清金益肺汤对痰热蕴肺型特发性肺纤维化大鼠发挥抗氧化作用的实验研究

目的:通过检测痰热蕴肺型特发性肺纤维化大鼠应用清金益肺汤后血清超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)的活性及光镜下大鼠肺组织的病理变化,探讨清金益肺汤对于痰热蕴肺型特发性肺纤维化病程中氧化/抗氧化失衡的调节作用。方法:清洁级健康雄性SD大鼠40只,随机分为5组:空白对照组(K组)、痰热蕴肺型特发性肺纤维化模型组(M组)、中药治疗组(Z组)、激素治疗组(J组)、中药加激素治疗组(H组)。采用气管内滴博来霉素的方法建立肺纤维化模型,造模结束后第二天滴加脂多糖建立痰热蕴肺证模型。光镜下观察各组大鼠肺组织的病理改变;化学荧光法检测各组大鼠腹主动脉血清SOD、GSH的活性。结果:M组、Z组、J组、H组在光镜下均有肺纤维化的特征性病理改变,但程度有所不同。与K组相比,M、Z、J、H组SOD、GSH的活性明显降低,有显著统计学意义(P<0.01)。与M组相比,Z、J、H组SOD、GSH活性显著升高(P<0.01);且H组明显高于Z组和J组。J组SOD活性明显低于Z组(P<0.01),而J组和Z组的GSH活性相较没有统计学意义(P>0.05)。结论:痰热蕴肺型特发性肺纤维化大鼠肺内存在氧化应激,清金益肺汤可明显增加肺内SOD、GSH的含量,使其在抗氧化机制中发挥重要作用,从而说明清金益肺汤可纠正痰热蕴肺型肺纤维化的氧化/抗氧化失衡。     

清金益肺汤对痰热蕴肺型特发性肺纤维化大鼠病理及免疫功能的影响

目的:通过检测痰热蕴肺型特发性肺纤维化大鼠应用清金益肺汤后肺组织IL-8、TGF-β1的表达水平及光镜下的病理变化,探讨清金益肺汤对痰热蕴肺型特发性肺纤维化大鼠病理及免疫功能的影响。方法:清洁级健康雄性SD大鼠40只,随机分为5组:空白对照组、痰热蕴肺型特发性肺纤维化模型组(模型组)、中药治疗组(中药组)、激素治疗组(激素组)、中药加激素治疗组(综合治疗组)。采用气管内滴入博来霉素的方法建立肺纤维化模型。造模结束后第2天气管内滴加脂多糖建立痰热蕴肺证模型。ELISA法检测各组大鼠肺组织IL-8、TGF-β1的表达水平,光镜下观察各组大鼠肺组织的病理改变。结果:模型组、中药组、激素组、综合治疗组大鼠肺组织在光镜下均有肺纤维化的特征性病理改变,但程度有所不同。与空白对照组相比,其余各组大鼠IL-8及TGF-β1的表达水平均明显增高;模型组表达水平明显高于中药组、激素组和综合治疗组;综合治疗组明显低于中药组和激素组;中药组和激素组IL-8的表达水平差异无统计学意义;激素组TGF-β1水平明显高于中药组。结论:清金益肺汤可改善痰热蕴肺型特发性肺纤维化大鼠的呼吸功能、结构改变,并能调节免疫,与激素联合可增强抗纤维化力度。     

清金益肺汤对痰热蕴肺型特发性肺纤维化大鼠血管重塑的干预作用

目的:探讨清金益肺汤对痰热蕴肺型特发性肺纤维化大鼠血管重塑的干预作用。方法:清洁级健康雄性SD大鼠40只,随机分为5组:正常对照组、模型组、中药治疗组、激素治疗组、中药加激素治疗组。采用气管内滴注博来霉素的方法建立肺纤维化模型,造模结束后第2天气管内滴加脂多糖建立痰热蕴肺证模型,分组给药14天。光镜下观察各组大鼠肺组织的病理改变,PCR法检测肺组织血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达水平,免疫组化法检测肺组织血小板衍生因子(PDGF)的表达水平。结果:造模大鼠在光镜下均有肺纤维化的特征性病理改变,但程度有所不同。与正常组比较,各造模组VEGFmRNA及PDGF的表达水平均明显升高,其差异具有显著统计学意义(P0.01);与模型组比较,各药物组VEGFmRNA及PDGF的表达水平显著降低(P0.01);中药加激素组低于中药、激素组(P0.01);中药组低于激素组(P0.01)。结论:清金益肺汤可能通过抑制VEGFmRNA及PDGF的表达改善痰热蕴肺型特发性肺纤维化大鼠模型的血管重塑,延缓或纠正肺纤维化进程。     

贝丹益肺胶囊对肺纤维化大鼠肺组织TGFβ-Smads 表达的影响

目的：观察贝丹益肺胶囊对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β（TGF -β1）信号通路分子 mR-NA 表达的影响,探讨其防治肺纤维化的作用及机制。方法：气管内滴入博来霉素（5mg/kg）建立大鼠肺纤维化模型。将40只 Wistar 大鼠随机分为四组（每组10只）：对照组、肺纤维化模型组、强的松组和贝丹益肺胶囊组。 HE 染色检测肺组织病理改变,原位杂交技术检测肺组织 Smad4 mRNA 表达,实时荧光定量 RT -PCR 技术检测 TGF -β1mRNA 表达。结果：胶原纤维染色显示模型组大鼠肺内胶原纤维表达显著高于对照组和贝丹益肺胶囊治疗组（P ＜0．05）。大鼠肺内 TGF -β1及 Smad4 mRNA 表达在模型组显著高于对照组（P ＜0．01）,在贝丹益肺胶囊治疗组显著低于模型组（P ＜0．05）。结论：贝丹益肺胶囊能有效地减轻肺纤维化大鼠肺组织的纤维化程度,其作用机制主要是通过抑制 TGF -β1及 Smad4 mRNA 表达上调,从而干扰 TGF -β1/Smad4信号通路对靶基因的激活来实现的。     

清金化痰方治疗老年慢性阻塞性肺疾病急性发作60例

目的：观察清金化痰方治疗痰热蕴肺型老年慢性阻塞性肺疾病急性发作（AECOPD）的临床疗效。方法：回顾性分析2011年4月至2013年10月我院急诊住院的AECOPD老年痰热蕴肺型患者110例，其中50例采用西医常规治疗，60例在西医常规治疗基础上加用清金化痰方，治疗10d后比较两组临床疗效。结果：显效率治疗组为63．3％，对照组为48．0％，两组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：清金化痰方联合西药治疗痰热蕴肺型老年AECOPD效果显著，值得推广。     

慢性乙型肝炎湿热蕴脾证和脾胃气虚证与TNF-α及IL-6相关性研究

目的：探讨慢性乙型肝炎浊热蕴脾证和脾胃气虚证与肿瘤坏死因子－α（TNF－α）及白细胞介素－6（IL－6）之间的关系。方法：选择慢性乙型肝炎124例,辨证为湿热蕴脾证64例,脾胃气虚证60例,两证型均随机分为常规治疗组和加服中药组,另设健康对照组30名,分别在治疗前后空腹抽取肘静脉血,采用双抗体夹心酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清TNF－α,IL－6水平。结果：慢性乙型肝炎湿热蕴脾证和脾胃气虚证TNF－α,IL－6均升高,与健康对照组比较差异有显著性（P＜0．01）;两证型治疗后TNF－α,IL－6均下降,与治疗前比较差异有显著性（P＜0．01）;湿热蕴脾证加服中药组TNF－α水平显著低于常规治疗组（P＜0．05）,脾胃气虚证加服中药组TNF－α,IL－6水平低于常规治疗组（P＜0．05,P＜0．01）。结论：慢性乙型肝炎湿热蕴脾证较脾胃气虚证病情严重;慢性乙型肝炎结合中医辨证治疗可明显改善TNF－α,IL－6水平的变化。     

培土益金方对肺脾两虚型肺纤维化大鼠模型IL-8及 TNF-α活性表达影响的研究

目的：通过ELISA检测大鼠肺组织IL-8及TNF-α的含量,探讨培土益金方对博莱霉素所致大鼠肺脾两虚型肺纤维化模型纤维化程度的治疗作用。方法：将SPF级雄性SD大鼠40只随机分为5组,分别为A 组（对照组）、B组（模型组）、C组（中药治疗组）、D组（激素治疗组）、E组（中药加激素治疗组）。采用气管内滴入博莱霉素药液的方法建立大鼠肺纤维化模型,造模结束后第2天起以番泻叶煎液灌胃15天构建肺脾两虚证型,第17天开始对治疗组灌胃15天。通过观察肺组织病理及ELISA检测大鼠肺组织中IL-8、TNF-α的含量。结果：模型组与中药治疗组肺组织匀浆中IL-8含量有统计学差异（P＜0．05）,中药治疗组与激素治疗组肺组织匀浆中IL-8含量无统计学差异,剩余各组间肺组织匀浆IL-8含量均有显著差异（ P＜0．01）;对照组与中药加激素治疗组、中药治疗组与激素治疗组以及中药治疗组与中药加激素治疗组肺组织匀浆中TNF-α含量均无统计学差异,其余各组间肺组织匀浆中TNF-α含量均有显著差异（ P＜0．01）。结论：培土益金方对肺脾两虚型特发性肺纤维化大鼠模型有显著疗效,其机制可能是通过影响IL-8、TNF-α等因子的表达有关。     

麦门冬汤对肺纤维化模型早期阶段肺组织中TNF-α、IL-10表达的影响

目的：探讨麦门冬汤防治肺纤维化作用及机理。方法：用平阳霉素诱导大鼠肺纤维化模型后，用药组每天灌胃麦门冬汤，分别于第7天、第14天后处死各组大鼠，观察、比较各组大鼠肺泡炎、肺纤维化程度和肺组织中TNF—α、IL-10的表达。结果：第7，14天麦门冬汤组及正常对照组肺泡炎、肺组织中TNF-α表达均显著低于模型组，肺组织中IL-10表达均显著高于模型组（P〈0．05）；第14天麦门冬汤组肺纤维化程度低于模型对照组。结论：麦门冬汤能明显减轻平阳霉素所致的大鼠肺泡炎，提高肺组织中IL-10的表达、抑制TNF-α的过度表达。     

痰热清注射液治疗痰热阻肺型特发性肺纤维化合并感染的疗效观察

目的：研究痰热清注射液联合抗生素治疗痰热阻肺型特发性肺纤维化合并感染的临床疗效。方法：选择痰热阻肺型特发性肺纤维化合并感染患者60例,随机分为观察组与对照组各30例。对照组接受西医常规综合治疗,观察组在此基础上予以痰热清注射液静滴治疗,比较两组中医证候疗效、6min步行试验距离、血气分析中PO2变化、肺功能中肺总量（TLC）、肺活量（VC）、一氧化碳弥散量（DLCO）情况。结果：观察组在症状、体征的改善,6min步行试验距离、血气分析中PO2的提升,肺功能DLCO的改善优于对照组（P＜0.01）。结论：痰热清注射液联合抗生素治疗痰热阻肺型特发性肺纤维化合并感染疗效显著,值得在今后的临床工作中推广应用。     

“乳宁Ⅱ号”抑制Ca761小鼠乳腺癌生长转移的实验研究

目的：探索“乳宁Ⅱ号”抑制乳腺癌生长转移的机制。方法：检测经“乳宁Ⅱ号”等不同方法处理的小鼠乳腺癌肺转移模型的瘤重,肺转移发生率及IL－2和TNF的含量,并进行组间比较。结果：Z组与CTX组、Z＋CTX组瘤重、肺转移率均低于NX组（P＜0．05）,TNF－α平均值均显著低于NS组（P＜0．05）、Z组与Z＋CTX组高于CTX组（P＜0．01）。结论：“乳宁Ⅱ号”可抑制Ca761小鼠乳腺癌生长及肺转移,其机制与其抑制TNF分泌及促进IL－2分泌有关。     

加味黑地黄丸对慢性支气管炎大鼠炎症因子表达的影响

目的：观察加味黑地黄丸对慢性支气管炎大鼠肺组织匀浆上清液中肿瘤坏死因子（TNF—α）、白细胞介素一8（IL一8）及其血清c反应蛋白（CRP）、可溶性细胞间黏附分子一1（slCAM一1）表达的影响。方法：将75只SD大鼠,用改良烟熏法复制慢性支气管炎大鼠模型,随机分为：模型对照组、地塞米松组、气管炎丸组、加味黑地黄丸（高、低剂量）组,另设正常对照组。灌胃给药20天。采用酶联免疫法（ELISA）测定各组大鼠肺组织匀浆中TNF一α和IL一8及其血清中CRP、slCAM一1的水平。结果：模型对照组大鼠肺组织匀浆上清TNF—α、IL一8和血清CRP、slCAM一1水平显著性升高（P〈0．01）。高剂量加味黑地黄丸能降低大鼠肺组织匀浆上清TNF—α、IL-8和血清CRP、slCAM-1水平（P〈0．01）,与地塞米松作用基本一致;低剂量加味黑地黄丸仅降低大鼠血清SlCAM一1水平（P〈0．01）。结论：加味黑地黄丸能降低TNF—α、IL一8和CRP、slCAM一1的表达水平．是减轻慢性支气管炎大鼠气道炎症反应的有效机制之一。     

桂枝茯苓丸对子宫内膜异位大鼠腹腔液中 IL -6和 TNF -α水平的影响

目的：观察桂枝茯苓丸对大鼠子宫内膜异位症的治疗作用。方法：采用自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、达那唑组、桂枝茯苓丸低、中、高剂量组,并设假手术组。给药30天后,采用 ELISA 法检测大鼠腹腔液中白介素-6（IL -6）和肿瘤坏死因子-α（TNF -α）含量。结果：桂枝茯苓丸高剂量组能明显降低大鼠腹腔液中 IL -6水平（P ＜0．05）,高、中剂量组能显著降低腹腔液中 TNF -α含水平（P ＜0．05或 P ＜0．01）。结论：桂枝茯苓丸对大鼠子宫内膜异位症具有较好治疗作用。     

中西医结合治疗细菌性肺炎临床观察

目的：观察中西医结合治疗痰热壅肺型细菌性肺炎的临床疗效。方法将92例痰热壅肺型细菌性肺炎患者随机分为治疗组和对照组,治疗组47例,对照组45例,治疗组以清金化痰汤煎剂联用西药治疗,对照组单用西药治疗,疗程均为21天。结果：治疗组主要症状和体征消失时间明显短于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．01）;治疗组疗效优于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：清金化痰汤联合西药治疗痰热壅肺型细菌性肺炎优于单纯西药治疗;     

疏风宣肺方和解表清里方体外干预甲型流感病毒H1N1诱导炎性细胞因子分泌作用的研究

目的：研究疏风宣肺方和解表清里方对甲型流感病毒H1 N1感染的人肺腺癌上皮细胞（A549）中炎性细胞因子的影响。方法培养 A549,甲型流感病毒 H1N1感染 A549后,分为细胞对照组、H1V1感染组、奥司他韦对照组、疏风宣肺组及解表清里组。采用实时定量聚合酶链式反应（RT －PCR）和Western blotting 法检测各组细胞中炎症相关的白细胞介素（IL）1、肿瘤坏死因子α（TNF －α）、IL －6、IL －10、单核细胞趋化蛋白1（MCP －1）、调节活化正常 T 细胞表达和分泌的趋化因子（RANTES）的 mRNA 及蛋白表达的变化。结果基因芯片结果提示,与细胞对照组比较,H1N1感染组差异表达基因 Il1β、Thf、Ccl5、Il10、Il6、Ccl2明显上调。与 H1N1感染组比较,奥司他韦组、疏风宣肺组和解表清里组差异基因 Thf、Il1β、Ccl5、Il10、Il6、Ccl2表达显著下调。 RT －PCR 结果显示,与细胞对照组比较,H1N1感染组 IL －1、TNF －α、IL －6、IL－10、MCP －1、RANTES 的 mRNA 表达均显著升高（P ＜0．01）。与 H1N1感染组比较,疏风宣肺组 IL －1、TNF－α、IL －6、IL －10、MCP －1的 mRNA 表达均明显降低（P ＜0．01,P ＜0．05）,解表清里组 IL －1、TNF －α、IL －6、MCP －1的 mRNA 表达均明显降低（P ＜0．01,P ＜0．05）。 Western blotting 结果显示,H1N1感染组 IL －1、TNF －α、IL －6、IL －10、MCP －1、RANTES 蛋白表达较细胞对照组显著升高（P ＜0．05）;与 H1N1感染组比较,疏风宣肺组及解表清里组 IL －1、TNF －α、IL －6、IL －10、MCP －1、RANTES 蛋白表达均显著降低（P ＜0．05,P＜0．01）。结论疏风宣肺方和解表清里方均可抑制流感病毒感染后炎性细胞因子 IL －1、TNF －α、IL －6、MCP －1的 mRNA 过表达及蛋白分泌,减轻炎症反应,并恢复机体免疫功能的稳定和平衡。     

补肾益肺消癥方对α-SMA及SP-C蛋白对肺纤维化大鼠病变肺组织分布及表达的影响

目的探讨补肾益肺消癥方干预肺纤维化大鼠α-SMA及SP-C蛋白在病变肺组织中分布及表达的作用机制。方法以博来霉素致大鼠肺纤维化的动物模型,以吡非尼酮作为阳性对照药物,补肾益肺消癥方分别于模型过程中、造模后及实验全程进行干预,观察动物活动及体重变化,免疫组化检测病变肺组织中α-SMA、SP-C蛋白表达。结果大鼠体重显示,模型组体重较正常组明显减轻(P0.05),中药防治组体重较模型组明显升高(P0.05)。免疫组化、免疫荧光结果显示,模型组病变肺组织中α-SMA、SP-C蛋白表达较正常组明显升高(P0.05),阳性组和中药组α-SMA、SP-C蛋白表达较模型组明显减低(P0.05)。结论补肾益肺消癥方可以通过减少α-SMA的表达及成熟SP-C蛋白沉积,减少成纤维灶的形成,抑制内质网应激反应,延缓特发性肺纤维化的病理进程,从而达到治疗的目的。     

咳喘宁胶囊对慢性支气管炎大鼠血清、肺组织及支气管肺泡灌洗液TNF和IL-1β含量的影响

目的：探讨咳喘宁胶囊对实验性慢性支气管炎治疗作用的内在机制。方法：采用改良烟熏法复制大鼠慢性支气管炎模型，实验分组为模型组、咳高组、咳低组、桂龙组，并设不加处理的正常组。以高、低剂量咳喘宁和桂龙咳喘宁进行干预，测定各组大鼠血清、肺组织及支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子（TNF）和白细胞介素－1（IL－1β）的含量。结果：模型组大鼠血清、肺组织及BALF中TNF和IL－1β含量均较正常组明显升高（P＜0．01）。与模型组相比较，治疗各组血清、肺组织及BALF中TNF和IL－1β含量均明显降低（P＜0．05或P＜0．01）；咳高组血清、肺组织中TNF含量均明显低于桂龙组与咳低组（P＜0．01），而3个治疗组对BALF中TNF含量的影响差异无统计学意义（P＞0．05）；咳高组血清、肺组织及BALF中IL－1β含量均低于桂龙组与咳低组（P＜0．05或P＜0．01）。结论：TNF和IL－1β在慢性支气管炎的病理生理过程中起着重要作用，咳喘宁胶囊通过降低TNF和IL－1β含量，控制炎症反应。     

贝丹益肺胶囊对肺纤维化大鼠肺组织CatKmRNA表达的影响

目的:观察贝丹益肺胶囊对博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织的Cat KmRNA的影响,探讨其防治IPF的作用机制。方法:将40只Wistar大鼠随机分为四组:肺纤维化、对照组、贝丹益肺胶囊组和强的松组,各组10只。模型组、贝丹益肺胶囊组和强的松组将博莱霉素(5 mg/kg)滴入大鼠气管内建立肺纤维化的模型。免疫组化检测模型大鼠肺组织的病理改变,Western blotting测定肺组织中Cat K蛋白的表达。实时荧光定量检测Cat KmRNA在IPF大鼠肺组织匀浆中的表达。结果:免疫组化染色显示模型组大鼠肺内Cat K表达显著高于对照组和贝丹益肺胶囊治疗组(P0.05)。大鼠肺内Cat KmRNA表达在模型组显著高于对照组(P0.01),在贝丹益肺胶囊治疗组显著低于模型组(P0.05)。结论:贝丹益肺胶囊可减轻肺纤维化大鼠肺组织的纤维化程度,其作用机制主要是减少Cat KmRNA在肺组织中的含量,使胶原的降解和沉积维持在一相对衡定的正常代谢状态,使肺纤维化的进展减慢或逆转。     

益气类中药对肺纤维化大鼠模型肺组织中TNF-α、IL-8的影响

目的：观察博莱霉素所致肺纤维化模型大鼠肺组织中TNF-α和IL-8的表达水平,探讨益气类中药对大鼠肺纤维化的作用及其机制。方法：32只SD大鼠随机分为空白组、模型组、益气组和泼尼松组,采用气管内滴加博莱霉素的方法制作肺纤维化模型,并应用相应的药物灌胃干预,各组大鼠分别于第28 d处死,观察大鼠肺组织匀浆中TNF-α、IL-8的表达水平。结果：与空白组比较,模型组、泼尼松组大鼠肺组织中TNF-α、IL-8的表达水平明显增高（P〈0.01）,益气组IL-8的表达水平明显增高（P〈0.01）、TNF-α表达水平无明显差异（P〉0.05）。与模型组比较,益气组和泼尼松组肺纤维化程度明显减轻（P〈0.01）,肺组织中TNF-α、IL-8表达水平也显著降低（P〈0.01）。益气组较泼尼松组肺纤维化程度更轻（P〈0.05）,肺组织中TNF-α、IL-8表达水平也更低（P〈0.01）。结论：益气类中药与泼尼松均可下调肺组织中TNF-α及IL-8的表达水平,抑制或延缓肺纤维化的发生发展,益气类中药疗效较泼尼松更好。     

红豆杉活性成分巴卡亭Ⅲ对大鼠肺纤维化的干预作用

目的：观察红豆杉活性成分巴卡亭Ⅲ对实验性大鼠肺纤维化的干预作用。方法：大鼠随机分为空白组、模型组、强的松组和巴卡亭Ⅲ组。通过气管内注射博莱霉素（BLM）复制肺纤维化模型，于造模后第2天治疗组开始给药，给药后第14天处死大鼠，取肺组织，行HE染色，并行免疫组化细胞外信号调节酶（ERK1）测定。结果：巴卡亭Ⅲ能减轻大鼠肺泡炎症及肺纤维化程度（P＜0．01），并能减少ERK1的表达。结论：巴卡亭Ⅲ对BLM诱导产生的大鼠肺纤维化有一定的干预作用。     

活血化瘀药物防治放射性肺损伤的实验研究

目的观察活血化瘀药物对小剂量重复照射下不同时相大鼠肺组织病理学改变和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β（TGF-β）表达,探讨其防治放射性肺损伤的作用机制。方法130只SD雌性大鼠随机分为单纯照射组（60只）、中药治疗组（60只）和空白对照组（10只）用直线加速器对单纯照射组和中药治疗组大鼠右肺进行照射,3Gy／次,2次／周,累积剂量最高为30Gy,分别于照射开始后第1、3、5、8、12、26周共6个时间点,两组各随机处死10只大鼠,取材切片,行HE和免疫组化染色,观察大鼠肺组织病理改变和TNF-α和TGF-β的表达。结果单纯照射组大鼠肺组织于照射第5周急性放射性肺炎最重,第26周肺纤维化明显;不同时相TNF-α和TGF-β表达明显增强（P〈0．01）,中药治疗组大鼠肺组织急性放射性肺炎反应轻微,后期纤维化不明显,TNF-α、TGF-β的表达较单纯照射组明显降低（P〈0．01）;结论在小剂量重复照射过程中,活血化瘀药物可抑制致炎因子和致纤维化因子的表达,减轻早期放射性肺炎的炎症反应。延缓放射性肺纤维化的进展,对放射性肺损伤具有防治作用。