绿茶抗高温与香烟诱变作用的研究

目的探讨绿茶抗高温、香烟及其联合诱变作用。方法在４２℃高温下,给实验小鼠皮下注射香烟烟雾水溶物,同时用不同浓度的绿茶水灌胃,统计分析对小鼠骨髓细胞微核的影响。结果绿茶可明显抑制高温、香烟及其联合诱导小鼠骨髓细胞微核的形成,各剂量组与对照组相比有显著差异。并且绿茶低于１０ｍｇ时,抑制微核的形成与绿茶的剂量呈明显的剂量关系;在绿茶剂量高于１０ｍｇ时各剂量组之间抑制微核形成无显著差异。结论适当剂量的绿茶对高温、香烟及联合诱变作用呈明显的抑制效应。     

S_(180)肿瘤核糖核酸体外对小鼠脾淋巴细胞蛋白质合成的影响

用放射性同位素标记氨基酸参入法研究了肿瘤细胞RNA对小鼠脾淋巴细胞蛋白质合成的影响。结果表明,肿瘤RNA在体外可显著抑制脾淋巴细胞的(~3H)亮氨酸参入,这种抑制效应无肿瘤细胞来源特异性,但有组织来源特异性。其抑制效应的活性组分可能存在于RNase酶解后的Sephadex G-100凝胶过滤第二组分中。     

山茱萸的免疫药理研究——Ⅱ.总甙部分抑制免疫反应的体外效应

本文显示山茱萸总甙部分,体外抑制小鼠和人的混合淋巴细胞反应,抑制细胞毒性T细胞的诱导和增殖,抑制白细胞介素2受体表达,同时与环孢霉素A进行了比较。总甙部分对小鼠混合淋巴细胞反应的抑制效应,除剂量外,还与刺激和反应淋巴细胞来源小鼠种系有关,推测总甙部分影响主要组织相容性抗原。     

胎盘多肽对移植性肿瘤生长及骨髓抑制的影响

目的:探讨胎盘多肽(PPs)对小鼠移植性肿瘤生长及其对环磷酰胺(CP)诱导小鼠骨髓抑制作用的影响。方法:①用染料排斥试验及肿瘤体内移植试验,观察PPs对体外肿瘤细胞及体内肿瘤生长的抑制效应;②用CP诱导小鼠骨髓抑制模型,并给以PPs,观察骨髓细胞变化情况。结果:①PPs对体外培养的肿瘤细胞生长无明显的抑制作用(P>0.05),而体内肿瘤种植实验中,给药组H22胶质瘤小鼠生命延长率为70%,S180实体瘤生长抑制率为65%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);②PPs对CP诱导的骨髓细胞抑制现象有明显的保护效应(P<0.01)。结论:PPs在受试动物体内有明显的抑制肿瘤生长及对CP诱导的骨髓抑制有显著的保护作用。     

腺病毒介导的TEM8抑制小鼠在体胶质瘤模型的血管生成作用

目的探讨基于TEM8的腺病毒(Ad-TEM8)对小鼠胶质瘤G422细胞系体内外模型的生长抑制及其抗血管的生成作用。方法连续皮下注射Ad-TEM8使其激活小鼠免疫系统并收集小鼠脾淋巴细胞,将该细胞与G422细胞体外共培养,检测G422细胞的生长抑制率,并应用ELISOT检测该免疫激活淋巴细胞在体外分泌IFN-γ的能力。另构建皮下荷G422昆明小鼠在体肿瘤模型,并连续皮下注射Ad-TEM8后检测肿瘤生长速度以及瘤内血管抑制效应。结果 Ad-TEM8能有效激发小鼠产生具有肿瘤生长抑制作用的毒性效应淋巴细胞,并分泌IFN-γ。Ad-TEM8皮下注射诱导的细胞毒性作用能有效抑制在体G422肿瘤生长,产生明显的血管生成抑制作用。结论 Ad-TEM8可诱导小鼠产生细胞毒性细胞、抑制在体和体外肿瘤细胞生长,其在体抑制肿瘤生长作用机制之一可能是抑制肿瘤内血管生成。TEM8可能成为抗胶质瘤血管生成治疗的新靶标。     

家兔脊髓部分切割对电针抑制束旁核痛敏放电的影响

用玻璃微电极在39只1.8～3.0kg的家兔上记录了64个丘脑束旁核神经元对腓总神经强电流刺激的痛敏放电。电针双侧“足三里”区域后,这些神经元的痛敏放电,有的被明显抑制(占48.4％);有的被部分抑制(占18.8％);有的则基本未受影响(占32.8％)。切割脊髓双侧背柱后,16个转经元的痛敏放电和电针抑制效应均无明显变化;切割包括双侧背外侧束在内的背半部后,则11个神经元中有7个的电针抑制效应被明显削弱,而其余4个的电针抑制效应基本无改变。实验结果表明,电针对束旁核痛敏放电的抑制效应,主要是通过背外侧束中的下行纤维实现的。     

康莱特对小鼠肝癌细胞Hepa1-6增殖和凋亡的影响

目的：探讨不同浓度、不同作用时间康莱特（KLT）注射液对小鼠肝癌细胞Hepa1-6增殖和凋亡的影响。方法：采用MTT比色法观察不同浓度KLT对小鼠肝癌细胞Hepa1-6增殖抑制作用。HE染色光镜下观察细胞结构的改变。流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果：KLT对小鼠肝癌细胞Hepa1-6有明显的抑制效应,呈时间、浓度依赖性（P〈0.01）。光镜下可见细胞形态趋向良性分化。流式细胞仪检测,KLT作用Hepa1-6细胞48 h后,均出现凋亡峰,凋亡率呈浓度依赖性（P〈0.01）。结论：KLT可通过抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡来抑制小鼠肝癌细胞Hepa1-6的生长。     

马鞭草醇提物免疫活性的初步研究

目的:研究马鞭草醇提物对小鼠免疫功能的影响,探讨马鞭草抗感染的免疫活性机制。方法:用马鞭草醇提物20mg/kg对小鼠进行腹腔注射10天后,分别测定对照组给药组小鼠T淋巴细胞增殖能力、抗体形成细胞分泌抗体的能力、吞噬细胞的吞噬能力。结果:马鞭草醇提物对小鼠T淋巴细胞增殖能力、抗体形成细胞分泌抗体的能力具有明显的增强效应(P<0.05或P<0.01),对小鼠吞噬细胞功能则具有明显抑制效应(P<0.05)。结论:马鞭草醇提物能增强小鼠T、B细胞免疫功能和抑制小鼠吞噬细胞功能。     

苦参治疗Ⅰ型变态反应性疾病的机理研究

小鼠口饲苦参液或将氧化苦参碱直接作用于脾细胞均不影响IgE抗体形成。氧化苦参碱明显抑制变应原诱导的肥大细胞脱颗粒作用,其抑制效应与药物浓度呈正相关。氧化苦参碱不阻断抗原与特异性抗体结合,亦不改变细胞内cAMP水平,但能降低细胞膜的流动性,稳定细胞膜。后者可能是苦参抑制肥大细胞释放组织胺治疗Ⅰ型变态反应的药理学基础。     

NF-κB抑制介导的黄芪多糖抗人肺癌细胞效应

目的:探讨黄芪多糖(APS)的抗肿瘤效应,并研究核转录因子(NF-κB)在APS抗肿瘤效应中的作用。方法:用不同浓度的APS干预A549细胞,用MTS法检测APS对A549细胞的增殖抑制效应(量效和时效关系)。用Real-time PCR法检测APS对A549细胞p65mRNA的抑制效应,用Western blot法检测APS对A549细胞P65蛋白的抑制效应。用NF-κB荧光素酶报告基因检测APS对A549细胞NF-κB活性的的抑制效应。结果:20g/L和40g/L的APS对A549细胞具有明显的增殖抑制效应,处理48h后抑制效应最强。20g/L的APS处理A549细胞后24h对p65mRNA具有显著抑制效应,同浓度APS处理后48h对P65蛋白有显著抑制效应。荧光素酶报告基因检测显示:20g/L的APS处理A549细胞后6h可显著抑制NF-κB的转录活性。结论:APS可显著抑制人肺癌细胞A549的增殖,通过对NF-κB的抑制介导其抗肿瘤活性。     

人结核杆菌热休克蛋白65重组卡介苗疫苗的构建、表达及鉴定

目的　构建人结核杆菌热休克蛋白 6 5 (HSP6 5 )重组卡介苗 (BCG)疫苗。方法　用PCR技术从BCG基因组中扩增出抗原 85B (Ag85B)的信号肽DNA序列 ,从 pCMV MTHSP 6 5质粒中扩增出HSP6 5全长基因。利用DNA重组技术将以上两个片段插入质粒 pBCG 2 10 0的人结核杆菌HSP70启动子下游 ,构建一个分泌型的原核穿梭表达质粒pBCG SP HSP6 5。利用电穿孔的方法将该质粒转入BCG中 ,经热诱导后 ,用SDS PAG电泳来观察其表达水平。利用Westernblot来检验HSP6 5的生物学活性。结果　酶切鉴定、PCR和测序分析结果表明 ,所克隆的信号肽DNA片段和热休克蛋白 6 5DNA片段与报道结果完全一致 ,重组体的连接方向正确 ,阅读框与预期完全一致。热诱导后 ,重组BCG表达的 6 5kD (1kD =0 992 1ku)蛋白占菌体总蛋白的 35 6 7% ,占裂解物上清总蛋白的 74 0 9% ,表明重组的HSP6 5基因能在BCG中高效表达 ,表达的蛋白大部分以可溶状态存在。通过Westernblot证实分泌的该蛋白能与结核杆菌HSP6 5的抗体特异性结合。结论　成功构建分泌型原核穿梭表达质粒pBCG SP HSP6 5 ,重组的HSP6 5基因能在BCG中高效表达 ,表达的HSP6 5具有生物学活性 ,重组BCG疫苗构建成功。     

抗肝细胞生长多肽单克隆抗体及其抗独特型抗体的建立及初步应用

为了深入研究肝细胞生长因子及其与肝细胞作用的机制,本文应用单克隆抗体技术获得两株分泌肝细胞生长多肽单克隆抗体的杂交瘤细胞系:以纯化的两株单抗为抗原,我们制备了抗独特型兔血清抗体,发现它们具有肝细胞生长多肽样作用.本文应用单克隆抗体检测250例正常人和肝病病人血清(免疫斑点法),发现重型肝炎病人血清肝细胞生长多肽含量明显增高,肝性脑病病人更为明显;慢性迁延性肝炎与正常人比较无显著差异.提示血清肝细胞生长多肽升高与肝细胞损伤程度有关.4例肝癌病人3例血清肝细胞生长多肽阳性,推测肝细胞生长多肽可能参与了肝细胞癌性生长的调控     

不同损伤条件下热休克蛋白27在人晶状体上皮细胞中的表达

目的 观察不同损伤条件下热休克蛋白27( HSP27)在人晶状体上皮细胞系SRA01中的表达情况.方法 体外培养人晶状体上皮细胞系SRA01,在添加香烟烟雾凝聚物(CSC,25 mg/mL)或过氧化氢(H202,50 mmol/L)条件下培养30 min后,恢复至正常培养条件.分别于处理0,2,4,6,16,24 h时,采用免疫细胞化学、RT-PCR法检测细胞中HSP27的表达情况.结果 在生理和应激情况下,人晶状体上皮细胞内均有HSP27的表达.应激损伤后4h,HSP27 mRNA和蛋白的表达明显增加,8h达最高峰,24 h仍维持在较高水平.CSC组细胞HSP27的表达较过氧化损伤组弱(P＜0.05).结论 体外培养的人晶状体上皮细胞中存在HSP27的表达.不同损伤应激可诱导HSP27的表达增加,HSP27可能通过对抗应激作用保护晶状体上皮细胞.     

胃癌组织中HSP_(70)基因高表达与癌变关系分析

目的 :探讨胃癌组织中 HSP70 基因高表达与癌变关系。方法 :采用人的 HSP70基因探针 P17与从胃癌患者手术切除组织中采取的癌组织、癌旁组织、正常组织分别提取的RNA进行 northern杂交。结果 :杂交信号的强度为癌组织 >癌旁组织 >正常组织。结论 :HSP70 基因在组织癌变过程中表达活性明显不同 ,热休克蛋白在癌组织中显示高表达。     

肿瘤HSP70活化的γδTCR~＋CIK杀瘤活性的实验研究

目的研究肿瘤HSP70活化的TCR＋CIK对肿瘤细胞的杀伤作用,为肿瘤过继免疫治疗提供实验参考。方法培养人类的肿瘤细胞,提取HSP70,以此活化TCR＋CIK,进行肿瘤杀伤实验。结果肿瘤HSP70活化的TCR＋CIK对肿瘤细胞有明显的杀伤作用,且不受MHCⅠ类分子的限制,与未活化的CIK相比差异具有显著性（〈0.05）。结论肿瘤HSP70活化的TCR＋CIK较普通CIK更具有杀伤作用,有较好的研究应用前景。     

丹皮酚增强顺铂对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制作用

目的探讨丹皮酚和顺铂联合应用对人肝癌细胞SMMC07721的增殖抑制作用。方法用不同浓度的丹皮酚、顺铂和两药联用处理人肝癌细胞SMMC-7721,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定药物在体外对人肝癌SMMC07721细胞的增殖抑制作用,应用两药相互作用指数（CDI）进行联合用药分析。结果丹皮酚（7．81-250mg／L）和顺铂（0．625～20mg／L）单独应用均对人肝癌SMMC-7721细胞有抑制作用,呈现剂量效应关系。丹皮酚与顺铂联合应用后对人肝癌SMMC-7721细胞的抑制率明显大于单药,有显著的协同杀伤作用。结论丹皮酚与顺铂联合应用具有明显的协同抗肝癌细胞株SMMC-7721增殖的作用。     

RNA干扰热休克蛋白90α表达对NIH-3T3细胞应激反应的影响

目的 用RNA干扰方法建立稳定的热休克蛋白90α（HSP90α）抑制表达细胞株，研究热休克蛋白90α抑制表达对细胞应激反应的影响。方法 将人Hsp90αRNA干扰基因片段连接入pSilencer2．1-U6 neo载体，重组质粒pSilencerHSP90经亚克隆、纯化、测序鉴定后，用电穿孔法转染到小鼠成纤维细胞系NIH-3T3细胞内。经G418筛选、克隆分离培养，用免疫荧光、免疫印迹鉴定阳性克隆。用高温作用（44℃，40min）模拟氧化应激环境，以NIH-3T3细胞为对照，流式细胞仪测定DNA受损细胞数，分析在细胞应激状态下对细胞膜和DNA的损害及HSP90低表达对细胞应激反应的影响。结果 转染pSilencerHSP90的NIH-3T3细胞Hsp90免疫荧光染色减弱，主要分布于胞浆；与对照相比，44℃，40min时DNA的损害加重（9．2％vs18．5％，P〈0．01）。结论 建立稳定低表达HSP90αNIH-3T3细胞株；热休克蛋白90表达与其应激保护作用密切相关。     

神经递质多巴胺干预MDSC的功能及影响肿瘤生长的研究

目的：研究神经递质多巴胺对肿瘤单核细胞性髓源性抑制细胞（ MDSC ）抑制功能的干预作用及其对肿瘤生长的影响。方法：体内注射多巴胺,观察对肺癌小鼠模型肿瘤生长的影响;采用流式细胞术检测多巴胺注射对荷瘤鼠骨髓单核细胞性MDSC 数量及细胞表型的影响;以T 细胞增殖实验检测多巴胺处理对MDSC抑制功能的影响。结果：多巴胺注射可延缓肿瘤生长、明显降低单核细胞性MDSC对T细胞增殖的抑制作用,并促进MDSC的分化成熟。结论：神经递质多巴胺可干预肿瘤单核细胞性MDSC的抑制功能,可能是其抗肿瘤作用的机制之一。     

热休克蛋白70的肺保护作用研究

热休克蛋白(HSP)是生物细胞受到伤害性刺激时,由HSP基因编码合成的一类生物进化上最保守的蛋白,具有抗炎、抗氧化、抑制凋亡以及分子伴侣作用,HSP对各种刺激还具有迅速的反应能力,在许多细胞活动中扮演着重要的角色。而其中最受关注的是HSP70,尽管其在生理状态下,表达量较少,但可通过热预处理、基因转染以及药物等方法诱导其产生,从而发挥脏器保护作用。文章综述其在急性肺损伤中的作用以及相关机制的机制研究进展。