正常人九中TTV感染的检测

目的 研究新近报道的一种与输血后肝炎有关的病毒在中国郑州地区正常人群中以及同性别人群中感染的检测情况。方法：采用ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｖｉｒｕｓ，ＴＴＶ）基因组ＯＲＦ１区的套式聚合酶链反应（ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）的方法对９６份郑州地区正常体检者的血清标本进行检测。结果 ９６例正常体检者（男性５７人，女性３９人）中有１７例ＴＴＶ ＤＮＡ为阳性（１７．７＾）其中男１０     

慢性肾衰血透患者输血传播病毒感染分析

目的 观察输血传播病毒（ＴＴＶ）和肝炎病毒在慢性肾衰（ＰＣＦ）血液的透析（ＨＩ）患中的流行情况和感染相关因素。方法 应用巢式，一聚合酶链反应（Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ方法和双轨体夹心ＥＬＩＳ分水岭列ＣＲＦ血透患和２０８例西安地区职业血员及１２８例对照组血清ＴＴＶ ＤＮＡ，ＨＢＶ五项，并分析ＴＴＶ与输血次数、ＨＤ时间、员冢及其与各型肝炎病毒感染的关系。结果 （１）９０例ＣＲＦ血透患和２０８例职业献血员     

巢式聚合酶链反应检测脑脊液中单纯疱疹病毒的DNA

应用巢式（ｎｅｓｔｅｄ）聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测患者脑脊液中单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）ＤＮＡ，２５份经鞘内ＩｇＧ抗体确诊的“单纯疱疹病毒性脑炎（ＨＳＥ）”患者的ＣＳＦ标本中２３份ＰＣＲ阳性；１０５份ＩｇＧ阴性的“散发性脑炎”患者ＣＳＦ中１５份ＰＣＲ阳性，其中７份阳性标本为发病１周内所取，２份取于发病当日。提示ＰＣＲ更适于ＨＳＥ的早期诊断。     

维持性血液透析患者经血液传播嗜肝病毒感染状况

目的：探讨血液透析（血透）患者乙型（ＨＢＶ）、丙型（ＨＣＶ）、丁型（ＨＤＶ）、庚型（ＨＧＶ）和ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｔｕｓｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄｖｉｒｕｓ）等经血液传播性病毒性肝炎感染状况。方法：对８０例血透患者和１２例血透工作人员应用酶联免疫（ＥＬＩＳＡ）法检测ＨＢＶ两对半及ＨＣＶ、ＨＤＶ抗体;逆转录—套式聚合酶链反应（ＲＴｎＰＣＲ）检测血清ＨＧＶＲＮＡ;巢式ＰＣＲ检测ＴＴＶＤＮＡ。结果：８０例长期维持性血透患者中,经血液传播肝炎病毒感染５１例（６３８％）,其中ＨＢＶ阳性２１例（２６２…     

一种快速诊断呼吸道合胞病毒感染的方法

应用引物设计原则，选择呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）基因组中高度保守的Ｆ基因作为扩增靶序列，独立设计合成了两对引物，建立了一个逆转录套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＲＳＶＲＮＡ的方法。结果：对引物进行敏感度实验，其检测敏感度为每ｍｌ１０ＴＣＩＤ５０ｓ（５０％ｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｉｎｆｅｃｔｉｖｅｄｏｓｅ）的病毒量；用副流感病毒１型、甲型流感病毒、乙型流感病毒、新城疫病毒、腮腺炎病毒和腺病毒２型作对照，均无预期扩增产物出现，证实了设计引物的特异性；用建立的逆转套式ＰＣＲ方法对５例急性下呼吸道感染患儿的鼻咽部分泌物标本进行检测，发现３例阳性，２例阴性；同时用病毒培养法检测，结果完全相同。提示：该方法具有快速、敏感、特异和观察结果客观等优点。     

丙型病毒逆转录套式多聚酶链反应检测技术假阳性结果分析

丙型病毒逆转录套式多聚酶链反应检测技术假阳性结果分析高广甫关琦苏英郑州市第六人民医院（４５００５２）丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ逆转录套式多聚酶链反应技术（ＨＣＶ—ＲＮＡ—ＲＴ—ｎｅｓｔｅｄ—ＰＣＲ）已成为丙型肝炎，诊断上不可缺少的直接检测ＨＣＶ及观...     

HFRS患者血清中HV-RNA的PCR检测及扩增产物的测序分析

目的 探讨ＲＴ－ＰＣＲ用于ＨＦＲＳ临床标本中病毒基因检测的若干影响因素及西安地区近年主要浒汉坦病毒（ＨＶ）毒株的分子流行病学特点。方法 设计合成了两套分别互补于ＨＶ Ｍ基因片段和Ｓ基因片段的引物,建立了检测ＨＦＲＳ患临床血清标本中ＨＶ基因的ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ方法,并对扩增的部分ＨＶ靶基因进行了测序分析和比较,结果 １１９份ＨＦＲＳ患轿清（经临床和ＩＦＡ确诊）经用Ｓ基因片段引物的ＲＴ－ｎ     

西安地区病毒性肝炎患者TTV DNA的检测及临床意义

目的 调查西安地区不同类型肝炎患者输血传播病毒（ＴＴＶ）感染状况并探讨其临床意义。方法 在病毒ＯＲＦ１区设计内／外两对引物,采取ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ方法,检测病毒性肝炎患者１４７例和非病毒性肝炎患者１２８全血清中ＴＴＶ ＤＮＡ。结果 在肝炎组中,ＴＴＶ基因检测阳性率分别淡非甲非戊型肝炎６０．０％（９／１５）,庚型肝炎５０．０％（６／１２）,乙型肝炎２６．２％（２１／８０）,丙型肝炎１１．１％（３／     

检测人巨细胞病毒的免疫—PCR方法的建立

目的：依据免疫－ＰＣＲ基本原理，建立检测人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）活动性感染的免疫＿ＰＣＲ方法。方法：我们建立的免疫－ＰＣＲ方法与酶联免疫ＥＬＩＳＡ不同之处是，用ＰＣＲ扩增生物素化线性ＰＢＶ２２０ＤＮＡ代替ＥＬＩＳＡ的酶催化底物，经琼脂糖凝胶电泳溴化乙锭染色观察分析扩增产物异条带，判断结果。结果：用本法检测ＨＣＭＶ的敏感性高于ＥＬＩＳＡ法１０＾３－１０＾５倍，可检测到５个感染ＨＣＭＶ细胞；而检测ＨＳ     

聚合酶链反应检测血清丁型肝炎病毒核酸

目的为建立一种特异性强、敏感性高的检测丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）感染的方法，提高丁型肝炎的诊断水平。方法根据ＨＤＶＲＮＡ保守区（６５４～９６３位核苷酸）设计合成两对引物，采用逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－“ｎｅｓｔｅｄ”ＰＣＲ）对３５例肝炎患者血清进行检测。结果二次ＰＣＲ扩增的特异性和敏感性均较一次ＰＣＲ高。１９例丁型肝炎抗原阳性者ＨＤＶＲＮＡ均为阳性，９例丁型肝炎抗体阳性者中有６例阳性，７例单纯ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ阳性者均未检出ＨＤＶＲＮＡ。结论这一检测方法特异性强、敏感性高，可广泛用于临床检测。     

反转录病毒介导基因转移治疗脑肿瘤的安全性研究：Ⅰ.具有？…

目的：检测反转录病毒介导的脑肿瘤基因治疗中具有复制能力野生型反转录病毒（ＲＣＲ）。方法．；ＲＣＲ检测主要方法有：ＤＮＡ聚合酶链式反应（ＰＣＲ），反转录ＰＣＲ（ＲＴ／ＰＣＲ）。Ｓｏｕｔｈｅｍ杂交以及ｎｅｏ基因和ｌａｃＺ基因的补救分析。结果：建立了ＰＣＲ的检测系统，从ＤＮＡ水平、ＲＮＡ水平和病毒活体水平对产ＨＳＶ＿ＴＫ病毒我装细胞（ＴＫ／ＶＰＣ），Ｃ６转ＴＫ基因细胞和实验动物血液可能存在的ＲＣＲ野生型     

用聚合酶链反应（PCR）方法检测皮肤单纯疱疹病毒I型感染

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测皮肤单纯疱疹病毒Ｉ型感染北京医科大学第一医院皮肤科杨海珍，朱鸣，朱学骏单纯疱疹是临床较常见的疾病，由单纯疱疹病毒ＨＳＶ）感染，ＨＳＶ是ＤＮＡ病毒，分为ＨＳＶ－Ⅰ，ＨＳＶ－Ⅱ。ＨＳＶ－Ⅱ感染可能与宫颈癌的发生有关（１）。...     

多重聚合酶链反应检测人子宫颈病毒感染

目的在同一反应体系中同时快速检测人子宫颈常见的人乳头状瘤病毒１６型（ＨＰＶ－１６）、人疱疹病毒２型（ＨＳＶ－２）和巨细胞病毒（ＣＭＶ）以及沙眼衣原体（ＣＴ）感染。方法采用快速制备样品的方法简化了聚合酶链反应（ＰＣＲ）实验过程，应用多重聚合酶链反应检测四种病原体。结果整个ＰＣＲ检测过程仅需４小时，总检出率为５７％，各病原体检出率分别是ＨＰＶ－１６１１％、ＨＳＶ－２２１％、ＣＭＶ１４％和ＣＴ２１％。结论该方法既保持了ＰＣＲ的敏感性和特异性，又是一种简便、快速的诊断技术，可用于人宫颈感染的临床诊断和预后判断。     

血清丙肝病毒RNA二种提取方法的比较

２４例抗－ＨＣＶ阳性的血清标本，同时以硫氰胍半字符热酚变性方法和蛋白酶ＫＩ肖化法裂解提取丙肝病毒ＲＮＡ（ＨＣＶＲＮＡ），并应用反转录半字符多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和套式多聚酶链反应（Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ。结果表明，硫氰胍半字符热酚法明显优于蛋白酶Ｋ消化法。前者处理标本的阳性检出率为５８．３％，后者处理标本的阳性检出率为３３．３％（Ｐ＜０．０５）；前者操作步骤简便，在试剂的保存等方面优于后者，故前者更适于临床ＨＣＶＲＮＡ的检测     

RT-PCR结合地高辛标记定量检测猴免疫缺陷病毒RNA

从感染猴免疫缺陷病毒（ＳＩＶ）的恒河猴血浆和培养细胞株中分别纯化病毒ＲＮＡ，经逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增ＳＩＶｇａｇ基因特异的ＤＮＡ片段。将ＲＴ－ＰＣＲ产物用地高辛标记，检测灵敏度比凝胶电泳和斑点杂交提高１００倍。用已知拷贝数的ＲＮＡ作为定量标准，可估计待测样本中ＳＩＶＲＮＡ的拷贝数。     

逆转录-半套式-聚合酶链反应在流行性乙型脑炎病人病原学诊断中的临床应用研究(摘要)

目的 :①建立一种新的敏感性高、特异性强的检测ＪＥＶＲＮＡ的方法 (ＲＴ -ｓｅｍｉ-ｎｅｓｔｅｄ -ＰＣＲ) ,并对该方法在临床标本检测中的应用进行评价。②分析新建立的ＲＴ ｓｅｍｉ-ｎｅｓｔ ｅｄ-ＰＣＲ与ＩｇＭ捕获法ＥＬＩＳＡ(ＭａｃＥＬＩＳＡ)的相关性 ,评价两种方法在临床标本检测中的应用。方法 :随机收集临床诊断的 37例乙脑和 15例病人标本 (包括血清、脑脊液 )分别为 6 3份和 30份 ,同时用ＲＴ -ｓｅｍｉ-ｎｅｓｔｅｄ -ＰＣＲ、ＭａｃＥＬＩＳＡ进行检测。结果 :除疫苗第一次ＰＣＲ扩增可出现相应电泳条带外 ,临床标本第一…     

PCR—谱酶法检测小儿肝炎综合征人疱疹解毒DNA的研究

为探讨婴儿肝炎综合征（ＮＨＳ）与疱疹病毒（ＨＳＶ）感染的关系。在疱疹病毒高度同源序列ＤＮＡ聚合酶基因中设计一对引物，能对ＨＳＶ－Ｉ、ＨＳＶ－Ⅱ、ＥＢＶ和ＣＭＶ四种疱疹病毒ＤＮＡ进行扩增，继而用凝胶电泳和限制性内切酶ＢａｍＨⅠ或ＳｍａⅠ酶切分析扩增产物进行鉴别，建立了能一次性分型检测上述四种病毒的ＰＣＲ－酶谱法。灵敏度可测到１ｆｇＤＮＡ，且该引物仅对四种疱疹病毒扩增。用建立的ＰＣＲ－酶谱法检测３０例     

用聚合酶链反应检测乙肝患者血清中的HBV－DNA

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了１１４例传染科门诊病人血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，并与ＨＢＶ有关的血清学标志（ＨＢＶＭ）进行了比较。结果表明：在９２和ＪＨＢｓＡｇ（＋）病例中，ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者５０例，占５４．３４％；在２８例ＨＢｅＡｇ（＋）病例中，ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者２６例，占９２．８６％；在２０例ＨＢＶＭ均为阴性的病例中，ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者有６例，占３０．００％。证明ＰＣＲ法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ较用ＥＬＩＳＡ法检测抗原一抗体更加灵敏、可靠。     

PCR热启动及稀释法与常规法检测血清HBV—DNA的结果比较

采用常规ＰＣＲ、热启动ＰＣＲ、稀释后热泪动ＰＣＲ三种方法，对经ＥＬＩＳＡ检测为ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｃ、ＨＢｅＡｇ或抗ＨＢｅ阳性的血清标本，检测其乙型肝炎病毒ＵＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ）。结果显示热启动ＰＣＲ、稀释后热启动ＰＣＲ能提高ＨＢＶ－ＤＮＡ的阳性检出率。     

乙型肝炎合并HFRS与HFRS临床对比分析

目的探讨乙型肝炎合并肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）对ＨＦＲＳ临床及乙肝病毒血清学标志（ＨＢＶＭ）的影响。方法采用Ａｕ－５６０全自动生化分析仪检测肝、肾功能，酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测ＨＢＶＭ，聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测ＨＢＶＤＮＡ，并与３０例ＨＦＲＳ进行临床对比分析。结果合并感染肝、肾损伤轻，对乙肝病毒（ＨＢＶ）有短期抑制作用。结论两种嗜病毒合并感染并未加重病情及肝脏损伤。