红藤方对子宫内膜异位症患者血清基质金属蛋白水解酶-9、基质金属蛋白酶抑制剂-1水平的影响

目的观察红藤方对子宫内膜异位症患者血清基质金属蛋白水解酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）水平的影响。方法将73例子宫内膜异位症患者随机分为2组。治疗组37例予红藤方治疗,对照组36例予孕三烯酮治疗。2组均治疗3个月。观察2组治疗前后血清MMP-9、TIMP-1及MMP-9/TIMP-1水平改变情况。并设正常组40例进行对照。结果治疗组、对照组血清MMP-9均高于正常组（P〈0．05）,血清TIMP-1均低于正常对照组（P〈0．05）,MMP-9/TIMP-1水平与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组、对照组治疗后血清MMP-9与正常组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）;治疗后对照组与正常组血清TIMP-1比较差异有统计学意义（P〈0．05）,而治疗组与正常组比较血清TIMP-1比较差异无统计学意义（P〉0．05）。治疗后治疗组、对照组血清MMP-9/TIMP-1与正常组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）,但治疗后治疗组更接近于正常组,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组治疗前后MMP-9及MMP-9/TIMP-1比较差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组治疗前后MMP-9/TIMP-1比较差异有统计学意义（P〈0．01）。对照组治疗前后血清MMP-9、TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论子宫内膜异位症发生与血清MMP-9、TIMP-1水平失调有关,红藤方作用机制与调整血清MMP-9/TIMP-1表达,抑制异位内膜的侵袭性有关。     

动脉粥样硬化患者基质金属蛋白酶-9及其抑制物-1基因表达与痰浊证素的相关性研究

目的分析动脉粥样硬化(AS)患者基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)的基因表达水平与痰浊证素的相关性,探讨MMP-9、TIMP-1基因表达水平作为AS患者中医"痰浊证素"客观指标的可行性。方法将AS患者分为痰浊证素组30例,非痰浊证素组48例,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术进行MMP-9和TIMP-1mRNA表达水平的定量检测。结果痰浊证素组MMP-9和TIMP-1基因表达水平均明显高于非痰浊证素组,差异具有统计学意义。结论 MMP-9及TIMP-1基因表达可作为中医痰浊证素的客观指标。     

华蟾素通过调控基质金属蛋白酶抑制人胃腺癌细胞MGC-803侵袭与迁移

目的:探讨华蟾素对人胃腺癌MGC-803细胞的侵袭与迁移的影响及其分子机制。方法:噻唑蓝(MTT)比色法检测华蟾素(10,20,40,80,160,320 mg·L~(-1))对人胃腺癌MGC-803细胞增殖的抑制影响;transwell小室法检测华蟾素对MGC-803细胞侵袭与迁移能力的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测经华蟾素作用后的MGC-803细胞中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2),基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitors of metalloproteinases-1,TIMP-1),基质金属蛋白酶抑制因子-2(tissue inhibitors of metalloproteinases-2,TIMP-2)的蛋白表达水平;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测经华蟾素处理后的MGC-803细胞中MMP-2,MMP-9,TIMP-1,TIMP-2的mRNA表达情况。结果:(1)MTT比色法结果显示,与空白组比较,华蟾素(10,20,40,80,160,320 mg·L~(-1))对胃腺癌MGC-803细胞的增殖具有显著抑制作用(P0.01),并且华蟾素对MGC-803细胞的抑制作用呈浓度和时间依赖。(2)transwell实验结果显示,与空白组比较,华蟾素(10,20,40 mg·L~(-1))对胃腺癌MGC-803细胞的侵袭与迁移能力具有不同程度的抑制作用(P0.05)(3)Real-time PCR和Western blot实验结果显示,与空白组比较,华蟾素(10,20,40 mg·L~(-1))能够下调MMP-2,MMP-9蛋白和mRNA的表达,上调TIMP-1,TIMP-2蛋白和mRNA的表达。结论:华蟾素能明显抑制胃腺癌MGC-803细胞的侵袭与迁移,其机制可能与上调TIMP-1,TIMP-2的转录水平,进而下调MMP-2,MMP-9蛋白水平有关。     

贞清方对2型糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶组织抑制物-1表达的调节作用

目的探讨中药贞清方(含女贞子、地龙等中药)对2型糖尿病大鼠肾脏结构及肾组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)表达的影响。方法采用高糖高脂饲料喂养加小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)注射的方法建立2型糖尿病模型。将成模大鼠随机分成模型组,贞清方高、低剂量组,依那普利组,并设立正常对照组,治疗8周。用免疫组化法检测MMP-9、TIMP-1以及纤维连结蛋白(FN)在肾脏的表达,光镜观察肾小球和肾小管形态。结果糖尿病模型组较对照组TIMP-1、FN表达增强,MMP-9表达减弱；治疗组TIMP-1、FN表达较模型组减弱,MMP-9表达增强。其中贞清方高剂量组作用最明显。形态学观察显示治疗组肾小球和肾小管病变比模型组减轻。结论贞清方可能通过影响糖尿病大鼠肾脏MMP-9、TIMP-1的表达而发挥其对糖尿病大鼠肾脏结构的保护作用。     

绝经后妇女基质金属蛋白酶3和抑制因子水平与骨保护蛋白和骨桥蛋白的关系

目的：探讨绝经后妇女血清基质金属蛋白酶-3（MMP-3）和抑制因子（TIMP-1）水平及其与骨保护蛋白和骨桥蛋白的关系。方法：将210名绝经后妇女用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清MMP-3、TIMP-1和骨桥蛋白（OPN）以及骨保护蛋白（OPG）水平,计算MMP-3/TIMP-1比值。结果：①骨质疏松组中MMP-3的数值（153±121）ng/mL高于正常组（125±101）ng/mL,而TIMP-1的数值（134±106）μg/L低于正常组（147±130）μg/L,血清OPN数值（56±20）ng/mL明显高于正常组（26±11）ng/mL。②骨质疏松组中MMP-3与MMP-3/TIMP-1比值和血清OPN和OPG存在明显正相关性（P〈0.05）,TIMP-1和血清OPG和OPN存在明显负相关性（P〈0.05）。结论：绝经后骨质疏松症妇女MMP-3/TIMP-1比值与OPN和OPG具有关联性,MMP-3/TIMP-1比值升高可能为绝经后骨质疏松症伴随骨代谢转换过程增快的表现。     

生血汤加减联合放疗对乳腺癌患者外周血癌胚抗原、基质金属蛋白酶-2、金属蛋白酶抑制剂-2的影响

目的 探讨生血汤加减联合放疗对乳腺癌患者外周血癌胚抗原(CEA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)mRNA的影响.方法 将2005年2月至2008年1月来我院就诊的91例乳腺癌患者,按随机数字表法分为两组,对照组40例,采用放疗配合口服阿那曲唑片治疗;治疗组51例,在对照组治疗基础上加服中药生血汤治疗.结果 治疗组总有效率为82.3％、对照组为52.5％,两组总有效率比较,差异有统计学意义(x2=19.74,P＜0.05).治疗后对照组外周血CEA、MMP-2 mRNA表达量[分别为(7.50±4.32) ng/ml、(116.32±67.40) ng/ml]均高于治疗组[(7.20±3.22)ng/ml、(105.08±37.82) ng/ml,P＜0.05];TIMP-2/MMP-2比值(26.65±19.75)则低于治疗组[ (39.48±21.21),p＜0.05].结论 生血汤加减联合放疗可有效降低乳腺癌患者外周血CEA、MMP-2mRNA表达量,升高TIMP-2/MMP-2比.     

舒血宁注射液对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者血清基质金属蛋白酶-9及组织金属蛋白酶抑制物-1水平的影响

目的观察舒血宁注射液对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)急性加重期患者血清基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase,MMP-9)及组织金属蛋白酶抑制物-1(tissueinhibitor of metalloproteinase,TIMP-1)水平的影响。方法 79例COPD急性加重期患者随机分成治疗组39例和对照组40例,两组均给予COPD常规治疗,治疗组在此基础上予舒血宁注射液15mL加入250mL葡萄糖注射液中静脉滴注,每天2次,共14天,治疗前后分别采用肺功能仪测定第1s用力呼气量(FEV1)及用力肺活量(FVC)数值,计算FEV1/FVC%及FEV1占预计值%。ELISA法检测患者血清MMP-9及TIMP-1浓度,并与20名健康体检者的结果进行对照。结果治疗后,治疗组FEV1、FVC、FEV1/FVC%及FEV1占预计值%均较治疗前及对照组显著改善(P<0.05,P<0.01);治疗组血清MMP-9、TIMP-1浓度及MMP-9/TIMP-1值均较治疗前及对照组显著降低(P<0.05,P<0.01);相关性分析表明,血清MMP-9、TIMP-1浓度与FEV1/FVC%呈明显负相关(r分别为-0.677、-0.629,P<0.01),与FEV1占预计值%亦呈明显负相关(r分别为-0.562、-0.661,P<0.01);MMP-9/TIMP-1值与FEV1占预计值%及FEV1/FVC%亦呈明显负相关(r分别为-0.732、-0.891,P<0.01)。结论舒血宁注射液可改善COPD急性加重期患者肺通气功能,其机制之一可能与其降低血清MMP-9、TIMP-1浓度,纠正MMP-9/TIMP-1失衡有关。     

雷公藤内酯醇上调纤维肉瘤HT 1080细胞基质金属蛋白酶 9基因甲基化水平

目的:研究雷公藤内酯醇(triptolide,TL)抑制纤维肉瘤HT-1080细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP-9)表达的机制.方法:用终浓度分别为6,12,18 nmol·L~(-1)的TL处理HT-1080细胞72 h,对照组不加药物处理,甲基化特异性PCR检测TL对MMP-9基因启动子甲基化水平的影响,RT-PCR检测TL对基质金属蛋白酶组织抑制物(TIMP-1,-2,-3和-4 mRNA表达的影响.结果:与对照组比较,3个TL处理组中仅18 nmol·L~(-1)处理组MMP-9基因甲基化指数明显上调(0.39±0.10 vs 0.61±0.10,P＜0.05);所有TL处理组TIMP-1,-2,-3和-4的mRNA表达均无明显变化.结论:TL上调HT-1080细胞MMP-9基因甲基化水平,这可能是TL抑制肿瘤MMP-9表达的一种新机制.     

慢性胃病不同中医证候患者胃黏膜基质金属蛋白酶-7及金属蛋白酶组织抑制剂-1的表达

目的观察慢性胃病不同中医证候胃黏膜基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)的表达,并探讨及其与Hp感染的关系。方法临床选取慢性胃病患者117例,并招募健康志愿者11名。根据中医证候将慢性胃病患者分为脾胃湿热证组(57例)、肝胃不和证组(30例)及脾气虚证组(30例),健康志愿者为正常对照组。采用美蓝染色和快速尿素酶法检测Hp感染情况;常规HE染色法观察炎症程度;免疫组织化学方法定性、定位检测MMP-7及TIMP-1蛋白水平表达。结果脾胃湿热证与肝胃不和证患者Hp感染率和感染程度相当,虽均呈略高于脾气虚证趋势,但差异无统计学意义(P0.05)。与脾胃湿热组及脾气虚证组比较,肝胃不和证胃黏膜炎症程度更重(P0.05),脾胃湿热证呈高于脾气虚证患者,但差异无统计学意义(P0.05);胃黏膜炎症活动度呈脾胃湿热证肝胃不和证脾气虚证,差异有统计学意义(P0.05)。与Hp阴性患者比较,脾胃湿热证、肝胃不和证及脾气虚证Hp阳性患者胃黏膜炎症活动度更重,脾胃湿热证及脾气虚证Hp阳性患者胃黏膜炎症程度更重,差异均有统计学意义(P0.05)。与正常对照组比较,脾胃湿热证、肝胃不和证及脾气虚组患者胃黏膜TIMP-1表达水平升高(P0.05,P0.01),脾胃湿热证组Hp阴性患者MMP-7表达水平升高(P0.05);与脾胃湿热证组Hp阴性患者比较,脾胃湿热证组Hp阳性患者MMP-7表达水平降低(P0.05);与脾气虚证组比较,脾胃湿热证组TIMP-1蛋白表达水平降低(P0.01)。胃黏膜炎症程度与MMP-7表达呈负相关,与TIMP-1表达呈正相关关系(P0.01);Hp感染程度与胃黏膜MMP-7表达未见明显相关性(P0.05),而与胃黏膜TIMP-1表达呈正相关(P0.05);其中胃黏膜MMP-7表达与TIMP-1表达呈正相关(P0.01)。结论胃黏膜炎症中MMP-7相对低水平表达及与TIMP-1平衡紊乱,可能是慢性胃病的发病机制之一;其在不同证候表达差异对"同病异证"微观研究有一定的阐发,且情绪波动可能也是慢性胃病发病的重要因素。     

心血瘀阻证心肌微环境基质金属蛋白酶-2、9表达的实验研究

目的:观察基质金属蛋白酶-2、9在心血瘀阻证心肌微环境的变化。方法:建立大鼠急性心梗心血瘀阻证模型,分为假手术组、健康对照组、心虚瘀阻证组,然后用ELISA方法观测其基质金属蛋白酶2、9的表达。结果:基质金属蛋白酶2血瘀阻证表达高于健康对照和假手术组(P<0.05),基质金属蛋白酶9三组间均有差异,其中心血瘀阻证组最高,其次为假手术组、健康对照组(P<0.05)。结论:基质金属蛋白酶-2、9参与心血瘀阻证心肌微环境的变化,是中医证候本质的物质学基础。     

N1-取代咖啡酰吡咯烷衍生物-LY52抑制MMP-2活性作用研究

 目的以MMP-2为靶点,设计合成了N1-取代咖啡酰吡咯烷衍生物-LY52,研究其对MMP-2活性抑制作用及抗侵袭转移能力。方法MTT法检测LY52对肿瘤细胞生长抑制作用;台盼蓝染色方法鉴别其作用性质。以proMMP-2酶活性实验方法,直接测定LY52对该酶的抑制作用。MTT法研究细胞与不同类型的基底膜蛋白黏附性。以明胶酶谱实验法,分析Hep-2培养上清液MMP-2的表达及活性。免疫细胞化学和免疫组织化学实验分别检测体外培养和接种裸鼠体内Hep-2细胞的MMP-2表达水平。以Transwellchamber小室法,研究LY52对Hep-2细胞穿过重组基底膜的能力。结果与结论LY52对Hep-2细胞仅具有较弱的生长抑制作用。当化合物与proMMP-2接触时,显示直接抑制酶活性,并可能阻滞proMMP-2向活性型转变。与细胞接触1h,LY52明显抑制Hep-2细胞与基底膜蛋白LN,FN及Matrigel的黏附性;接触24h,Hep-2细胞上清液中MMP-2表达水平显著下降;免疫组织化学实验也发现LY52对接种裸鼠体内的Hep-2细胞生长具有一定的抑制作用,同时降低MMP-2表达水平。当与LY52接触24h,Hep-2细胞穿过包被基底膜蛋白的polycarbonate滤膜能力下降,说明LY52具有抗侵袭和癌细胞游走的能力。LY52可能通过特异性结合并降低MMP-2活性,抑制Hep-2细胞的侵袭与转移能力。     

大黄素对肾纤维化大鼠肾组织MMP-9表达的影响

目的 探讨中药大黄素对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中基质金属蛋白酶9 （MMP-9）表达的影响.方法 120只wister大鼠随机分成3组：假手术组、梗阻组及大黄素治疗组.制备单侧输尿管梗阻（UUO）模型.治疗组在UUO的基础上每天以大黄素40mg/kg灌胃,采用病理及免疫组化的方法动态观察各组大鼠术后1d、3d、7d、14d梗阻侧肾脏组织学变化和MMP9在梗阻肾小管间质中表达情况.结果模型组MMP-9的表达先增高后降低,治疗组MMP-9的表达水平高于模型组（P＜0 05）.结论 中药大黄素可以通过提高MMP9的表达,促进ECM的降解来发挥其延缓肾间质纤维化进程的作用.     

急性脑梗死患者血清基质金属蛋白酶-9变化及醒脑静注射液的干预作用

目的探讨血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）与急性脑梗死的关系,观察醒脑静注射液对MMP-9的干预作用。方法选择急性脑梗死患者46例,随机分为常规组与治疗组。常规组单纯采用西药常规治疗,治疗组在常规组基础上加用醒脑静注射液静滴,并在第1天、第3天、第8天、第14天时清晨空腹抽取肘静脉血,对比MMP-9变化。结果治疗组治疗后第14天MMP-9浓度降至正常,MMP-9浓度下降程度明显高于常规组,特别在大面积梗死亚组。结论MMP-9血清浓度与急性脑梗死面积大小成正比。经药物治疗后,MMP-9血清浓度无高峰出现,呈缓慢下降曲线,醒脑静注射液干预治疗组下降更明显。     

急性冠脉综合征中医辨证与C-反应蛋白和基质金属蛋白酶-9的关系

目的探讨急性冠脉综合征(ACS)中医辨证分型与C-反应蛋白(CRP)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的关系。方法观察组100例ACS患者按中医辨证分为心脉瘀阻证、痰热血瘀证、痰浊血瘀证、气滞血瘀证、寒凝血瘀证、气虚血瘀证、气虚血瘀痰阻证和气阴两虚、痰瘀互结证。对照组30例为健康人。分别检测血清CRP及MMP-9水平,并进行相关分析。结果观察组CRP、MMP-9水平明显高于正常对照组(P0.01)。实证与虚实夹杂证比较,CRP、MMP-9水平升高(P0.05或P0.01)。结论血清CRP、MMP-9水平与ACS中医证型具有相关性。     

温针灸对不同时间点KOA模型兔关节软骨中MMP-1、MMP-13表达的影响

目的:观察温针灸(warming moxibustion)对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)软骨细胞中基质金属蛋白-1、13(matrix metalloproteinase-1、13,MMP-1、MMP-13)表达的影响,明确温针灸治疗KOA的作用机制。方法:选取70只新西兰大耳兔,其中10只作为空白对照组,剩余随机分为模型2周组、模型4周组、模型6周组、温针灸2周组、温针灸4周组、温针灸6周组。采用右后肢伸直位石膏固定制备KOA兔模型,模型2、4、6周组不予处理,温针灸2、4、6周组分别给予温针灸治疗2周,治疗结束后取材。采用免疫组化及RT-PCR检测各组治疗前后关节软骨中MMP-1、MMP-13蛋白及mRNA的表达。结果:与空白对照组比较,模型2周组、模型4周组、模型6周组软骨中MMP-1、MMP-13表达明显升高(P0.05),且各组间比较,差异有统计学意义(P0.05)。与相应模型组比较,温针灸治疗后,MMP-1、MMP-13的表达降低(P0.05),且各组间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:温针灸可降低KOA兔软骨中MMP-1、MMP-13的表达,说明温针灸治疗KOA可能与其抑制MMP-1、MMP-13的表达有关。     

原发性高血压颈动脉硬化与基质金属蛋白酶-3基因型的相关性分析

目的分析高血压病颈动脉硬化与基质金属蛋白酶-3（MMP-3）基因型的相关性。方法将本院2010年5月—2013年5月收治的原发性高血压病人108例作为观察组,将102例健康体检者作为对照组,MMP-3基因启动子在-1171位点存在三类基因型：分别为：6A/6A、5A/6A及5A/5A,对比三类基因型在两组中的分布情况;观察组高血压者69例与对照组体检者31例采取颈动脉超声检查,对比分析两组的内-中膜厚度（IMT）。结果观察组6A/6A基因型（65.7%）与6A等位基因频率（82.4%）高于对照组基因型（53.8%）与等位基因频率（75.9%）,但分布差异相比不具有统计学意义（基因型P=0.092,等位基因P=0.118）;观察组6A/6A基因型病人在起始部位、膨大前以及膨大部位的IMT均显著高于对照组（P〈0.05）,具有统计学意义。结论原发性高血压病人的颈动脉内-中膜厚度受多种危险因素影响,高血压病的6A/6A基因型病人其颈动脉内-中膜厚度增加。     

冠心病稳定型心绞痛患者MPO及MMP-9表达变化

目的 探讨冠心病稳定型心绞痛患者血清髓过氧化物酶（MPO）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达变化.方法 采用液相芯片分析系统同步检测206例经冠状动脉造影证实的稳定型心绞痛患者及28名健康对照者血清MPO和MMP-9表达程度,并分析其与冠脉病变程度的相关性.结果 稳定型心绞痛患者血清MPO、MMP-9表达程度较健康对照者升高（P〈0.01）;二者变化具有显著正相关（P〈0.01）,且与冠脉病变程度Gensini积分无明显相关.结论 稳定型心绞痛患者冠脉斑块具有一定程度炎性反应和不稳定性,其中表达程度升高者可能处于向不稳定型心绞痛过度的阶段.MPO和MMP-9可能成为判定稳定型心绞痛患者危险分层的依据.     

基质金属蛋白酶-9与冠心病中医证候的关系

目的:探讨冠心病患者血清金属基质蛋白酶-9(MMP-9)水平变化的意义及与中医证候的关系。方法:对冠心病患者中医辨证分为心血瘀阻证组、痰浊内阻证组、非血瘀痰浊证组;健康人作为对照组,用双抗体夹心ABC-ELISA法检测血清MMP-9水平。结果:冠心病中医各证组MMP-9水平明显高于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论:MMP-9水平与冠心病中医证候有关联,可作为冠心病病情发展的预测指标及中医辨证的参考指标。     

愈肾颗粒不同药对配伍对肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶-2及其抑制剂-2的影响

目的:考察黄芪、太子参(益气摄血组),牡丹皮、丹参(凉血化瘀组),紫草、益母草(解毒化瘀组)3组药对对大鼠肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)m-RNA表达的影响.方法:应用血清药理学方法,制取中药药对的含药血清.以血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作为刺激因子,培养大鼠肾小球系膜细胞,使其发生增殖.应用反转录多聚酶链反应技术(RT-PCR)观察各组间MMP-2,TIMP-2的基因表达情况.结果:益气摄血组对TIMP-2抑制作用显著,与模型组比较有显著性差异;其他2组虽有抑制趋势,但无统计学意义.3组药对对MMP-2的影响均无统计学意义.结论:黄芪、太子参可通过抑制TIMP-2的基因表达,发挥防治肾小球硬化的作用.