树突状细胞疫苗诱导免疫效应细胞对PC3的凋亡和抑制

目的:体外观察正常人树突状细胞(dendritic cells,DC)疫苗诱导免疫效应细胞对胰腺癌细胞系(PC3)的凋亡和抑制作用.方法:用淋巴细胞分离液分离抗凝新鲜全血以获得单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),用贴壁法获取DC和去DC的单核细胞(即免疫效应细胞),并分别用人粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、人白介素4(IL-4)、人肿瘤坏死因子(TNF-α)、PC3肿瘤相关抗原(PC3TAA)和人白介素2(IL-2)培养正常人DC和免疫效应细胞,6 d后将DC和免疫效应细胞混合培养1 d并计数细胞.观察DC生长状况,检测DC表型(CD1a、CD80、CD83、CD86).MTT法检测DC诱导免疫效应细胞对PC3的抑制作用,TdT法检测培养上清液对PC3细胞的凋亡作用.结果:体外多种细胞因子和肿瘤相关抗原能有效引起DC增殖,并高表达CD80、CD83、CD86;体外实验中,DC疫苗诱导免疫效应细胞对PC3的最大抑制(杀伤)效率为98.1%;DC培养上清液和DC混合免疫效应细胞培养上清液均能有效地引起PC3凋亡.结论:DC在抗胰腺肿瘤中有重要作用.     

转染IL-12基因的人脐带间充质干细胞对卵巢癌细胞的体外增殖和对裸鼠体内移植瘤的抑制作用

摘要：目的探讨人脐带间充质干细胞（UC-MSCs）负载白细胞介素12（IL-12）重组腺病毒载体抗卵巢癌SKOV3作用的研
究。方法腺病毒介导IL-12 基因转染体外培养的UC-MSCs（AdIL-12-MSCs）,Western blotting 和RT-PCR 检测
AdIL-12-MSCs中IL-12基因蛋白及mRNA表达,ELISA法检测AdIL-12-MSCs上清液中IL-12的表达。光镜下观察外源
性IL-12对SKOV3细胞形态的影响,MTT法检测AdIL-12-MSCs分泌的IL-12对SKOV3细胞增殖活性的影响,流式细胞
仪检测AdIL-12-MSCs 上清液对SKOV3 细胞凋亡的影响。建立裸鼠卵巢癌SKOV3 皮下移植瘤模型,观察移植
AdIL-12-MSCs 后对移植瘤的影响。结果腺病毒介导IL-12 基因成功转染UC-MSCs形成AdIL-12-MSCs,转染后细胞
IL-12基因在蛋白及mRNA水平均有明显表达。AdIL-12-MSCs分泌的外源性IL-12显著抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖
并诱导其凋亡,并抑制卵巢癌SKOV3移植瘤在裸鼠体内的生长（P<0.05）。结论转染IL-12基因的UC-MSCs能够在蛋白
及mRNA水平表达IL-12基因,显著抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖并诱导其凋亡,抑制卵巢癌SKOV3移植瘤在裸鼠体
内的生长。     

白细胞介素-10对人树突状细胞表型及致炎细胞因子分泌的影响

目的观察白细胞介素(IL)-10对体外培养人树突状细胞(DC)表型和致炎细胞因子IL-12分泌的影响,探讨IL-10对DC炎性成熟过程中的负调节作用.方法通过SCF、GM-CSF、TGF-β1、Flt-3和TNF-α体外培养体系,从脐血CD34+造血干细胞中诱导扩增获得DC,并于细胞成熟中用重组人IL-10进行干预.流式细胞仪分析细胞表型CD1a、CD11c、CD83、CD80、CD86和HLA-DR;RT-PCR检测IL-12 p35、p40mRNA表达;ELISA法测定IL-12p70分泌的含量.结果IL-10可下调成熟中DC表面CD11c、CD83、CD80和CD86的表达,同时可抑制DC内IL-12p35、p40mRNA的转录和IL-12p70的分泌.结论IL-10可抑制DC黏附共刺激分子表达和致炎细胞因子的合成,提示其不仅可调抑DC的递呈抗原功能,且参与了炎症局部微环境的调节.     

白细胞介素-10对人树突状细胞表型及致炎细胞因子分泌的影响

目的 观察白细胞介素(IL)-10对体外培养人树突状细胞(DC)表型和致炎细胞因子IL-12分泌的影响，探讨IL-10对DC炎性成熟过程中的负调节作用。方法 通过SCF、GM-CSF、TGF-β、Flt-3和TNF-α体外培养体系，从脐血CD34造血干细胞中诱导扩增获得DC，并于细胞成熟中用重组人IL-10进行干预。流式细胞仪分析细胞表型CD1a、CD11c、CD83、CD80、CD86和HLA-DR；RT-PCR检测IL-12 p35、p40mRNA表达；ELISA法测定IL-12 p70分泌的含量。结果 IL-10可下调成熟中DC表面CD11c、CD83、CD80和CD86的表达，同时可抑制DC内IL．12p35、p40mRNA的转录和IL-12p70的分泌。结论 IL-10可抑制DC黏附共刺激分子表达和致炎细胞因子的合成，提示其不仅可调抑DC的递呈抗原功能，且参与了炎症局部微环境的调节。     

罗格列酮抑制糖基化-人白蛋白诱导的人单核细胞源树突状细胞的免疫成熟

目的:研究过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)激动剂罗格列酮(rosiglitazone)对糖基化终产物(AGEs)诱导的人单核细胞源树突状细胞(DC)的免疫成熟的影响.方法:采用免疫磁珠法分离人外周血CDl4 单核细胞,经含重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF,100μg/L)和重组人白细胞介素4(IL-4,20μg/L)的RPMIl640培养5天,使其分化为未成熟DC.先经罗格列酮(50μmol/L)干预24h后,加入糖基化.人血清白蛋白(AGE-HSA,200μg/ml)再干预48h,采用流式细胞术检测树突状细胞表型(CD1a、CD80、CD86和HIA-DR),混合T淋巴细胞反应检测DC对淋巴细胞增殖的影响,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素12(IL-12)、肿瘤坏死因子a(TNF-α)和γ干扰素(INF-γ)的浓度.结果:与对照组相比,经罗格列酮处理的DC可明显下调由AGE-HSA促进的CD80、CD86、HLA-DR和CD1a的表达.使AGE-HSA促进的对T淋巴细胞的增殖作用明显减弱,明显抑制DC细胞因子IL-10、IL-12、TNF-α和IFN-γ的分泌(P<0.05).结论:过氧化物酶体增殖物激活型受体γ激动剂罗格列酮可以抑制糖基化-人血清白蛋白诱导的树突状细胞的免疫成熟及其免疫功能,这可能是它抗炎的重要机制之一.     

生长激素对脐血来源树突细胞成熟状态的影响

目的 检测生长激素(GH)对脐血来源树突细胞(DC)的免疫表型和功能状态的影响.方法 从新鲜脐带血中分离出单核细胞,应用白细胞介素4(IL-4)和重组人粒-巨细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)诱导刺激单核细胞,以不同浓度的GH作为修饰因子修饰DC诱导过程;观察DC形态、数目、生长状态,流式细胞仪检测DC的免疫表型,酶联免疫吸附试验测定DC上清液中白细胞介素12(IL-12),自体混合淋巴细胞反应测定其功能状态.结果 脐血贴壁的单核细胞在细胞因子和GH诱导下可以分化为成熟DE,不同浓度(5、25、100 ng/ml)GH可显著上调DC CD83(31%±4%、34%±4%、34%±5%)、CD80(26%±4%、29%±6%、30%±6%)和HLA-DR(45%±8%、49%±6%、50%±5%)分子表达的阳性宰(P<0.05),明显提高DC分泌IL-12的能力[分别由第5天的(91±12)、(159±20)、(166±19)pg/ml上升到第9天的(686±58)、(796±61)、(810±67)pg/ml](P<0.05),DC对自体淋巴细胞的激活功能明显增强(P<0.05).结论 GH可明显促进DC的诱导过程,修饰加速DC的成熟并提高细胞表面共刺激分子表达,增强DCIL-12分泌和激发自身淋巴细胞增殖能力;GH的修饰作用与浓度有一定的相关性.     

脐血树突状细胞经卵巢癌细胞刺激后抗卵巢癌免疫应答的体外研究

目的研究脐血来源的树突状细胞(DC)的体外扩增培养方法及诱导特异性抗卵巢癌细胞免疫效应.方法①从脐血中分离单个核细胞后,获得单核细胞(Mo).以粒细胞-巨噬细胞集落剂(GM-CSF)、IL-4、集落刺激因子(SCF)和酪氨酸激酶受体Ⅲ配体(Flt-3L)诱导分化扩增,共培养7d后用流式细胞仪进行表型分析;②诱导单核细胞分化的第3天加入人卵巢癌细胞株SKOV3的冻融抗原,共培养4d后获得负载肿瘤抗原的成熟DC;将致敏的DC与从脐血中分离的同种同体T淋巴细胞共培养6d,获得效应细胞;MTT法检测效应细胞对人卵巢癌细胞株SKOV3、人肝癌细胞株Hu-7的细胞毒作用;结果①脐血来源的Mo在细胞因子的作用下,7d后分化生成成熟的DC,高表达特异性抗原CD83、CD86、CD80、CD1a;②DC可负载并提呈肿瘤抗原,诱导肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的产生,不同浓度的CTL对卵巢癌细胞株SKOV3均有特异性杀伤、抑制作用(P＜0.05).结论脐血中DC的前体细胞(即单核细胞)可在体外分化扩增为成熟的功能性DC,并可诱导出特异性杀伤卵巢癌细胞的免疫效应,是一种临床应用前景良好的、方便有效的肿瘤免疫治疗方法.     

慢性粒细胞白血病树突状细胞诱导及其抗肿瘤功能的体外研究

目的 探讨人慢性粒细胞白血病(CGL)来源的树突状细胞(DC)的免疫功能。方法 应用重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)联合重组人白介素(rhIL)-4在体外诱导培养CGL细胞,获得DC。应用流式细胞仪(FACS)检测诱导前、后的细胞表型,观察其诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)的体外抗肿瘤效应。采用酶联免疫吸附试验(ELIS)测定DC培养及DC与外周血单个核细胞(PBMNC)共同培养的上清液中IL-12及干扰素(IFN)-γ的量。结果 联合rhGM-CSF及rhIL-4可诱导CGL细胞分化为DC;CGL-DC体外激活的CTL对CGL细胞具有特异性细胞毒活性;分别从诱导DC培养上清液和DC PBMNC培养的上清液中检测出一定量IL-12及IFN-γ。结论 CGL-DC具有抗原提呈细胞的免疫功能,可望用于CGL的免疫治疗。     

肺癌细胞裂解物对树突状细胞的免疫抑制作用

目的:研究Lewis肺癌细胞裂解物对小鼠树突状细胞(DC)的免疫抑制作用。方法:反复冻融法制备Lewis肺癌细胞裂解物,骨髓冲洗提取C57/BL6小鼠DC,GM-CSF、IL-4体外诱导培养DC,ELISA检测肿瘤细胞裂解物(TCL)中透明质酸(HA)含量,ELISA检测DC培养上清液中IL-12和IL-10水平。结果:经检测,Lewis肺癌细胞TCL中含有HA,其含量为42 mg/ml。将这种TCL作用于C57/BL6小鼠DC,同对照组相比,DC的IL-12分泌水平显著下降(P<0.01),而IL-10的分泌水平显著提高(P<0.01),这符合免疫耐受DC细胞因子分泌特点。在用Pep-1抗体封闭DC表面的HA受体CD44后,DC的IL-12、IL-10分泌水平则恢复至同对照组相同的水平(P>0.05)。结论:Lewis肺癌细胞裂解物中含有HA。通过这种物质,肺癌细胞裂解物可以诱生鼠源免疫耐受性DC,从而抑制DC的免疫活性。     

洛铂诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡的研究

目的探讨洛泊对体外培养的浆液性卵巢癌细胞SKOV3凋亡的诱导作用。方法体外培养卵巢癌细胞SKOV3,用MTT比色法检测洛铂对SKOV3细胞株的增殖抑制作用以及流式细胞仪检测洛铂对SKOV3细胞株的凋亡率。结果体外培养的卵巢癌SKOV3细胞经不同浓度的洛泊处理后细胞生长明显受到抑制,洛泊作用于卵巢癌SKOV3细胞可诱导细胞的凋亡。结论卵巢癌SKOV3细胞对洛泊敏感,洛泊对卵巢癌细胞的杀伤作用是通过诱导细胞凋亡途径实现的。     

SKOV3冻融抗原负载的DC-CIK细胞对SKOV3的杀伤作用

目的 探讨负载人卵巢癌细胞株SKOV3冻融抗原(Ag)的树突状细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养后对SKOV3杀伤作用的影响.方法 取12例卵巢癌患者外周血,常规诱导出DE及CIK细胞,以SKOV3冻融Ag负载DC,经Ag负载与未经Ag负我的DC分别和CIK细胞共培养,流式细胞技术分析DC、Ag-DC、Ag-DC-CIK 3组DC细胞表型,CIK、DC-CIK、Ag-DC-CIK组CIK细胞表型;乳酸脱氢酶释放法测CIK组、DC-CIK组、Ag-DC-CIK组对SKOV3杀伤活性.结果 Ag-DC-CIK组中DC细胞成熟表型高于DC及Ag-DC组(P<0.01);Ag-DC-CIK组中CIK细胞成熟表型高于CIK及DC-CIK组(P<0.01);Ag-DC-CIK组对SKOV3杀伤率高于CIK及DC-CIK组(P<0.01).结论 负载SKOV3冻融Ag的DC与CIK共培养可促进DC、CIK的成熟,且可提高对SKOV3的杀伤作用.     

白介素-8对SKOV3细胞系卵巢癌干样细胞特性的影响

目的:研究白介素-8(IL-8)能否促成人卵巢癌SKOV3细胞系细胞肿瘤干细胞样细胞特性.方法:用添加或未添加重组人IL-8(rhIL-8:10.0 ng/mL)的干细胞条件培养基处理SKOV3细胞.肿瘤球形成和琼脂集落形成试验测定球形成率和集落形成率.蛋白质印迹分析肿瘤干细胞标志蛋白CD133和CD44表达水平.结果:rhIL-8(10.0 ng/mL)显著地增高SKOV3细胞肿瘤球形成率和琼脂集落形成率.此外,rhIL-8(10.0 ng/mL)上调SKOV3细胞CD133和CD44蛋白表达.结论:rhIL-8具有促进SKOV3细胞肿瘤干细胞样细胞特性作用.     

ROLE OF ERK1／2 KINASE IN CISPLATIN-INDUCED APOPTOSIS IN HUMAN OVARIAN CARCINOMA CELLS

Objective To investigate the role of extracellular regulated kinase (ERK1/2) pathway in cisplatin-induced apoptosis in human ovarian carcinoma cells.Methods Cisplatin-induced apoptosis were stained with DAPI and was assessed microscopically in human epithelial adenocarcinoma ovarian cell line SKOV3 cells. ERK activation was determined by Western blotting using an anti-phosphoERK antibody to detect ERK activity. The effect of PD98059 on ERK activity induced by cisplatin was detected by MTT assay.Results Marked apoptosis of SKOV3 cells resulted from 48 hours treatment with 20 μg/mL cisplatin. Strong activation of ERK was led to by 15 μg/mL cisplatin. Dose response and time course of cisplatin induced apoptosis in SKOV3 cells.Cisplatin-induced ERK activation occurred at 12 hours and increased to highest induction at 24 hours by Western blotting.The effect of PD 98059 on ERK activity induced by cisplatin at the concentration of 100 μmol/L PD 98059. Statistically significant decreased in cell survival were observed with 100 μmol/L PD 98059 at 15 and 20 μg/mL cisplatin (P＜ 0.05).Conclusions Cisplatin activates the ERK signaling pathway in ovarian cancer cell line SKOV3. Inhibition of ERK activity enhances sensitivity to cisplatin cytotoxity in ovarian cancer cell line SKOV3. Evaluation of ERK activity could be useful in predicting which ovarian cancer will response most favorably to cisplatin therapy.     

雷帕霉素对人单核细胞来源的树突状细胞免疫功能的影响

目的：研究雷帕霉素对人树突状细胞（DC）免疫功能的影响。方法分离外周血单个核细胞,在含粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rhGM- CSF）、IL-4、胎牛血清及有或无雷帕霉素的培养条件下制备DC。用流式细胞仪检测DC表型（CD1a、CD83、CD86、HLA- DR）;混合淋巴细胞反应（MLR）检测DC对同种异体T淋巴细胞的刺激能力;流式细胞仪检测DC吞噬功能和凋亡细胞数;ELISA法测定MLR上清液中的细胞因子。结果与对照组比较,经雷帕霉素处理的DC表面CD1a、CD83、CD86、HLA- DR的表达明显降低（均P＜0.01）;对T淋巴细胞刺激的能力下降（P＜0.01）;细胞吞噬能力下降（P＜0.01）;凋亡细胞数增加（P＜0.01）,MLR中细胞因子（TNF-α、IL-10、IL-12）浓度降低（均P＜0.01）。结论雷帕霉素对人树突状细胞免疫功能有明显的抑制作用,可能是其防止冠状动脉支架术后再狭窄的机制之一。     

巨噬细胞通过分泌抗菌肽LL-37/hCAP-18调控卵巢癌细胞的增殖

目的 研究巨噬细胞是否通过分泌抗菌肽LL-37/hCAP-18对卵巢癌细胞的生长增殖进行调控。方法 采用Millicell插入式细胞培养皿共培养人巨噬细胞和卵巢癌细胞株SKOV3;通过细胞计数法检测巨噬细胞对卵巢癌细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测共培养上清中的相关细胞因子及LL-37的水平;实时定量反转录聚合酶链反应在mRNA水平检测巨噬细胞和SKOV3细胞中LL-37 mRNA的表达水平;应用LL-37中和抗体抑制LL-37的功能及活性,进而通过MMT细胞增殖实验探讨LL-37对巨噬细胞对卵巢癌细胞增殖的调控。结果 细胞计数法检测结果显示,巨噬细胞与卵巢癌细胞SKOV3共培养后,可促进其增殖;共培养的上清中,LL-37及IL-6水平明显升高;实时定量RT-PCR在mRNA水平共培养中的巨噬细胞其LL-37基因表达升高,且其表达水平随时间的延长而增加;应用LL-37的中和抗体,可明显抑制巨噬细胞对SKOV3细胞的增殖促进作用。结论 在与卵巢癌细胞共培养的环境中,巨噬细胞通过增强抗菌肽LL-37的表达和分泌水平促进卵巢癌细胞的增殖,LL-37在巨噬细胞促进卵巢癌的发展中扮演重要角色。     

卵巢癌细胞和脐血树突状细胞融合瘤苗的体外培养与免疫原性的研究

目的将脐血来源的树突状细胞(DC)与人卵巢癌细胞株SKOV3细胞相融合,获得SKOV3/DC融合细胞,分析其生物学特性及其免疫原性。方法①利用PKH26红色荧光染料标记脐血来源的DC,用聚乙二醇法(PEG)融合DC与人卵巢癌细胞株SKOV3细胞,用流式细胞仪分选融合细胞(SKOV3/DC)。②应用细胞培养技术、流式细胞术及光学显微镜检测SKOV3/DC的生长特性和形态学特征,并分析其免疫原性。结果①脐血来源的单核细胞(Mo)在相关细胞因子的作用下,可诱导分化为DC,其可表达表面抗原CD1a、CD80、CD86、HLA-DR及MHC-Ⅰ,不表达CA125。②人卵巢癌细胞株SKOV3细胞为CA125及MHC-Ⅰ双阳性细胞,不表达CD1a、CD80、CD86和HLA-DR分子。③树突状细胞和SKOV3按10∶1比例融合,融合率约为8.5%。SKOV3/DC形态与亲本肿瘤细胞相似,CA125抗原表达呈阳性,并且高表达CD1a、CD80、CD86、HLA-DR和MHC-Ⅰ分子。SKOV3/DC在体外能分裂增殖,但增殖活性明显低于SKOV3细胞。结论①脐血中的DC前体细胞(单核细胞)可在体外分化扩增为成熟的功能性DC。②SKOV3/DC融合细胞兼具两种亲本细胞的部分特性,但其体外增殖活性明显降低,失去亲本肿瘤的恶性生长特性。本研究为将SKOV3/DC作为肿瘤疫苗用于卵巢癌主动免疫治疗的研究提供了前期资料。     

小鼠可溶性CD83-Ig对树突状细胞产生IL-12的影响

目的:探讨小鼠可溶性CD83-Ig对树突状细胞(DC)产生白细胞介素-12(IL-12)的影响。方法:将表达小鼠CD83胞外功能区与人IgG1αFc融合蛋白(CD83-Ig)的真核表达载体pmCD83-Ig转染COS-7细胞,表达可溶性CD83-Ig融合蛋白,并将该载体转染DC细胞系(DC2.4),筛选稳定表达CD83-Ig的细胞系。采用LPS刺激DC2.4,借助RT-PCR和ELISA法分别检测DC2.4IL-12mRNA的表达和细胞培养上清中IL-12的水平,观察CD83-Ig对DC2.4表达IL-12的影响。结果:可溶性CD83-Ig处理DC细胞组和CD83-Ig基因转染DC细胞组IL-12mRNA的表达和上清液中IL-12水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:CD83-Ig可抑制LPS刺激DC产生IL-12,可能是CD83-Ig负调节DC活性的重要机制。     

顺铂诱导肿瘤裂解物致敏DC抗肿瘤作用研究

目的探讨用顺铂（DDP）诱导卵巢癌细胞株（SKOV3）获得的肿瘤细胞裂解物以致敏树突状细胞（dendriticc ells,DCJ诱导的OTL对肿瘤细胞的杀伤作用。方法分离健康者外周血单个核细胞,培养Dc,分为三组。顺铂组：用顺铂诱导卵巢癌细胞株获得细胞裂解物致敏Dc;冻融组：用冻融法获得细胞裂解物致敏Dc;空白组：不做任何处理。成熟的Dc与T细胞混合培养获得特异性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T Iymphocyte,CTL）。流式细胞仪（flowcyLometry,FCM）检测三组Dc表型,CTL亚群比例,MTT检测CTL对SKOV5的杀伤效果。结果顺铂组Dc的分子表面标志cD86、cD40表达分别为（76j5±j99）％、（7120±686）％,显著高于空白组（P〈005）,而与冻融组相比差异无统计学意义;两组Dc诱导的特异性CTL,其亚群cD8＋T、GD矿T比值[（8（]42±46I）％、（955±224）％]明显著于空白组（P〈0.05）;帧铂组诱导的CTL对SKOV3的杀伤率随着E/T比例（20：1,40：1,80：1）的增加而逐步渐增高,杀伤率[（4566±3.16）、（5016±344）％、（5882±406）％]显著高于冻融组[（39．71±477）％、（4700±402）％、（5376±478）％]与空白组[（3794±374）％、（41¨±504）％、（4808±377）％]。结论DDP诱导SKOV3来获得的肿瘤裂解物致敏DG能有效激活抗肿瘤免疫反应,提示化疗与生物治疗联合治疗可能是治疗卵巢癌潜在有效的方法。     

大鼠OX-62+树突状细胞的体外诱导及生物学特性

目的 :从大鼠骨髓中有效地诱导、培养OX 6 2 + 树突状细胞 (dendriticcells,DC) ,观察其表型及功能特征。方法 :大鼠骨髓细胞培养 3h ,贴壁细胞加入含重组大鼠GM CSF和IL 4 ,继续培养 6～ 12d ,淘洗法去非粘附细胞中的Fc受体阳性细胞 ,流式细胞仪分析细胞表型及抗原摄取能力 ,混合淋巴细胞反应检测其刺激同种T细胞增殖能力 ,ELISA测定分泌IL 12水平。结果 :培养DC90 %以上表达OX 6 2。培养 6d的OX 6 2 + DCs具有不成熟表型 ,表达中等水平的MHCII抗原和低水平的CD80、CD86、ICAM 1;分泌少量IL 12 ;具有较强的摄取抗原能力 ,但刺激同种T细胞增殖能力极低。培养 12d的OX 6 2 + DC已经成熟 ,MHCII、CD8、CD86、ICAM 1表达明显增加 ;分泌IL 12增加 ;摄取抗原能力下降 ;刺激同种T细胞增殖能力明显增强。结论 :成功建立了体外大量扩增大鼠骨髓OX 6 2 + DC的新方法。     

晚期胃肠道肿瘤癌性腹水对树突状细胞的抑制效应研究

目的对癌性腹水体外抑制树突状细胞(dendritic cells,DC)免疫功能的效应进行观察,着重探讨癌性腹水免疫抑制效应与腹水中IL-10含量的关系.方法分离10例晚期胃肠道恶性肿瘤患者癌性腹水上清,检测IL-10含量;癌性腹水采用抗IL-10中和或直接加入DC体外培养的系统,观察癌性腹水对DC表面分子表达、细胞凋亡及T淋巴细胞刺激功能的影响.结果癌性腹水较对照IL-10含量显著增高,体外对DC有显著抑制作用,能降低DC表面分子表达、抑制DC对T淋巴细胞刺激增殖效应,并显著促进DC凋亡.中和IL-10处理显著减低癌性腹水对DC的抑制效应,但对DC凋亡率无明显影响.结论晚期胃肠道恶性肿瘤患者癌性腹水对树突状细胞免疫功能有显著抑制作用,IL-10含量增高可能是其抑制效应的重要机制.