干扰素α治疗慢性乙型肝炎患者肝纤维化的实验研究

目的 观察干扰素α对慢性乙型肝炎(乙肝)患者肝组织纤维化程度的影响。方法 选取病理诊断为S₃～S₄期的16例乙肝患者,干扰素治疗期前后3次进行肝组织炎症程度及纤维化程度病理分析,免疫组化检测肝组织TGF-β1蛋白、Fas及HBcAg抗原,TUNEL方法观察肝细胞凋亡情况。同期检测血清肝纤维化指标及肝功能。结果 在S₃～S₄期,患者Fas、TGF-β1显著表达,肝细胞的DNA损伤严重。干扰素α治疗3个月后Fas抗原、TGF-β1表达程度显著下降(P<0.05);细胞凋亡程度减轻(P<0.05);肝组织HBcAg表达程度无显著改变;连续6～9个月治疗后,肝组织炎症及纤维化程度逐渐改善(P<0.05),血清肝纤维化指标及肝功能水平与治疗前差异显著。结论 干扰素α能显著改善S₃～S₄期患者肝细胞凋亡和肝组织纤维化程度,但需持续治疗。     

轻度慢性乙型肝炎患者肝组织中HBcAg及TGF-β1的表达及临床意义

目的了解转化生长因子-β1（TGF-β1）和HBcAg在轻度慢性乙型肝炎患者肝组织中的表达情况。方法采用免疫组化法（S-P）检测10例对照肝组织、90例轻度慢性乙型肝炎患者肝组织TGF-β1、HBcAg的表达。结果90例轻度慢性乙型肝炎患者肝组织TGF-β1随肝脏纤维化加重而表达增加,其差异具有显著性（P〈0．05）,正常肝组织组TGF-β1无表达;轻度慢性乙型肝炎患者肝组织HBcAg阳性率为81．11％,HBcAg是更可靠的HBV复制指标。结论TGF-β1、HBcAg的表达在轻度慢性乙型肝炎患者肝组织肝纤维化的形成和发展中起重要作用。TGF-β1、HBcAg的表达与早期临床诊断及治疗和判断预后密切相关。     

白细胞介素10对肝纤维化大鼠转化生长因子β1及受体的影响

目的 研究白细胞介素10（IL-10）对肝纤维化模型大鼠转化生长因子p1（TGF-β1）、Ⅰ型受体（TGF-RⅠ）和Ⅱ型受体（TGF-RⅡ）表达的影响。方法 27只SD大鼠随机分为对照组和CCl4诱导肝纤维化模型组。至造模第9周。模型组随机分为3组：造模结束即处死（S组）、IL-10治疗2周后处死（I组）及自然恢复2周后处死（R组）。通过免疫组织化学和ELISA方法检测各组肝脏及血清中TGF一β1、TGF-RⅠ和TGF-RⅡ含量。结果 成功建立肝纤维化模型。肝病理组织学显示I组纤维化程度明显改善。R组纤维化程度无明显改善。TGF-β1、TGF-RⅠ和TGF-RⅡ的阳性表达分别为S组明显升高（与对照组比较，P〈0．05），I组显著降低（与对照组阳性指数接近P〉0．05），R组降低，但阳性指数仍明显高于I组（P〈0．05）。血清TGF-β1在S组浓度最高，I组最低。R组较S组略有下降但仍显著高于I组（P〈0．05）。结论 外源性IL-10可能通过抑制肝组织中TGF-β1及相应受体的表达。减弱TGF-β1致纤维化的作用．对肝纤维化有一定的治疗的作用。     

暴发性肝衰竭中Fas及caspase-3与肝细胞凋亡的关系

目的研究在暴发性肝衰竭（fulminant hepatic failure，FHF）中Fas及caspase-3表达与肝细胞凋亡的关系。方法联合应用脂多糖（LPS）和D-氨基半乳糖（D—GalN）制备FHF小鼠模型；采用免疫组化方法检测肝组织Fas表达，原位杂交方法检测肝组织caspase-3表达，TUNEL法检测肝组织肝细胞凋亡；在用药后2、4、8和12h动态观察Fas、caspase-3表达及肝细胞凋亡变化。结果在FHF模型小鼠中，用药后8h可出现典型的肝细胞凋亡表现，12h仍存在肝细胞凋亡。用药后2h开始Fas有少量表达，至8h和12h表达均很多，二者比较差异无显著，与2h组比较P〈0．01，与4h组比较P〈0．05。用药后2hcaspase-3少量表达，8h达最高峰，12h较8h减少，8h与2h比较，P〈0．01，与4h和12h比较P〈0．05。Fas和caspase-3表达相一致。结论在FHF中，肝细胞凋亡的发生与Fas及caspase-3的表达增加有关，且Fas介导肝细胞凋亡的过程与caspase-3的激活有关。     

姜黄素对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1及Caspase-3表达的影响

目的：观察姜黄素（Cur）对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化及对其肝组织转化生长因子-β1（TGF-β1）及半胱天冬酶-3（Caspase-3）表达的影响．方法：采用皮下注射400g／L四氯化碳复制模型,造模后给予姜黄素治疗,观察肝组织病理改变并进行肝纤维化分级和血清生化学检测;免疫组化法测定肝组织中TGF-β1及Caspase-3蛋白表达的变化,RT-PCR检测肝组织中TGF-β1mRNA表达．结果：Cur治疗组大鼠肝纤维化程度较模型组显著减轻（P〈0．01）;并且大鼠血清ALT（nkat／L）,AST（nkat／L）,ALP（nkat／L）水平明显降低[（757±234）惦（1677±252）,（2776±238）VS（4865±403）,（1850±191）掷（4310±728）,P〈0．05或P〈0．01],A／G比值提高[（0．89±8．06）US（0．60±7．48）,P〈0．05];Cur治疗组TGF-β1mRNA,TGF-β1表达较模型组显著下降[（3．13±1．55）粥（9．56±2．01）,（0．32±0．12）傩（0．87±0．40）,P〈0．05或P〈0．01];Caspase-3表达较模型组显著升高[（5．47±1．06）US（1．56±0．61）,P〈0．05]．结论：Cur对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化具有显著的治疗作用,其作用机制可能与抑制TGF-β1表达、促进Caspase-3表达相关．     

慢性乙型肝炎患者肝组织内HBcAg表达的临床研究

目的 探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者肝组织内HBcAg的表达与肝组织的炎症、纤维化程度、血清中的HBV DNA、HBsAg以及HBeAg定量之间的关系。方法 选择安徽医科大学第一附属医院2013年3月至2014年3月收治的103例CHB患者,按病理学结果分为S1组（36例）和S2~3组（67例）。利用免疫组化技术检测肝细胞内HBcAg的表达,同时利用FirbScan仪器测定患者的肝纤维化程度。结果 在S2~3组中,肝组织HBcAg的表达与血清HBV DNA、HBsAg、HBeAg水平及肝纤维化指标均呈现显著的相关性（P<0.05）,在S1组中均无显著相关（P>0.05）。结论 HBcAg在肝细胞中的表达与机体血清中DNA、HBsAg、HBeAg水平及无创肝纤维化程度存在一定的相关性。     

酒精性肝纤维化大鼠肝组织中TGF-β1／Smads信号分子表达的变化

目的观察TGF-1／Smads信号分子在酒精性肝纤维化大鼠肝组织中的变化,探讨酒精性肝纤维化的发病机制。方法50只SD大鼠,随机分成模型组和对照组各25只。模型组用56度白酒灌胃（15m1．kg-1·d-1）致肝纤维化,对照组以等量生理盐水代替灌胃。6个月后全部处死取肝待检。采用HE染色观察肝纤维化程度,免疫组化法观察肝组织中TGF-β1蛋白的表达水平,RT-PCR法观察肝组织中TGF—β1和SmadsmRNA的表达水平。结果6个月酒精灌胃能成功制作大鼠酒精性肝纤维化模型。和对照组相比较,模型组肝组织中TGF—p1蛋白表达水平显著升高（P〈0．01）,TGF-β1,smad3,samd4mRNA表达水平显著升高（均P〈0．01）,而smad7mRNA水平显著降低（P〈0．05）。结论TGF-βl／Smads信号通路参与酒精性肝纤维化的形成过程,其中Smad7起着对肝纤维化负调控的作用。     

血清转化生长因子β1检测在慢性乙型肝炎患者的临床意义

目的：评价慢性乙型病毒性肝炎（CHB）患者血清转化生长因子β1（TGF-β1）测定的临床意义。方法：采用酶联免疫吸附法测定56例慢性乙型病毒性肝炎及肝硬化患者血清TGF-β1水平，并检测肝功能、肝纤维化指标、门静脉及脾静脉内径；以健康人20例为对照，并对患者组经3个月的常规护肝治疗后比较其症状、肝功能、肝纤维化的改善程度。结果：随着患者病情的加重和肝纤维化的进展，血清TGF-β1。水平随之上升，即对照组〈慢性肝炎轻度〈慢性肝炎中度〈慢性肝炎重度〈肝硬化（P〈0．01）；患者组血清TGF-β1与血清总胆红素（TBIL）。透明质酸（HA）、层黏连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原氨基端肽（PⅢNP）、Ⅳ型胶原（CIV）、脾门静脉内径呈正相关（P〈0．01），与血清白蛋白（ALS）呈负相关（P〈0．01）；经3个月常规护肝治疗后，患者丙氨酸转氨酶（ALT）、HA、PⅢNP改善程度与血清TCF-β1．呈负相关。结论：测定患者血清TGF—β1可反映CHB患者肝细胞损害和肝纤维化程度，并能提示预后，对临床有较高的应用价值。     

BMP-7防治实验性肝纤维化的研究

目的观察骨形态发生蛋白-7（bone morphogenefic protein-7,BMP-7）对实验性肝纤维化的影响。方法运用猪血清腹腔注射法．诱导免疫性大鼠肝纤维化模型。实验动物分为5组：肝纤维化模型组、早期治疗组、后期治疗组、预防组、对照组。预防组从实验开始、早期治疗组从实验第2周、晚期治疗组从实验第4周腹腔注射外源性BMP一7．每周3次：对照组注射等剂量生理盐水。采用免疫组化和Western印迹法检测BMP-7对实验性肝纤维化大鼠肝组织中转移生长因子β1（transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1）表达的影响。结果实验性肝纤维化大鼠的早期治疗组、后期治疗组和预防组的肝纤维化级别与模型组之间的差异均有统计学意义（P〈0．05）;预防组和治疗组中BMP-7可以抑制纤维化肝组织中TGF-β1的表达,治疗组中的TGF-β1的表达较模型组中明显减少（P〈0．05）。结论BMP-7有效预防和治疗实验性肝纤维化,其机制可能与抑制纤维化肝组织中的TGF-β1的表达有关。     

肝炎平对血吸虫性肝纤维化家兔肝组织HGF和TGF-β1表达的影响

目的 观察肝炎平对日本血吸虫感染致肝纤维化家兔肝组织肝细胞生长因子（HGF）和转化生长因子β1（TGF—β1）表达的影响。方法 实验分为3组：正常对照组、模型组及肝炎平治疗组。模型组及肝炎平治疗组通过腹部贴片法感染日本血吸虫（180条／只），6周后用吡喹酮200mg／d，整片喂服，共2d，进行杀虫治疗，杀虫治疗后肝炎平治疗组予以肝炎平治疗6周。苏木精-伊红染色观察肝脏病理形态改变。免疫组化法检测各组HGF、TGF-β1在肝内的表达；RT—PCR和Western blot法分别检测各组HGF、TGF—β1 mRNA和蛋白表达水平。结果 血吸虫性肝纤维化家兔经肝炎平治疗后肝组织内TGF-β1的蛋白和mRNA表达降低，而HGF的表达增强，与模型组比较差异有显著性意义（均P〈0．05）。结论 肝炎平抑制血吸虫性肝纤维化家兔肝组织TGF—β1的表达，促进HGF的表达，这可能是其抗血吸虫性肝纤维化作用的机制之一。     

病毒性肝炎病理分期与脾脏指标的相关性研究

目的探讨慢性病毒性肝炎病理分期与脾脏大小及脾静脉指标的关系。方法 234例慢肝患者根据肝穿结果肝纤维化程度分为S0～S4五期,按炎症分为G1～G4四期。比较慢肝不同病理分期之间脾脏指标的差异。结果 S分期之间脾脏大小及脾静脉内径差异有统计学意义,且随S分期增高而增大。G4与其它各分期之间脾脏大小、脾静脉内径差异有统计学意义,且高于其它各组。结论慢肝患者脾脏增大,脾静脉内径增宽随肝脏病理纤维化及炎症分期的增高而增大。     

超声定量检测对乙肝患者肝纤维化的评估价值

目的分析超声定量检测对乙肝患者肝纤维化程度的评估价值。方法选取160例慢性乙肝患者作为临床研究对象,所有患者均接受超声定量检测和肝组织活检,对照研究不同病理分期患者的肝包膜厚度,脾脏长径、厚度,脾门静脉内径,门静脉主干内径以及胆囊壁厚度,并评价超声定量检测对患者肝纤维化的诊断准确性。结果S0-S2期肝纤维化患者各检测指标呈上升趋势,但组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）;S3、S4期患者各检测指标均屁著高于S0、S1期患者,差异有统计学意义（P〈0．01）。超声定量检测对轻、中度肝纤维化及早期肝硬化的准确性分别为92％、97％和82％。结论超声定量检测具有无创性、可重复性等优势,且对乙肝患者肝纤维化的诊断准确率较高,可作为临床评估此类患者的重要检查方式。     

Fas在慢性丙型肝炎肝组织中的表达

目的通过检测慢性丙型肝炎患者肝组织Fas的表达,探讨Fas-FasL系统在慢性丙型肝炎发病机制中的作用及其临床意义。方法50例慢性丙型肝炎患者肝脏穿刺取肝组织做病理活检。免疫组织化学法检测肝组织中Fas的表达,分析肝组织中Fas表达与肝组织炎症、纤维化及临床分型间的关系。结果慢性丙型肝炎患者肝组织细胞中Fas表达随着肝脏炎症活动度和肝纤维化程度加重而增加(P<0.05),随着临床病情的加重而增加(P<0.05)。结论Fas-FasL系统与慢性丙型肝炎患者肝组织的炎症和纤维化有关,Fas-FasL系统介导的肝细胞凋亡可能是慢性丙型肝炎发病机制之一。     

实时剪切波超声弹性成像对慢性乙型病毒性肝炎肝纤维化分期的定量分析

目的 探讨实时剪切波超声弹性成像(SWE)技术在慢性乙型病毒性肝炎肝纤维化分期诊断中的应用价值,同时建立诊断肝纤维化分期的杨氏模量值参考范围.方法 以48例慢性乙肝患者和58例健康成人作为研究对象,测量研究对象的肝脏S5、S6段杨氏模量值,并对48例慢性乙肝患者进行病理组织学检查,将病理结果与杨氏模量值进行比较分析,得出诊断肝纤维化分期的杨氏模量值参考范围.结果 肝S5、S6段的杨氏模量值在慢乙肝组及正常对照组间存在显著差异(P<0.05),慢乙肝组S5、S6段杨氏模量值分别为(11.7±2.9、12.1±3.2)k Pa,明显高于正常对照组(5.7±1.1、5.8±1.3)k Pa.肝杨氏模量值在各纤维化分期间均有差异(P<0.05),S0~S4期肝S5段杨氏模量值分别为(5.8±2.2、7.3±1.9、10.3±2.8、10.3±2.8、25.3±3.6)k Pa,肝S6段杨氏模量值分别为(5.7±2.3、9.2±2.1、10.5±2.1、14.7±4.5、26.1±2.1)k Pa,且随S分期的增加,肝脏杨氏模量值有所增加.结论 SWE技术可确立肝纤维化分期的杨氏模量值参考范围,且有较高的敏感性、特异性和准确性.     

苦参素胶囊联合重组人干扰素对高AFP(甲胎蛋白)慢性乙肝患者纤维化指标及炎症因子的影响

目的:研究苦参素胶囊联合重组人干扰素对高甲胎蛋白(AFP)慢性乙肝患者纤维化指标及炎症因子的影响及治疗效果.方法:将2012年3月~2015年3月于我院接受诊治的96例慢性乙肝肝硬化伴高甲胎蛋白患者,根据治疗方式的不同,随机平均分为A、B、C三组,所有患者均接受复方鳖甲软肝片、水飞蓟宾葡甲胺片、甘草酸二铵保肝抗炎治疗,恩替卡韦抗乙肝病毒治疗,维生素、能量合剂等常规乙肝治疗,A组患者在此基础上给予苦参素胶囊治疗,B组患者给予干扰素-γ 治疗,C组患者给予两种药物联合治疗,治疗9个月,观察三组患者治疗前后肝功能、肝纤维化指标以及炎症因子表达.结果:经过治疗后,三组患者AFP、ALT、AST、TBil、PT均显著降低,白蛋白显著上升;A组HBV-DNA阴转率40.63%,HBeAb阳转率31.25%,HBeAg阴转率34.38%,B组37.50%、28.13%和31.25%,C组65.63%、56.25%和59.38%;三组LN、PCⅢ、PⅣP、HA均显著降低;脾脏厚度、内径,脾静脉宽度,门静脉内径均显著降低;炎症因子IL-6、TNF-α、BFGF及TGF-β1含量均显著降低.A、B两组差异不显著,与C组差异显著.结论:苦参素胶囊联合重组人干扰素可显著降低慢性乙肝患者甲胎蛋白含量,改善肝纤维化状态,降低炎症反应,促进肝功能恢复.     

丙型肝炎肝细胞凋亡的电镜和免疫组化研究

目的探讨丙型肝炎肝细胞凋亡与Ｆａｓ抗原表达及病理损伤的关系。方法应用电镜和免疫组化方法检测了２３例慢性丙型肝炎患者的肝组织。结果凋亡肝细胞呈多种形态学改变;Ｆａｓ抗原中,强度表达及组织炎症活动度积分高者,细胞凋亡指数增高。结论肝细胞凋亡是一系列超微病理改变过程,Ｆａｓ系统在介导细胞凋亡中起重要作用,细胞凋亡是慢性丙型肝炎肝组织的重要病理变化。     

3.0T MR弥散加权成像及张量成像评价肝纤维化的临床研究石喻

 目的 探讨MR弥散加权成像(DWI)及张量成像（DTI）对慢性病毒性肝炎患者的肝纤维化程度定量分析的能力。方法 应用3.0T MR对8名志愿者、40例慢性病毒性（乙型或丙型）肝炎患者进行DWI及DTI检查,弥散敏感度(b值)选择0,800 s/mm2,比照肝穿病理结果,计算表观弥散系数（ADC）及平均弥散率（MD）,分析两种方法定量肝纤维化分期的能力。结果 受试者的肝脏ADC和MD分别为(1.26±0.12)×10-3 mm2/s和(1.39±0.14)×10-3 mm2/s,差异有统计学意义（Z=-5.775,P<0.01）。ADC、MD与纤维化分期呈显著负相关（r分别为-0.686,-0.481,P<0.01）;ADC可有效鉴别正常肝脏（S0期）与S2 、S3、S4期纤维化（P<0.05）,肝硬化（S4期）与S1、S2、S3期纤维化（P值分别为 0.003,0.041,0.014）;MD能有效鉴别S4期与S0、S1期纤维化(P值分别为0.002,0.026）,但不能鉴别比较其他各期纤维化(P >0.05）。ADC预测≥S2期、≥S3期及≥S4期纤维化的能力均优于MD（ROC曲线下面积,ADC分别为0.879、0.823、0.866;MD分别为0.796、0.743、0.725）。结论 DWI对肝纤维化分期的定量分析效果全面优于DTI,适合慢性病毒性肝炎患者的纤维化评价。     

肝脏瞬时弹性探测仪在诊断慢性乙型肝炎患者不同分期肝纤维化中的应用价值

目的 探讨肝脏瞬时弹性探测仪(FibroScan)在诊断慢性乙型肝炎患者不同分期肝纤维化中的应用价值.方法 选取200例慢性乙型肝炎患者,均行病理活检诊断肝纤维化分期,同时采用FibroSean检测肝弹性值.比较不同分期患者的肝弹性值,分析肝弹性值与肝组织纤维化分级的相关性.采用受试者工作特征曲线法评估FibroScan诊断不同分期肝纤维化的价值.结果 S0、S1、S2、S3、S4期患者的肝弹性值依次升高(P<0.05),肝弹性值与肝纤维化分期呈正相关(P<0.05).FibroScan诊断S1、S2、S3、S4期肝纤维化的曲线下面积分别为0.931、0.955、0.968、0.954,特异度及灵敏度均大于90％.结论 FibroScan检查对慢性乙型肝炎患者不同分期肝纤维化均具有较高的临床诊断价值.     

Fibroscan对慢性乙型肝炎肝脏纤维化的诊断研究

目的探讨肝脏瞬时弹性成像系统(FS)对慢性乙型肝炎肝脏纤维化的诊断意义。方法随机选取本院162例慢性乙型肝炎患者分别行FS值检测,受试者同期行肝穿刺活检。以肝活检的不同分级结果为判断界点构建FS的ROC曲线,计算曲线下面积(AUC)、阳性和阴性结果的临界值(cut-off值),评价FS对慢性乙型肝炎肝脏纤维化的诊断意义。结果 FS对显著纤维化(S2-S4)、严重纤维化(S3-S4)、早期肝硬化(S4)的AUC值分别为0.81、0.88、0.90,cut-off值分别为7.3、9.7、17.5 KPa;随着肝功能受损程度的加重,胆红素、转氨酶的升高对FS值的影响差异有统计学意义。结论 Fibroscan对慢性乙型肝炎肝脏纤维化的诊断分析有较高的临床价值,对肝硬化、严重纤维化、显著纤维化(S≥2)的诊断价值优于轻度肝纤维化(S2)。