按其核受体表达不同分为PPARβ/δ>RARα、RARα>>PPARβ/δ、RARα>PPARβ/δ3组;MTT结果显示在相同RA药物作用下RARα>PPARβ/δ组的抑制率明显高于RARα>PPARβ/δ组、PPARβ/δ>RARα和对照组,差异有统计学意义(P<0.01).结论 PPARβ/δ、RARα的表达可作为评估RA治疗颅咽管瘤效果的有效指标.PPARβ/δ表达低的颅咽管瘤细胞对RA更敏感;靶向升高RARα或者靶向降低PPARβ/δ的表达都有益于颅咽管瘤的治疗.     

XIAP基因与耐紫杉醇卵巢癌细胞A2780/Taxol耐药关系的研究

目的 探讨X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）基因与卵巢癌对紫杉醇耐药的相关性。方法 以5、10、20、40、80、160、320 ng/mL的紫杉醇处理卵巢癌紫杉醇敏感细胞A2780和耐药细胞A2780/T,噻唑蓝（MTT）比色法检测各组细胞的抑制率（IR）, 逆转录实时荧光定量PCR（RT-qPCR）、蛋白质印记（Western blot）检测紫杉醇100 ng/mL处理A2780和A2780/T细胞后XIAP基因和蛋白的表达;将A2780/T细胞分为空转染组（转染空载体质粒）、小干扰RNA（siRNA）-XIAP（siRNA-XIAP）组（转染siRNA-XIAP质粒）、非特异性转染组（转染非特异性质粒）、空白对照组（不转染质粒）,RT-qPCR和Western blot检测各组细胞XIAP基因和蛋白的表达,并加入含不同质量浓度的紫杉醇（0、1 000、1 500、2 000、2 500 ng/mL）,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 不同质量浓度紫杉醇处理后,A2780细胞IR随紫杉醇质量浓度的增加而增高（P<0.05）,A2780/T细胞IR无明显变化。紫杉醇100 ng/mL处理A2780和A2780/T细胞后,A2780细胞XIAP mRNA的表达低于紫杉醇未处理组（P<0.05）,A2780/T细胞中XIAP mRNA的表达与紫杉醇未处理组差异无统计学意义(P>0.05),但A2780/T细胞XIAP mRNA和蛋白表达均高于A2780紫杉醇处理组（P均<0.05）;siRNA-XIAP组XIAP mRNA和蛋白的表达均低于其他各组（P<0.05）,在紫杉醇2 000 ng/mL及2 500 ng/mL作用下,siRNA-XIAP组凋亡率高于其他各组（P<0.05）。结论 卵巢癌对紫杉醇耐药与XIAP基因的高表达有关,特异性的siRNA可通过降低XIAP的表达,促进细胞凋亡,增加耐药癌细胞对紫杉醇的敏感性。     

右美托咪定对LPS诱导星形胶质细胞MCP-1分泌的影响

目的 研究右美托咪定对脂多糖(LPS)诱导大鼠星形胶质细胞MCP-1 mRNA分泌的影响.方法 培养原代大鼠星形胶质细胞,待诱导分化成熟,免疫组化检测α-2A肾上腺受体的表达;不同浓度LPS刺激星形胶质细胞,观察LPS浓度与MCP-1 mRNA表达的量效关系;随后将细胞随机分为6组:对照组(control组)、LPS(200 ng/ml)刺激组(LPS组)、右美托咪定(DEX)500 ng/ml孵育组(DEX组)、DEX(10、100、500 ng/ml)+LPS(200 ng/ml)组[DEX(10、100、500 ng/ml)+LPS组],荧光实时定量PCR检测各组MCP-1 mRNA的表达.结果 α-2A肾上腺受体在星形胶质细胞表达,与细胞标志物GFAP完全共标;不同浓度LPS刺激可引起MCP-1剂量依赖性的表达增加(F(6,41)=289.35,P<0.001),LPS刺激引起MCP-1 mRNA表达量增加的ED50为150.8 ng/ml,ED95为344.1 ng/ml,r=0.86;与LPS组相比,不同浓度右美托咪定均可抑制LPS刺激引起的星形胶质细胞MCP-1 mRNA升高(F(5,21)=454.15,P<0.001).结论右美托咪定可抑制LPS刺激大鼠星形胶质细胞MCP-1 mR-NA的表达,该作用可能是其减轻疼痛的机制之一.     

Exendin-4对肿瘤坏死因子-α诱导的单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的观察exendin-4对大鼠肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、纤维连接蛋白(FN)表达的影响。方法试验分组:对照组、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组(10 ng/ml)、TNF-α(10 ng/ml)+E1组(1 nmol/L exendin-4)、TNF-α(10 ng/ml)+E5组(5 nmol/L exendin-4)、TNF-α(10 ng/ml)+E10组(10 nmol/L exendin-4)。收集24 h细胞,提取RNA,采用实时荧光定量检测细胞内MCP-1 mRNA的表达;分别在24、48 h收集各组细胞培养上清液,采用ELISA检测培养细胞上清中MCP-1、FN的浓度。结果孵育24 h时,TNF-α组MCP-1 mRNA和细胞培养上清MCP-1、FN表达较对照组明显增加(P<0.01);与TNF-α组比较,TNF-α+E5组、TNF-α+E10组细胞内MCP-1 mRNA和培养上清内MCP-1、FN含量均明显降低;孵育48 h时,TNF-α组细胞培养上清MCP-1、FN表达较对照组明显增加(P<0.01);与TNF-α组比较,TNF-α+E1组、TNF-α+E5组、TNF-α+E10组细胞培养上清内MCP-1、FN含量均明显降低;并且随着时间的延长和exendin-4浓度的增加,培养上清内MCP-1、FN含量降低更加明显。结论 Exendin-4可明显抑制TNF-α诱导的系膜细胞MCP-1 mRNA的表达,并以剂量和时间依赖的方式抑制TNF-α诱导的系膜细胞培养上清内MCP-1、FN的含量,提示exendin-4可能会对肾脏具有一定保护作用。     

Effects of Fucoidan on the expression of MMP2 and TIMP-2 in human mesangial cells cultured with growth factor β1

目的 观察褐藻多糖硫酸酯(Fucoidan FPS)对TGF-β1下刺激人肾小球系膜细胞MMP-2、TIMP-2分泌的影响,探讨其在慢性肾衰竭(Chronic Renal Failure CRF)防治中的意义.方法 用TGF-β1作为刺激因子,孵育体外培养的人肾小球系膜细胞(Human Mesangial cell HMC),并分别用不同浓度的FPS干预,具体分组如下:模型组(TGF-β14 ng/ml)、FPS高剂量组(TGF-β14 ng/ml +FPS 100 ug/ml)、FPS中剂量组(TGF-β14 ng/ml + FPS 50 ug/ml)、FPS低剂量组(TGF-β14 ng/ml + FPS 25 ug/ml)、FPS对照组(FPS 100ug/ml)、正常对照组.ELISA技术检测HMC培养上清液中MMP-2、TIMP-2蛋白表达水平,Realtime PCR技术检测HMC 的MMP-2、TIMP-2 mRNA表达水平.结果 与正常对照组相比,TGF-β1能减少HMC的MMP-2蛋白及mRNA表达 (P＜0.01),增加HMC的TIMP-2蛋白及mRNA表达 (P＜0.01);FPS能阻断TGF-β1刺激下HMC的MMP-2蛋白及mRNA表达减少、TIMP-2蛋白及mRNA表达增加(P＜0.01,P＜0.05);FPS对照组与正常对照相比MMP-2、TIMP-2蛋白及mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 褐藻多糖硫酸酯能阻断TGF-β1刺激下人肾小球系膜细胞MMP-2、TIMP-2表达的比例失衡,阻断了由MMP-2、TIMP-2比例失衡导致的ECM积聚,从而延缓了慢性肾衰竭的进展.     

颅咽管瘤中E-cadherin表达与侵袭性相关性研究

目的研究E-cadherin在颅咽管瘤中表达情况,探讨E-cadherin异常表达与颅咽管瘤侵袭相关性。方法对71例颅咽管瘤进行HE染色及E-cadherin免疫组织化学检测。结果 E-cadherin均低表达于侵袭性颅咽管瘤基底细胞和漩涡样细胞簇中;E-cadherin正常表达于非侵袭性细胞膜中。结论 E-cadherin的表达减少与颅咽管瘤的侵袭性相关,是侵袭性颅咽管瘤的标志性因子。