miR-139-5p在小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨miR-139-5p在小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义,阐明miR-139-5p在小细胞肺癌发生发展中的作用。方法：采用细胞生长、凋亡及周期实验检测miR-139-5p的生物学功能;实时荧光定量PCR法检测50例小细胞肺癌患者癌组织及癌旁正常组织中miR-139-5p的表达,结合临床资料分析其在临床中的作用。结果：miR-139-5p在小细胞肺癌组织中的表达水平低于正常肺组织（P<0.01）;转染miR-139-5p mimics后能够明显上调细胞中miR-139-5p的表达,差异有统计学意义（P<0.01）。与对照组比较,上调miR-139-5p的表达后细胞的增殖能力降低（P<0.01）,G₁期细胞明显增多（P<0.05）,细胞周期发生G₀/G₁期阻滞。单因素分析,miR-139-5p的表达与患者的性别和年龄无关（P>0.05）,miR-139-5p在局限期（LD）患者中的表达较广泛期（ED）患者低,两者的miR-139-5p表达率比较差异有统计学意义（χ²=10.546,P=0.001）;miR-139-5p在耐药患者中的表达较化疗敏感患者增高（χ²=7.025,P=0.008）。miR-139-5p在存活患者中的表达较死亡患者降低（χ²=7.697,P=0.006）;Cox回归分析,疾病分期和miR-139-5p的表达可作为小细胞肺癌独立的预后因子。结论：miR-139-5p通过抑制细胞增殖、促进细胞凋亡及诱导细胞周期阻滞参与调节小细胞肺癌发生发展,可作为评估小细胞肺癌患者临床预后的靶基因。     

非小细胞肺癌患者瘤组织LncRNA LINC00460、miR-98-5p的水平及临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者瘤组织长链非编码RNA(lncRNA)LINC00460、microRNA-98-5p(miR-98-5p)表达及临床意义。方法 选取2017年1月至2018年12月57例NSCLC患者病例资料进行回顾性研究。术中留取癌组织和癌旁组织(距肿瘤边缘2 cm),比较癌组织及癌旁组织miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达，分析癌组织miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达与病理特征的相关性，比较不同预后患者miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达，logistic回归分析癌组织miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达与预后的关系，并比较癌组织miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达不同患者总生存率，列线图分析miR-98-5p、LncRNA LINC00460对患者预后评估价值。结果 癌组织miR-98-5p表达低于癌旁组织，LncRNA LINC00460表达高于癌旁组织(P<0.05)。NSCLC患者癌组织miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达...     

非小细胞肺癌组织中miR-454-3p、CPEB1 mRNA表达水平及临床意义

目的分析非小细胞肺癌组织中微小RNA-454-3p(miR-454-3p)、胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白1(CPEB1)信使RNA(mRNA)表达水平与临床病理特征及预后的相关性。方法选取2014年4月—2016年3月在中国科学院合肥肿瘤医院确诊为非小细胞肺癌患者96例,术中取其癌组织设为肺癌组,癌旁正常组织为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测2组miR-454-3p、CPEB1 mRNA表达水平;以二者表达水平均值为界,再分为miR-454-3p低表达亚组、高表达亚组和CPEB1 mRNA低表达亚组、高表达亚组,分析癌组织中miR-454-3p、CPEB1 mRNA表达水平与患者临床病理特征及预后的关系;Logistic回归分析影响非小细胞肺癌患者预后的因素。结果肺癌组miR-454-3p表达水平高于对照组,CPEB1 mRNA表达水平低于对照组(t/P=14.130/0.000、12.541/0.000)。患者癌组织miR-454-3p、CPEB1 mRNA表达水平与性别、年龄、吸烟史、分化程度无关(P>0.05),与肿瘤直径、病理类型、淋巴结远处转移、TNM分期有关(miR-454-3p:χ^(2)/P=7.102/0.008、13.577/0.000、9.687/0.002、14.291/0.000;CPEB1 mRNA:χ^(2)/P=10.816/0.001、18.288/0.000、14.122/0.000、16.239/0.000);癌组织miR-454-3p与CPEB1 mRNA表达水平呈负相关(r/P=-0.524/0.000)。miR-454-3p高表达患者5年生存率低于miR-454-3p低表达患者(χ^(2)/P=7.012/0.008),CPEB1 mRNA高表达患者5年生存率高于CPEB1 mRNA低表达患者(χ^(2)/P=4.112/0.043);miR-454-3p高表达、淋巴结远处转移是影响非小细胞肺癌患者死亡的独立危险因素[OR(95%CI)=2.255(1.725~2.948)、1.987(1.428~2.765)],CPEB1 mRNA高表达是影响患者死亡的保护因素[OR(95%CI)=0.677(0.518~0.886)]。结论非小细胞肺癌组织中miR-454-3p呈高表达,CPEB1 mRNA呈低表达,且二者均与患者肿瘤直径、病理类型、淋巴结远处转移、TNM分期及预后有关。     

分泌蛋白DKK1(Dickkopf-1)在非小细胞肺癌患者血清及组织中的表达及其意义

目的:探讨DKK1(Dickkopf-1)在非小细胞肺癌患者血清及组织中的表达及其意义。方法:检测197例非小细胞性癌患者与200名健康志愿者血清中DKK1含量。免疫组化检测144例非小细胞肺癌患者(从199例非小细胞性癌患者中选取)和265例回顾性非小细胞性癌患者肿瘤组织中DKK1表达情况。结果:非小细胞肺癌组血清DKK1含量明显高于健康人群组(P<0.05)。当把血清DKK1浓度31.9150 pg/mL设为诊断非小细胞肺癌的阈值时,其诊断特异性和敏感性分别为87.9%和87.6%。血清DKK1浓度大于65.0 pg/mL非小细胞肺癌患者生存期明显低于血清DKK1浓度较低患者(P=0.033)。非小细胞肺癌组织中DKK1高表达与血清DKK1含量有密切相关性。结论:低浓度阈值的DKK1可以作为非小细胞肺癌诊断标志物,而高浓度阈值的DKK1可以作为非小细胞肺癌预后预测标志物。血清和组织中DKK1表达水平可以帮助诊断非小细胞肺癌,预测非小细胞肺癌患者预后。     

MIA蛋白对非小细胞肺癌患者肿瘤临床分期、组织分化程度的影响

目的研究黑色素瘤抑制性活性(Melanoma Inhibitory Active, MIA)蛋白在非小细胞肺癌中的表达,对比其对患者肿瘤临床分期、组织分化程度的影响。方法选择2019年5月至2021年5月本院住院治疗的非小细胞肺癌患者86例纳入本次研究,采用免疫组化标记envision法测定非小细胞肺癌患者肿瘤组织MIA蛋白表达,探究其对患者肿瘤临床分期、组织分化程度的相关性。结果非小细胞肺癌、癌旁细胞组织均有MIA阳性表达,其中非小细胞肺癌细胞阳性染色部分显示为弥漫性分布,包膜胞浆内呈现棕黄和棕褐色团块,细胞核内无分布,癌旁细胞组织阳性染色部分显示浅黄色。非小细胞肺癌细胞组织内MIA表达和肿瘤临床分期、淋巴结转移、组织分化程度存在密切相关性(P＜0.05);Ⅲ-Ⅳ期非小细胞肺癌、癌旁组织细胞MIA表达均明显高于Ⅰ-Ⅱ期,且非小细胞肺癌MIA表达高于癌旁组织(P＜0.05);高分化非小细胞肺癌、癌旁组织细胞中MIA表达高于中分化、低分化,且非小细胞肺癌MIA表达高于癌旁组织(P＜0.05)。结论MIA蛋白能够有效抑制非小细胞肺癌细胞的转移和分化,阻断患者肿瘤内血管形成,有利促进非小细胞肺癌细胞的凋亡。     

p16基因在不同非小细胞肺癌之间的表达比较

目的:探讨p16基因在不同类型非小细胞肺癌中的表达。方法:采用链霉素抗生物素-过氧化酶免疫组化法(SP法)检测63例非小细胞肺癌患者及26例肺良性病变患者中p16蛋白的表达情况。结果:肺良性疾病组织中p16蛋白阳性率为100%,而非小细胞肺癌组织中P16蛋白阳性率为47.62%,两者相比有显著性差异(P<0.05);不同组织、非小细胞肺癌不同发展阶段的p16蛋白表达情况也呈显著性差异(P<0.05)。结论:p16的基因表达率与非小细胞肺癌不同组织类型有明显差异;p16的基因表达率会随着非小细胞肺癌的发展阶段产生不同的变化。     

p73基因在人非小细胞肺癌组织中的表达

目的　研究人非小细胞肺癌中p73基因的mRNA表达状况 ,并探讨其表达水平与肿瘤各项临床病理指标间的相关性。方法　应用半定量RT PCR方法检测人非小细胞肺癌组织、相应癌旁肺组织及远癌肺组织中p73的mRNA表达。结果　p73基因的表达水平及表达阳性率在肺癌组织中为 87.5 % (2 8/32 )明显高于相应的癌旁肺组织和远癌肺组织 (P <0 .0 1) ;不同临床病理学类型、分化程度及TNM分期的肺癌组织间p73mRNA的表达差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　p73基因在人非小细胞肺癌组织中的表达显著上调。     

EpCAM在非小细胞肺癌中表达及其与非小细胞肺癌转移预后关系

目的:探讨EpCAM在非小细胞肺癌中表达及其与非小细胞肺癌转移预后关系。方法:选取2011年2月—2013年2月在我院经病理确诊并手术切除的非小细胞肺癌患者作为研究对象,免疫组化法检测肿瘤组织、癌旁组织和正常肺组织EpCAM表达,对患者进行随访,观察EpCAM表达与患者术后转移和生存的相关性。结果:肺癌组织EpCAM表达阳性率高于正常组织和癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。EpCAM阴性患者生存率和中位生存时间均高于阳性患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。EpCAM阴性患者5年内淋巴结转移和远处转移率均低于EpCAM阳性患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:EpCAM在非小细胞肺癌中高表达,且与Ⅰ期非小细胞肺癌患者术后远期转移和生存相关,干扰EpCAM功能可能是非小细胞肺癌的新治疗靶点。     

SH2B1在非小细胞肺癌中的表达水平及与临床病理参数和预后的关系

目的观察SH2B衔接因子蛋白1(SH2B1)在非小细胞肺癌组织中表达情况,并探讨SH2B1与临床病理特征及预后的关系。方法选取2013年9月-2015年6月在青海省第五人民医院进行手术治疗的51例非小细胞肺癌患者的癌组织标本为非小细胞肺癌组织组,另选取距癌组织边缘≥5 cm的癌旁组织作为癌旁组织组。分别采用荧光实时定量聚合酶链反应法(qRT-PCR)与免疫印迹法(Western blot)检测SH2B1 mRNA、SH2B1蛋白相对表达情况;应用免疫组织化学法(SP)检测SH2B1蛋白表达;分析SH2B1与临床病理参数的关系,采用Kaplan-Meier对非小细胞肺癌患者3年生存情况进行分析;并对影响非小细胞肺癌预后的因素进行COX回归分析。结果与癌旁组织相比,非小细胞肺癌组织中SH2B1 mRNA、SH2B1蛋白表达水平显著升高(P0.05),SH2B1蛋白阳性率显著高于癌旁组织(62.7%vs. 31.4%)(P0.05)。SH2B1在有淋巴结转移、分化程度低、TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期患者癌组织中表达量高于无淋巴结转移、分化程度中高、TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期患者(P0.05)。Kaplan-Meier分析结果显示SH2B1高表达组三年内存活率低于SH2B1低表达组(18.8%vs. 63.2%)(P0.05);多因素COX回归分析结果显示SH2B1阳性表达是影响非小细胞癌不良预后的独立危险因素。结论 SH2B1基因在非小细胞肺癌组织中高表达,其异常表达与患者临床病理指标及预后不良密切相关,推测SH2B1可能参与非小细胞肺癌的癌变过程。     

miR-579在肾癌中表达的临床意义及其对肾癌细胞增殖的影响

目的探讨微小RNA-579(miR-579)在肾癌中表达的临床意义及其生物学功能。方法选取2012年1月—2014年3月四川省内江市第一人民医院泌尿外科手术治疗肾癌患者92例,收集其癌组织及癌旁正常组织,检测miR-579表达水平;比较不同临床病理特征癌组织中miR-579水平;对不同miR-579水平的肾癌患者进行生存分析。将肾癌A498细胞按随机数字表法分为对照组(不予转染)、miR-NC组(转染阴性对照)、miR-579组(转染miR-579),比较3组细胞miR-579表达水平、增殖水平及3’-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)和鼠双微体2(MDM2)表达水平。结果癌组织中miR-579表达水平低于癌旁组织(t/P=16.010/0.000),癌组织中miRNA-579水平与肿瘤直径(t/P=3.420/0.001)及分化程度、临床分期(F/P=10.514/0.000、7.308/0.000)有关。miR-579低表达组患者的生存率低于高表达组(χ²/P=4.684/0.030)。与对照组和miR-NC组比较,miR-579组细胞miR-579表达水平升高(F/P=480.200/0.000);在培养48 h和72 h时的OD值降低(F/P=12.870/0.000、13.040/0.000);PDK1和MDM2的表达水平降低(F/P=67.500/0.000、18.780/0.000)。结论miR-579在肾癌组织和细胞呈低表达,与肿瘤直径、分化程度、临床分期及低生存率有关。体外转染miR-579模拟物可抑制细胞增殖,可能与抑制PDK1和MDM2表达有关。     

MicroRNA-7-5p 调控p53 表达对非小细胞肺癌 增殖及侵袭能力的影响

目的 探讨microRNA-7-5p（miR-7-5p）是否通过调控p53 基因的表达而影响人非小细胞肺 癌（NSCLC）细胞体外的增殖、侵袭能力。方法 通过双荧光素酶报告证明p53 为miR-7-5p 的下游靶基 因,将miR-7-5p 转染至人NSCLC 细胞株NCI-H1975,依据实验对照原则分为空白对照组、miR-7-5p 组 和miR-NC 组,观察细胞中p53 基因在转录和蛋白水平的表达变化;然后通过细胞增殖、细胞周期实验及 侵袭实验,观察NCI-H1975 细胞体外增殖和侵袭能力的变化。结果 miR-7-5p 组的p53 mRNA 相对表达 量、迁移细胞数及克隆形成数均低于miR-NC 组（P <0.05）。miR-7-5p 组3''UTR 荧光素酶的表达活性较 miR-NC 组低（P <0.05）。miR-7-5p 组p53 mRNA 和蛋白相对表达量较miR-NC 组低（P <0.05）。miR- 7-5p 组细胞增殖能力较miR-NC 组低（P <0.05）。miR-7-5p 组细胞周期G0/G1 期比例高于空白对照组 和miR-NC 组（P <0.05）。miR-7-5p 组细胞周期的G2/M 期比例低于miR-NC 组（P <0.05）。miR-7- 5p 组细胞周期的S 期比例低于空白对照组和miR-NC 组（P <0.05）。miR-7-5p 组细胞侵袭能力低于空白对 照组和miR-NC 组（P <0.05）。结论 miR-7-5p 主要是通过靶向p53 促进其mRNA 和蛋白的表达,并减弱人 NSCLC 的增殖和侵袭能力。     

miR-522促进食管癌增殖和转移的作用机制研究

目的 研究微小RNA-522(miR-522)对食管癌细胞增殖和转移能力的影响及作用机制.方法 选择2014年1月—2015年6月辽宁省健康产业集团阜新矿总医院心胸外科行食管癌根治性手术患者60例,qRT-PCR检测miR-522在食管癌组织和癌旁组织中的表达;培养食管癌细胞,qRT-PCR检测食管癌细胞系TE-1、T...     

miR-30a-5p对肺癌细胞增殖与迁移的影响及其机制

研究miR-30a-5p 对非小细胞肺癌（NSCLC）增殖和迁移的影响,并探讨其调控机制。方法NSCLC A549细胞系分成两组,miR-30a-5p组和对照组,分别转染miR-30a-5p mimics和microRNA scramble,MTT实验及细胞划痕实验分别测定两组细胞增殖和迁移能力,实时聚合酶链反应（real time-PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别测定两组泛素蛋白连接酶（UBE3C）mRNA 和蛋白质表达水平。结果培养48 h后,miR-30a-5p 组相对活细胞百分比低于对照组[（203.7±16.8）% vs（330.4±20.7）%（p =0.000）];培养72 h后,miR-30a-5p组相对活细胞百分比（258±30.2）%,对照组相对活细胞百分比（403.4±28.4）%,miR-30a-5p组相对活细胞百分比低于对照组（p =0.001）。细胞划痕实验示：miR-30a-5p组划痕愈合率为（23.2±2.7）%,对照组划痕愈合率为（89.2±4.8）%,miR-30a-5p 组划痕愈合率低于对照组（p =0.000）。real time-PCR显示,miR-30a-5p 组UBE3C mRNA 表达水平为（0.15±0.02）,对照组UBE3C mRNA 表达水平为（1.03±0.09）,miR-30a-5p组UBE3C mRNA表达水平低于对照组（p =0.000）;Western blot显示,miR-30a-5p组UBE3C 蛋白表达水平为（1.57±0.26）,对照组UBE3C 蛋白表达水平为（5.32±0.42）,miR-30a-5p 组UBE3C 蛋白表达水平低于对照组（p =0.000）。结论miR-30a-5p抑制NSCLC 增殖和迁移,其机制与下调UBE3C表达有关。     

沉默APE1对非小细胞肺癌细胞的放射敏感性的影响研究

目的 研究脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶-1（APE1）对非小细胞肺癌细胞放射敏感性的影响。方法 采用免疫组化染色检测手术标本切片（非小细胞肺癌组织20例及癌旁组织5例）中APE1的表达,Western blot与实时荧光定量（qRT）-PCR检测非小细胞肺癌细胞系（A549,H460,H1299）及肺正常上皮细胞系中APE1的表达;Western blot检测辐照A549与H460细胞0~6 Gy后APE1的表达;构建沉默APE1的A549与H460稳定细胞株后,Western blot检测其辐照6 Gy后APE1的蛋白表达;细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成率;CCK-8检测细胞增殖;细胞术流式检测细胞凋亡。结果 非小细胞肺癌组织及细胞系中APE1的表达明显上调;辐照能诱导非小细胞肺癌细胞APE1的表达,且表达随辐照剂量增高而上调;沉默APE1能有效地抑制辐照诱导A549与H460细胞中APE1的表达;成功构建沉默APE1的A459、H460稳定细胞株;沉默APE1联合辐照进一步抑制了非小细胞肺癌细胞克隆形成率、细胞增殖率,同时促进细胞凋亡（ PAPE1可增强非小细胞肺癌细胞的放射敏感性。     

肺腺癌患者miR-126-5p的差异性表达及其作用机制预测

目的探讨肺腺癌患者miR-126-5p的表达差异性及其在患者临床预后中的价值,基于生物信息学方法,分析其作用机制。 方法检索STARBASE数据库,分析肺腺癌组织和正常肺组织中miR-126-5p表达水平差异。使用Kaplan-Meier Plotter在线网站 分析肺腺癌患者生存预后,绘制癌组织miR-126-5p不同表达水平患者的生存曲线。利用STARBASE数据库预测miR-126-5p 作用的靶基因,在线网站分析靶基因的表达水平及对预后的影响。使用qPCR法检测30例健康对照组及30例肺腺癌患者外周 血清mir-126-5p表达水平。结果STARBASE数据库检索结果提示正常肺组织中miR-126-5p高表达,肺腺癌组织中miR-126-5p 低表达,Kaplan-Meier Plotter在线大数据分析提示肺腺癌组织中miR-126-5p高表达的患者生存预后优于低表达者（HR=0.68, P=0.015）。miR-126-5p预测结合靶基因BRCC3 mRNA 3’UTR区,二者表达量呈负相关（r=-0.197,P<0.05）;与正常组织相比, BRCC3 在肺腺癌患者中呈现高表达,与患者不良预后相关（HR=1.39,P<0.05）。对照组血清中miR-126-5p 高于肺腺癌患者 （1.23±0.21 vs 0.63±0.12,P<0.05）。结论肺腺癌组织中miR-126-5p 表达水平低于正常肺组织,肺腺癌患者外周血清中miR- 126-5p表达水平低于正常人,miR-126-5p高表达患者预后较好,低表达患者预后较差。通过生物信息学预测,miR-126-5p可能 通过调控BRCC3发挥抑癌作用。     

大蒜素通过miR-486-5p/KDM5B轴增加非小细胞肺癌A549细胞放疗敏感性

目的：探讨大蒜素对非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞放射敏感性影响及其作用机制。方法：大蒜素联合X射线处理A549 细胞,采用MTT法检测A549 细胞增殖活力;Transwell实验检测A549 细胞侵袭能力;克隆形成实验检测A549细胞对放射的敏感性;彗星实验评估A549细胞DNA损伤情况;Western blot检测γ-H2AX、Snail、Vimentin蛋白和组蛋白去甲基化转移酶（KDM5B）的表达量。qRT-PCR检测miR-486-5p的表达量。双荧光素酶报告基因验证miR-486-5p与KDM5B的靶向关系。结果：不同浓度（20、40、60 μg/mL）大蒜素干预可显著抑制A549细胞增殖活力（P ＜0.05）和侵袭能力（P ＜0.05）,并上调miR-486-5p在A549细胞中的表达量（P ＜0.05）。40 μg/mL大蒜素可明显上调X射线对A549细胞增殖和侵袭能力的抑制作用（均P ＜0.05）,且加速了A549细胞DNA损伤。机制上,大蒜素通过上调miR-486-5p增强A549细胞对X射线的敏感性,但敲低miR-486-5p可显著下调大蒜素对A549细胞放射增敏作用。此外,miR-486-5p靶向负调控KDM5B的表达。结论：大蒜素可通过抑制A549细胞增殖、侵袭并诱导细胞DNA损伤,进而增强A549细胞对X射线的敏感性,其作用机制是通过上调miR-486-5p靶向抑制KDM5B来实现的。     

非小细胞肺癌Stathmin mRNA的表达及临床意义

目的 探讨Stathmin mRNA在非小细胞肺癌中的表达及临床意义.方法 成对收集非小细胞肺癌手术切除的癌和癌旁组织,抽提总RNA,利用半定量RT-PCR技术检测Stathmin mRNA的表达,对其与临床病理指标的关系进行统计学分析.结果 共收集癌和癌旁组织43对,癌组织中Stathmin mRNA表达的阳性率为76.7%,癌旁组织中为60.5%,癌组织的Stathmin相对表达量明显高于癌旁组织（Z=5.359,P=0.000）;无论是癌还是癌旁组织,男性中Stathmin的相对表达量明显高于女性（χ^2=5.059、5.799,P=0.024、0.016）.癌组织中,鳞癌中Stathmin的相对表达量高于腺癌（χ^2=5.821,P=0.016）、中央型明显高于周围型（χ^2=4.308,P=0.038）.结论 非小细胞肺癌中Stathmin mRNA的表达具有较高的阳性率,其中鳞癌、中央型肺癌和男性患者中增高最明显.     

长链非编码RNA TPT1-AS1促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用研究

目的 研究肿瘤蛋白翻译调节因子1反义-RNA1(TPT1-AS1)在肝细胞和肝癌细胞中表达的差异,及其对肝细胞癌增殖、迁移、侵袭、上皮细胞间质化(EMT)的影响.方法 2018年9月—2020年6月于西安交通大学实验室进行细胞实验,使用qRT-PCR分别检测92例经手术切除的肝癌组织与对应癌旁肝组织,肝癌细胞HepG2...