光气诱导小鼠原代肺Ⅱ型细胞凋亡

目的 :探讨光气是否诱导肺Ⅱ型细胞发生凋亡 .方法 :2 6只二级BALB/c小鼠 ,雄性 ,随机分为两组 :染毒组和正常对照组 (各 1 3只 ) .正常对照组小鼠以空气为对照 ,染毒组小鼠给予 1 1 .9mg/L剂量的光气 ,时间为 5min ,染毒后 4h ,比较两组小鼠肺脏的湿干比、病理学变化 .分离、培养小鼠原代肺Ⅱ型细胞并用电镜观察染毒组肺Ⅱ型细胞凋亡情况 .结果 :1 1 .9mg/L的光气染毒 5min ,小鼠肺脏湿干比 (6 .4 2± 1 .0 0 )比正常对照组 (4 .2 5± 0 .4 7)显著增加 (P <0 .0 5 ) ;光镜下观察肺组织可见肺水肿发生 ;单宁酸染色和电镜鉴定小鼠原代肺Ⅱ型细胞 ;电镜显示光气染毒肺水肿小鼠原代肺Ⅱ型细胞出现凋亡小体 .结论 :光气染毒可造成小鼠肺水肿并诱导小鼠原代肺Ⅱ型细胞发生凋亡     

光气对小鼠肺上皮细胞和内皮细胞凋亡的诱导作用

目的 研究光气对肺水肿小鼠肺上皮细胞和内皮细胞凋亡的诱导作用。方法 将32只BALB/C小鼠随机分成正常对照组(16只)和染毒组(16只)2组。正常对照组小鼠以空气为对照,染毒组小鼠给予11.9mg/L剂量的光气,时间为5min。染毒后4h,取小鼠分离、培养肺Ⅱ型细胞用于电镜观察和流式细胞仪检测细胞凋亡,取小鼠肺脏进行DNA琼脂糖凝胶电泳和TUNEL染色检测肺组织凋亡。结果 光气染毒肺水肿小鼠电镜下原代肺Ⅱ型细胞出现凋亡小体;流式细胞术显示肺Ⅱ型细胞凋亡率(40.26±7.74)显著高于正常对照组(1.58±1.01,P<0.001);DNA琼脂糖凝胶电泳出现"DNA梯状改变";TUNEL染色检测到肺上皮细胞和血管内皮细胞凋亡。结论 光气染毒可造成肺水肿小鼠肺脏细胞发生凋亡,提示光气造成小鼠肺水肿的发生机制存在细胞凋亡的诱导作用。     

光气染毒对小鼠肝脏的损伤作用

目的:研究小鼠光气染毒对肝脏的损伤作用与枯否氏细胞的变化.方法:40只小鼠,雌雄各半,随机分为4组. 正常对照组小鼠以空气为对照,染毒组小鼠给予11.9 mg/L剂量的光气,时间为5 min, 染毒后2, 4, 8 h,测定各组小鼠肝脏的丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、还原型谷胱甘肽(GSH)及染毒4 h后进行肝组织学和超微结构观察. 结果: 随着光气染毒后时间的延长,小鼠肝脏的MDA含量升高,GSH含量降低,T-SOD活力在染毒后2 h显著升高,与正常组差异显著(P<0.05);光镜下,光气染毒的肝组织肝细胞呈现空泡样变性. 电镜下,染毒肝细胞脂滴增多,肝脏出血,枯否氏细胞(KC)出现凋亡征象. 结论: 光气染毒可引起小鼠肝脏脂质过氧化,肝细胞脂肪变性、KC凋亡.     

吸入烹调胡麻油烟致大鼠肺部病变的时相分析

目的 :利用大鼠吸入烹调胡麻油烟染毒的动物模型 ,光镜下观察肺组织病理形态的改变 ,电镜下观察肺泡Ⅱ型细胞的形态变化。方法 :采用动式吸入胡麻油烟 ,浓度为 4 4 4 4± 18 6 8mg/m3 为染毒组 ,吸入新鲜的空气 (2 0～ 2 2℃ )为阴性对照组 ,每组 18只动物 ,分三个时相 (15、30、5 0d)观察肺组织病理形态的变化。结果 :光镜下可见烹调胡麻油烟染毒组动物肺组织病理改变以炎症改变为主 ,尚有肺泡上皮腺样化生、鳞状化生病变形成 ,病理改变第三时相最明显。肺泡Ⅱ型细胞损伤第三时相最严重。结论 :烹调胡麻油烟可引起实验动物肺组织病理形态的改变 ,且随时相延长 ,病理改变更为严重。     

高氧液治疗家兔光气中毒急性肺损伤

目的 :探讨高氧液对兔光气中毒性肺损伤的治疗作用 .方法 :新西兰大白兔 4 2只随机分为 7组 (n =6 ) .染毒组分高浓度组和低浓度组 ,其中高浓度组又分为高浓度光气中毒组 (染毒后不输液 ,HP组 )、平衡盐治疗组 (静脉输入平衡盐30mL·kg-1,HPB组 )及高氧液治疗组 (静脉输入高氧液 30mL·kg-1,HPH组 ) ;低剂量组也分为 3组 :低浓度光气中毒组(LP组 )、平衡盐治疗组 (LPB组 )和高氧液治疗组 (LPH组 ) ;阴性对照组 (C组 )吸入新鲜空气 .高浓度染毒组记录动物染毒后生存时间 ,低浓度染毒组均在染毒后 1,3,8和 12h抽取动脉血样作血气分析 ,12h后处死 ,开胸取肺 ,测定肺湿干比 (W·D-1)、肺水含量 (LW )和肺系数 (L·B-1) ,留取部分肺组织作组织病理学检查 .C组吸入空气后处理同低浓度染毒组 .结果 :HPH组与HP ,HPB组比较 ,生存时间明显延长 (P<0 .0 5 ) ,HP组与HPB组比较无显著差异 (P >0 .0 5 ) .LPH组在输入高氧液后PaO2 明显高于LPB ,LP组 (P <0 .0 1) ;LPH组W·D-1,LW和L·B-1均明显低于LPB ,LP组 (P <0 .0 5 ) .结论 :静脉输注高氧液治疗能减轻光气中毒造成的急性肺组织损伤     

大鼠光气染毒后机体氧化损伤及NaHCO3缓冲液对其的影响

目的:探讨大鼠光气染毒后机体内氧化指标的改变及NaHCO3缓冲液对其的影响,研究光气肺损伤的机制以及中毒的救治方法. 方法:SD大鼠40只随机分成4组. 染毒后,用两个剂量水平的NaHCO3缓冲液腹腔注射,染毒后3 h断头采血并剖腹取肺和肝脏,取肺左叶称取湿干比,用荧光法分别检测肺脏、血清和肝脏的脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG). 结果:单纯染毒组肺脏MDA和血清MDA,GSH,GSSG及肝脏的GSSG与对照组比较,差异显著;0.5 mL NaHCO3缓冲液治疗组肺脏MDA和血清MDA,GSH与单纯染毒组相比差异显著,0.2 mL NaHCO3缓冲液治疗组血清GSH和肝脏GSSG与单纯染毒组比较,差异显著. 结论:光气染毒后机体氧化损伤,给予NaHCO3缓冲液可以缓解这种氧化损伤.     

家兔海水型呼吸窘迫综合征肺损伤及机制变化

对海水型呼吸窘迫综合征(SW-RDS)免肺酶活性变化、肺磷脂和Ca~(2+)的分布及肺细胞膜损伤程度进行了分析研究.结果发现,SW-RDS模型组兔PaO_2进行性下降;肺毛细血管内皮细胞、肺泡Ⅰ、Ⅱ型上皮细胞在超微结构上有明显损伤现象,其胞质内及肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体和板层体内有许多镧颗粒分布.肺Ⅱ型细胞板层小体和肺泡上皮细胞表面的磷脂含量明显减少,而肺毛细血管腔内磷脂含量却增高,肺Ⅰ、Ⅱ型细胞及肺毛细血管内皮细胞内 Ca~(2+)沉淀产物明显增加;肺碱性磷酸酶、5’核苷酸酶、对-硝基苯磷酸酶和细胞色素氧化酶活性明显下降,而胞嘧啶单核苷酸酶活性明显增强.作者认为,上述异常变化是SW-RDS肺损伤发病机理中很值得注意的重要环节.     

卡托普利对烟雾吸入性损伤大鼠肺的保护作用

目的:探讨卡托普利对烟雾吸入性损伤大鼠肺的保护作用。方法:雄性SD大鼠48只,随机分为对照组、致伤组、卡托普利组。卡托普利组烟雾吸入性致伤后腹腔注射卡托普利,致伤组致伤后注射与卡托普利组等体积的生理盐水,对照组不做致伤处理。检测各组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)的水平。并取各组5 h大鼠左肺组织行病理切片光镜观察。结果:光镜下对照组肺泡结构清晰完整;致伤组肺组织肺泡间质增宽、炎细胞浸润;卡托普利组肺组织炎细胞较致伤组减少。卡托普利组各时相点血清TNF-α和IL-6含量高于对照组(P<0.01),但低于致伤组(P<0.05)。致伤组IL-10含量与对照组相比无差异(P>0.05),卡托普利组IL-10含量高于对照组(P<0.01)。卡托普利组各时相点肺组织MDA和MPO含量均高于对照组(P<0.01),但低于致伤组(P<0.05)。卡托普利组5 h肺组织SOD含量高于致伤组(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.01)。结论:卡托普利可减轻烟雾吸入性损伤大鼠体内炎性反应,对肺组织有一定的保护作用。     

家兔严重体表烧伤肺的病理变化

66只家兔分为对照组(n=6)和致伤组,致伤组从伤后2h至30d分为10个时相点(每时相n=6)。经LM、TEM、SEM观察气管和肺,伤后6h开始出现各种病变,气管和支气管见充血,水肿,中性粒细胞浸润,纤毛断裂、脱落、倒伏、粘着,杯状细胞和Clara细胞增多。肺间质水冲,中性粒细胞浸润或聚集于毛细血管内,Ⅱ型肺泡上应及其板层体减少,板层体空泡化等改变,3d时病变最重,7d之后各项病变逐渐减少或减轻。讨论了主要病变的发生及其意义。     

放射性肺损伤的ECT表现研究现状及展望

放射性肺损伤可分为早期损伤(急性放射性损伤)和后期损伤(放射性纤维化)。放射生物学的研究表明，放射性肺炎与肺泡Ⅱ型细胞和血管内皮细胞的损伤密切相关。肺泡Ⅱ型细胞损伤导致肺表面活性物质合成减少，引起肺泡张力变化，肺顺应性降低，肺泡塌陷和不张。血管内皮细胞损伤导致肺血流灌注和通透性改变。ECT检查是核医学常用的检测手段，目前在肺泡通透性和肺血流灌注的研究中该技术已趋成熟，     

糖尿病酮症酸中毒家兔肺泡超微结构和细胞化学的研究

目的:研究糖尿病酮症酸中毒肺损伤的发病机制。方法:实验组(DK组,n=6)给予四氧嘧啶(alloxen)150 mg.kg-1和链脲佐菌素(STZ)150 mg.kg-1,对照组(NS组,n=6)使用生理盐水,72 h后行动脉血气分析,处死动物,取肺组织标本,做病理学检查,采用铅离子捕获法做常规超微结构、酸性磷酸酶(ACPase)细胞化学检查。结果:NS组血气分析正常;肺泡上皮细胞组织结构完整;溶酶体内ACPase活性表达,溶酶体结构完整。DK组体质量下降,动脉血气分析显示达到糖尿病酮症酸中毒标准;光镜可见肺泡内出血和肺泡隔的增厚、断裂;超微结构可见有肺泡上皮损伤、血管内有炎症细胞贴壁、肺泡内见炎症细胞等改变;肺泡上皮细胞内溶酶体形态不规则,细胞浆内有散在黑色酶颗粒,溶酶体数量增多。结论:糖尿病酮症酸中毒能引起肺上皮细胞组织结构损坏和细胞内溶酶体的破坏。     

大鼠肺缺血再灌注损伤中肺泡细胞凋亡的动态观察

目的研究大鼠肺缺血再灌注损伤(IR)中肺泡细胞凋亡的动态过程及其与肺损伤的相关性。方法采用大鼠单肺原位热缺血再灌注模型。于缺血再灌注0min、30min、1h、2h,6h及12h采取肺组织及左房血标本,测定血氧分压、肺组织湿／干重比,并作光镜和透射电镜观察组织、细胞形态及亚显微结构,确定凋亡发生。TUNEL法测定肺组织中凋亡指数。台盼蓝活体染色评价细胞死亡程度,并结合同组凋亡水平间接推测细胞坏死水平。结果肺IR后,肺组织透射电镜观察可见肺泡Ⅱ型上皮细胞增多,并且不同程度出现形态学改变,细胞体积缩小变圆,细胞核呈多形性,核被膜外折或内陷,核固缩并边集在核膜下呈月牙状或腰带状,胞浆浓缩,胞浆内嗜锇性板层体减少、排空增多,细胞膜上微绒毛减少或消失,提示细胞凋亡发生,肺泡Ⅰ型上皮细胞则少有上述改变。单独缺血30min,肺泡细胞凋亡指数无增高。肺再灌注后0．5h起,肺泡细胞凋亡指数显著增高,再灌注2h时达到高峰。与细胞凋亡指数相比,坏死指数与肺功能损害的相关性更显著。结论肺IR后发生凋亡的主要是肺泡Ⅱ型上皮细胞。肺泡细胞凋亡指数于再灌注2h达到高峰。肺泡细胞坏死指数与肺功能损害的相关性较凋亡指数更显著。     

烹调油烟对大鼠肺细胞的DNA损伤机制

目的：以大鼠肺Ⅱ型细胞为靶细胞,检测烹调油烟的细胞毒作用和对细胞ＤＮＡ的损伤。方法：烹调油烟颗粒提取物对大鼠肺Ⅱ型细胞染毒２４ｈ后,应用ＭＴＴ法、溴乙锭荧光法以及单细胞凝胶电泳技术检测烹调油烟对大鼠肺Ⅱ型细胞的细胞毒性和ＤＮＡ的损伤。结果：在受试剂量范围内,烹调油烟颗粒提取物具有细胞毒性,可致ＤＮＡ交联及断裂的作用随染毒剂量的增加而增强,并存在剂量－反应关系（ｒ细胞毒性＝－０．９４８,Ｐ＜０．０１;ｒ交联＝０．９７６,Ｐ＜０．０１;ｒ断裂＝０．９５７,Ｐ＜０．０１）。结论：烹调油烟颗粒提取物对大鼠肺Ⅱ型细胞具有细胞毒性作用和ＤＮＡ损伤作用,可使ＤＮＡ链间交联和ＤＮＡ单链断裂。     

Vimentin,CTGF和AQP5在烟尘诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞恶性转化模型中的表达

目的 观察波形蛋白(Vimentin)、结缔组织生长因子(conective tissue growth factor,CTGF)和水通道蛋白5 (Aquaporin5,AQP5)在烟尘诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)恶性转化模型中的表达.方法 以永生化ATⅡ(RLE-6TN细胞株)为实验对象,分为高剂量染毒组、低剂量染毒组和空白对照组.高、低剂量染毒组分别使用终浓度为200、50 mg/L的烟尘悬浊液在第1、3、5、7、9代对细胞染毒,同代对照组不加烟尘悬浊液同步培养.从第10代起,高、低剂量染毒组常规传代直至软琼脂克隆形成检测实验呈阳性.采用透射电镜观察细胞超微结构,以免疫印迹法及免疫组织化学法观察各组细胞肺表面活性蛋白SP(-B)、SP-C、波形蛋白(Vi-mentin)、结缔组织生长因子(CTGF)、水通道蛋白5(AQP5)表达.结果 从形态改变、软琼脂克隆形成实验及肺泡表面活性蛋白(SP)-B、SP-C的表达上发现经烟尘诱导,RLE-6TN细胞超微结构会发生改变,且高、低剂量染毒组克隆形成率与染毒培养代数相关性有统计学意义(P＜0.01),但与烟尘染毒水平相关性无统计学意义(P＞0.05).免疫组织化学显示高、低剂量染毒组第30代细胞CTGF阳性、SP-B阴性,空白对照组CTGF阴性、SP-B阳性.Western blot示高、低剂量染毒组第25、30、35代细胞及空白对照组Vimentin和AQP5均为阴性.结论 云锡炼厂烟尘导致ATⅡ恶性转化模型中CTGF表达阳性,但Vimintin及AQP5的表达呈阴性.     

水下爆炸致水面泅渡战位比格犬脑和肺的损伤特点

目的 研究水下爆炸引起水面泅渡战位比格犬脑和肺的损伤情况.方法 20只健康比格犬随机分为4个实验组(距爆源5、8、11和15 m)和1个对照组(n=4).利用1 kg 2,4,6-三硝基甲苯(TNT)裸药在水下2 m实施爆炸对水中漂浮比格犬进行致伤,采用水下及颅内压力传感器和高速摄像机记录爆炸致伤的过程.爆炸后3 h内对存活的比格犬行头部和胸部CT检查及头部MRI检查.爆炸后24 h取脑和肺标本,观察颅脑和胸、肺大体损伤情况,并通过H-E染色和TUNEL染色观察脑和肺组织病理学变化及细胞凋亡情况.结果 压力传感器和高速摄像机观察到水下爆炸的致伤过程包括冲击波作用和气泡作用2个阶段.5 m、8 m、11 m和15 m组比格犬分别死亡4、3、1、0只.头部CT和MRI检查示实验组比格犬脑组织没有明显损伤,胸部CT检查示有肺内出血、气胸、血胸或胸腔积液等表现.H-E染色结果示实验组比格犬脑组织无明显变化,而肺组织肺泡破裂,肺泡腔内有大量红细胞,肺间质内有大量炎症细胞浸润.TUNEL染色仅见海马区少量细胞呈阳性表现,而肺组织肺泡上皮细胞和间质细胞呈现广泛的凋亡坏死趋势.结论 水下爆炸引起水面泅渡战位比格犬的损伤主要为肺爆震伤,脑组织损伤相对轻微.     

内毒素血症大鼠Clara细胞数量和形态学变化

目的目的探讨内毒素（LPS）血症对Clara细胞的影响。方法通过免疫组织化学染色、透射电镜分析，观察内毒素血症大鼠Clara细胞数量和形态学方面的变化。结果静脉注射LPS后0．5h肺开始出现急性肺损伤（ALI）病理改变，表现为肺小动脉充血，肺泡隔水肿，肺泡隔出现以中性粒细胞（PMN）为主的炎性细胞浸润，随着时间的推移，肺损伤程度逐渐加重，于6h达最重，6h后逐渐恢复。内毒素致伤后1h大鼠Clara细胞数量开始明显减少，6h达最少，24h后逐渐恢复。LPS致伤后24h，Clara细胞的超微结构明显受损。结论内毒素血症可引起Clara细胞受损，Clara细胞可能是LPS在肺内的作用靶点，Clara细胞受损可能是LPS诱导急性肺损伤的早期事件。     

不同肺保护剂对兔体外循环手术肺保护的比较

目的比较不同的肺保护剂在兔体外循环(Extracorporeal c ircu lation,ECC)中的肺保护作用。方法将15只新西兰纯种大白兔(体重约2 kg)随机分成三组,即沐舒坦(30 mg/kg)组(组Ⅰ,n=5),抑肽酶(10万K IU/kg)组(组Ⅱ;n=5)和乌斯他丁(1万U/kg)组(组Ⅲ,n=5)。在开胸后和ECC停机30 m in后取兔肺组织,在光镜、电镜下观察肺组织术前、术后病理变化,并比较三组间的不同;同时将肺组织制成匀浆、并于ECC前、停机、鱼精蛋白中和肝素后和停机后30 m in抽取兔血清测量肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素8(IL-8)和丙二醛(MDA)的浓度变化。结果三组光镜下观察均可发现ECC后肺泡壁毛细血管扩张、出血;肺间质及肺泡腔内炎性细胞侵润。组Ⅲ上述改变明显少于其他二组;电镜观察发现可见肺泡Ⅱ型细胞微绒毛大部分消失;板层样小体呈空泡样变。组Ⅰ和组Ⅱ上述改变明显;术后肺组织匀浆中TNF-α含量组Ⅲ明显低于组Ⅰ和组Ⅱ;兔血清中TNF-α和IL-8停机后30 m in时组Ⅲ明显低于组Ⅰ和组Ⅱ。无论是肺组织匀浆还是血清中,MDA在三组间术前、后无明显差异。结论乌斯他丁较沐舒坦和抑肽酶能更好地抑制炎性因子的产生。     

不同龄大鼠肺泡Ⅱ型细胞表面活性物质的变化

目的 探讨衰老对肺泡Ⅱ型细胞合成表面活性物质代谢的影响。方法 利用形态计量和Northern杂交方法比较了幼(1～2月龄)、中(9～10月龄)和老年(25～28月龄)大鼠肺泡Ⅱ型细胞内板层体数及肺组织内肺泡表面活性物质相关蛋白(SP)A、B和C基因的表达。结果 老年鼠肺泡Ⅱ型细胞内板层体数为12.20±4.99个/细胞,高于幼年鼠的11.25±3.29个/细胞(P<0.01),但低于中年鼠的13.37±4.55个/细胞(P<0.05)。肺组织中SP-A、SP-B和SP-C基因的表达各年龄组之间则无差别。结论 肺泡Ⅱ型细胞对表面活性物质代谢的年龄相关性变化能力可能是代偿性分泌增加而达到的新的动态平衡的结果,并不是老化时肺功能下降的原因。     

热休克蛋白70在急性百草枯中毒大鼠肺脏中的表达

目的检测百草枯(PQ)诱导急性肺损伤(ALI)中肺组织热休克蛋白70(HSP70)的表达情况。方法健康雄性SD大鼠36只,随机分为对照组(n=18),ALI组(n=18)。ALI组用PQ灌胃(200 mg/kg)染毒建立大鼠ALI模型。对照组用等量生理盐水灌胃。采用RT-PCR检测大鼠肺组织HSP70的表达,比色法检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)、伊文蓝(EBD),观察肺组织病理变化。结果 ALI组大鼠肺组织HSP70的表达在染毒后12 h明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),24 h达高峰。MPO及EBD水平显著增高(P<0.01)。肺组织病理检查可见PQ中毒后肺泡壁充血、炎性细胞浸润,并有局灶性出血。结论 HSP70在PQ中毒后的表达增多,可能参与了PQ诱导的ALI后的组织保护作用。     

严重肺挫伤及缺血再灌注早期TNF-α动态与肺泡Ⅱ型细胞形态学关系

目的 探讨严重肺挫伤及缺血再灌注后早期肺泡灌洗液中(BALF)及血清中TNF-α动态与肺形态学的关系.方法 75只实验兔随机分为对照组A(n=25)、实验组B(LC,n=25)及C(LIRI,n=25);检测各组0,1,2,3,4 h肺功能变化及BAIF中SP-A、B、C、D含量百分比,组织病理及电镜检查.结果 B、C组1 h血清及BALF中TNF-α浓度开始上升,2～3 h间达到顶峰,3～4 h间又急剧下降;而对照组血清及BALF中TNF-α浓度无明显变化.B、C组1～4 h肺泡Ⅱ型细胞电镜及病理检查呈不同程度的炎症及变性改变且持续加重.结论 严重肺挫伤及缺血再灌注后1～3 h BALF及血清中TNF-α持续升高,与肺泡Ⅱ型细胞病理改变相一致.