黄芪桂枝五物汤对阳虚寒凝型骨关节炎大鼠免疫相关细胞因子的影响

目的:研究黄芪桂枝五物汤对阳虚寒凝型骨关节炎大鼠CD4~+/CD8`+及相关细胞因子的作用。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、塞来昔布组、黄芪桂枝五物汤7 d组和黄芪桂枝五物汤14 d组,每组10只。除正常组外,各组大鼠均予冷固法复合外界环境刺激的方法复制阳虚寒凝型骨关节炎模型,共6周。造模结束前,各给药组分别灌胃给药,黄芪桂枝五物汤7 d组或14 d组分别给药7 d或14 d(30 g·kg-1),塞来昔布组给药7 d(20.82 mg·kg-1),正常组及模型组予生理盐水灌胃7 d,至造模结束。造模结束后,免疫组化法检测各组大鼠膝关节软骨诱导型一氧化氮合酶(i NOS),Ⅱ型胶原及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达,取大鼠血液流式细胞法检测CD4~+/CD8~+,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠血液中白细胞介素-4(IL-4),C-反应蛋白(CRP)及胰岛素生长因子(IGF),低氧诱导因子1α(HIF-1α)含量。结果:与正常组比较,模型组CD4~+及CD4~+/CD8~+降低(P0.05),各用药组与模型组比较,黄芪桂枝五物汤14 d组和塞来昔布组CD4+及CD4+/CD8+升高(P0.05)。与正常组比较,模型组IL-4,CRP,HIF-1α及i NOS表达升高(P0.05),Ⅱ型胶原及TGF-β表达降低(P0.05);与模型组比较,各用药组Ⅱ型胶原及TGF-β表达升高(P0.05),IL-4水平降低(P0.05),黄芪桂枝五物汤14 d组CRP,i NOS及HIF-1α表达降低(P0.05),塞来昔布组CRP及i NOS(P0.05);各用药组之间,与塞来昔布组比较,黄芪桂枝五物汤7 d组和14 d组Ⅱ型胶原表达降低(P0.05),黄芪桂枝五物汤7 d组i NOS表达升高(P0.05)。IGF水平在各组无显著性差别。结论:黄芪桂枝五物可以调节机体免疫低下状态,并通过调节细胞因子IL-4及下游细胞因子i NOS,HIF-1α,TGF-β1等细胞因子水平的变化,对骨关节炎软骨细胞起正向修复作用。     

芳香疗法用于妇科恶性肿瘤患者术后恶心呕吐的效果研究

目的探讨芳香疗法缓解妇科恶性肿瘤术后患者恶心呕吐的效果。方法选取2019年1月至2019年8月间中国医学科学院肿瘤医院收治的行手术治疗的202例妇科恶性肿瘤患者,按病房号奇偶数随机分为试验组(102例)和对照组(100例)。对照组患者采用常规护理,试验组患者在常规护理基础上采用嗅柠檬香氛作为芳香疗法进行干预,比较两组患者手术完毕返回病房后2、6、12和24h恶心呕吐发生率及中、重度恶心呕吐(PONV)发生率。结果两组患者术后、2、6、12和24h疼痛程度比较,差异均无统计学意义(P> 0.05)。术后返回病房,两组患者6、12和24h的PONV发生率比较,6h和12h中、重度PONV发生率比较,差异均有统计学意义(均P <0.05)。试验组患者未观察到有不良反应。患者对柠檬气味主观感受好,接受程度高,满意度98.0%(100例),希望继续使用率98.0%。结论以嗅柠檬气味作为芳香疗法,可有效缓解妇科恶性肿瘤患者全麻手术后的恶心呕吐。     

桂枝芍药知母汤对急性痛风性关节炎大鼠抗炎作用机制的探讨

目的观察桂枝芍药知母汤对大鼠急性痛风性关节炎的疗效以及对炎性介质前列腺素(PGE2)和白三烯(LTB4)含量的影响,探讨其抗炎作用机制。方法踝关节注射法造模,雄性SD大鼠随机分为空白组,模型组,桂枝芍药知母汤高(2g·kg-1·d-1)、中(1mg·kg-1·d-1)、低(0.5mg·kg-1·d-1)剂量组,秋水仙碱组(0.1mg·kg-1·d-1),痛风舒组(0.3mg·kg-1·d-1)。在受试大鼠右侧踩关节腔内注入尿酸钠(每只0.01g)溶液,形成痛风模型。空白组以同样方法注射空白溶剂。造模12h后给药,连续给药5天后腹主动脉取血,取大鼠踝关节做病理切片,比较各组大鼠关节体积,观察各组血清中PGE2和LTB4的含量。结果桂枝芍药知母汤组大鼠踝关节体积变小,血清中PGE2和LTB4的含量明显低于模型对照组。结论桂枝芍药知母汤可抑制炎症因子PGE2和LTB4,并对大鼠急性痛风性关节炎有显著疗效。     

不同产地蒙古黄芪中黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ和黄芪皂苷Ⅲ含量的比较与分析＊

目的：采用HPLC-ELSD法测定了16批不同产地蒙古黄芪中黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ的含量。方法：使用DIKMA Diamonsil C18（150 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速：1 mL·min-1,柱温：30℃。ELSD检测器参数：漂移管温度90℃,空气流量2.8 L·min-1。采用SPSS 16.0进行聚类分析。结果：黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ和黄芪皂苷Ⅲ在进样量分别为0.0932-1.02μg（r =0.9995）,0.789-8.78μg（r =0.9997）,0.506-3.13μg（r =0.9996）,0.0161-1.38μg （r =0.9992）范围内,平均回收率分别为97.55%、98.61%、99.68%、98.58%,RSD分别为1.2%、1.3%、1.3%、1.2%。聚类分析结果表明,单一采用黄芪甲苷为指标的聚类分析无法区分各省份蒙古黄芪,而同时采用4种皂苷含量为指标,可将不同省份蒙古黄芪明显区分开。结论：本方法简单、快捷、准确,能够更加直接地反映出不同产地蒙古黄芪原药材的质量状况,为蒙古黄芪药材的质量控制研究提供了新思路。     

黄芪糖蛋白对T细胞增殖与活化的影响

目的:探讨黄芪糖蛋白对大鼠T细胞增殖与活化的影响。方法:无菌制备大鼠脾脏悬浮细胞,分离淋巴细胞,接种后加入黄芪糖蛋白共培养,采用MTT法和流式细胞术分别检测T细胞增殖情况和T细胞亚群分布。结果:MTT实验结果显示黄芪糖蛋白显著抑制了T细胞的增殖(P0.05或P0.01)。流式检测结果显示黄芪糖蛋白显著降低了T细胞中CD3+CD28+、CD3+CD278+细胞的比例(P0.01)。结论:黄芪糖蛋白可有效抑制T细胞的增殖与活化,且主要通过抑制CD278在T细胞表面表达来阻止T细胞的活化。     

艾灸对应激性胃溃疡大鼠胃黏膜细胞凋亡蛋白质磷酸化的影响

目的:研究艾灸对应激性胃溃疡大鼠胃黏膜细胞凋亡蛋白质磷酸化的影响,探讨艾灸促进胃黏膜损伤修复的信号转导机制。方法:将大鼠随机分为正常组、模型组、胃经穴组和对照点组,采用束缚冷应激法制作应激性胃溃疡大鼠模型,肉眼观察大鼠胃黏膜损伤程度,Apoptosis Microarray Slides芯片检测胃黏膜细胞凋亡蛋白质磷酸化水平。结果:与模型组比较,胃经穴组和对照点组大鼠胃黏膜损伤指数值均显著降低(P<0.05);与对照点组比较,胃经穴组大鼠胃黏膜损伤指数显著降低(P<0.05);Apoptosis Microarray Slides芯片检测结果显示:与模型组比较,胃经穴组大鼠胃黏膜细胞10种蛋白质磷酸化水平上调,其中Bcl-XL、Mcl-1、Bcl-2、IAPs 4种蛋白磷酸化水平差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);18种蛋白质磷酸化水平下调,其中TNF、Fas、Apaf-1、Caspase-3、Caspase-9、Bax 6种蛋白质磷酸化水平差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论:艾灸可促进胃黏膜的损伤修复,调节多种凋亡相关信号蛋白质的磷酸化水平,并且存在一定的经脉脏腑相关性。     

不同产地蒙古黄芪中黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ和黄芪皂苷Ⅲ含量的比较与分析

目的：采用HPLC-ELSD法测定了16批不同产地蒙古黄芪中黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ的含量。方法：使用DIKMA Diamonsil C₁₈（150 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速：1 mL·min^-1,柱温：30℃。ELSD检测器参数：漂移管温度90℃,空气流量2.8 L·min^-1。采用SPSS 16.0进行聚类分析。结果：黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ和黄芪皂苷Ⅲ在进样量分别为0.093 2-1.02 μg（r = 0.999 5）, 0.789-8.78 μg（r = 0.999 7）, 0.506-3.13 μg（r = 0.999 6）,0.016 1-1.38 μg（r = 0.999 2）范围内,平均回收率分别为 97.55%、98.61%、99.68%、98.58%,RSD分别为1.2%、1.3%、1.3%、1.2%。聚类分析结果表明,单一采用黄芪甲苷为指标的聚类分析无法区分各省份蒙古黄芪,而同时采用4种皂苷含量为指标,可将不同省份蒙古黄芪明显区分开。结论：本方法简单、快捷、准确,能够更加直接地反映出不同产地蒙古黄芪原药材的质量状况,为蒙古黄芪药材的质量控制研究提供了新思路。     

风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型滑膜组织中TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的:探讨风湿宁对风寒湿痹证胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型滑膜组织中Toll样受体4/核转录因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路的影响及相关的作用机制。方法:SPF级雌性Wistar大鼠随机分为6组,分别为正常组,模型组,阳性药组(来氟米特片,2.33 mg·kg-1),风湿宁低、中、高剂量组(9.12,18.24,36.48 g·kg-1),每组9只。除正常组外,其余各组大鼠采用风寒湿外感致病因素刺激,结合牛Ⅱ型胶原乳化剂诱导的方法,制备风寒湿痹证CIA大鼠模型。造模成功后,各组大鼠给予相应药物灌胃干预,每日1次,连续4周。观察药物对大鼠关节肿胀度,酶联免疫吸附测定法(ELISA)血清类风湿因子(RF),环瓜氨酶肽(ACPA),白细胞介素(IL)-1β,IL-10,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)滑膜组织中TLR4,髓样分化因子88(My D88),NF-κB酶抑制蛋白α(IκBα),NF-κB mRNA和蛋白表达的情况。结果:与正常组比较,模型组CIA大鼠模型的关节肿胀度明显升高,血清RF,ACPA,IL-1β,TNF-α含量显著升高,IL-10含量显著降低,滑膜组织中TLR4,My D88,IκBα,NF-κB mRNA和蛋白表达显著升高(P0.05,P0.01);与模型组比较,风湿宁低、中、高剂量组可明显降低风寒湿痹证CIA大鼠模型的关节肿胀度与血清RF,ACPA,IL-1β,TNF-α含量,升高血清IL-10水平,下调滑膜组织中TLR4,My D88,IκB-α,NF-κB mRNA与蛋白表达量(P0.05,P0.01)。结论:风湿宁可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,从而抑制IL-1β,TNF-α的产生,起到治疗RA的作用,且其疗效与药物剂量有一定相关性。