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1.
目的:克隆人肠道病毒71型(EV71)及柯萨奇病毒A组16型(CA16)的VP1蛋白编码基因,构建相应真核表达质粒在体外进行重组表达,检测其细胞内定位,为EV71及CA16的疫苗研究提供基础。方法:通过PCR扩增分别获取EV71及CA16的VP1编码序列,插入pcFlag载体,分别构建EV71及CA16 VP1与FLAG标签融合的真核表达质粒;瞬时转染人胚肾293T细胞及横纹肌肉瘤RD细胞,Western blot法检测融合蛋白的表达,免疫荧光检测融合蛋白的细胞内定位情况。结果:测序表明两种来源VP1蛋白的重组表达质粒构建正确;分别转染两种不同的细胞后,均可通过Western blot检测到相应蛋白表达;免疫荧光检测显示两种毒株的VP1均表达在细胞质中。结论:外源融合表达EV71或CA16 VP1蛋白的真核表达质粒构建成功;所构建质粒分别转染细胞后,均可在细胞质内检测到VP1融合蛋白的表达。 相似文献
3.
目的:制备两株抗人心肌肌钙蛋白玉(human cardiac troponin Ⅰ,cTnⅠ)单克隆抗体,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法。方法:制备腹水型单抗、饱和硫酸铵沉淀法和亲和层析柱Protein G 纯化抗体,并通过SDS-PAGE 和ELISA 对抗体特异性进行鉴定,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法,并对30 份临床血清样本进行检测。结果:本实验制备的两株单抗(分别命名为Ab1、Ab3;亚型都是IgG1)能够识别以cTnⅠ单体、cTnⅠ-C 复合物和cTnⅠ-T-C 复合物不同形式存在的cTnⅠ。Ab1、Ab3 的效价分别为1 :80 万和1 :40 万,亲和力常数分别为1.62×109L/ mol、2.60×108 L/ mol。利用2 株单抗建立的鲁米诺化学发光酶免疫分析法检测范围为:6.25 ~ 400 ng/ ml。对30 份临床样本进行检测,阳性检出率为77.3%,阴性检出率为100%。结论:建立了可以检测以cTn玉单体、cTnⅠ-C 和cTnⅠ-T-C 复合物形式存在的cTnⅠ的鲁米诺化学发光酶免疫分析法,具有更高的实用性。 相似文献
4.
目的:探讨穿膜肽(cell penetrating peptide, CPP)Tat49-57携带NY-ESO-1155-163抗原肽致敏DC后诱导获得抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocyte, CTL),并体外检测其对黑素瘤细胞株A-375的杀伤效果。 方法:采集健康志愿者外周血50 ml,用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞,经细胞因子诱导,获得DC和T淋巴细胞。实验组用Tat49-57-NY-ESO-1155-163致敏DC,待DC成熟后与T淋巴细胞混合诱导产生CTL,并设PBS组和NY-ESO-1155-163组作为对照。流式细胞术检测致敏前后DC的表型,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测抗原肽疫苗致敏DC后诱导的CTL对黑素瘤细胞株A-375的体外杀伤活性,同时与对人肺癌A549细胞株、人白血病K562细胞的杀伤作用进行比较。结果:Tat显著提升NY-ESO-1155-163进入DC的穿膜能力。与NY-ESO-1155-163致敏的DC相比,Tat49-57-NY-ESO-1155-163致敏后DC的CD80/CD86\[(54.9 ±3.3 )% vs (43.8±5.7)%,P<0.05\]和CD40\[(42.1±1.9)% vs (23.7±2.8)%,P<0.05\]的表达率显著升高。Tat49-57-NY-ESO-1155-163刺激DC后诱导培养的T细胞亚群主要以MHC-Ⅰ类分子介导的CD3+CD8+细胞为主。Tat49-57-NY-ESO-1155-163组CTL对A-375细胞的杀伤能力显著高于NY-ESO-1155-163组,且随着效靶比的增加,杀伤活性逐渐增强(P<0.05)。A-375细胞高表达NY-ESO-1,Tat49-57-NY-ESO-1155-163组CTL对A-375细胞具有特异性杀伤作用,杀伤作用显著强于A549和K562细胞(均P<0.05)。结论:Tat49-57可以增强NY-ESO-1155-163抗原多肽的免疫原性,Tat49-57-NY-ESO-1155-163多肽致敏DC能有效诱导CTL抗黑素瘤细胞A-375的特异性免疫应答。 相似文献
5.
新生儿脑干听觉诱发电位测定 总被引:7,自引:1,他引:7
目的:探讨新生儿脑干听觉诱发电位(BAEP)正常值。为早期发现新生儿听力障碍提供参考。方法:应用中国科技大学生物技术公司生产的NGT型脑干反应测听仪对出生1-7d的43例新生儿进行BAEP检测,以声强70dB的短声分别刺激左右耳,对其中符合正常新生儿标准的31例(63耳)检测结果进行分析,并进行统计学处理。结果:(1)BAEP出波率:70dB BHL出波率为100%。(2)波潜伏(PL)发育:Ⅰ、Ⅲ,Ⅴ波各波潜伏期与成人正常值明显不同(P<0.0005)。(3)波间期(IPL)发育:Ⅰ-Ⅲ、Ⅲ-Ⅴ、Ⅰ-Ⅴ波间期参数与成人正常值亦有明显不同(P<0.0005)。结论:正常新生儿BAEP参数与成人BAEP正常值明显不同,对31例正常新生儿进行检测,取得了正常新生儿BAEP参数,对诊断新生儿疾病有一定价值。 相似文献
6.
7.
8.
缬沙坦与培哚普利治疗肾性高血压临床要分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 观察缬沙坦和培哚普利联合治疗肾性高血压的疗效。方法 将60例慢性肾功能不全高血压患者随机分为3组,分别用缬沙坦(80mg/d)、培哚普利(4mg/d)和缬沙坦(80mg/d)加培哚普利(4mg/d)共治疗24周,单独用药组治疗12周后,若血压≤130/80mmHg(1mmHg=0.1333kPa),继续单独治疗12周,若血压〉130/80mmHg,改为联合用药治疗12周,观察血压、尿蛋白、血肌酐的变化及药物的不良反应。结果 联合用药组血压控制率比单独用药组高(P〈0.05),两种药物均有降低尿蛋白的作用。与治疗前比较,联合用药组第12周后血肌酐有明湿下降(P〈0.05)。单独用药组血压未达标病例再联合用药后血压、尿蛋白、血肌酐均有明显下降(P〈0.05)。联合用药的不良反应与单独用药相比没有明显增加。结论缬沙坦和培哚普利联合治疗肾性高血压,较单独用药能更有效地控制血压、减少蛋白尿、降低血肌酐,具有良好的安全性和耐受性。 相似文献
9.
目的 探讨赤峰市中年脑卒中高危人群危险因素的城乡差异。方法 整群抽取赤峰市40~65岁中年常住户籍居民进行面对面的访视、基本信息的收集和体检,并对筛查结果进行统计分析。结果 共调查40~65岁中年高危人群1 832人,其中城市居民950人(51.9%),乡村居民882人(48.1%),城乡居民年龄、性别差异无统计学意义(P>0.05);脑卒中家族史、高血压病、糖尿病、超重或肥胖、血脂异常在城市的暴露率高于乡村(P<0.05);而缺乏运动、吸烟史的暴露率低于乡村(P<0.05)。结论 赤峰市中年脑卒中高危人群中危险因素暴露存在城乡差异,应进行针对性的卒中防治策略,城市重点关注高血压、糖尿病、血脂异常、肥胖等疾病的控制,乡村着重对吸烟、运动不足等不良生活方式的干预。 相似文献
10.
目的:探讨全面部骨折临床治疗的最佳手术方案。方法:对26例全面部骨折病例采用螺旋CT三维重建定位,设计术式,切开复位,钛板坚强内固定治疗,线型骨折处辅助内镜、90°侧壁螺丝刀从口内或口外隐蔽小切口进路复位固定,术后CT三维重建、牙颌模型复查与术前对比观察。结果:26例术后骨折复位良好,面部外形突度和对称性恢复良好、无明显疤痕。23例咬合关系恢复良好,张闭口运动、咀嚼功能恢复正常;3例咬合关系有后牙早接触,经颌间牵引和调牙合后基本恢复正常。结论:螺旋CT三维重建能显示全面部骨折的立体结构和骨折线的全貌,精确定位分析、设计手术方式,使术中有明确的路经和程序。辅助内镜、90°侧壁螺丝刀,可从口内或口外隐蔽小切口进路复位固定线型骨折,减少组织损伤及避免面部瘢痕,符合微创和美学手术原则,适用于下颌角、升支、颧骨颧弓的线型骨折。 相似文献