蓝桉油对单核细胞THP-1核因子-κB核转位活化的影响

目的：探讨蓝桉油对人单核细胞THP-1细胞株核因子-κB(NF-κB)核转位活化的影响。方法：蓝桉油(1、10、100mg／L，30min)预处理THP—1细胞，经脂多糖(LPS，1mg／L，30min)刺激后，采用间接免疫荧光细胞化学法结合激光扫描共聚焦显微镜，测定THP—1细胞NF-κBp65亚基(NF-κB／p65)定位；Western-blot法分析细胞核内NF-κB／p65水平。结果：免疫荧光分析显示，正常细胞NF-κB／p65荧光标记主要分布于胞浆区，核区很少，LPS刺激后NF-κB／p65荧光标记浓集于核区，胞浆区少见；但经蓝桉油(100mg／L)预处理后，LPS刺激的THP—1细胞NF-κB／p65荧光标记则主要位于胞浆区；Western-blot分析显示，在正常THP—1细胞核蛋白中有低水平的NF-κB／p65表达，经LPS刺激，核内NF-κB／p65表达明显增高；蓝桉油预处理后，可以抑制LPS诱导的核内NF-κB／p65高水平表达，且呈剂量依赖关系。结论：蓝桉油预处理阻止了LPS诱导的NF-κB／p65核转位，从而抑制了其活性功能的发挥。蓝桉油可抑制LPS刺激引起的NF-κB核转位活化。     

电刺激小脑顶核对局灶脑缺血再灌注大鼠脑组织核因子-κB/p65、TNF-α蛋白和基因表达的影响

目的观察电刺激小脑顶核干预对局灶性缺血再灌注大鼠脑组织核因子-κB/p65(NF-κB/p65)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白和基因表达的影响及其对中枢神经元保护的作用机制。方法 2014年9月—2015年9月在重庆医科大学神经病学实验室进行。Wistar大鼠60只随机分为假手术组(NC组)、缺血再灌注组(I/R组)、电刺激小脑顶核组(FNS组),每组20只,采用线栓法制作脑缺血再灌注动物模型,FNS组予以电刺激小脑顶核干预,造模或干预成功后处死大鼠取脑组织,分别采用免疫组织化学法和RT-PCR检测各组NF-κB/p65、TNF-α的表达。结果与NC组比较,I/R组NF-κB/p65、TNF-α蛋白表达增加(q=0.032、0.020,P<0.05);与I/R组比较,FNS组NF-κB/p65、TNF-α的表达明显降低(q=0.182、0.013,P<0.05)。与NC组比较,L/R组NF-κB/p65mRNA和TNF-αmRNA表达量明显增高(P<0.05);与I/R组比较,FNS组NF-κB/p65 mRNA和TNF-αmRNA表达量明显减少(P均<0.05)。结论电刺激小脑顶核抑制NF-κB/p65的活化和TNF-α的转录,NF-κB/p65的活化抑制和表达减少及所致的TNF-α表达下调可能是其发挥中枢神经源性保护作用的机制之一。     

胶质瘤组织中核因子κB的表达及意义

目的目的探讨核因子κB(NF-κB)在胶质瘤组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学方法检测NF-κB p65在64例胶质瘤中的表达,10例正常大脑组织作为对照。结果64例胶质瘤中NF-κB p65蛋白阳性表达率为54.7%(35/64);10例正常脑组织中NF-κB p65无一例阳性表达。NF-κB p65蛋白的表达在星形细胞瘤与正常脑组织之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论NF-κB组成性活化与胶质瘤的发生相关,NF-κB p65是一种与胶质瘤相关的新的癌蛋白。     

溃结灵对Caco-2炎症细胞模型核因子-κB p65 DNA结合活性的影响

【目的】观察溃结灵含药血清对Caco-2炎症细胞模型核因子-κB(NF-κB)p65蛋白DNA结合活性的影响。【方法】采用不同剂量含药血清干预Caco-2细胞,并以促炎细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)]诱导Caco-2细胞建立炎症细胞模型,收集细胞。采用Trans AM核转录因子活性检测试剂盒检测细胞核蛋白NF-κB p65的含量(活性)。【结果】TNF-ɑ与IL-1β诱导的模型组细胞核蛋白NF-κB p65的含量显著高于正常对照组(P﹤0.01);溃结灵高、中剂量组,蛋白酶抑制剂组和阳性药(柳氮磺胺吡啶)组细胞核蛋白NF-κB p65的含量均显著降低,与模型组比较差异有统计学意义(P﹤0.01)。【结论】溃结灵含药血清对Caco-2炎症细胞模型细胞核蛋白NF-κB p65 DNA结合活性具有一定的下调作用。     

欧前胡素抑制compound48/80介导的肥大细胞脱颗粒作用机制研究

[目的]探讨欧前胡素抑制compound48/80介导的肥大细胞脱颗粒作用机制.[方法]取雄性SD大鼠的腹腔肥大细胞进行体外培养,利用compound48/80诱导肥大细胞活化,治疗组分别加入10,20,40μmol/L的欧前胡素.利用ELISA法检测各组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平,利用Western blot法检测NF-κB p65水平.[结果]与正常对照组比较,compound48/80可激活实验大鼠腹腔肥大细胞,增加细胞核内NF-κB p65表达量,减少胞浆中NF-κB p65表达量,促进NF-κB p65核转位;与正常对照组比较,模型对照组TNF-α,IL-6水平均明显升高(P<0.05).与模型对照组比较,欧前胡素各剂量组细胞核内NF-κB p65表达量明显减少,胞浆中NF-κB p65表达量明显增加,欧前胡素抑制NF-κB p65核转位,并明显降低肥大细胞TNF-α,IL-6水平(P<0.05),且作用效果呈浓度依赖性增强.[结论]欧前胡素可通过调节NF-κB激活抑制肥大细胞脱颗粒,从而抑制炎性细胞因子的释放.     

核转录因子κB和糖皮质激素受体在慢性阻塞性肺疾病患者稳定期的相互作用

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期外周血和气道黏膜核转录因子κB(NF-κB)和糖皮质激素受体(GCR)的表达.方法 应用Werstern blot方法检测COPD稳定期患者和相匹配的肺功能正常对照组各8例外周血淋巴细胞和支气管黏膜核蛋白核转录因子NF-κB和GCR的表达.结果 COPD患者稳定期外周血淋巴细胞和支气管黏膜核蛋白GCR表达均显著低于对照组(P<0.05,P<0.01),两组支气管黏膜表达显著高于外周血淋巴细胞(P<0.05,P<0.01);COPD患者稳定期外周血淋巴细胞和支气管黏膜核蛋白NF-κB表达均显著高于对照组(P<0.05),两组支气管黏膜表达高于外周血淋巴细胞(P<0.05,P<0.01).结论 COPD患者稳定期与对照组NF-κB和GCR表达差异性提示COPD患者即使在稳定期仍存在慢性炎症,尤其是气道局部炎症更为明显.     

核转录因子NF-κB、RET/PTC在桥本甲状腺炎合并甲状腺乳头状癌中的表达及其意义

目的:探讨核转录因子NF-κB与RET/PTC在桥本甲状腺炎(HT)合并甲状腺乳头状癌(PTC)患者中的表达、两者的相关性及其可能的致癌机制。方法:对20例HT,20例PTC、15例HT合并PTC患者手术切除的甲状腺组织及18例甲状腺腺瘤患者腺瘤旁正常甲状腺组织(NTT)用免疫组织化学(IHC)方法检测RET/PTC癌基因和NF-κB p65蛋白表达情况,并研究两者表达的相关性;用免疫荧光双标记法和激光共聚焦显微镜检测并观察NF-κB与RET/PTC的共表达情况。结果:IHC结果显示HT、HT合并PTC、PTC中RET/PTC阳性率分别为30%(6/20)、60%(9/15)和65%(13/20),NF-κB p65阳性率分别为90%(18/20,9例核转位)、93.3%(14/15,13例出现核转位)和95%(19/20,16例出现核转位),18例NTT中RET/PTC癌基因蛋白表达均为阴性,NF-κB阳性率为27.8%(5/18,无1例出现核转位)。RET/PTC和NF-κB p65在HT、HT合并PTC和PTC中的表达均显著高于NTT组(均P<0.05),而且NF-κB p65的表达及活化和RET/PTC蛋白的表达密切相关(P<0.01)。免疫荧光双标记和激光共聚焦显微镜检测结果显示NF-κB与RET/PTC共表达于HT及PTC病变甲状腺滤泡上皮细胞内。结论:HT及PTC患者甲状腺组织中RET/PTC与NF-κB均显著高于NTT,两者表达与活化相关且共表达于甲状腺滤泡上皮细胞内,提示核转录因子NF-κB p65可能通过RET/PTC活化在桥本甲状腺炎滤泡上皮癌变中发挥重要的作用。     

外周血NF-κB基因表达水平对肝癌诊断的临床价值研究

目的：定量分析外周血单核细胞中核转录因子（NF-κB）的表达水平,以探讨对肝癌（HCC）诊断和预后价值。方法：从不同肝病患者及正常对照组外周血单个核细胞中制备总RNA,以实时定量PCR分析NF-κB/p65 mRNA拷贝数,并经DNA序列分析证实,比较不同肝病组间NF-κB基因的表达水平,分析其临床价值。结果：以实时定量PCR法成功分析了外周血中NF-κB/p65 mRNA的表达水平,所扩增的基因片段,经DNA序列分析证实,与已知人NF-κB基因的源序列完全一致;外周血NF-κB/p65 mRNA拷贝数,肝癌组明显高于肝硬化、慢性肝炎及正常对照组;肝癌术后血中NF-κB/p65 mRNA表达明显下降,肝癌复发者NF-κB表达又明显升高。结论：肝癌患者外周血中NF-κB基因过表达,分析血NF-κB mRNA拷贝数有助于肝癌诊断及预后判断。     

辛伐他汀对脂多糖诱导人THP-1单核细胞MCP-1表达与NF—κB活化的影响及机制

目的 通过研究辛伐他汀对脂多糖(LPS)诱导人THP-1单核细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达与NF-κB活化的影响,探讨辛伐他汀调控炎症状态下单核细胞MCP-1表达与NF-κB活化的机制.方法 体外培养人THP-1单核细胞,分为对照组、LPS组、辛伐他汀低、中、高浓度组,辛伐他汀3组加入不同浓度(1、5、10 μmol/L)辛伐他汀预孵2h与LPS组均加入LPS刺激24 h.应用Western blot检测各组细胞质蛋白IκBα、NF-κB p65、MCP-1水平与各组细胞核蛋白NF-κB P65水平,ELISA检测各组细胞培养上清MCP-1水平.结果 辛伐他汀呈浓度依赖性抑制LPS诱导人THP-1单核细胞胞质蛋白与培养上清MCP-1增加;辛伐他汀呈浓度依赖性抑制LPS所致人THP-1单核细胞胞质蛋白IκBα与NF-κB P65降低及核蛋白NF-κB P65增加.结论 辛伐他汀抑制LPS诱导人THP-1单核细胞MCP-1表达可能与其抑制NF-κB活化有关;而抑制NF-κB活化可能与其抑制IκBα降解有关.     

脂多糖对大鼠膀胱上皮细胞中Toll样受体4与核因子-κB表达的影响

目的观察体外培养的大鼠膀胱上皮细胞中Toll样受体4(TLR4)与核因子-κB(NF-κB)在脂多糖(LPS)刺激下的表达变化。方法分离幼龄Sprague-Dawley大鼠膀胱黏膜,培养上皮细胞。将分离纯化的上皮细胞分为对照组和LPS刺激1、2、3组;对照组不给予任何干预措施,LPS刺激1、2、3组给予LPS(0.01 g·L-1)分别作用1、5、24 h。采用实时定量荧光酶联免疫反应及Western blot技术检测TLR4与NF-κB p65表达量的变化。结果对照组和LPS刺激1、2、3组的TLR4 mRNA相对表达量分别为1.00±0.10、1.32±0.27、1.81±0.10、1.61±0.35;TLR4蛋白相对表达量分别为1.00±0.18、1.36±0.12、1.95±0.08、1.79±0.21。与对照组比较,LPS刺激1、2、3组TLR4 mRNA和蛋白的相对表达量均增多(P<0.05);LPS刺激2、3组TLR4 mRNA和蛋白相对表达量较LPS刺激1组增多(P<0.05);LPS刺激2、3组TLR4 mRNA和蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组和LPS刺激1、2、3组NF-κB p65 mRNA相对表达量分别为1.00±0.08、1.60±0.05、1.51±0.06、1.39±0.04;NF-κB p65蛋白相对表达量分别为1.00±0.08、1.87±0.11、1.69±0.10、1.94±0.18。与对照组比较,LPS刺激1、2、3组NF-κB p65 mRNA和蛋白相对表达量均增多(P<0.05);LPS刺激1、2、3组间NF-κB p65 mRNA和蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 LPS可上调膀胱上皮细胞中TLR4与NF-κB p65的表达。     

NF-κB、TNF-α及NO在微小病变型肾病综合征发病机制中的作用

目的 通过研究核转录因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及一氧化氮(NO)在微小病变型肾病综合征(MCNS)肾损伤中的作用,探讨MCNS形成的可能机制.方法 雄性SD大鼠36只随机分为2组,模型组尾静脉一次性注射阿霉素5.5 mg/kg,对照组注射等量生理盐水.研究单个核细胞中NF-κB活化情况,动态观察外周血中TNF-α、NO的变化,研究其与尿蛋白、血清白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素(Urea)及肌酐(Cr)等浓度变化的关系,并观察肾脏病理学改变.结果 造模后14天模型组与对照组比较,NF-κBp65活性、TNF-α、NO、尿蛋白、TC及TG明显升高(P<0.01);ALB降低(P<0.01);电镜下见足突融合.随着造模时间的延长,模型组NF-κBp65活性、TNF-α、NO、尿蛋白、TC及TG持续增高,在造模后35天达峰值;而ALB持续降低(P<0.01);电镜检查见弥漫性足突融合.模型组Urea仅在造模后35天较对照组增高(P<0.01),2组Cr在整个实验过程中差异均无统计学意义(P>0.05).结论 NF-κB的异常活化在MCNS肾损伤中起着重要的作用,其作用机制可能是通过诱导TNF-α、NO产生增多,损害肾脏细胞,导致蛋白尿的发生.     

转录因子-κB活性与2型糖尿病肾脏病变的关系

目的探讨2型糖尿病患者外周血单个核细胞中转录因子-κB(Nuclear factor kappa B, NF-κB)的活性与肾功能损害的关系.方法应用凝胶电泳迁移率实验(EMSA)测定了41例2型糖尿病患者(A组)和10例健康正常人(D组)外周血单个核细胞中NF-κB的活性,并根据有无肾脏病变将糖尿病患者分为糖尿病无肾病组(B组)和糖尿病肾病组(C组).结果与D组比较,A、B、C三组NF-κB活性显著增强(P均<0.05),其中C组活性最高,B、C两组间NF-κB活性也有差别(P<0.05).结论 2型糖尿病患者外周血单个核细胞中NF-κB活性显著增强,尤其是伴有肾脏病变的患者,NF-κB与糖尿病肾病的发生、发展有关.     

LPS直接诱导对肺微血管内皮细胞核因子κB活化的影响

目的探讨内毒素(lipopolysaccharide, LPS)的直接诱导作用对肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells, PMVECs)核因子κB(NF-κB)活化的影响.方法 100 ng/ml LPS刺激PMVECs 0、0.5、1、2、4、6、8 h或1、10、100 ng/ml LPS刺激1 h后,凝胶电泳迁移率分析(electrophoretic mobility shift assay, EMSA)检测NF-κB的活化,免疫细胞化学(ICC)观察其亚基p50、p65的核转位.并通过加入NF-κB活化阻断剂TPCK观察其对100 ng/ml LPS刺激1 h诱导活化的影响.结果 LPS的直接刺激能迅速活化NF-κB,诱导其p50、p65亚基核转位,1 h即达到高峰,且呈剂量依赖关系,后逐渐下降.TPCK能显著抑制其活化(P<0.01).结论 LPS的直接刺激能诱导NF-κB的活化,这可能是LPS诱导炎症反应的一个重要环节.     

核转录因子κB p65在子宫颈鳞癌中的表达及意义

目的:探讨核转录因子κB(NF-κB)p65蛋白在人宫颈鳞癌组织中的表达及意义.方法:32例人宫颈鳞状细胞癌为实验组,慢性宫颈炎及正常宫颈组织各30例为对照组.应用免疫组织化学方法检测NF-κB p65蛋白在组织中的表达水平.结果:免疫组织化学方法显示32例宫颈癌组织中NF-κB p65蛋白阳性表达率为68.7.%,慢性宫颈炎组织中NF-κB p65蛋白阳性表达率为6.66%,而30例正常组织中无表达,实验组与对照组之间差异显著(P＜0.05).结论:NF-κB活化与宫颈癌的发生有关,NF-κB p65可能成为人宫颈癌治疗的新靶点.     

H2S对氧化型低密度脂蛋白诱导人单核巨噬细胞核转录因子-κB的影响及机制

目的:研究硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导人单核巨噬细胞NF-κB通路的调节作用及其机制。方法:人单核细胞系THP-1细胞采用12-豆蔻酸-13-乙酸佛波醇(phorbol myristate acetate,PMA)诱导分化为巨噬细胞后,分为4组:对照组、ox-LDL组、ox-LDL+H2S100μmol/L组及ox-LDL+H2S 500μmol/L组。用Western blot检测细胞IκBα蛋白表达及NF-κB磷酸化水平,激光共聚焦法检测细胞胞浆IκBα及NF-κB的核转位改变,免疫共沉淀方法检测细胞核中NF-κB p65与IκBα结合情况。结果:Western blot结果显示,与对照组相比,ox-LDL组人单核巨噬细胞中NF-κB p65磷酸化水平明显升高(0.855±0.116 vs.0.502±0.218,P=0.046),IκBα表达明显减少(0.612±0.216 vs.0.997±0.167,P=0.029);与ox-LDL组相比,ox-LDL+H2S 100μmol/L组及ox-LDL+H2S 500μmol/L组细胞中NF-κB p65磷酸化水平显著降低(0.424±0.225 vs.0.855±0.116,P=0.020;0.378±0.071 vs.0.855±0.116,P=0.011),IκBα表达显著增多(1.037±0.111 vs.0.612±0.216,P=0.015;1.046±0.084 vs.0.612±0.216,P=0.013)。激光共聚焦结果显示:与对照组相比,ox-LDL组THP-1源性巨噬细胞胞浆中IκBα表达明显降低,NF-κB p65核转位明显增加;与ox-LDL组相比,ox-LDL+H2S 100μmol/L组及ox-LDL+H2S 500μmol/L组细胞胞浆IκBα表达显著增多,NF-κBp65核转位明显减少。免疫共沉淀结果显示,对照组人单核巨噬细胞胞核内未检测到NF-κB p65与IκBα的结合,ox-LDL组细胞核内NF-κB p65与IκBα结合较少,ox-LDL+H2S 100μmol/L组及ox-LDL+H2S 500μmol/L组细胞核内NF-κB与IκBα结合明显增多。结论:H2S可抑制ox-LDL诱导人单核巨噬细胞中NF-κB通路激活,其作用机制可能与抑制胞浆中IκBα降解,减少NF-κB p65磷酸化激活及核转位,同时可促进胞核中IκBα与NF-κB的结合,进而抑制NF-κB的活性有关。     

华蟾素注射液对HepG2细胞NF-κB通路的影响

目的探讨华蟾素注射液对肝癌细胞株HepG2NF-κB通路的影响。方法在TNF-α激活NF-κB通路的条件下利用双荧光素酶报告基因系统检测华蟾素注射液对含有NF-κB反应元件的萤火虫荧光素酶报告基因pNF-κB-TA-luc转录活性的影响。Western blotting进一步验证华蟾素注射液对HepG2细胞核内NF-κB亚基p65蛋白量的影响,同时半定量RT-PCR检测NF-κB下游靶基因细胞间黏附分子1(ICAM-1)的转录水平。结果0.25、0.5μg/ml浓度的华蟾素注射液可有效地抑制pNF-κB-TA-luc报告基因的相对荧光素酶值(P<0.05)。Western blot结果进一步证明华蟾素可使NF-κB亚基p65蛋白量降低,RT-PCR结果表明NF-κB下游靶基因ICAM-1表达降低。结论华蟾素注射液的抗癌机制可能与抑制癌细胞NF-κB通路的活化有关。     

小儿肝门静脉海绵样变性者NF-κB活性在手术前后的变化分析

目的观察并分析小儿肝门静脉海绵样变性者核因子-κB(NF-κB)活性在手术前后的变化。方法以2005年2月—2013年7月我院收治的43例小儿肝门静脉海绵变性者为研究对象,以40例正常儿童为对照组,检测对照组以及观察组儿童在手术前后血清单个核细胞(PBMC)中的NF-κB p65/Lamin B1的相对含量和NF-κB活性。结果观察组术前、术后PBMC中NF-κB p65的相对含量分别为(1269.3±349.8)ng/mg、(884.5±154.8)ng/mg,均高于正常对照组(106.1±12.7)ng/mg(P<0.05);与术前相比,术后相对含量降低(P<0.05);观察组术前、术后PBMC中NF-κB的活性分别为(2194.5±471.3)ng/mg、(1376.9±203.7)ng/mg,均高于正常对照组(221.1±33.6)ng/mg(P<0.05);与术前相比,术后相对含量降低(P<0.05)。结论经手术治疗后,小儿肝门静脉海绵样变性者PBMC中NF-κB p65的相对含量、NF-κB的活性均显著降低,表明手术在一定程度上有效缓解了肝门静脉高压的病症。     

儿童过敏性紫癜发病中NF-κB对树突状细胞的调控与T辅助细胞分化失衡的关系

目的 了解儿童过敏性紫癜发病中NF-κB对树突状细胞的调控与T辅助细胞分化失衡的关系.方法 收集我院2008年6月至2009年3月肾脏免疫科收治的过敏性紫癜(henoch-schonlein purpura,HSP)患儿36例和过敏性紫癜肾炎(henoch-schonlein purpura nephritis,HSPN)患儿32例,以及门诊体检的健康儿童27例,抽取外周血,诱导培养树突状细胞(dendritic cells, DC),于第5天分别抽取7例以上3组外周血诱导培养的DC加入NF-κB抑制剂5 μg,分别采用ELISA、流式细胞技术、RT-PCR和细胞免疫化学方法,检测患儿血浆IL-4、INF-γ和DC培养上清IL-12、IL-10水平;DC表面CD86、CD80、CD83、CD-209的表达;DC内NF-κB亚型p50、p65 mRNA表达量和NF-κB活化情况.结果 与对照组比较,HSP组和HSPN组血浆中Th2类细胞因子IL-4升高(P<0.05),Th1类细胞因子INF-γ降低(P<0.05);DC培养上清中IL-10升高(P<0.05),IL-12降低(P<0.05);CD86、CD83升高(P<0.05),CD80降低(P<0.05);细胞内NF-κB p50、p65 mRNA 表达量也升高(P<0.05);NF-κB活化表达数量增多.但HSP组与HSPN组以上检测指标2组比较差异无统计学意义(P>0.05).加入NF-κB抑制剂后以上各项异常指标可逆转,且逆转后与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 HSP发病与DC异常调控Th1/Th2细胞失衡密切相关,NF-κB是DC免疫功能的关键性调控基因,抑制NF-κB的活化是阻断DC功能和依赖于T细胞免疫反应的一个有效靶点.     

免疫化学染色图像分析法检测细胞核因子κB

目的探讨一种简便、安全、可定量的细胞核因子κB(NF-κB)活性的检测方法。方法以晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白(HSA-AGE)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC),NF-κB/p65免疫化学染色后,分析细胞NF-κB/p65核/浆的阳性染色比,以经典的凝胶迁徙率泳动分析法作对照。结果HSA-AGE可激活HUVECNF-κB,呈时间、剂量依赖关系,两种方法检测的趋势一致。结论免疫化学染色的图像分析法可用于定量检测NF-κB的活性。     

NF-κB沉默抑制鼻咽癌5-8 F细胞增殖

目的：探讨核因子-κB(NF-κB)沉默对鼻咽癌5-8F细胞的增殖抑制作用。方法构建NF-κB p65沉默重组质粒表达载体pGenesil-1.2-NF-κB和阴性对照重组质粒载体pGenesil-1.2-HK,应用转染试剂将重组质粒表达载体转染人鼻咽癌5-8F细胞,采用Western blot法检测NF-κB p65的表达,采用MTT及流式细胞仪分析细胞增殖和细胞周期。结果 NF-κB p65沉默抑制鼻咽癌5-8F细胞增殖,抑制率为(58．43±1．24)%,与对照组细胞抑制率(0)和阴性对照组细胞抑制率(17．89±4．13)%比较,差异有统计学意义( P<0．05)。 NF-κB沉默组S期细胞为(42．27±0．39)%,与空白对照组(30．83±1．36)%和阴性对照组(34．88±0．85)%比较,差异有统计学意义( P<0．05)。结论 NF-κB p65沉默抑制鼻咽癌5-8F细胞增殖,其可能是通过S期细胞阻滞起作用。