外源性mIκBα基因在肝癌细胞Hep G2中的表达及对其生长的影响

目的观察mIκBα基因对肝癌细胞生长的影响。方法同源重组法构建含mIκBα基因的重组腺病毒质粒，经293细胞包装成含mIκBα的重组腺病毒。用此腺病毒感染肝癌细胞Hep G2，测定感染效率。通过集落形成实验、细胞生长曲线等方法观察目的基因对肝癌细胞生长的影响。结果重组腺病毒含有舳基因。重组腺病毒可在肝癌细胞中稳定地表达，感染的肝癌细胞形成的集落数明显少于对照组（P〈0．01）；重组腺病毒感染的肝癌细胞在软琼脂内存活，对照组细胞则无法存活；重组腺病毒感染的肝癌细胞生长速度减慢。结论含目的基因mIκBα的腺病毒重组体在293细胞中扩增并有效地转染Hep G2细胞；外源性mIκBα基因可以抑制肝癌细胞Hep G2的生长。     

mIκBα基因转染肝癌细胞HepG2的放射增敏作用

目的 探讨mIκαBα基因是否增加肝癌细胞的放射敏感性.方法 实验分3组:亲本细胞对照组、nepG2细胞转染Adv组、转染mIκBα基因的Hep G2细胞-Ad mIκBα组.在6 Gy X射线照射前后分别测定3组细胞下列指标:Western blot检测肝癌细胞浆内mIκαBα值;电泳迁移率法测定肝癌细胞核内NF-κB活性;TUNEL染色法测定肝癌细胞凋亡指数.2 Gv放射线照射后的肝癌细胞存活分数和用多靶单击模型确定的Do、Dq值判定肝癌细胞的放射敏感性.结果 放射线照射前,Adv组与Hep G2组细胞浆内mIκBα呈低值,照射后更减低;而细胞核内NF-κB活性照射前为( ),照射后为( ),呈持续激活状态;细胞凋亡指数在照射前分别为1.4、1.6,照射后升高至8.9、11.7.Ad mIκBα组在照射前、后细胞浆内mIκBα均呈高值,均为Adv组的3倍;而细胞核内NF-κB活性在照射前、后均呈阴性;照射前细胞凋亡指数为18.2,照射后升高至88.3.3组中Ad mIκBα组细胞存活分数最低,为0.301;而SER(放射增敏比)最大,为2.099;Do值最小,为1.468.Dq值最小,为0.709.结论 用mIκBα基因转染肝癌细胞Hep G2,可抑制肝癌细胞内NF-κB的抗凋亡活性.增强肝癌细胞的放射敏感性.     

重组腺病毒IκBαM在人肝癌细胞HepG2中的表达及对NF-κB活性的抑制

目的　检测重组腺病毒IκBαM (AdIκBαM)在肝癌细胞HepG2 中的表达及TNF α诱导下IκBαM变化情况 ,并观察此超级抑制物对NF κB活性的抑制作用。方法　利用GFP及有限稀释法测定病毒滴度和感染靶细胞的效率 ,Western印迹法检测 2 93细胞和HepG2 中重组腺病毒介导IκBαM的表达及TNF α诱导下IκBαM变化情况 ,EMSA观测感染AdIκBαM前后经TNF α处理的HepG2 细胞核中NF κB活性水平的变化。结果　扩增AdIκBαM的滴度为 2× 10 8pfu/ml,MOI为 2 0 ;AdIκBαM在HepG2 中能稳定高效表达且不因TNF α的诱导而降解 ,未感染细胞基础水平的IκBα及转入的AdIκBα对照则随诱导时间延长而呈现先逐渐降低后升高的趋势。EMSA显示 ,感染AdIκBαM的细胞在处理前后均无NF κB活化迹象 ,而未感染及感染AdIκBα的细胞经TNF α诱导后则有NF κB过度活化情况。结论　AdIκBαM能高效扩增并有效感染靶细胞HepG2 ,能在HepG2 细胞中稳定高水平表达 ,且不会被TNF α诱导而降解 ,能稳定有效的抑制HepG2 细胞中NF κB的过度活化 ,上述结果初步表明 ,通过IκBαM超级抑制物抑制NF κB的活性 ,再辅以常规的抗肿瘤治疗 ,有望成为一种十分有效的肿瘤基因治疗方法。     

X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1抑制肝癌裸鼠移植瘤生长的研究

目的 研究X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1(XAF1)基因对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠荷瘤模型,每组5只裸鼠分别在瘤内分3点注射相同感染滴度的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、Ad5/F35-Null对照空病毒及等体积的磷酸缓冲液(PBS),隔天注射1次,疗程2周.每3天测量各组裸鼠移植瘤的体积,观察Ad5/F35-XAF1组移植瘤的生长与其他两组的差异.原位末端标记TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,免疫组织化学法检测移植瘤中XAF1蛋白表达和微血管密度(MVD).结果 与PBS组和Ad5/F35-Null组比较,瘤内注射Ad5/F35-XAF1组裸鼠移植瘤体积、质量和MVD显著减小(P<0.05或P<0.01),而移植瘤细胞的凋亡指数和XAF1蛋白的表达率均明显增高(P<0.01).结论 腺病毒介导XAF1基因可抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,可能与该基因诱导肝癌细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成有关.     

X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1抑制肝癌裸鼠移植瘤生长的研究

目的 研究X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1（XAF1)基因对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法 建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠荷瘤模型,每组5只裸鼠分别在瘤内分3点注射相同感染滴度的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、Ad5/F35-Null对照空病毒及等体积的磷酸缓冲液（PBS）,隔天注射1次,疗程2周。每3天测量各组裸鼠移植瘤的体积,观察Ad5/F35-XAF1组移植瘤的生长与其他两组的差异。原位末端标记TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,免疫组织化学法检测移植瘤中XAF1蛋白表达和微血管密度（MVD）。结果 与PBS组和Ad5/F35-Null组比较,瘤内注射Ad5/F35-XAF1组裸鼠移植瘤体积、质量和MVD显著减小（P<0.05或P<0.01）,而移植瘤细胞的凋亡指数和XAF1蛋白的表达率均明显增高（P<0.01）。结论 腺病毒介导XAF1基因可抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,可能与该基因诱导肝癌细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成有关。     

重组腺病毒mIКBa基因的构建及体外抑制血管生成的作用

目的应用同源重组法构建mIκBα基因的腺病毒真核表达载体,探讨其体外抑制血管形成的作用。方法通过Lipofectamine介导构建重组腺病毒pAdmIκBα,有限稀释法测定病毒滴度;以MOI为10、20、30、50感染HCC9204细胞,RT-PCR方法检测细胞NFκ-B(p65)的表达,ELISA法检测细胞上清液p65的含量;鸡胚绒毛尿囊膜检测(CAM)了解pAdmIκBα对血管形成的抑制。结果经PCR检测提示重组体腺病毒含有pAdmIκBα基因;pAdmIκBα的滴度是1.252×109pfu/ml;将pAdmIκBα转染HCC9204细胞,当MOI=10时,p65 mRNA表达和上清液p65蛋白含量开始下降,在MOI=50时降低到最低水平;pAdmIκBα对p65表达的抑制呈剂量依赖性;pAdmIκBα对血管新生有很强的抑制作用,而且随着剂量的增加作用越发明显。结论成功构建出含有mIκBα基因的具有感染能力的高滴度的重组腺病毒,并且该重组腺病毒具有体外抑制血管生成的作用。     

重组腺病毒介导的野生型p53基因对HepG2细胞抑制作用的研究

目的:研究重组腺病毒介导的野生型p53基因对人肝癌细胞系HepG2的抑制作用。方法:用MTT比色法检测重组人p53腺病毒(Ad-p53)在不同感染滴度、不同感染时间对人肝癌细胞HepG2生长的抑制作用,用流式细胞仪检测Ad-p53作用后HepG2细胞的凋亡率;采用瘤内注射的方法观察Ad-p53对裸鼠移植瘤的抑制作用。结果:Ad-p53对HepG2细胞有明显的抑制效应,效靶比(MOI)越高、作用时间越长,抑制作用越强;当rAd-p53在125MOI效靶比时,细胞生长基本达到完全抑制;p53转导显著增加了HepG2细胞的凋亡率;瘤内注射Ad-p53后,荷瘤裸鼠的肿瘤生长受到明显抑制。结论:Ad-p53对人肝癌HepG2细胞有明显的抑制效应,其抑制效应具有时间、剂量依赖关系,Ad-p53转导野生型p53基因可能是一种有效的肝癌基因治疗途径。     

腺病毒介导siCD44实验性治疗人CNE-2L2鼻咽癌

目的探讨用siCD44治疗实体瘤的可能性。方法以高表达CD44的人鼻咽癌细胞CNE-2L2为研究对象,用软琼脂集落形成实验和细胞接种裸鼠后成瘤性生长及肿瘤肺转移检测细胞恶性生物学行为。构建Ad5-siCD44,用293细胞包装产生病毒。接种CNE-2L2细胞于裸鼠皮下,待肿瘤长到50～100mm3大小,瘤体内注射Ad5-siCD44,以注射PBS或Ad5-egfp为对照,2周后比较肿瘤的大小和重量。结果CD44表达抑制致细胞的恶性生物学行为明显受抑。瘤体内注射PBS、Ad5-egfp和Ad5-siCD442周后,肿瘤的平均体积分别为(3.139±0.850)、(3.612±0.888)和(1.512±0.742)cm3,实验组与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。3组的平均瘤重分别为(2.28±0.73)、(1.83±0.26)和(1.20±0.64)g,实验组与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。结论瘤体内注射Ad5-siCD44对CD44高表达的鼻咽癌细胞CNE-2L2所生成的肿瘤有一定治疗作用。     

腺病毒介导IκBα基因在体外培养U937细胞中的表达及效应研究

目的通过构建IκBα基因的腺病毒表达载体,并用急性相反应蛋白SAA3启动子来指导目的基因IκBα的表达,体外观察在炎性刺激后IκBα蛋白的诱导性表达特性及对NF-κB活性的调控作用,对炎症介质产生的抑制效应. 方法采用DNA重组与同源重组技术,构建含只响应病理信号的启动子-急性相反应蛋白启动子SAA3、目的基因IκBα的炎症诱导性复制缺陷型重组腺病毒载体(AdIκBα).应用AdIκBα,选择在炎症反应中具有代表意义的巨噬细胞,观察AdIκBα在体外培养巨噬细胞U937中诱导性表达IκBα (Western blot)、对NF-κB活性的调控(EMSA)及体外效应.结果①成功构建炎症诱导性IκBα表达质粒(pAdpLpl SAA3 NLS IκBα),该表达框含SAA3启动子,SV40大T抗原核定位信号(NLS),IκBα cDNA和ploy A; ② pAdpLpL SAA3 NLS IκBα质粒与pJM17同源重组,脂质体(DOTAP)介导,共转染入293细胞.PCR法筛选阳性克隆,获得重组腺病毒(Ad IκBα); ③用293细胞扩增Ad IκBα;采用反复冻融法纯化腺病毒,获得高滴度(5×1010 pfu/ml)重组腺病毒; ④体外实验,用50 MOI Ad IκBα预感染体外培养的U937细胞,再用LPS攻击后,该腺病毒诱导性表达IκBα蛋白(Western blot),且表达的IκBα能抑制NF-κB的活化(EMSA)、下调LPS攻击后TNF-α、IL-6的产生.结论该IκBα腺病毒表达载体通过调控NF-κB活性,可调控炎症介质(TNF-α、IL-6)的产生,用于调理细胞的炎症反应.     

重组血管基膜衍生多功能肽抑制人肝癌HepG2裸鼠移植瘤生长和血管生成

目的:研究重组血管基膜衍生多功能肽rVBMDMP对人肝癌HepG2裸鼠移植瘤生长和血管生成的抑制作用。方法:体外培养人肝癌HepG2细胞和人胚肝L-02细胞,MTT法测定不同浓度的rVBMDMP对HepG2细胞的选择性抑制增殖作用;人肝癌HepG2裸鼠移植瘤模型治疗实验评价rVBMDMP体内抗人肝癌作用;CD31免疫组化方法分析rVBMDMP处理的HepG2裸鼠移植瘤组织微血管面积(MVA)的比例。结果:rVBMDMP具有选择性抑制体外培养人肝癌HepG2细胞增殖作用,呈剂量依赖性,而对L-02细胞的增殖活性无明显的影响。rVBMDMP对HepG2裸鼠移植瘤生长具有显著抑制作用,呈剂量依赖性。1.0 mg/kg、3.0 mg/kg和10.0 mg/kg的rVBMDMP的肿瘤生长抑制率分别为:12.4%,55.8%和79.7%。其中10.0 mg/kg的rVBMDMP的肿瘤生长抑制率近似于20.0 mg/kg的5-氟尿嘧啶(5-FU,80.1%)。rVBMDMP处理的人肝癌HepG2裸鼠移植瘤组织的CD31染色阳性区域面积百分比随着rVBMDMP浓度的增加明显降低。结论:rVBMDMP对人肝癌HepG2细胞增殖...     

基于Bax/Bcl-2-Caspase-3通路芍药软肝方抑制裸鼠肝癌生长及机制研究

目的研究芍药软肝方(SRF)调控Bax/Bcl-2-Caspase-3通路抑制肝癌生长的作用及机制。方法建立HepG2荷瘤裸鼠模型,随机分为空白对照组、高、中、低浓度芍药软肝方(SRF)组,灌胃3周后称取瘤重,TUNEL法观察肿瘤细胞凋亡情况,Western-blot法检测对组织中NF-κB-p65、VEGF、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白质表达。结果(1)不同浓度芍药软肝方(SRF)均可抑制HepG2荷瘤裸鼠体内肝癌肿瘤的生长,并能诱导肿瘤细胞凋亡;(2)SRF可降低裸鼠肝癌组织中NF-κB-p65、VEGF、Bcl-2蛋白表达,上调Bax、Caspase-3蛋白表达。上述作用均呈浓度依赖。结论 SRF可显著抑制HepG2荷瘤裸鼠肿瘤生长并促进肿瘤细胞凋亡,且作用呈浓度依赖。其机制可能通过调控Bax/Bcl-2-Caspase-3通路与抑制信号通路上游NF-κB-p65及VEGF等因子的蛋白质表达有关。     

大肠杆菌内同源重组法构建含mIκBα基因的重组腺病毒及其在Hep G2细胞中的表达

目的 通过在大肠杆菌内同源重组,快速、有效地制备含人mIκBα基因的腺病毒重组体的方法,并观察其在肝癌细胞株Hep G2细胞中的表达。方法 首先将目的基因mIκBα克隆进结合有绿色荧光蛋白报告基因的穿梭质粒-pAdTrack-CMV中,将新形成的质粒pAdTrack-CMV-mIκBα用限制性内切酶Pme I线性化后,再与腺病毒骨架质粒-pAdEasy-1一同转化进大肠杆菌株BJ5183细胞中。用对卡那霉素抗性挑选重组体质粒-pAd-mIκBα,并通过限制性内切酶分析,确认重组。最后将线性化后的重组体质粒转染进腺病毒包装细胞株293细胞。腺病毒重组体Ad-mIκBα在7~10 d内产生。借助GFP的表达,测定和观察在293细胞中重组腺病毒的滴度及其在Hep G2细胞中的表达。结果 经PCR检测提示重组体腺病毒含有mIκBα基因。Ad-mIκBα的滴度是2.7×109 PFU/ml。当MOI等于10时,在Hep G2细胞中,Ad-mIκBα病毒可有效和稳定地表达,其感染效率24 h为57%,48 h达100%。结论 运用在大肠杆菌内同源重组法能有效和方便地构建含目的基因mIκBα的腺病毒重组体Ad-mIκBα。该重组体能在293细胞中扩增,并有效地感染Hep G2细胞。为进一步研究mIκBα基因的功能和该基因治疗肝癌提供了一个良好的基因转导载体。     

蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂重组腺病毒对人肝癌细胞MHCC97H侵袭转移的影响

目的 构建携带蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂（sv-cystatin）基因的重组腺病毒载体（Ad/sv-cystatin）,研究其对人肝癌细胞MHCC97H在体内、外侵袭转移的影响。 方法 构建携带sv-cystatin的重组腺病毒,体外感染MHCC97H细胞,采用CCK-8法检测细胞生长,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力,通过裸鼠皮下肝癌细胞肺转移模型观察Ad/sv-cystatin瘤内注射对裸鼠的治疗作用。 结果 体外实验证实Ad/sv-cystatin能够感染MHCC97H细胞。与对照组及空载体组相比,Ad/sv-cystatin对MHCC97H细胞体外生长、侵袭和迁移均具有明显的抑制作用,瘤内注射Ad/sv-cystatin可以显著降低MHCC97H细胞的肺转移。 结论 重组腺病毒Ad/sv-cystatin具有抑制人肝癌细胞MHCC97H体内外侵袭转移的作用,在肝癌基因治疗方面具有开发应用潜能。     

HBV X基因对肝癌细胞生物学行为的影响

目的:构建可表达HBV X基因的重组腺病毒,观察HBV X基因对肝细胞生物学行为的影响。方法:构建可表达HBV X基因的重组腺病毒Ad-X及空病毒Ad0;重组腺病毒感染HepG2细胞,应用MTT、平板克隆形成试验、流式细胞术、TUNEL等方法观察HBV X基因对肝细胞生物学行为的影响。结果:与HepG2组和Ad0组相比,Ad-X组细胞生长速度较快,其克隆形成率高于对照组,流式细胞分析显示Ad-X感染可加快HepG2细胞G1→S期细胞周期进程;Ad-X组细胞凋亡指数低于HepG2组及Ad0组,Ad-X感染HepG2细胞后可诱导c-myc mRNA的表达。结论:Ad-X可促进HepG2细胞的增殖并抑制其凋亡。     

Netrin-1促进肝癌细胞HepG2抗失巢凋亡的作用

目的 初步探讨神经生长因子Netrin-1对人肝癌细胞HepG2抗失巢凋亡的作用及相关机制.方法 采用脂质体转染的方法,将Netrin-1的真核表达质粒转染到肝癌细胞HepG2中,Western blot检测Netrin-1的表达;用软琼脂集落试验、悬浮培养模型及流式细胞检测的方法观察肝癌细胞HepG2抗失巢凋亡的特性.结果 肝癌细胞HepG2在失巢状态下可以聚集成团生长,并与贴壁生长有相似的凋亡比例.与对照组细胞相比,稳定转染Netrin-1真核质粒的HepG2细胞在软琼脂中形成细胞集落的数量明显增加,在悬浮培养模型中形成细胞团的直径更大,在失粘附状态下的细胞凋亡比例明显降低;磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)通路的抑制剂LY294002能增加转染细胞在失粘附状态下的凋亡比例.结论 肝癌细胞HepG2具有抗失巢凋亡的特性,Netrin-1可以增强HepG2细胞抗失巢凋亡的能力,其机制可能与PI3-K通路相关.     

NF-κB decoy寡核苷酸联合阿霉素诱导裸鼠肝癌细胞HepG_2凋亡

目的:探讨NF-κB decoy寡核苷酸协同阿霉素对裸鼠肝癌细胞HepG2的作用及机制。方法:接种传代培养的人肝癌细胞HepG2于裸鼠皮下,局部注射NF-κB decoy寡核苷酸和/或阿霉素进行治疗。观测裸鼠瘤体大小变化,计算抑瘤率;HE染色观察肝癌组织结构和细胞形态改变;TUNEL法检测细胞凋亡。结果:NF-κB decoy寡核苷酸联合阿霉素治疗组裸鼠肝癌细胞的生长受到明显抑制,抑瘤率为80.52%;肿瘤重量、体积明显小于单用NF-κBdecoy寡核苷酸、阿霉素治疗组及对照组;联合组癌组织凋亡增加,凋亡指数为(39.8±1.6)%,与其余3组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:NF-κB decoy寡核苷酸协同阿霉素能抑制NF-κB活性,促进肝癌细胞凋亡,增加其对化疗药物的敏感性。     

Ad5F35-IκBαΔN重组腺病毒对K562/DNR细胞耐药性逆转的研究

目的:研究Ad5F35-IκBαΔN重组腺病毒对K562/DNR细胞耐药性的逆转作用及相关机制。方法:采用流式细胞仪分析细胞凋亡;NF-κB p65活性分析试剂盒检测K562/DNR细胞NF-κB活性。结果:感染Ad5F35-IκBα△N腺病毒后,K562/DNR细胞NF-κB活性受到明显抑制,从0.224±0.021活性单位/μg核蛋白降至0.132±0.015;凋亡率明显增高,从(10.4±1.5)%升至(43.2±4.8)%。结论:感染Ad5F35-IκBα△N腺病毒后,可通过抑制NF-κB的活性,增加K562/DNR细胞凋亡率,从而逆转K562/DNR细胞的耐药性。     

腺病毒介导的mIL-12基因对裸鼠肝癌生长的抑制作用

目的　研究腺病毒介导的mIL - 12基因 (AdvmIL - 12 )对裸鼠肝癌生长的抑制作用。方法　用Ad vmIL - 12转染小鼠肝癌H2 2细胞作为实验组 ,以腺病毒转染的H2 2细胞和未转染的H2 2细胞为对照组。将上述细胞分别接种到裸鼠右侧前肢皮下 ,第 11天断头处死裸鼠 ,采血 ,取出瘤组织称重。用ELISA法检测体外细胞培养上清液、接种前后裸鼠血清、肝癌组织中IL - 12表达量。结果　实验组肿瘤平均重量为 (0 87± 0 16 )g ,空白对照组和载体对照组分别为 (1 6 5± 0 39)g和 (1 88± 0 14 )g ,实验组的肝癌平均重量小于对照组 (P <0 0 5 )。AdvmIL- 12 /H2 2细胞上清液中mIL - 12的含量为 (89 71± 2 2 0 5 )ng/ml,Adv/H2 2 ,H2 2细胞上清液中未检测到mIL - 12。接种前各组裸鼠血清中均未检测到mIL - 12的表达。接种后实验组裸鼠血清中仅有少量mIL - 12表达 ,对照组裸鼠血清中未检测到mIL - 12的表达。实验组肝癌组织中mIL - 12的表达量高于对照组 (P <0 0 1) ,对照组之间的mIL - 12平均表达量差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　转染AdvmIL - 12的小鼠肝癌H2 2细胞在裸鼠肝癌组织局部高表达mIL - 12 ,并能抑制裸鼠肝癌的生长。     

Bevacizumab抑制人肝癌细胞及其移植瘤的生长

目的探讨Bevacizumab对肝癌细胞株HepG2及荷肝癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法不同浓度Bevacizumab处理HepG2细胞48 h后,MTT法检测Bevacizumab对细胞增殖的抑制作用,设不加药物的HepG2细胞为对照组。建立荷肝癌细胞株HepG2裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为Bevacizumab组和空白对照组,观察用药前后肿瘤大小,计算抑瘤率;应用免疫组化计算肿瘤微血管密度。结果 Bevacizumab可抑制HepG2细胞增殖;与空白对照组比较,Bevacizumab可延缓移植瘤的生长,MVD值明显降低(P=0.000)。结论 Bevacizumab可直接抑制肝癌细胞株HepG2的增殖;Bevacizumab主要通过抑制新生血管的形成而抑制移植瘤的生长。     

过表达外源性Cyr61对人肝癌细胞株HepG2生长和迁移的影响

目的 采用AdEasy系统构建的带有标记基因RFP的重组腺病毒Ad-Cyr61感染人肝癌细胞株HepG2,并观察外源性cyr61对肿瘤细胞生长和迁移的影响.方法 Ad-Cyr61与Ad-RFP分别感染人肝癌细胞株HepG2,荧光倒置显微镜观察荧光表达,通过RT-PCR、免疫组化实验分别检测Ad-Cyr61的mRNA和蛋白的表达;通过M1Tr实验、细胞计数实验、克隆形成实验和划痕愈合实验,观察Cyr61对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖和迁移的影响.结果 Ad-Cyt61感染人肝癌细胞株HepG2,与对照组比较细胞数量增多,集落形成增加,细胞划痕逐渐愈合.结论 Ad-Cyr61感染人肝癌细胞株HepG2后可促进细胞增殖和迁移,提示Cyr61在肿瘤发生和转移中可能起到重要作用.