豨莶醇对佐剂性关节炎大鼠血清细胞因子及滑膜细胞凋亡蛋白的影响

目的探讨豨醇(奇任醇)对佐剂性关节炎(AA)大鼠血清细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及滑膜细胞Bcl-2、Fas-L蛋白表达的影响。方法采用弗氏完全佐剂建立SD大鼠AA模型,分别给予奇任醇、氢化可的松、阿司匹林 环磷酰胺治疗;ILISA法测定实验大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平;踝关节滑膜细胞进行Bcl-2、Fas-L免疫组化染色,运用计算机图像分析系统对染色结果进行分析。结果与正常组相比,模型组大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平显著升高(P<0.01),滑膜细胞Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05),Fas-L表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,奇任醇组大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平显著降低(P<0.01、0.05);滑膜细胞Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.05),Fas-L蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论奇任醇可降低AA大鼠血清细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6水平,下调滑膜细胞Bcl-2蛋白表达、促进Fas-L蛋白表达。     

TNF-琢对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞自噬和增殖的影响及作用机制研究

目的观察TNF-α对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞（RASF）自噬和增殖的影响,并进一步通过抑制NF-资B通路来探讨这一影响的作用机制。方法以RASF细胞株MH7A为研究对象,在一阶段实验中,根据5ng/mlTNF-琢处理的时间点不同,将细胞分为6组,即0、3、6、12、24及48h组。在二阶段实验中,将细胞分为4组,即Bay组：细胞用5滋g/mlBay11-7082处理;TNF-α组：细胞用5ng/mlTNF-琢刺激;Bay+TNF-琢组：细胞用5滋g/mlBay11-7082预处理2h,再用5ng/mlTNF-琢刺激;正常对照（Ctrl）组：细胞不作处理。MTT法检测细胞相对活性;共聚焦显微镜下采用GFP-LC3来示踪自噬形成;Westernblot法检测细胞内P-p65、自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ/自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3-I（LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ）以及唯Bcl-2同源-3域蛋白-1（Beclin-1）蛋白表达水平;Realtime-PCR法检测细胞内Beclin-1mRNA表达水平;细胞免疫荧光法检测P-p65在细胞中表达及定位。结果与0h组相比,12、24、48h组细胞相对活性均明显升高（均P＜0.05）。GFP-LC3-Ⅱ腺病毒转染细胞后,与0h组相比,TNF-琢刺激滑膜细胞后自噬小体形成明显增多,其中24h组最为明显。与0h组相比,3、6、12h组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达水平均明显升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）,6、12、24、48h组Beclin-1蛋白表达水平均明显升高（均P＜0.05）。与0h组相比,6、12、24、48h组Beclin-1mRNA表达水平均明显升高（均P＜0.05）。与TNF-α组相比,Bay+TNF-琢组细胞内P-p65蛋白表达及入核明显减少。与Ctrl组比较,Bay组细胞P-p65蛋白的表达水平明显下降,与TNF-琢组比较,Bay+TNF-琢组细胞P-p65蛋白的表达水平明显下降（均P＜0.05）。与Ctrl组比较,Bay组细胞相对活性明显降低（P＜0.05）;与TNF-琢组比较,Bay+TNF-琢组细胞相对活性明显降低（P＜0.05）。与TNF-琢组相比,Bay+TNF-琢组细胞自噬小体明显减少。与Ctrl组比较,Bay组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平均明显下降（均P＜0.05）;与TNF-α组比较,Bay+TNF-琢组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平均明显下降（均P＜0.05）。与Ctrl组比较,Bay组Beclin-1mRNA表达水平明显下降（P＜0.05）;与TNF-琢组比较,Bay+TNF-α组Beclin-1mRNA表达水平明显下降（P＜0.05）。结论TNF-α能诱导RASF自噬和增殖活性,而NF-资B通路则能上调TNF-α刺激下的细胞自噬和增殖活性。     

乌司他丁对坏死性小肠结肠炎新生大鼠小肠结肠的保护作用研究

目的探讨乌司他丁对坏死性小肠结肠炎(NEC)新生大鼠小肠结肠的保护作用。方法将60只3日龄SD大鼠随机分为正常对照组、NEC模型组、乌司他丁治疗组、乌司他丁对照组,每组15只。先采用综合应激法建模,即3日龄SD大鼠离开母鼠后,采用肠内配方奶喂养、缺氧（100%CO2灌饲养箱10min）-高氧（97%O2灌饲养箱5min）暴露和冷应激（4℃环境中5min）的方法,2次/d,连续3d,并加腹膜腔注射0.9%氯化钠溶液。造模成功后取肠管组织切片,HE染色光镜下观察并作Shiou评分,免疫荧光法检测自噬因子（Beclin-1）和自噬相关蛋白（LC3A/B）表达水平,Elisa法检测TNF-α、IL-1β和IL-6水平。结果NEC模型组和正常对照组相比较炎症反应明显改善,Shiou评分有统计学差异;Beclin-1和LC3A/B荧光强度显著增强;TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。乌司他丁治疗组和NEC模型组相比较炎症反应明显改善,Shiou评分有统计学差异;Beclin-1和LC3A/B水平可见荧光强度表达显著下降;TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显下降,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论乌司他丁对NEC新生大鼠小肠结肠有保护与治疗作用。     

ERK5对人肺成纤维细胞自噬、凋亡和增殖的调控

目的 探讨细胞外信号调节蛋白激酶-5(ERK5)对人肺成纤维细胞系(HLFs)自噬、凋亡和增殖的调控及对成纤维细胞表型转化的影响.方法 转化生长因子β1(TGF-β1)诱导HLFs建立肺纤维化细胞模型,过表达ERK5基因(ERK5)后通过Western blot检测自噬、凋亡、增殖相关因子和表型转化标志因子α-SMA的表达,通过细胞增殖/毒性检测(CCK8)试剂盒检测细胞增殖率.结果 经TGF-β1处理后,与对照组相比,ERK5组细胞α-SMA、P62蛋白表达水平升高,LC3Ⅱ、Beclin-1蛋白表达水平降低;促凋亡蛋白Cleaved-Caspase-3表达水平降低,抗凋亡蛋白Bcl-2和增殖细胞核抗原PCNA表达水平升高,CCK8检测到细胞增殖率升高.结论 在TGF-β1诱导的HLFs表型转化过程中,ERK5高表达促进细胞增殖、抑制细胞自噬和凋亡.     

基于AKT/mTOR信号通路探讨复方七芍降压片治疗自发性高血压大鼠的作用机制

目的探讨复方七芍降压片通过调控蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对自发性高血压(SHR)大鼠血压、炎症因子及胸主动脉自噬相关蛋白表达的影响。方法 SHR大鼠30只,随机分为模型组、厄贝沙坦片组(27 mg/kg)、复方七芍降压片组(1.73 g/kg),连续给药6周,另设10只WKY大鼠为正常组,灌胃生理盐水。分别在给药前及给药1、2、3、4、5、6周,测量各组大鼠尾动脉血压。给药6周后取材,电镜观察胸主动脉超微结构及自噬情况;ELISA法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平;免疫组化法检测胸主动脉中Beclin-1、Bcl-2、AKT、mTOR蛋白表达;Western-blot检测胸主动脉中Beclin-1、Bcl-2蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血清IL-1β、IL-6水平升高(P0.01);胸主动脉Bcl-2、AKT、mTOR蛋白表达升高(P0.01或P0.05),Beclin-1表达降低(P0.01),且未见明显的自噬体结构。与模型组比较,复方七芍降压片组大鼠各周血压均降低(P0.01);血清IL-1β、IL-6水平降低(P0.05);胸主动脉中AKT、mTOR蛋白表达均降低(P0.05),Beclin-1表达升高(P0.05),且可见明显的自噬体结构。结论复方七芍降压片能够降低SHR大鼠血压,其机制可能与抑制胸主动脉中自噬相关信号通路蛋白AKT、mTOR的表达,促进主动脉自噬,改善炎症反应有关。     

Caco-2细胞缺氧复氧损伤时母乳对促炎细胞因子表达的影响

目的：研究母乳对坏死性小肠结肠炎（necrotizing enterocolitis, NEC）炎症细胞的分子保护机制。方法通过建立Caco-2细胞缺氧复氧损伤模型,向正常细胞和缺氧复氧损伤模型细胞分别加入常规培养液、未加热乳清、加热灭活乳清。继续培养6 h后用ELISA法检测Caco-2细胞分泌于培养液中的促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平。结果正常细胞组,未加热乳清和加热灭活乳清均可下调IL-1β、IL-6水平,未加热乳清较加热灭活乳清下调明显,两者之间差异有统计学意义;缺氧复氧损伤后IL-1β、IL-6、TNF-α均明显表达,未加热乳清和加热灭活乳清均可下调IL-1β、IL-6、TNF-α水平,差异有统计学意义,未加热乳清较加热灭活乳清下调IL-1β明显。结论母乳上清液可下调Caco-2炎症细胞促炎细胞因子IL-1β、IL-6的表达,尤其缺氧复氧损伤后TNF-α也下调明显,此类机制可能为母乳防治NEC的作用机制之一。     

自噬在大蒜素减轻脓毒症小鼠急性肺损伤中的作用

目的：探讨自噬在大蒜素减轻脓毒症小鼠急性肺损伤中的作用及机制。方法：将152只20~25 g的8周龄雄 性Balb/c小鼠随机分为4组：假手术组(S组)、脓毒症组(CLP组)、大蒜素治疗组(Allicin组)及自噬抑制组(3-MA组)。脓 毒症模型采用盲肠结扎穿孔法;Allicin组于术后6和12 h用大蒜素(30 mg/kg,腹膜内注射)干预;3-MA组在大蒜素干预 之后0.5 h加用3-MA(15 mg/kg,腹膜内注射);S组和CLP组于同时间点给予等量生理盐水。每组随机取20只小鼠,观 察术后7 d生存率。每组各取12只小鼠,于术后24 h时收集肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fl uid,BALF)(n=6)及肺组织 (n=6),采用ELISA法测定BALF中TNF-α和IL-6水平;HE染色观察肺部病理变化,免疫组织化学法测定肺组织自噬蛋 白微管相关蛋白1轻链3B(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3B)和Beclin-1的表达;采用比色法检测肺组织 MDA含量及SOD活性。结果：与S组比较,CLP组7 d生存率降低(P<0.05),BALF中TNF-α及IL-6水平升高(P<0.05),肺 损伤评分增加(P<0.05),肺组织MDA含量增加、SOD活性下降(P<0.05),肺组织LC3B及Beclin-1表达升高(P<0.05);与 CLP组比较,Allicin组7 d生存率升高(P<0.05),BALF中TNF-α和IL-6水平降低(P<0.05),肺损伤评分下降(P<0.05),肺组 织MDA含量下降,SOD活性增加(P<0.05),肺组织LC3B和Beclin-1表达升高(P<0.05);与Allicin组比较,3-MA组小鼠7 d 生存率降低(P<0.05),BALF中TNF-α和IL-6水平升高(P<0.05),肺损伤评分增加(P<0.05),肺组织MDA含量增加、SOD 活性下降(P<0.05),肺组织LC3B和Beclin-1表达降低(P<0.05)。结论：大蒜素可能通过增强自噬水平减轻脓毒症小鼠急 性肺损伤。     

溃结灵对Caco-2炎症细胞模型核因子-κB p65 DNA结合活性的影响

【目的】观察溃结灵含药血清对Caco-2炎症细胞模型核因子-κB(NF-κB)p65蛋白DNA结合活性的影响。【方法】采用不同剂量含药血清干预Caco-2细胞,并以促炎细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)]诱导Caco-2细胞建立炎症细胞模型,收集细胞。采用Trans AM核转录因子活性检测试剂盒检测细胞核蛋白NF-κB p65的含量(活性)。【结果】TNF-ɑ与IL-1β诱导的模型组细胞核蛋白NF-κB p65的含量显著高于正常对照组(P﹤0.01);溃结灵高、中剂量组,蛋白酶抑制剂组和阳性药(柳氮磺胺吡啶)组细胞核蛋白NF-κB p65的含量均显著降低,与模型组比较差异有统计学意义(P﹤0.01)。【结论】溃结灵含药血清对Caco-2炎症细胞模型细胞核蛋白NF-κB p65 DNA结合活性具有一定的下调作用。     

白芍总苷对内毒素性心肌炎大鼠心肌组织炎症因子的影响

目的研究白芍总苷（TGP）对内毒素性心肌炎大鼠心肌组织中炎症因子TNF-α、IL-1β、NF-κB表达的影响。方法通过尾静脉注入脂多糖（LPS）建立内毒素性心肌炎大鼠模型,分别以低、中、高剂量的TGP进行干预,光镜观察大鼠心肌组织的病理学变化,免疫组化检测心肌组织TNF-α、IL-1β、NF-κB的表达水平。结果光镜观察发现模型组大鼠心肌组织炎症反应明显,较多炎症细胞浸润;TGP中、高剂量组大鼠心肌组织炎症反应较轻,有少量炎症细胞浸润;低剂量组大鼠心肌组织炎症坏死程度介于模型组和中剂量组之间。免疫组化检测提示TGP中、高剂量组TNF-α、IL-1β、NF-κB的表达明显减少,与模型组比较均有统计学差异（均P＜0.01）;TGP低剂量组的TNF-α、IL-1β表达与模型组均无统计学差异（均P＞0.05）,而NF-κB的表达与模型组有统计学差异（P＜0.05）。结论 TGP能有效抑制内毒素性心肌炎大鼠心肌组织炎症反应,减轻心肌损伤,在中、高剂量时效果明显。     

祛风通络方对高糖诱导人肾小球系膜细胞炎性反应的影响机制研究

目的 观察祛风通络方对高糖诱导人肾小球系膜细胞炎性反应的影响.方法 体外培养人肾小球系膜细胞株并采用25.0 mmol/L高糖DMEM诱导其增殖,设立正常组、模型组、抑制剂组、祛风通络组,ELISA法测定IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1的表达水平,real-time PCR法测定白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、相对分子量为38×103的促分裂素原活化蛋白激酶(p38 MAPK)mRNA的表达,Western blot法检测ICAM-1、MCP-1、p38 MAPK的表达.结果 与正常组比较,模型组IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1水平增加(P<0.05),IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1、ICAM-1、MCP-1、p38 MAPK mRNA相对表达水平升高(P<0.05),p38 MAPK、ICAM-1、MCP-1的相对表达水平升高(P<0.05);与模型组比较,祛风通络组IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1水平下降(P<0.05),IL-1β、TNF-α、TGF-β1、ICAM-1、MCP-1、p38 MAPK mRNA相对表达水平降低(P<0.05),MCP-1的相对表达水平降低(P<0.05).与抑制剂组比较,祛风通络组p38 MAPK、IL-1β、IL-6、TGF-β1 mRNA相对表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)结论祛风通络方可以明显改善高糖诱导人肾小球系膜细胞的炎性反应,减少IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1、MCP-1、ICAM-1的表达,这一过程可能是通过p38 MAPK信号通路实现的.     

白藜芦醇对TNF-α诱导的人支气管上皮细胞炎症反应的干预作用

【目的】探讨白藜芦醇对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人支气管上皮细胞炎症反应的干预作用及可能机制。【方法】培养人支气管上皮细胞16-HBE。实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测TNF-α诱导的16-HBE细胞中白细胞介素6(IL-6)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、白细胞介素1β(IL-1β)mRNA的表达水平及白藜芦醇对其预处理后的变化;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测白藜芦醇预处理TNF-α诱导的16-HBE细胞后其核转录因子κB抑制蛋白α(IκBα)和磷酸化核转录因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)及核转录因子κB p65(NF-κB p65)和磷酸化核转录因子κB p65(p-NF-κB p65)的蛋白表达水平。【结果】与空白对照组比较,10 ng/mL TNF-α诱导24 h可明显诱导16-HBE细胞中IL-6、MMP-9、IL-1βmRNA表达上调(P 0.01或P 0.001)。与TNF-α诱导组比较,50、100、150μmol/L白藜芦醇预处理的TNF-α诱导16-HBE细胞中IL-6、MMP-9、IL-1βmRNA表达水平均降低(P 0.001),且呈剂量依赖性。与TNF-α诱导组比较,50、100、150μmol/L白藜芦醇组TNF-α诱导的16-HBE细胞中p-IκBα蛋白表达水平增高,且呈剂量依赖性,其中,100、150μmol/L白藜芦醇组差异有统计学意义(P 0.01或P 0.001),而p-NF-κB p65蛋白表达水平均降低,差异有统计学意义(P 0.001)。【结论】白藜芦醇可能通过调控NF-κB信号通路抑制TNF-α诱导的人支气管上皮细胞炎症反应。     

左归丸含药血清对大鼠海马神经元和胶质细胞氧糖剥夺损伤的保护作用及机制研究

目的:探讨左归丸含药血清对大鼠海马神经元和胶质细胞氧糖剥夺损伤的保护作用及机制。方法:原代培养大鼠海马神经元和胶质细胞混合细胞,分为对照组、模型组、含药血清组和抑制剂组。对照组细胞不做特别处理。模型组细胞给予氧糖剥夺。含药血清组细胞除给予氧糖剥夺+左归丸含药血清。抑制剂组细胞给予氧糖剥夺+左归丸含药血清+雌激素受体(ER)非特异性拮抗剂ICI182780。采用CCK-8法检测各组细胞存活率。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组细胞氧化应激和炎症因子谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平。采用Western blot检测TNF-α、IL-1β、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及磷脂酰肌醇激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路相关蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组细胞存活率、GSH-Px水平下降,MDA、TNF-α、IL-1β水平升高,Bcl-2、磷酸化磷脂酰肌醇激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表...     

肺炎支原体肺炎患儿外周血白细胞自噬相关蛋白表达及临床意义

目的 探讨肺炎支原体肺炎（MPP）患儿外周血白细胞自噬相关蛋白抗微管相关蛋白1轻链3（LC3）、Beclin1的表达及临床意义。方法 采用前瞻性研究方法,收集2019年1月～2020年5月山西省人民医院住院的轻症、重症肺炎支原体肺炎患儿血液标本及正常门诊体检儿童外周血,分离白细胞,采用Western Blot检测白细胞中LC3II、LC3I、Beclin-1的表达量,计算LC3II/I比例;ELISA法检测血清白细胞介素-6 （IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量;比较上述指标在3组儿童血清中的表达量,并分析自噬和细胞因子之间的相关性。 结果 ①共纳入MPP组50例,其中轻症28例,重症22例;对照组（正常体检儿童）25例。②MPP轻症组、重症组外周血白细胞中自噬相关蛋白LC3II/I比例及Beclin1表达量高于对照组,MPP重症组高于轻症组,差异有统计学意义(P＜0.05)。③MPP轻症组、重症组IL-6、TNF-α水平高于对照组,MPP重症组IL-6、TNF-α水平高于轻症组,差异有统计学意义(P＜0.05)。④自噬相关蛋白LC3II/I比例、 Beclin1表达量与IL-6、TNF-α均成正相关(P＜0.05)。结论 MPP中发生了自噬,自噬和病情程度有关,病情越重,自噬程度越高。MPP中细胞因子水平增高,炎症反应明显。自噬和细胞因子呈正相关,提示MPP发生自噬影响细胞因子改变,从而影响疾病严重程度。     

双氢青蒿素抑制LPS诱导的小胶质细胞炎症反应

目的 观察双氢青蒿素(dih ydroartemisinin,DHA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的BV-2小胶质细胞神经炎症反应的影响及其机制.方法 LPS诱导BV-2小胶质细胞活化建立炎症模型,用不同浓度DHA(0.5、1、2、4μmol/L)处理细胞,CCK-8检测细胞活性;选取lμmol/L DHA干预细胞,倒置相差显微镜下观察细胞形态的变化;RT-PCR检测iNOS、IL-1β、IL-6、TNF-α基因表达水平;ELISA检测培养基中IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平;Western blot检测NF-κB、IκBα及TLR4的蛋白表达.结果 低剂量的DHA(＜2μmol/L)对BV-2细胞活性无明显影响(P＞0.05),DHA可抑制LPS引起的BV-2细胞形态变化,DHA抑制活化的BV-2细胞iNOS、IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表达(P＜0.01),减少IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子释放(P＜0.01),明显降低TLR4的蛋白表达,减少细胞质内IκBα的表达,并抑制NF-κB向核内移位(P＜0.01).结论 DHA可能通过作用于TLR4/NF-κB通路,抑制LPS诱导的BV-2小胶质细胞NF-κB的激活,从而抑制炎症因子的产生,发挥抗炎作用.     

桂枝芍药知母汤对尿酸钠诱导的大鼠巨噬细胞Toll-MyD88信号通路炎性信号表达的影响

目的:基于Toll-My D88信号通路观察桂枝芍药知母汤对尿酸钠诱导的大鼠巨噬细胞炎性信号表达的影响,以期分析其抗炎的药效作用机制。方法:以尿酸钠混悬液诱导大鼠巨噬细胞制备痛风性关节炎巨噬细胞模型,以桂枝芍药知母汤含药血清进行干预,ELISA法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、钙结合蛋白S100A8的表达,DNA-蛋白质互作ELISA(DPI-ELISA)方法检测核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)活性;Western-Blot法检测髓性分化因子-88(myeloid differentiation factor 88,My D88)信号衔接蛋白、核因子κB酶抑制剂-β(inhibitor kappa B kinaseβ,IKK-β)、核因子κB抑制蛋白α亚基(NF-kappa-B inhibitor alpha,IKB-α)表达水平;逆转录PCR检测Toll样受体-2(toll-like receptor-2,TLR-2)、TLR-4mRNA的表达。结果:尿酸钠混悬液诱导巨噬细胞造模2 h后,模型细胞对照组IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、S100A8含量,NF-κB活性,My D88、IKK-β蛋白表达及TLR-2、TLR-4 mRNA表达较正常细胞对照组显著增高(P0.05),IKB-α表达较正常细胞对照组显著降低(P0.05);与模型细胞对照组比较,桂枝芍药知母汤各剂量组细胞表达TLR-2、TLR-4 mRNA水平显著降低(P0.05);在不加受体抑制剂的实验中,桂枝芍药知母汤各剂量组IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α含量,My D88、IKK-β蛋白表达水平显著降低(P0.05),高剂量组NF-κB活性显著降低(P0.05),高剂量组S100A8、IKB-α表达水平显著升高(P0.05)。结论:桂枝芍药知母汤抗炎作用机制与降低TLR-2、TLR-4 mRNA表达,抑制My D88、IKK-β蛋白表达,增加S100A8、IKB-α蛋白表达水平,抑制NF-κB激活,进而降低Toll-My D88信号通路相关炎性因子表达密切有关。     

原花青素对CIA大鼠足爪组织中NF-κB/p65蛋白和血清中某些促炎性细胞因子表达的影响

目的研究原花青素对Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎(CIA)大鼠足爪组织中核转录因子NF-κB/p65蛋白表达的抑制作用和血清中炎性细胞因子IL-1β、TNF-α等水平的影响。方法建立Ⅱ型胶原诱导的CIA大鼠模型,免疫组化法检测足爪组织中NF-κB/p65蛋白的表达,ELISA法检测CIA大鼠血清中IL-1β和TNF-α的含量。结果原花青素能剂量依赖性地下调NF-κB/p65蛋白的表达,降低CIA大鼠血清中TNF-α和IL-1β的水平。结论原花青素对CIA大鼠炎症的抑制作用可能与其下调NF-κB/p65蛋白表达、降低促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β的水平有关。     

香菇多糖联合GP化疗方案治疗晚期非小细胞肺癌近期疗效及对外周血促炎性细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达的影响

目的观察香菇多糖联合GP化疗方案治疗晚期非小细胞肺癌客观反应率,分析对外周血促炎性细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达的影响及意义。方法将52例晚期非小细胞肺癌患者根据治疗方案的不同随机分为两组:对照组(GP化疗方案)和观察组(香菇多糖联合GP化疗方案),各26例。比较两组患者经8周治疗后客观反应率和促炎性细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白表达水平的差异。结果与对照组相比,观察组患者对香菇多糖联合GP化疗方案反应率明显提高(P0.05);同样,观察组促炎性细胞因子IL-1β和TNF-α表达水平明显下降(P0.05)。结论香菇多糖联合GP化疗方案治疗晚期非小细胞肺癌可以有效提高客观反应率,并与抑制外周血促炎性细胞因子IL-1β和TNF-α的表达相关。     

川芎嗪通过AMPK-NF κB信号通路抑制BV-2小胶质细胞促炎性细胞因子基因表达

目的观察川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对Aβ25-35诱导的BV-2小鼠小胶质细胞促炎性细胞因子基因表达及对一磷酸腺苷激活的蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)-核因子κB(nuclear factor kappa B,NFκB)信号通路的影响。方法采用Aβ25-35激活BV-2细胞的炎性反应,测定TMP高、中、低剂量(终浓度分别为100、30、10μmol/L)对Aβ25-35诱导的BV-2细胞白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)mRNA表达水平的影响。在AMPK激活剂(AICAR)及抑制剂(化合物C)存在下,检测TMP对AMPK及p65(NFκB亚基)磷酸化的影响。结果 TMP高、中剂量可明显抑制BV-2细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α和iNOS基因mRNA表达水平(P0.01),高剂量TMP可激活BV-2细胞中AMPK(P0.01),并抑制p65磷酸化(P0.01)。结论 TMP通过激活BV-2细胞中AMPK活性,抑制NFκB活化,进而抑制促炎性细胞因子基因的表达。     

依达拉奉对急性缺血性卒中患者外周血自噬及氧化应激水平的影响

目的 观察依达拉奉对急性缺血性卒中(AIS)患者外周血自噬及氧化应激水平的影响.方法 选取2017年1月至2020年12月该院收治的AIS患者150例作为研究对象,采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组75例.对照组给予常规治疗,观察组在常规治疗基础上加用依达拉奉,连续治疗2周.采用实时荧光定量-聚合酶链反应检测两组患者外周血单个核细胞(PBMC)中自噬相关基因(Beclin-1、LC3-Ⅱ)mRNA水平,酶联免疫吸附试验检测相关炎性细胞因子[白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]和氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]水平,采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)和日常生活活动能力(ADL)量表评估神经功能,经颅超声多普勒测定大脑动脉血流情况,记录不良反应发生情况.结果 观察组患者治疗后PBMC中Beclin-1、LC3-ⅡmRNA水平均较对照组降低,MDA、IL-1β、TNF-α水平均低于对照组,SOD水平高于对照组,NIHSS评分低于对照组,ADL评分高于对照组,基底动脉、左右侧大脑中动脉血流均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 依达拉奉可明显降低AIS患者过度激活的细胞自噬及下游氧化应激和炎性通路,从而减轻脑组织缺血再灌注损伤,促进神经功能的恢复.     

石菖蒲挥发油有效成分联合左旋多巴对6-羟基多巴诱导帕金森病模型大鼠自噬相关因子影响

目的:研究石菖蒲挥发油有效成分β-细辛醚联合左旋多巴对6-羟基多巴诱导帕金森病模型大鼠自噬相关因子的影响。方法:将SPF级SD大鼠在内侧前脑束部位注入6-OHDA制备PD模型。将成功的PD模型大鼠随机分为模型组、雷帕霉素组(1 mg/kg)、3-甲基腺嘌呤(3-Methyl adenine,3MA)组(500 nmol/只)、美多巴组(75 mg/kg)、左旋多巴组(60 mg/kg)、β-细辛醚组(15 mg/kg)和联合用药组(左旋多巴60 mg/kg+β-细辛醚15 mg/kg),给药30 d,每天2次。给药末次1 h后,麻醉并灌注各组大鼠,取中脑做免疫荧光和流式检测Beclin-1、LC3B和p62的表达。结果:在免疫荧光和流式细胞术的检测方法中,与假手术组比较,模型组大鼠的Beclin-1和LC3B蛋白表达显著增加(P0.01),而p62蛋白表达显著减少(P0.01);与模型组比较,美多巴组、左旋多巴组、β-细辛醚组和联合用药组大鼠的Beclin-1和LC3B蛋白表达显著减少(P0.05),而p62蛋白表达显著增加(P0.05),其中β-细辛醚组和联合用药组大鼠的Beclin-1和LC3B蛋白表达显著低于美多巴组和左旋多巴组(P0.05),而β-细辛醚组和联合用药组大鼠的p62蛋白表达显著高于美多巴组和左旋多巴组(P0.05)。结论:β-细辛醚与左旋多巴联合应用能减少6-羟基多巴诱导PD大鼠模型中脑的自噬因子Beclin-1和LC3B表达的作用,同时增加p62的表达。