miR-132 靶向调控Ezrin 抑制卵巢癌细胞增殖、促进凋亡的实验研究

目的:探讨微小核糖核酸分子(miRNA)-132 在卵巢癌中生物学作用和作用靶点。方法:收集22 例卵巢癌及癌旁非肿瘤组织标本,RT-PCR 检测miR-132 表达量;RT-PCR 检测人正常卵巢上皮细胞和卵巢癌细胞系中miR-132 表达量;选择miR-132 表达量最高或最低的卵巢癌细胞株,分别转染阴性对照质粒(NC)和miR-132 mimic 质粒,RT-PCR 检测转染后miR-132 表达量;CCK-8 法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot 检测Ezrin 蛋白表达。结果:卵巢癌组织中miR-132 表达量显著低于癌旁非肿瘤组织,而卵巢癌细胞系中miR-132 表达量显著低于正常卵巢上皮细胞,差异均有统计学意义(P<0.05);选择卵巢癌细胞株中miR-132 表达量最低卵巢癌SKOV3 细胞株进行基因转染,与转染阴性对照质粒相比,转染miR-132 mimic 质粒后miR-132 表达量显著上升,细胞增殖显著降低,细胞凋亡显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05);Western blot 结果显示,上调miR-132 表达后,卵巢癌SKOV3 细胞株中Ezrin 蛋白表达显著上升(P<0.05)。结论:在卵巢癌中,miR-132 可能作为一种抑癌基因通过靶向调控Ezrin 抑制卵巢癌细胞增殖、促进凋亡。     

LEEP刀治疗宫颈上皮内瘤样病变90例临床分析

目的探讨LEEP刀宫颈环形电切术治疗宫颈上皮内瘤变（CIN）的临床疗效、并发症等。方法通过对2009～2010．年行阴道镜下活检病理诊断为CIN的90例患者行LEEP刀宫颈环形电切术者随访并行回顾分析。切除组织全部送病理检查,观察手术时间、出血量及术后修复情况。结果宫颈环行电切除术首次治疗成功率为96．7％。平均手术时间为（6．5±1．0）min;平均出血量为（5．0±1．0）ml。阴道镜下活检病理诊断与最后诊断的符合率为82．2％（74／90）,90例患者术后1年细胞学检查均转阴性（100％）。结论LEEP刀宫颈环形电切术具有手术操作简单、并发症少、疗效高等特点．是一种理想的CIN诊治方法。     

术前血清鳞状细胞癌抗原水平与早期子宫颈鳞状细胞癌淋巴结转移的关系

目的:探讨术前血清鳞状上皮细胞癌抗原(SCCAg)水平与早期子宫颈鳞状细胞癌淋巴结转移的关系.方法:对391例行根治性手术的早期子宫颈鳞状细胞癌患者的临床病理资料进行回顾性分析,检测术前SCCAg水平,并将其与各临床病理参数的关系进行统计学分析.结果:术前SCCAg水平在FIGO分期、肿瘤直径、肌层浸润深度、子宫颈旁有无受侵及淋巴结有无转移间差异均有统计学意义(P<0.01),而在肿瘤的组织学分级和脉管有无浸润间差异均无统计学意义(P>0.05).仅有肿瘤直径(P=0.001 5)和淋巴结转移(P=0.000 1)是影响SCCAg水平的独立危险因素,且淋巴结转移比肿瘤直径对SCCAg水平影响更大.在Ⅰb1期,当选择截断值为2.5 ng/ml时,有较好的灵敏度(0.54)和特异度(0.83),Youden指数(0.37)最高,预测效果最佳;而在Ⅰb2和Ⅱa期,当选择截断值为4.5 ng/ml时,有较好的灵敏度(0.55)和特异度(0.79),Youden指数(0.34)最高,预测效果最佳.结论:术前SCCAg水平对评估淋巴结转移有一定的价值.在Ⅰb1期和Ⅰb2+Ⅱa期,分别选择截断值为2.5 ng/ml和4.5 ng/ml时,有最佳预测效果.     

抑制热休克蛋白70表达可增强宫颈癌细胞对顺铂化疗的敏感性

目的 探讨抑制宫颈癌Hela229细胞内热休克蛋白(HSP)70表达对顺铂(DDP)化疗敏感性的影响.方法 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)及集落克隆法测定各因素对Hela229细胞的抑制作用;溴化丙啶(PI)单染法及DAPI检测细胞的凋亡率;JC-1染色法测定线粒体膜电位(△Ψm)的变化;Western blotting测定相关蛋白的表达;建立裸鼠动物模型测定各因素体内的抑瘤作用.结果 宫颈癌细胞较正常宫颈细胞高表达HSP70;当HSP70抑制剂与顺铂合用,细胞的存活率较单用顺铂显著下降(P<0.01);PI与DAPI染色实验表明HSP70抑制剂能增加顺铂诱导的细胞凋亡率;JC-1染色结果显示,HSP70抑制剂处理后顺铂组细胞线粒体膜电位发生了明显的降低.Western blotting实验结果显示HSP70蛋白表达抑制剂与顺铂合用较单用顺铂显著增加促凋亡蛋Bax/caspase-3表达及caspase-3活化;明显降低抑制凋亡相关蛋白Bcl-2表达.裸鼠移植肿瘤模型结果表明HSP70抑制剂与顺铂合用能增强顺铂对模型小鼠肿瘤的抑制作用(P<0.01).结论 抑制HSP70表达可增强宫颈癌细胞对顺铂的敏感性,机制可能是通过抑制HSP70,进而调节凋亡相关蛋白的表达,促进宫颈癌细胞凋亡.HSP70有望成为宫颈癌基因治疗的一个新靶点.     

缺氧相关蛋白碳酸酐酶-Ⅸ在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的：检测缺氧相关蛋白碳酸酐酶-Ⅸ（CAⅨ）在上皮性卵巢癌中的表达及与临床病理特征的关系,探讨缺氧在上皮性卵巢癌发生、发展中的作用.方法：选取上皮性卵巢癌组织40例,交界性上皮性卵巢肿瘤组织30例,正常卵巢组织30例,用免疫组织化学方法检测CAⅨ在3种组织中的表达.结果：CAⅨ在正常卵巢组织、交界性上皮性卵巢肿瘤组织及上皮性卵巢癌组织的表达率分别为0.0％、16.7％和52.5％,差异均有统计学意义（P＜0.05）.CAⅨ的阳性表达率在上皮性卵巢癌组织临床分期、组织学分级及有无淋巴结转移间差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论：CAⅨ在上皮性卵巢癌的发生及侵袭、转移中起重要作用,上皮性卵巢癌中CAⅨ的高表达提示缺氧标志物CAⅨ可能是上皮性卵巢癌的预后因素之一.     

缺氧诱导因子-1α和碳酸酐酶-9在子宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和碳酸酐酶-9(CAⅨ)在子宫颈鳞状细胞癌(SCC)组织中的表达及其临床意义。方法:采用EliVision Plus/HRP免疫组织化学法检测HIF-1α和CAⅨ在30例正常子宫颈组织、55例子宫颈上皮内瘤变(CIN)和80例SCC组织中的表达特点及相关性。结果:HIF-1α在正常子宫颈组织、CIN及SCC组织中的表达率分别为0.00%、43.64%和76.25%,差异均有统计学意义(P0.01);CAⅨ在正常子宫颈组织、CIN及SCC组织中的表达率分别为0.00%、40.00%和66.25%,差异均有统计学意义(P0.01);低分化SCC组织中HIF-1α、CAⅨ的表达率高于高-中分化SCC组织(P0.05),有淋巴结转移SCC组织中HIF-1α、CAⅨ的表达率高于无淋巴结转移SCC组织(P0.05),Ⅱ期SCC组织中HIF-1α的表达率高于Ⅰ期SCC组织(P0.05);SCC组织中HIF-1α与CAⅨ的表达呈正相关关系(P0.05)。结论:HIF-1α、CAⅨ在SCC的发生、发展中起重要作用,SCC中HIF-1α和CAⅨ的高表达和正相关关系提示了以缺氧诱导因子通路为基础的分子靶向治疗的可行性。     

术前新辅助化疗在Ⅰb2～Ⅱb期子宫颈腺癌中的应用效果观察

目的:探讨新辅助化疗治疗Ⅰb2～Ⅱb期子宫颈腺癌的近期疗效。方法:将Ⅰb2～Ⅱb期子宫颈腺癌患者44例随机分为2组:对照组20例采用单纯手术治疗;研究组24例采用紫杉醇联合顺铂或奈达铂化疗1～2个疗程后行广泛性全子宫双附件切除+盆腔淋巴结清扫术。观察患者化疗前后的肿瘤变化情况及2组患者的术后淋巴结转移、宫旁脉管癌栓、宫颈浸润、出血量、手术时间情况及不良反应。结果:新辅助化疗能够使肿瘤体积较化疗前缩小或消失,临床有效率高达70.8%。研究组和对照组患者的手术时间分别为（180±30）min和（200±30）min,术中出血量分别为（400±50）ml和（450±50）ml,研究组均少于对照组（P<0.05和P<0.01）。研究组和对照组宫颈深层间质浸润发生率分别为37.5%和 70.0%,脉管癌栓发生率分别为25.0%和55.5%,淋巴结转移率分别为12.5%和40.0%,研究组均低于对照组（P<0.05）,而2组阴道切缘率分别为0.00%和15.0%,差异无统计学意义（P>0.05）。结论:术前新辅助化疗可以提高手术治疗Ⅰb2～Ⅱb期子宫颈腺癌的临床疗效。     

纳米碳示踪前哨淋巴结检测技术在腹腔镜下早期子宫内膜癌手术中的应用

目的探讨纳米炭示踪前哨淋巴结（SLN）检测技术在腹腔镜下早期子宫内膜癌手术中的临床价值。方法40例早期子宫内膜癌病人行腹腔镜下全子宫双附件+盆腔和/或腹主动脉旁淋巴结清扫术，术中行纳米炭示踪SLN显影识别，记录黑染的SLN的检测情况，术后将切除的淋巴结病理检查。结果40例病人中37例共检测出黑染淋巴结142枚，平均3.8枚/人，检出率为92.5%。SLN的检出率在不同注射部位、不同分期、不同肿瘤直径病人中差异均无统计学意义（P>0.05）。子宫内膜癌SLN主要分布在髂外淋巴结（32.4%，46/142）和闭孔淋巴结（25.7%，37/142）。纳米炭示踪SLN的敏感度为100%，阴性预测值为100%。结论腹腔镜下早期子宫内膜癌术中纳米炭示踪SLN技术是可行的，为判断淋巴结转移的情况及手术范围的选择提供了有效的依据。