120例染色体核型检查患者手掌atd角及tpD分析

异常组合的肤纹与染色体畸变有密切关系,亦可能反应映宫内胎儿早期发育的外环境条件。本文就120例有染色体核型检查的患者对其手掌atd角及tpD进行分析,并与正常人对照比较。atd角小儿以≥49—年龄(最大到9) 13(2 SD),简化为62—年龄(最大到9);成人以≥40 12(2SD)简化为52做为增大的判断标准。tpD小儿以≥17 12(2SD)亦即29;成人以16 12(2SD)亦即28为增大的标准。本组染色体核型异常组有8/28例(29%)属增大,染色体核型正常组有16/92例(17%)属增大。     

肝细胞生长因子在正常和轻型急性胰腺炎小鼠的药动学研究

目的:研究肝细胞生长因子(HGF)在轻型急性胰腺炎(MAP)小鼠的药动学及胰腺分布。方法:于正常小鼠背部皮下注射125I-HGF80ng,注射后1、2、3、4、5、10、15、30、60、90、120、180、240、300min分别取血清及胰腺组织,测定HGF含量,计算HGF半减期;小鼠分为对照组和模型组,以雨蛙肽100μg/kg体重腹腔注射复制MAP模型,125I-HGF给药后30、60、120、180、360min测定血清及胰腺组织HGF含量,计算HGF半减期。结果:HGF在正常小鼠血液及胰腺组织中呈先快后慢的代谢特征,后期半减期约为130min;复制MAP后HGF在模型组小鼠血液中的后期半减期约为195min,较对照组延长(P<0.01);模型组胰腺HGF含量高于对照组(P<0.01)。结论:HGF在正常小鼠血液及胰腺中均呈先快后慢的代谢特征;MAP后HGF半减期延长,胰腺中的HGF含量增高。     

聚乙二醇修饰重组人白细胞介素-2及其生物学特性

采用聚乙二醇活性酯（ＰＥＧ－５０００）化学修饰重组人白细胞介素－２（ｒＩＬ－２）及修饰后复性制得修饰产物ＰＥＧ－ｒＩＬ－２。ＰＥＧ－ｒＩＬ－２系列研究：经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＣＴＬＬ－２短期细胞培养结合３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定，ＰＥＧ－ｒＩＬ－２分子量为２５ｋＤ，生物活性保留６９．７％；采用ＬＤＨ释放法测定证实ＰＥＧ－ｒＩＬ－２激活的ＬＡＫ细胞对人体肝癌细胞ＢＥＬ－７４０２和Ｋ５６２细胞的杀伤作用和ｒＩＬ－２相近甚至强于ｒＩＬ－２；小鼠体内的药代动力学研究表明，经静脉给药后，ＰＥＧ－ｒＩＬ－２较ｒＩＬ－２的系统清除率降低了７．７倍，清除相半衰期延长了１２倍。提示ＰＥＧ修饰ｒＩＬ－２后可能改变目前肿瘤免疫法中ｒＩＬ－２的剂量方案，减少其用量和不良反应。     

胰岛素样生长因子结合蛋白7基因在胃癌细胞中的表达及甲基化调控

目的 研究胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)mRNA在胃癌细胞中的表达及其甲基化调控.方法 分别培养胃癌细胞株高分化MKN-28、中分化SGC-7901和AGS、低分化MKN- 45以及胃黏膜正常上皮细胞(GES-1).提取细胞RNA,采用RT-PCR法检测IGFBP7 mRNA在各细胞株中的表达.提取细胞基因组DNA,甲基化修饰后采用甲基特异性PCR(MSP)分析其CpG岛甲基化状态.采用不同浓度去甲基化药物5'-杂氮-2'-脱氧胞嘧啶(5-aza-dc)处理细胞株后,经Real-time PCR定量药物处理前后各细胞株IGFBP7 mRNA的相对表达量.结果 各肿瘤细胞株中IGFBP7 mRNA表达较GES-1降低或消失.MSP检测IGFBP7 mRNA表达降低和消失的细胞株均有CpG岛不同程度的甲基化.不同浓度5-aza-dc处理细胞后,IGFBP7 mRNA的表达量呈剂量依赖性增高.结论 IGFBP7 mRNA在胃癌细胞株中低表达或不表达,其表达下调与其CpG岛甲基化有关.5-aza-dc可使IGFBP7 mRNA表达降低的胃癌细胞株重新表达IGFBP7 mRNA,提示IGFBP7基因CpG岛甲基化可能是IGFBP7在胃癌细胞系中表达缺失的分子机制.     

乙氧硬化醇对胃癌细胞体外杀伤作用的实验研究

目的：探讨乙氧硬化醇对胃癌细胞的体外杀伤作用。方法：采用ＭＴＴ细胞毒试验分别测定乙氧硬化醇对三种不同化程度的胃癌细胞株的杀伤率。结果：乙氧硬化醇对三株胃癌细胞株均存在抑制作用,且呈浓度－抑制率相关关系。结论：乙氧硬化醇能在体外杀伤胃癌细胞。     

下调间隙连接蛋白43表达促进人胰腺癌细胞的侵袭和血管形成

背景：细胞间缝隙连接由间隙连接蛋白（Cx）构成,在肿瘤侵袭和血管形成过程中起重要作用。目的：以RNA干扰技术下调人胰腺癌细胞Cx43表达,观察Cx43表达改变对胰腺癌细胞缝隙连接的影响,探讨其在胰腺癌细胞侵袭和血管形成中的作用。方法：设计靶向Cx43的小干扰RNA（siRNA）并转染人胰腺癌细胞株BxPC3,以实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质印迹法检测Cx43siRNA的干扰效果。染料传递实验检测细胞间缝隙连接,体外血管形成实验检测与BxPC3细胞共培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的血管生成能力,体外侵袭实验检测BxPC3细胞的侵袭能力。结果：Cx43siRNA转染BxPC3细胞后,细胞Cx43mRNA和蛋白表达明显下调。Cx43表达下调后,BxPC3细胞间、BxPC3细胞与HUVEC间缝隙连接显著减少;与BxPC3细胞共培养的HUVEC血管生成增多,每视野血管节点数显著高于对照组（15.69±1.09对5.24±1.32,P〈0.05）;BxPC3细胞的侵袭能力亦明显增强,每视野侵袭细胞数显著多于对照组（76.0±3.0对48.0±2.0,P〈0.05）。结论：下调Cx43表达可能通过减少细胞间缝隙连接,促进人胰腺癌细胞的侵袭和血管形成。     

胰岛素样生长因子结合蛋白7基因在胃癌细胞中的表达及甲基化调控

目的 研究胰岛素样生长因子结合蛋白7（IGFBP7）mRNA在胃癌细胞中的表达及其甲基化调控。方法 分别培养胃癌细胞株高分化MKN-28、中分化SGC-7901和AGS、低分化MKN-45以及胃黏膜正常上皮细胞（GES-1）。提取细胞RNA,采用RT-PCR法检测IGFBP7 mRNA在各细胞株中的表达。提取细胞基因组DNA,甲基化修饰后采用甲基特异性PCR（MSP）分析其CpG岛甲基化状态。采用不同浓度去甲基化药物5'-杂氮-2'-脱氧胞嘧啶（5-aza-dc）处理细胞株后,经Real-time PCR定量药物处理前后各细胞株IGFBP7 mRNA的相对表达量。结果 各肿瘤细胞株中IGFBP7 mRNA表达较GES-1降低或消失。MSP检测IGFBP7 mRNA表达降低和消失的细胞株均有CpG岛不同程度的甲基化。不同浓度5-aza-dc处理细胞后,IGFBP7 mRNA的表达量呈剂量依赖性增高。结论 IGFBP7 mRNA在胃癌细胞株中低表达或不表达,其表达下调与其CpG岛甲基化有关。5-aza-dc可使IGFBP7 mRNA表达降低的胃癌细胞株重新表达IGFBP7 mRNA,提示IGFBP7基因CpG岛甲基化可能是IGFBP7在胃癌细胞系中表达缺失的分子机制。     

舒林酸和吲哚美辛对人血管内皮细胞ECV304的生长抑制作用

目的：体外研究非甾体类消炎药对人血管内皮细胞的生长抑制作用。方法：采用舒林酸和吲哚美辛作用于人脐静脉内皮细胞株ECV304，并设置不同的作用浓度和作用时间，以体外药物敏感实验(MTT)检测舒林酸和吲哚美辛在不同浓度及作用时间下对ECV304细胞的增殖抑制效应；以流式细胞仪技术和Hoechst33258。荧光染色检测药物作用后细胞有无凋亡改变及其形态学变化。结果：舒林酸和吲哚美辛在体外对ECV304细胞均有显著的生长抑制作用，并且具有时间和剂量依赖性，舒林酸能显著诱导ECV304细胞产生凋亡。结论：舒林酸和吲哚美辛在体外具有良好的抑制人脐静脉内皮细胞株ECV304生长的作用，非甾体类消炎药能够诱导血管内皮细胞产生凋亡而抑制其生长，同时也可能存在其他的作用机制。     

人胃腺癌长春新碱耐药细胞系耐药机制的研究

化疗是胃癌主要疗法之一 ,尤其对已处于转移和播散期的胃癌患者 ,有效化疗是延长生存期必不可少的方法。然而肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性常会造成化疗失败 ,耐药原因又相当复杂。我们采用免疫细胞化学和ＲＴ ＰＣＲ法 ,从蛋白、分子水平对ＭＫＮ2 8/ＶＣＲ、ＭＫＮ45 /ＶＣＲ进行耐药相关因素分析 ,阐明它们的耐药机制。材料和方法一、材料1.细胞系 :人胃腺癌细胞系ＭＫＮ2 8、ＭＫＮ45细胞 ,ＭＫＮ2 8/ＶＣＲ、ＭＫＮ45 /ＶＣＲ长春新碱耐药细胞 [上述两种耐药细胞由本实验室采用单药剂量递增法培育 ,耐药剂量为长春新碱 (ＶＣＲ) 1μｇ/…