SISH检测乳腺癌HER2基因及17号染色体倍体分析

目的:评价银增强原位杂交(SISH)用于乳腺癌患者人表皮生长因子受体2(HER2)基因扩增状态检测的可行性和17号染色体多体的发生情况及其意义。方法:对90例手术后乳腺浸润性导管癌患者标本行全自动免疫组织化学(IHC)染色检测HER2蛋白表达,荧光原位杂交(FISH)和SISH检测HER2基因状态及17号染色体多体的发生率。结果:在IHC(3+)、(2+)、(1+/0)3组中,SISH检测与FISH检测在检测HER2基因扩增方面的总体符合率为96%。17号染色体多体的发生率在IHC(3+)、(2+)、(1+/0)3组中分别为44%,26%和0.02%,其总的发生率为18%。结论:SISH技术用于乳腺癌HER2基因状态检测结果与FISH相当,具有可行性和实际使用价值;17号染色体可能与乳腺癌患者的预后有关。     

荧光原位杂交技术在乳腺癌HER2的表达及其意义

目的 探讨荧光原位杂交（FISH）-5免疫组织化学（IHC）检测乳腺癌人表皮生长因子受体2（HER2）基因状态中的相关性和差异性。方法对40例原发性乳腺癌组织做石腊切片,分别用兀SH和IHC检测HER2基因扩增和HER2蛋白表达,以FISH检测结果为标准,评价IHC检测的基因扩增比率。结果IHC检测HER2蛋白表达（3＋）的基因扩增比率为88．9％（8／9）,1例无扩增者为17号染色体多体;IHC（2＋）的基因扩增比例为71．4％（5／7）,2例无扩增者中有1例为17号染色体多体;IHC（1＋和0）的无基因扩增。结论IHC可以做为HER2基因状态检测的初筛;IHC（2＋）与IHC（3＋）存在假阳性,与17号染色体多体有关,故应该做FISH检测确诊。     

浸润性乳腺癌组织中人表皮生长因子受体2表达的检测方法比较

目的:比较荧光原位杂交法(FISH)与免疫组化法(IHC)检测乳腺癌组织中人表皮生长因子受体2(HER2)基因扩增和蛋白表达的异同。方法:应用4B5 IHC法与FISH法对51例女性新发乳腺癌行HER2蛋白表达及基因扩增的检测,对结果进行统计分析。结果:2种方法检测HER2阳性率存在显著性差异(P<0.05);IHC法检测HER2蛋白0～1+与3+之间,通过FISH法检测HER2基因扩增的一致性好(κ=0.9,P<0.05);IHC检测HER2蛋白2+与3+之间与FISH法检测HER2基因扩增一致性良好(κ=0.777,P<0.05)。结论:4B5 IHC法与FISH法呈现很好的一致性。新的免疫组化抗体4B5检测HER2蛋白具有良好的灵敏度和稳定性。     

全自动免疫组化和荧光原位杂交方法检测胃癌HER2状态

【摘要】 目的 探讨胃癌中HER2基因状态分布及HER2基因扩增/HER2蛋白表达与临床病理特征间的关系。方法 收集四川大学华西医院2009年1月～3月170例手术切除原发性胃或胃食管交界处腺癌石蜡组织标本,同时收集患者的临床和病理信息。所有病例行全自动免疫组化(IHC)和荧光原位杂交(FISH)检测HER2蛋白和基因的表达。结果 170例胃癌组织中, IHC检测蛋白表达为：100例(588%)0+,33例(194%)1+,14例(82%)2+,23例(136%)3+。FISH检测HER2基因扩增27例(159%),17号染色体多倍体者20例(704%）。其中4例(4%)IHC检测0+或1+,FISH检测阳性;有14例（378%）IHC检测2+或3+,FISH检测阴性。IHC与FISH结果间差异显著（P＜001)。HER2过表达和基因扩增与患者的年龄、性别、病理分级、肿瘤部位及TNM分期间没有相关性(P＞005),与分化程度、Lauren分级有相关性（P＜001)。结论 IHC与FISH检测胃癌HER2基因的阳性率分别为217%和159%。HER2基因扩增中17号染色体多倍体发生比例较高。分化程度越高,HER2阳性率越高,且主要集中在肠型。IHC可作为胃癌HER2检测的有效筛查手段,其不确定的病例可再行FISH检测确诊。     

乳腺癌HER2基因表达阳性者17号染色体倍体性与HER2蛋白表达及临床预后因素的相关性分析

目的 分析乳腺癌HER2基因表达阳性者17号染色体倍体性与HER2蛋白表达以及临床预后因素的相关性,以探讨其临床意义.方法 应用FISH、IHC等方法研究34例HER2基因有扩增的乳腺癌病例,分析17号染色体倍体性与HER2蛋白表达、乳腺癌临床预后因素的关系.结果 HER2基因表达阳性者17号染色体的多体性表达者较二体性表达者有更高的HER2蛋白表达级别(P<0.05),有更多的乳腺癌的不良预后因素出现概率(P<0.05).结论 FISH作为乳腺癌HER2基因检测手段不仅准确率高,而且能定量17号染色体的倍体性,从而为综合判断疾病的预后提供更多的依据.     

伴17号染色体着丝粒区扩增乳腺癌的人表皮生长因子受体2状态评估

目的:探讨17号染色体着丝粒区(chromosome 17 centromere locus,CEP17)扩增的乳腺癌人表皮生长因子受体2(human epithelial growth factor receptor 2,HER2)状态评估及其意义.方法:218例浸润性乳腺癌,采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测HER2蛋白表达情况,荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测HER2基因状态.结果:218例中,发现2例FISH检测有CEP17扩增:(1)病例1 HER2信号呈点状分布,平均2.6个/细胞核,CEP17信号呈簇状或多点状分布,HER2/CEP17比值远低于阳性标准,评估为HER2基因未扩增,伴CEP17扩增;(2)病例2 HER2信号呈多点状分布,平均6.8个/细胞核,CEP17信号呈多点状分布,平均5.9个/细胞核,评估为HER2基因扩增,伴CEP17扩增.两例IHC HER2蛋白表达均为2+.结论:乳腺癌CEP17扩增发生率低,可伴随或不伴随HER2扩增;当FISH显示CEP17扩增时,评估HER2信号绝对拷贝数尤为重要,并综合HER2/CEP17比值以及蛋白表达水平进行HER2状态准确评估,为临床治疗靶向用药提供尽可能准确的信息.     

乳腺癌人表皮生长因子受体-2基因扩增的意义

目的分析人表皮生长因子受体-2(HER2)、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)在乳腺癌组织中的表达,并用荧光免疫杂交法(FISH)检测乳腺癌组织中HER2基因扩增状态,评价其临床病理意义.方法应用FISH、IHC方法分析95例乳腺癌HER2基因扩增与临床病理特征的关系,比较两者之间的差异.结果 IHC法HER2蛋白表达(+++)12例中12例(100%)HER2基因扩增;HER2(++)50例中14例(28%)HER2基因扩增;HER2(+)21例中2例(9.52%) HER2基因扩增;84例浸润性导管癌中28例(33.3%)有HER2基因扩增,11例浸润性小叶癌中无HER2基因扩增;HER2基因扩增与ER和PR的IHC表达(+)或(-)间的差异有统计学意义(P<0.05);与肿瘤大小间的差异有统计学意义(P<0.05).结论免疫组化检测可作为HER2表达状态的初筛,在IHC法HER蛋白表达(+++)同时ER、PR阴性的浸润性导管癌HER2基因扩增率较高.     

乳腺癌组织中HER2的表达及其与临床病理特征的关系

对比研究IHC检测乳腺癌组织中HER2蛋白表达与FISH检测HER2基因扩增的一致性,探讨HER-2基因表达与患者临床病理特征的相关性。方法 收集2010—2015年乳腺癌根治术后癌组织标本463例,应用FISH检测标本中HER2基因表达、IHC检测HER2、ER、PR、Ki67、P53的蛋白表达,分析HER2基因与蛋白表达的一致性和相关性及其与患者临床病理特征的关系。结果463例乳腺癌标本中HER2基因扩增率为35.64%(165/463),HER2蛋白表达阳性率为26.35%(122/463);HER2蛋白表达、、+和-的标本中HER2基因扩增率分别为91.50%、10.00%、8.27%、7.14%;HER2基因扩增及蛋白表达与病理学分级(r=0.140、r=0.310,均P<0.01)、肿块大小(r=0.103、P<0.05,r=0.499,P<0.01)、有无淋巴结转移(r=0.175、r=0.220,均P<0.01)及Ki67表达(r=0.220、r=0.331,均P<0.01)呈正相关,与ER(r=-0.406、r=-0.382,均P<0.01)、PR表达(r=-0.610、r=-0.635,均P<0.01)呈负相关。结论 FISH和IHC两种方法检测HER2表达具有较好的一致性及相关性,但HER2蛋白表达组与HER2基因扩增间的一致性较低,提示HER2蛋白表达者须进一步进行FISH检测;HER2表达与Ki67、ER、PR、淋巴结转移、肿块大小及病理学分级之间存在相关性。     

探讨影响FISH检测乳腺癌免疫组化HER2(2+)扩增状态的因素及其与临床病理的意义

目的:通过FISH检测乳腺癌免疫组化HER2(2+)基因扩增情况,并分析其与乳腺癌患者临床病理特征的关系,探讨影响免疫组化HER2(2+)基因扩增的因素,为乳腺癌靶向治疗提供理论依据。方法:免疫组化Envision二步法检测HER2蛋白表达均(2+)的341例乳腺癌,FISH再次检测HER2基因扩增情况,并分析乳腺癌各临床病理特征与HER2基因扩增的关系。结果:FISH检测341例乳腺癌病例中,48例HER2基因扩增(14.08%),经单因素分析,发现HER2基因扩增与Ki-67、p53、ER和PR的表达显著相关(P<0.05),而与患者年龄、肿瘤部位、病理学类型、病理组织学分级、肿瘤大小、肿瘤数目、有无淋巴结转移、有无脉管侵犯、有无神经侵犯等因素均无相关性(P>0.05)。多因素Logistics回归分析也显示阳性组相对于阴性组,FISH检测HER2扩增的独立预测因素为ER-PR-,ER+PR-及ER-PR+(P<0.05)。结论:ER、PR蛋白的表达情况可帮助预测HER2基因扩增情况,联合免疫组化及FISH检测,能够得到较准确的HER2表达情况。     

FISH及免疫组化技术检测乳腺癌Her-2基因与蛋白的临床应用价值

目的 分析免疫组化技术(IHC)检测石蜡标本乳腺癌组织中原癌基因-2(Her-2)蛋白表达与荧光原位杂交技术(FISH)检测Her-2基因扩增状态的临床应用价值.方法 IHC和FISH技术分别检测98例乳腺癌癌组织中的Her-2蛋白表达和Her-2基因扩增.结果 98例石蜡包埋乳腺癌组织中1例Her-2表达蛋白为阴性的患者中,Her-2 基因扩增亦为阴性,符合率100%(1/1);15例Her-2蛋白表达为(+)的患者中,Her-2 基因扩增为阴性的12例,符合率为 80.0%(12/15);49例Her-2蛋白表达为(++)的患者中,Her-2基因扩增为阳性的25例,符合率51%(25/49);33例Her-2蛋白表达为(+++)的患者中,Her-2 基因扩增为阳性的27例,符合率81.8%(17/21).IHC法初筛为阴性(-~+)和强阳性(+++)检测结果与FISH检测结果一致性较高(Kappa =0.602＞0.40,P＜0.01),且两法检测差异无统计学意义(χ2=0.508,P＞0.05).结论 IHC方法检测乳腺癌组织中Her-2蛋白表达阴性和强阳性与FISH检测结果一致性较高.     

FISH检测乳腺癌HER2基因扩增及临床病理关系的研究

目的：探讨荧光原位杂交（FISH）检测原发性乳腺癌组织中HER2基因扩增与临床病理的关系。方法：收集2007年11月至2009年8月手术切除的乳腺癌组织标本105例,采用FISH方法检测HER2基因扩增情况,分析其与临床病理的关系,同时比较FISH与免疫组化（IHC）检测结果的相关性。结果：105例乳腺癌中共有39例HER2基因扩增,阳性率为37.1%（39/105）,其扩增与HER2蛋白过表达、组织学分级、雌激素和孕激素受体（均P〈0.05）状态有关;FISH与IHC两种方法检测HER2结果密切相关（rs=0.680,P〈0.05）。结论：HER2基因扩增与乳腺癌发生发展及临床预后密切相关,可作为乳腺癌治疗的理想靶点。     

荧光原位杂交对乳腺癌HER2基因的检测及临床应用

目的探讨荧光原位杂交法(FISH)检测乳腺癌组织中人类表皮生长因子受体2(HER2)表达的临床意义。方法采用FISH和免疫组织化学(IHC)法分别检测28例乳腺癌标本中HER2基因扩增状况和HER2蛋白表达。结果在IHC法检测HER2蛋白表达(++)的22例标本中,FISH检出6例HER2基因扩增,16例无变化。在HER-2蛋白表达(+++)的6例标本中,FISH检出5例HER2基因扩增,1例无扩增。结论对于IHC法初筛为(++)的患者应再进行FISH检测,以确定HER-2基因的状态,从而确定是否应用曲妥珠单抗治疗。     

改良荧光原位杂交技术检测乳腺癌HER2基因

目的探讨改良荧光原位杂交（fluorescent in situ hybridization,FISH）技术在检测乳腺癌HER2基因中的应用。方法对52例经免疫组化（immunohistochemistry,IHC）法检测HER2的乳腺癌标本行改良FISH法检测HER2基因扩增情况,Kappa检验法对两种检测结果的一致性进行统计分析。结果改良FISH法成功率高,与IHC法检测结果一致性好,两者实际一致率为88.5%（K=0.757,P=0.000）。结论改良FISH技术可作为最终确诊HER2基因状态的方法 。     

FISH在乳腺癌组织HER2/neu原癌基因检测上的应用及其临床意义的研究

目的对比研究乳腺癌中免疫组化法检测c-erbB2蛋白表达和荧光免疫原位杂交法(FISH)检测HER2基因扩增,并评估其临床价值。方法免疫组化染色法及FISH法分别检测42例乳腺癌组织中c-erbB2蛋白表达及HER2基因扩增状况,并进行对比分析。结果42例乳腺癌中c-erbB2蛋白表达( )者22例(52.38%),表达( )者20例(47.62%);42例乳腺癌中有20例(47.62%)出现HER2基因扩增,22例(52.38%)无扩增。两种方法的检测结果差异无统计学意义(P>0.05);但二者的吻合度一般,(k=0.430,P<0.05)。结论免疫组化可以作为临床治疗是否应用赫赛汀(Herceptin)的初筛,免疫组化呈阳性或强阳性的病例有必要进一步进行HER2基因扩增的检测,来确定临床治疗是否应用Herceptin,指导化疗药物的选择及判断患者的预后。     

FISH法与IHC法检测乳腺导管浸润癌HER2表达的一致性分析

目的:探讨荧光原位杂交法(FISH)与免疫组化法(IHC)检测乳腺导管浸润癌人表皮生长因子受体2(HER2)表达的一致性分析.方法:选取2018年5月～2021年5月,乳腺导管浸润癌确诊患者106例.比较FISH法与IHC法检测乳腺导管浸润癌HER2检出情况.对FISH法与IHC法检测乳腺导管浸润癌HER2基因扩增和蛋...     

IHC与FISH检测乳腺癌HER2状态一致性的对比研究及其临床意义

目的:对比研究免疫组织化学方法(IHC)检测乳腺癌HER2蛋白表达和荧光原位杂交技术(FISH)检测HER2基因状态的一致性,并评价其临床意义.方法:采用IHC法及FISH法分别检测77例乳腺癌患者术后石蜡包埋标本的HER2蛋白表达和HER2基因状态,并进行对比分析.结果:77例乳腺癌患者术后石蜡包埋标本用IHC检测H...     

荧光原位杂交和免疫组织化学技术检测乳腺癌HER-2基因扩增和蛋白表达状态对照研究

目的 比较荧光原位杂交(FISH)与免疫组织化学技术(IHC)在检测乳腺癌患者HER-2基因扩增和表达状态方面的应用.方法 采用FISH技术对66例IHC检测结果为HER-2基因过度表达(3+/2+)和低表达或无表达(1+/-)的乳腺癌石蜡切片进行HER-2基因扩增状态检测.结果 用FISH技术检测42例IHC结果显示HER-2基因过度表达(3+/2+)的标本,31例显示HER-2基因扩增,11例无扩增.检测24例IHC检测显示HER-2基因低度表达或无表达(1+/-)的标本,均未显示HER-2基因扩增.两组之间比较,Kappa系数为0.672,P<0.001,显示两项检测技术具有良好的一致性.另外.用FISH技术检测到部分病例显示17号染色体多体性,并且该多体性在HER-2高表达(3+/2+)的病例发生率显著高于低表达或无表达(1+/-)的病例(x~2=4.688,P=0.03).结论 FISH和ICH两项技术具有良好的一致性.IHC可作为HER-2基因扩增和表达状态检测的筛查手段.FISH技术可以作为检测HER-2基因扩增和17号染色体多体性的确诊手段.

Abstract：

Objective To evaluate the application of the immunohistochemistry (IHC) and the fluorescence in situ hybridization (FISH) in detecting the amplification and the expression of HER-2 gene in the breast cancer patients. Methods Sixty-six cases of paraffin-embeded breast cancer samples with overexpression, low or no expression of HER-2 gene as detected by IHC were analyzed for HER-2 gene amplification using FISH. Results Among the 42 samples with HER-2 gene overexpression (3+/2+) detected by IHC, 31 showed positive HER-2 gene amplification and 11 showed negative HER-2 gene amplification in FISH. In the 24 samples with low or no HER-2 gene expression (1+/-) detected by IHC, no HER-2 gene amplification was detected by FISH. The results of the two testing methods showed a good consistency with the kappa coefficient of 0.672 (P<0.001). We also found that the 17 chromosome polysomy in 42% of the samples and the incidence of 17 polysomy was significantly higher in the HER-2 gene overexpression (3+/2+) group than in low or no HER-2 gene expression (1+/-) group (x~2=4.688, P=0.03). Conclusion IHC can be used as a screening method for detecting HER-2 gene amplification, and FISH should be performed in cases of HER-2 gene overexpression (3+/2+) as detected by IHC.     

全自动银增强原位杂交检测乳腺癌患者人表皮生长因子受体2基因状态

目的 评价银增强原位杂交(SISH)用于乳腺癌患者人表皮生长因子受体2(HER2)基因扩增状态检测的可行性.方法 研究对象为2009年5-11月在中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院行手术治疗的63例乳腺浸润性导管癌患者(年龄32～64岁),术前均未行放疗和化疗.取手术切除乳腺癌标本行全自动免疫组织化学染色检测HER2蛋白表达、SISH检测HER2基因状态,其中43例同时行荧光原位杂交(FISH)检测HER2基因状态.根据2007年美国临床肿瘤协会/美国病理家协会制定的标准评估检测结果,比较不同检测方法之间的符合率.结果 61例患者SISH检测结果满意,其中HER2蛋白表达阳性(3+)的30例中SISH检测29例(97%)为HER2基因扩增;蛋白表达不确定(2+)的11例中SISH检测2例(18%)为基因扩增,2例(18%)为基因扩增不确定;蛋白表达阴性(1+/0)的20例SISH检测均为基因无扩增.43例行FISH检测者,HER2蛋白表达阳性(3+)的21例中20例(95%)FISH检测为HER2基因扩增;蛋白表达不确定(2+)的10例中1例FISH检测为基因扩增,3例为不确定;蛋白表达阴性(1+/0)的12例FISH检测均为基因无扩增.43例患者的FISH与SISH检测结果比较,42例相符(基因扩增21例,基因扩增不确定2例,基因无扩增19例),1例FISH检测为HER2基因扩增不确定而SISH检测为基因无扩增,总体符合率为98%.结论 SISH技术用于乳腺癌HER2基因状态检测结果与FISH相当,具有可行性和实际使用价值.     

FISH检测平顶山地区乳腺癌组织中HER-2基因的表达

目的 FISH方法检测乳腺癌组织中人表皮生长因子2(Her-2)的扩增情况,并与免疫组化结果相比较,优化实验方法。方法用FISH方法及免疫组化检测乳腺癌Her-2的表达,分析相关性。结果 202例乳腺癌患者中,FISH检测Her-2基因扩增60例,阳性率29.7%(60/202),其中Her-2蛋白阴性,Her-2基因未扩增36例,扩增1例,符合率94.7%;Her-2蛋白(+),Her-2基因扩增12例,符合率18.5%;Her-2蛋白(++),Her-2基因扩增22例,符合率26.8%;Her-2蛋白(+++),Her-2基因扩增26例,符合率92.8%。结论 FISH检测准确率较高,IHC阴性和(+++)时与FISH结果一致性较好,可作为治疗依据,IHC(+)～(++)时仅能作初步筛查,明确Her-2情况仍需FISH检测。     

荧光原位杂交与免疫组化对乳腺癌HER-2检测的对比研究

目的 探讨荧光原位杂交技术(FISH)检测石蜡标本乳腺癌HER-2基因和免疫组化法(IHC)检测HER-2蛋白表达的结果. 方法 采用荧光原位杂交技术(FISH)和免疫组化技术(IHC)分别检测203例乳腺癌患者手术切除标本的HER-2基因和HER-2蛋白表达,对两种方法检测结果进行对比分析.结果 203例HER-2 IHC结果阳性110例(54%),阴性93例(46%);FISH结果阳性60例(阳性率29%),阴性143例(71%).93例HER-2蛋白为阴性的患者中,HER-2基因表达阴性的87例,符合率93.6%(87/93);58例HER-2蛋白为+的患者中,HER-2基因表达为阳性的11例,符合率为19.0%(11/58);29例HER-2蛋白为++的患者中,HER-2基因表达为阳性的22例,符合率75.9%(22/29);23例HER-2蛋白为的患者中,HER-2基因表达为阳性的21例,两者符合率为91.3%(21/23).结论 对于IHC法初筛为阴性(-)或强阳性(+++)的患者两种方法检测的符合率(≥91.3%)较高,可选择性的进行FISH实验,尤其对于50岁以上年龄组的患者符合率(≥97.7%)更高,而对于IHC法初筛为阳性(+～++) 的患者应再进行FISH实验以确定HER-2基因的状态.