miR-7在肾癌中的表达及临床意义研究

目的检测肾细胞癌组织及相应癌旁正常组织中miR-7的表达,分析18达与临床病理特征之间的关系,为进一步研究miR-7在肾癌的发生发展中作用奠定基础。方法收集48例经手术切除的配对肾癌及癌旁组织标本,提取组织中总RNA,经逆转录获得cDNA,采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）方法检测标本中miR-7表达量,并通过统计学软件分析其表达量与患者临床病理特征之间的相关性。结果与相应癌旁组织相比,肾癌组织中miR-7表达量明显升高,其中34例（70.8%）肾癌标本miR-7表达上调,14例（29.2%）表达下调,差异有统计学意义（P〈0.05）。肾细胞癌中miR-7表达上调与患者年龄、性别、肾癌组织类型、TNM分期、AJCC临床分期无相关性（P〉0.05）。结论 miR-7在肾癌组织中明显高表达,提示其可能与肾癌的发生和发展相关,可能成为肾癌早期诊断、治疗乃至预后判断的新的生物标记物。     

肾癌患者血清和组织中miR-21,-122,-222含量检测及其相关靶基因的探究

目的:研究肾癌患者血清和组织中miR-21,-122,-222的含量并探究其潜在靶基因。方法:选择在本院诊断为肾癌并接受手术切除的54例患者及同期体检的70例健康志愿者作为本研究的受试者,分别作为肾癌组和对照组,采集血清标本及肾癌组织、癌旁组织。检测血清、肾癌组织、癌旁组织中miR-21、-122、-222的表达量以及肾癌组织、癌旁组织中抑癌基因、侵袭抑制基因的表达量。结果:肾癌组血清中miR-21,-122,-222的表达量显著高于对照组;肾癌组织中miR-21,-122,-222的表达量显著高于癌旁组织,PDCD4、BTG1、NPRL2、Bax、TIMP1、TIMP2、E-cadherin的表达量低于癌旁组织。miR-21,-122,-222的表达量与PDCD4、BTG1、NPRL2、Bax、TIMP1、TIMP2、E-cadherin的表达量呈负相关。结论:肾癌患者血清和组织中高表达的miR-21,-122,-222能够抑制多种抑癌基因、侵袭抑制基因的表达,进而促进肾癌细胞的增殖、侵袭。     

结直肠癌患者血浆与组织中微小RNA表达水平的临床研究

目的　探讨结直肠癌（CRC）患者术前、术后血浆微小RNA（miRNA）表达水平变化,以及术前血浆与癌组织miRNA表达水平的相关性。方法　选取2014年6月—2016年8月同济大学附属上海第十人民医院胃肠外科就诊的CRC患者32例,另选取同期体检健康者33例。采集健康者及CRC患者术前、术后1个月外周静脉血,留取CRC患者癌及癌旁组织。通过实时荧光定量聚合酶链反应检测血浆、癌组织与癌旁组织中miR-21、miR-17、miR-145、miR-15b、miR-150表达水平。结果　与健康者比较,CRC患者术前血浆miR-21、miR-17、miR-145、miR-15b表达水平上调（P<0.05）;与术前比较,CRC患者术后1个月血浆miR-21、miR-17、miR-15b表达水平下调（P<0.05）;与癌旁组织比较,CRC患者癌组织中miR-21、miR-17、miR-145、miR-15b表达水平上调,miR-150表达水平下调（P<0.05）。相关性分析显示,CRC患者术前血浆与癌组织miR-21（r=0.516,P=0.002）、miR-15b（r=0.526,P=0.001）表达水平呈正相关。结论　CRC患者血浆和癌组织miR-21、miR-17、miR-145、miR-15b表达水平失调,其中血浆miR-21、miR-15b有望成为CRC新型非侵袭性诊断标志物。     

肾癌中MIR-184的异常表达及意义

目的：探讨microRNA-184(MIR-184)在肾细胞癌发生过程中的作用。方法：应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测MIR-184在51例不同阶段肾癌及其癌旁组织中的相对表达量,并分析其表达量与肾癌患者年龄、性别及临床分期的相关性。结果：MIR-184在肾癌组织的平均表达量为-14.664 6±5.362 4,在相应癌旁组织中的平均表达量为-10.408 7±3.482 7, MIR-184在肾癌与癌旁组织中的表达差异具有统计学意义（P＜0.01）。以MIR-184在肾癌组织中表达量的平均值-14.664 6为界,将患者分为MIR-184低表达组和MIR-184高表达组,同时分别按照年龄、性别、临床分期将患者分为3组。卡方检验统计分析结果显示：癌组织中MIR-184的表达高低与患者的年龄、性别及肾癌的临床分期均没有相关性（具体概率分别为：P>0.30,P>0.99,P>0.30）。结论：MIR-184在肾癌发生、发展过程中发挥着重要的作用。     

miR-130b-3p在肾癌中表达及PI3K/AKT途径参与的机制研究

目的 探究miR-130b-3p调节PI3K/AKT途径对肾癌细胞生物学行为的影响及作用机制。方法 临床收集肾癌患者78例,检测肿瘤组织和癌旁组织中miR-130b-3p和PTEN蛋白水平,分析miR-130b-3p与肾癌病理特征的关系。通过相关性分析探究肾癌组织中miR-130b-3p与PTEN蛋白的相关性。786-O细胞分为NC、miR-130b-3p、PTEN和miR-130b-3p+PTEN组,分别转染NC、miR-130b-3p mimic和/或pcDNA 3.1 PTEN来过表达miR-130b-3p和/或PTEN。分别检测各组细胞活力、凋亡率、侵袭能力以及PI3K/AKT通路水平。结果 肾癌组织中miR-130b-3p水平显著高于癌旁组织(P<0.05)。miR-130b-3p表达水平与性别、年龄、肿瘤直径无关,高水平的miR-130b-3p与高临床分期和淋巴转移有关(P<0.05)。miR-130b-3p与PTEN靶向结合(P<0.05)。与NC组比较,miR-130b-3p组的PTEN蛋白和凋亡率显著降低,增殖活力、侵袭能力和PI3K/AKT通路显著...     

RCRF在高级别肾癌组织中表达上调并影响肾癌患者预后

目的 研究不同病理级别肾细胞癌中差异表达的长链非编码RNAs（lncRNAs）,找到其中一种lncRNA——RCRF与肾癌患者临床病理资料的关系,从而判断肾癌预后。方法 取6例肾细胞癌原发灶肿瘤组织,3例病理分级为FuhrmanⅠ级,另3例为Fuhrman Ⅲ~Ⅳ级,采用lncRNA芯片技术,筛选差异表达的lncRNAs。另取40例肾细胞癌患者的癌组织及癌旁正常组织,22例病理分级为FuhrmanⅠ~Ⅱ （低级别）,18例为Fuhrman Ⅲ~Ⅳ （高级别）,利用实时定量PCR技术检测在癌及癌旁非肿瘤组织中RCRF的表达,并研究RCRF与临床分期、病理分级、淋巴结转移、远处转移之间的关系。结果 筛选出320个与肾细胞癌病理级别相关的差异表达lncRNAs。肾癌组织尤其是高级别肾癌组织中RCRF的相对表达上调（P<0.01）。RCRF表达与肾癌病理分级、淋巴转移及远处转移有关（P<0.05）。结论 RCRF在高级别肾癌组织中表达上调,并且影响肾癌患者的预后。     

肾癌患者组织蛋白酶B检测的临床意义

目的　观察组织蛋白酶B在肾癌癌组织中的表达 ,探讨其临床应用价值。方法　应用免疫组化技术测定组织蛋白酶B在肾癌患者癌组织和癌周组织中阳性的表达。结果　癌组织中组织蛋白酶B平均标记指数在癌组织较癌周组织明显增高 ,两者之间有高度显著性差异 (p <0 .0 0 1 )。结论　组织蛋白酶B在癌组织中表达增强表明 ,组织蛋白酶B与肾癌恶性表现相关 ,是肾癌患者临床监测有效指标     

白细胞介素34在肾癌中的表达水平及其与临床病理特征的相关性研究

目的 探讨白细胞介素34(IL-34)在肾癌患者血清及肾癌组织中的表达及其临床意义。方法 选取2019年9月~2020年12月徐州医科大学附属医院泌尿外科住院的60例肾癌患者作为研究组,选择54例同时期来笔者医院体检的健康志愿者作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肾癌患者及健康对照血清中IL-34的表达水平;分析肾癌患者血清中IL-34的表达水平与肾癌临床病理特征的关系。采用PCR法检测肾癌患者肿瘤组织及癌旁组织中IL-34mRNA的表达。通过受试者工作特征曲线(ROC)分析IL-34对肾癌的诊断效能。结果 肾癌患者血清中IL-34为174.22±49.34pg/ml,健康对照为101.73±36.23pg/ml两者比较,差异有统计学意义(P<0.001)。不同肿瘤分期、淋巴结转移、分级以及肿瘤直径患者的IL-34水平比较,差异有统计学意义(P<0.001)。肾癌患者术后血清IL-34水平低于术前,差异有统计学意义(P<0.001)。不同分期肾癌组织中IL-34mRNA表达均高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001)。ROC曲线分析显示血清IL-34为136.35pg/ml时,预测诊断肾癌的曲线下面积为0.889(95% CI:0.832～0.946,P＜0.001),敏感度为78.3%,特异性为85.2%。结论 IL-34在肾癌中高表达,其表达水平与临床分期及病理分级密切相关。     

老年直肠癌患者外周血与癌组织miR-141的表达及其临床相关性

目的 研究老年直肠癌患者外周血与癌组织微小RNA(miR)-141的表达及临床相关性.方法 75例直 肠癌患者取直肠癌组织及癌旁正常组织并抽取肘静脉血,应用实时聚合酶联法检测直肠癌、癌旁正常组织标本和 外周血中miR-141的表达水平,分析直肠癌组织和外周血miR-141的相关性,外周血miR-141与临床病理特征和临 床预后的关系.结果 (1)与健康体检者外周血或者与正常癌旁组织相比,miR-141的表达水平在直肠癌患者外 周血和直肠癌组织中均明显下调(P<0.01);(2)有淋巴结转移的患者中直肠癌组织miR-141水平与外周血 miR-141水平呈正相关(r=0.694,P<0.01),无淋巴结转移的患者中直肠癌组织miR-141水平与外周血miR-141 水平呈正相关(r=0.725,P<0.01);(3)直肠癌患者外周血miR-141表达与肿瘤分期、肿瘤分化程度和有无淋 巴结转移相关;(4)术后6个月随访显示,75例患者中有13例(17.33%)患者出现复发/转移,复发/转移患者 外周血miR-141水平为(2.64±0.34),显著低于未复发/转移患者(P<0.01).结论 miR-141在直肠癌患者外 周血中表达与在癌组织中表达变化趋势一致,可反映直肠癌的临床病理特征.     

肾癌组织中HMGB1、MMP9的表达与临床分期、预后的相关性研究

目的  探讨高迁移率族蛋白B1（HMGB1）、基质金属蛋白酶9（MMP9）在肾癌组织中的表达,及与肾癌临床病理特征、预后的相关性。方法  采用免疫组织化学、实时定量聚合酶链反应法,检测67例肾透明细胞癌患者癌组织、癌旁组织中HMGB1、MMP9的表达,采用Person法分析其与临床病理学特征的相关性,采用Kaplan-Meier方法进行生存曲线分析,采用Cox比例风险模型分析影响患者预后相关因素。结果  肾癌组织中HMGB1、MMP9表达高于癌旁肾组织,差异有统计学意义;肾癌肿瘤TNM分期、淋巴结转移度、肿瘤直径与HMGB1、MMP9表达相关,而不同性别、年龄间HMGB1、MMP9的表达差异无统计学意义;HMGB1、MMP9低表达肾癌患者的生存期要高于中、高表达患者,HMGB1、MMP9的表达水平与预后呈负相关;HMGB1、MMP9、肿瘤TNM分期、淋巴结转移度是影响肾癌患者预后的独立危险因素。结论  HMGB1、MMP9可能在肾癌的浸润、转移机制中起着非常重要的作用,联合检测肾癌组织中HMGB1和MMP9的表达水平可能有助于评估肾癌的生物学特征和患者预后。

     

miR-132在上皮性卵巢癌中的表达及作用机制研究

目的 分析微小RNA-132(miR-132)在上皮性卵巢癌组织和细胞中的表达及其对上皮性卵巢癌细胞迁移与侵袭的作用机制.方法 收集2018年10月—2020年2月蚌埠医学院第一附属医院妇瘤科手术切除的卵巢癌及癌旁非肿瘤组织标本36份,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测卵巢癌组织、癌旁组织中miR-132相对表达...     

miR-522促进食管癌增殖和转移的作用机制研究

目的 研究微小RNA-522(miR-522)对食管癌细胞增殖和转移能力的影响及作用机制.方法 选择2014年1月—2015年6月辽宁省健康产业集团阜新矿总医院心胸外科行食管癌根治性手术患者60例,qRT-PCR检测miR-522在食管癌组织和癌旁组织中的表达;培养食管癌细胞,qRT-PCR检测食管癌细胞系TE-1、T...     

miR-125b靶向调控HK2表达增强乳腺癌MCF-7细胞放射敏感性的研究

目的探讨miR-125b靶向调控HK2对乳腺癌MCF-7细胞放射敏感性的影响。方法将miR-125b模拟物及其阴性对照转染至乳腺癌MCF-7细胞,分别记为miR-125b组和miR-NC组,采用RT-PCR检测MCF-7细胞中miR-125b和HK2 mRNA的表达,Western blotting检测HK2蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验检测miR-125b和HK2的靶向关系。另外将miR-125b模拟物和pcDNA3.1-HK2质粒共转染至MCF-7细胞中,记为miR-125b+HK2组,通过克隆形成实验和流式细胞仪检测miR-NC组、miR-125b组和miR-125b+HK2组细胞的存活分数和凋亡率。结果与miR-NC组相比,转染miR-125b模拟物后MCF-7细胞中miR-125b表达升高（P < 0.01）,而HK2 mRNA和蛋白的表达降低（P < 0.01）。双荧光素酶报告基因实验证实HK2是miR-125b的潜在靶基因。与miR-NC组相比,miR-125b组细胞的存活分数降低、凋亡率升高（P < 0.01）;与miR-125b组相比,miR-125b+HK2组存活分数降低明显升高而凋亡率降低（P < 0.01）。结论miR-125b可通过靶向调控HK2表达增强乳腺癌MCF-7细胞的放射敏感性。     

非小细胞肺癌组织miR-139-5 p和CTNNB1蛋白表达与放射敏感性的关系

目的 探讨非小细胞肺癌组织中微小RNA-139-5p(miR-139-5p)、钙黏蛋白相关蛋白(CTNNB1)表达与患者放射敏感性的关系.方法 选取2017年2月—2021年5月于唐山市人民医院放化七科和肿瘤内科就诊的非小细胞肺癌患者癌组织156例为研究对象(研究组);另选取非小细胞肺癌患者86例癌旁正常肺组织作为对照...     

MicroRNA-7-5p 调控p53 表达对非小细胞肺癌 增殖及侵袭能力的影响

目的 探讨microRNA-7-5p（miR-7-5p）是否通过调控p53 基因的表达而影响人非小细胞肺 癌（NSCLC）细胞体外的增殖、侵袭能力。方法 通过双荧光素酶报告证明p53 为miR-7-5p 的下游靶基 因,将miR-7-5p 转染至人NSCLC 细胞株NCI-H1975,依据实验对照原则分为空白对照组、miR-7-5p 组 和miR-NC 组,观察细胞中p53 基因在转录和蛋白水平的表达变化;然后通过细胞增殖、细胞周期实验及 侵袭实验,观察NCI-H1975 细胞体外增殖和侵袭能力的变化。结果 miR-7-5p 组的p53 mRNA 相对表达 量、迁移细胞数及克隆形成数均低于miR-NC 组（P <0.05）。miR-7-5p 组3''UTR 荧光素酶的表达活性较 miR-NC 组低（P <0.05）。miR-7-5p 组p53 mRNA 和蛋白相对表达量较miR-NC 组低（P <0.05）。miR- 7-5p 组细胞增殖能力较miR-NC 组低（P <0.05）。miR-7-5p 组细胞周期G0/G1 期比例高于空白对照组 和miR-NC 组（P <0.05）。miR-7-5p 组细胞周期的G2/M 期比例低于miR-NC 组（P <0.05）。miR-7- 5p 组细胞周期的S 期比例低于空白对照组和miR-NC 组（P <0.05）。miR-7-5p 组细胞侵袭能力低于空白对 照组和miR-NC 组（P <0.05）。结论 miR-7-5p 主要是通过靶向p53 促进其mRNA 和蛋白的表达,并减弱人 NSCLC 的增殖和侵袭能力。     

MicroRNA-196a 在喉癌组织中的表达及其 对喉癌细胞侵袭和转移的影响

目的 探讨microRNA-196a（miR-196a）在喉癌组织中表达及其对喉癌细胞侵袭和转移的影响。 方法 选取2015 年1 月—2017 年12 月金华市中心医院70 例喉癌手术切除标本的喉癌组织和癌旁组织。将 人喉癌Hep-2 细胞分为空白对照组、阴性对照组及siRNA 组。siRNA 组细胞转染pcDNA/miR-196a,阴性 对照组细胞转染pcDNA/miR-NC,空白对照组不做处理。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定癌旁 组织和喉癌细胞中miR-196a 水平;Transwell 小室测定喉癌细胞侵袭和迁移能力;Western blotting 检测喉癌 细胞磷脂酰肌醇-3- 激酶（PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（p-PKB）、Bax 及Bcl-2 蛋白水平;RT-PCR 测定喉 癌细胞PI3K、p-PKB、Bax 及Bcl-2 mRNA 水平。结果 喉癌组织中miR-196a 水平高于癌旁组织（P <0.05）。 与空白对照组和阴性对照组比较,siRNA 组喉癌细胞中miR-196a 水平降低（P <0.05）,细胞侵袭和迁移能 力下降（P <0.05）,PI3K、p-PKB 及Bcl-2 蛋白和mRNA 水平降低（P <0.05）,Bax 蛋白和mRNA 水平升 高（P <0.05）;空白对照组与阴性对照组细胞各指标比较,差异无统计学意义（P >0.05）。结论 喉癌组织中 miR-196a 水平升高,沉默miR-196a 可降低喉癌细胞的侵袭和迁移能力,其机制可能与PI3K/PKB 信号通路 有关。     

MDM_2基因产物在大肠癌中的表达及其临床意义

目的　研究MDM2 基因蛋白表达与大肠癌生物学行为及预后的关系。方法　应用免疫组化LDP法检测 6 0例大肠癌手术标本、30例癌旁组织及 16例大肠良性病变组织中MDM2 基因蛋白的表达。结果　大肠癌组织中 ,MDM2 基因蛋白表达阳性率为 75 % ( 4 5 /6 0 ) ,其中伴有区域淋巴结转移者阳性率为 95 .6 % ( 4 3/45 ) ,无伴有淋巴结转移者阳性率为 13 .3 % ( 2 /15 ) ,两者比较差异有高度显著性 ( χ2 =36 .30 ,P <0 .0 0 1) ;MDM2 基因蛋白表达水平在不同的大肠癌分化程度、浸润深度中差异有高度显著性 ( χ2 分别为 2 8.42 ,2 4.6 7,P均 <0 .0 0 1) ;但在不同的Duke分期、不同年龄组、不同部位及类型的大肠癌之间差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;MDM2 基因蛋白表达阳性者术后 5年生存率与阴性者比较差异有显著性 ( χ2 =6 .40 ,P <0 .0 5 )。 30例癌旁组织及 16例良性病变呈阴性表达。结论　MDM2 基因在大肠癌浸润和淋巴结转移过程中发挥重要作用 ,MDM2 基因蛋白的检测 ,可作为大肠癌预后判断的一个重要指标。     

miR-338-3p和MACC1基因在卵巢上皮性癌(EOC)组织中的表达及其意义

 目的 探讨微RNA-338-3p（miR-338-3p）和MET转录调剂因子MACC1在卵巢上皮性癌（epithelial ovariancancer，EOC）组织中的表达及其临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR技术检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性上皮性肿瘤组织和65例EOC组织中miR-338-3p和MACC1基因的表达情况，分析二者表达的相关性及其与EOC临床病理指标的关系，Log-rank和Cox回归分析影响EOC患者复发和死亡的危险因素，Kaplan-Meier法分析miR-338-3p和MACC1表达对EOC患者生存的影响。结果 EOC组织中miR-338-3p和MACC1基因的表达分别为0.331±0.038和0.774±0.025，与正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤组织中的表达差异有统计学意义（F=77.916，P<0.001；F=77.945，P<0.001），不同性质卵巢组织中miR-338-3p和MACC1的表达呈明显负相关（r=-0.968，P<0.001）。在EOC中，临床分期越晚、组织级别越高、有淋巴结转移的癌组织中miR-338-3p表达越低、MACC1表达越高。Log-rank单因素分析显示miR-338-3p低表达与EOC患者的复发（P=0.038，HR=4.139，95% CI：1.271~8.078）和死亡（P=0.008，HR=3.007，95% CI：1.217~7.431）相关。与其他患者相比，miR-338-3p低表达且MACC1高表达的EOC患者的总体生存率和无进展生存率最低（χ²=16.960，P=0.001；χ²=18.930，P=0.000）。结论 miR-338-3p低表达和MACC1高表达可能与EOC患者预后不良相关，二者可能共同参与EOC的进展和复发。     

miR-106a对人结直肠癌SW480细胞增殖和侵袭能力的影响

目的：：研究 microRNA-106a(miR-106a)对低转移性人结直肠癌 SW480细胞增殖和侵袭等恶性生物学行为的影响。方法：采用实时荧光定量 PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测20对结直肠癌组织及其癌旁组织中 miR-106a的表达,将 miR-106a mimics 转染到 SW480细胞中,用 qRT-PCR法检测 miR-106a的表达水平,并用CCK8实验、克隆形成实验和划痕法检测 SW480细胞的增殖、克隆形成以及体外迁移能力。结果：与癌旁组织相比较,结直肠癌组织中 miR-106 a 的表达水平升高(t=2.05,P=0.047);与mimics control转染组相比,miR-106a mimcs转染组miR-106a的表达水平显著升高(t=13.25,P=0.000),且细胞活力(72 h,t=4.52,P=0.000;96 h,t=6.17,P=0.000)和细胞克隆数明显升高(t=5.69,P=0.005),以及伤口愈合能力升高(48 h,t=5.44,P=0.032)。结论：过表达 miR-106a可显著促进低转移的人结直肠癌SW480细胞增殖和迁移能力,为结直肠癌的治疗提供了潜在的策略。     

miR-107靶向肿瘤蛋白D52抑制前列腺癌细胞的增殖和侵袭

目的研究microRNA-107(miR-107)对前列腺癌细胞生物学功能的影响和潜在的作用机制。方法采用瞬时转染、细胞克隆、细胞划痕、侵袭实验检测miR-107组与对照组(miR-NC组)对前列腺癌细胞生物学功能的影响。此外，通过靶基因预测软件TargetscanHuman7.2筛选出肿瘤蛋白D52(TPD52)作为miR-107的潜在下游靶基因并采用双荧光素酶报告基因实验进行了特异性结合的验证。同时，进一步通过蛋白免疫印迹和免疫荧光实验进行靶基因的表达检测。结果miR-107组的细胞划痕愈合率、侵袭率、增殖率均低于miR-NC组(P < 0.01)。miR-107组对靶基因TPD52表达量小于miR-NC组(P < 0.01)。结论miR-107通过靶向TPD52抑制前列腺癌的增殖和侵袭。