先天性心脏病患儿血清甲状旁腺素水平观察

目的探讨先天性心脏病(CHD)患儿甲状旁腺功能。方法用放射免疫法(IRMA)测定18例学龄前期CHD患儿血清甲状旁腺素(parathyrin,PTH)水平,并测定其血清Ca2 、Mg2 浓度;17例门诊体检的健康儿童作为对照。结果CHD患儿血清PTH水平(14.87±6.02ng/L)较对照组(19.68±5.76ng/L)明显降低,两者比较差异有显著性(P<0.05),CHD组中有8例(44.4%)患儿血清PTH<10ng/L,而对照组均高于10ng/L;CHD患儿血清Ca2 和Mg2 较对照组略低,但无统计学意义(P>0.05)。结论CHD患儿甲状旁腺素分泌不足,存在亚临床甲状旁腺功能低下。     

小发卡RNA抗呼吸道合胞病毒效应的研究

目的 为从基因水平抑制呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）的复制，针对RSV的M2-2基因构建小发卡结构状RNA（short hairpin RNA，shRNA）重组质粒，在细胞水平观察shRNA对RSV复制的影响。方法 将成功构建的针对RSV M2-2基因的重组质粒pshRNA8260转染HEp-2细胞，利用光镜观察pshRNA8260对RSV致HEp-2细胞病变效应（cytopathogenic effect，CPE）的影响并计算CPE抑制率，空斑形成实验检测RSV滴度变化。结果 成功构建了针对人RSV M2-2基因mRNA的pshRNA8260重组质粒，研究发现pshRNA8260能明显改善RSV所致的病变效应，降低RSV在细胞内复制的病毒滴度。结论 针对RSV M2-2基因的pshRNA82（g）重组质粒具有明显的特异性抗RSV效应的作用。     

卡介苗、干扰素γ及维生素A预防毛细支气管炎患儿发生哮喘的临床研究

目的　探讨卡介苗 (BCG)或联用干扰素γ(IFN γ) /维生素A(VitA)预防毛细支气管炎 (毛支 )患儿发生喘息的效果。方法　 4 4例毛支患儿予单独BCG或联用IFN γ/VitA治疗 ,于治疗前和治疗 3个月后进行PPD皮试 ,并随访 ,平均 1年时间 ,观察喘息发作情况。 19例未接受BCG接种的毛支患儿 ,作为疾病对照组。结果　BCG接种后PPD平均硬结直径大于干预前及对照组恢复期 ,以联合IFN γ/VitA治疗组更突出。BCG单用或联用IFN γ/VitA组 1年内喘息发作频率低于对照组恢复期 ,单用或联用组间差异无显著意义。结论　BCG可促进毛支患儿PPD皮试阳转 ,1年内喘息发作频率降低 ,可预防毛支患儿日后发展为哮喘。IFN γ/VitA与BCG具有一定的协同作用。     

小鼠呼吸道合胞病毒感染肺TLR4表达与气道高反应性

目的:研究小鼠呼吸道合胞病毒(RSV)感染对肺TLR4表达与气道高反应性的影响。方法:生后6周16只清洁级BALB/c小鼠被同等分成RSV感染组和对照组,感染后1周两组经吸入相同递增浓度乙酰甲胆碱检测气道高反应性,使用RT-PCR方法测定肺组织TLR4mRNA表达,并对二者的相关性进行了分析。结果:在吸入乙酰甲胆碱浓度为3.2g/L时两组气道阻力差异有显著性(P<0.01)。TLR4/β-actin的值分别为对照组0.239±0.055,RSV感染组0.361±0.102,两组间有显著性差异(P<0.05);TLR4 mRNA表达与吸入3.2g/L乙酰甲胆碱时的气道反应性呈正相关,相关系数为0.721(P<0.05)。结论:小鼠RSV感染后肺TLR4表达增强并呈气道高反应性,二者之间有显著正相关。     

BrdU标记人脐带间充质干细胞及对细胞生物学行为影响的体外研究

目的：探讨5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU）标记人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs）的方法及其对细胞存活、增殖以及凋亡的影响。方法：将hUC-MSCs分离培养并进行细胞表面标志物及多向分化潜能鉴定,取第5代细胞以终浓度分别为10、15、20、25 ?滋mol/L BrdU进行标记,采用空白BrdU作为对照组,分别培养24、48、72 h及96 h后,台盼蓝排斥实验检测细胞活力;MTT法检测细胞增殖能力;AnnexinV-FITC检测细胞存活率及凋亡率,免疫组化法检测各组标记率。结果：台盼蓝排斥实验检测细胞活力都在96%以上,实验组与对照组比较均无统计学意义（不同浓度组间比较P=0.89,各时间点比较P=0.61,时间与不同浓度的交互作用P=0.89）。MTT结果显示BrdU对细胞增殖无抑制（P ＞0.05）。不同浓度标记组间细胞增殖率及凋亡率的差异（增殖率F=12.02,P＜0.001,凋亡率F=6.14,P=0.009）。结论：BrdU标记hUC-MSCs是安全可靠的,BrdU标记hUC-MSCs的最佳剂量和时间为20 ?滋mol/L、72 h,适于hUC-MSCs在临床前实验研究的体内示踪。     

卵清蛋白激发对肠道菌群失调小鼠T细胞功能亚群的影响

目的:探讨卵清蛋白(OVA)雾化吸入激发对抗生素致肠道菌群失调小鼠肺组织及脾脏中T淋巴细胞功能亚群的影响.方法:32只BALB/c小鼠随机分为4组:菌群失调组、菌群失调加激发组、激发组、对照组.于实验第14天采用流式细胞术(FCM)检测肺组织及脾脏中Th1、Th2、Th17以及CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Tregs)水平.结果:菌群失调加激发组小鼠肺组织中Th2、Th17细胞水平增高,脾脏中Th1、Th2、Th17均与对照组无差异;菌群失调组及菌群失调加激发组小鼠肺组织及脾脏中Tregs水平均降低.结论:抗生素致肠道菌群失调小鼠经卵清蛋白雾化吸入激发后,可产生Th2、Th17细胞优势的变应性气道反应,与Tregs调节功能不足可能有关.     

SCID小鼠接种人白血病细胞HL-60的流式细胞术分析

腹腔及静脉注入人白血病细胞HL 6 0建立人白血病异种移植模型 ,采用流式细胞仪检测HL 6 0细胞表面标志CD33、DNA含量及周期分布 ,及病理组织学检查观察其生长特性。结果显示 ,实验接种的HL 6 0细胞在放射线处理或未处理的SCID小鼠体内均能生长 ,发生全身性白血病。 3周时外周血即可见白血病细胞浸润 ,受累肝、脾增生期细胞比例增加 ,iv接种 5× 10 6HL 6 0细胞 ,在发病晚期 ,骨髓细胞中CD33+ 细胞占 3 79%和 2 97% ;ip接种 1 0× 10 7的SCID小鼠 ,其骨髓细胞中CD33+ 率为 12 32 %。提示HL 6 0 /SCID小鼠模型为良好的肿瘤体内研究模型 ,以CD33阳性率判断模型中肿瘤细胞浸润指标能快速、客观地判断病情。     

新生儿感染IgG亚类探讨

本文观察18例新生儿败血症及11例新生儿皮下坏疽IgG亚类变化,两组患婴的四种血清IgG亚类均低于对照组(p<0.01或<0.05)。体外用pwm诱导B细胞产生lg可见两组患婴除lgM如lgG_3,外,IgG_1、lgG_2及lgG_4,明显低于对照组(p<0.01或p<0.05)。患婴的PBMC对T细胞丝裂原PHA的增殖反应减弱,CD_4/CD_8比值下降。本文结果表明新生儿感染时T细胞功能系乱可致B细胞抗体生成能力下降。     

静注丙种球蛋白治疗新生儿重症细菌感染抗体水平变化及用法初探

能增加新生儿患败血症风险的两个最重要的免疫缺陷是抗体缺陷和吞噬细胞数量及质量的异常。国外报道丙种球蛋白效果好。本文用国产静脉丙种球蛋白(Intravenous immunoglobulin IVIG)配合抗生素治疗重症细菌感染新生儿,观察血清抗体水平的变化并探讨其用法。     

地塞米松和甲基泼尼松龙对哮喘儿童外周血Th1/Th2类细胞因子平衡的影响

目的：观察支气管哮喘儿童外周血单个核细胞（PBMC）中CD4^4T细胞中两个功能性亚群（Th1/Th2)的功能状态及地塞米松和甲基泼尼松龙对其的影响。方法：15例哮喘及14名健康儿童，取静脉血，密度梯度离心 法分离PBMC，分别用10^-8mol/L地塞米松和甲基泼尼松龙体外干预培养48h后，用ELISA法测定培养上清中的干扰素－γ（IFN－γ）、白细胞介素－4（IL－4）和IL－10的浓度。结果：地塞米松和甲基泼尼松龙均可明显抑制哮喘儿童PBMC分泌-γ(P值分别为0．004和0．002）和IL－4（P值分别为0．002和0．001）；若以IFN－γ／IL－4表示Th1/Th2间的平衡，则甲基泼尼松龙（P＜0．05）可恢复Th1/Th2平衡；地塞米松和甲基泌尼松龙都不曩IL－10的分泌。结论：地塞米松和甲基泼尼松龙均可抑制IFN－γ和IL－4的产生，但甲基泼尼松龙抑制作用更强，从而可恢复哮喘儿童体内Th1/Th2平衡。