用一种可回收的配体催化合成紫杉醇C13片段

目的:建立一种经济的方法合成紫杉醇C13侧链(2R,3S)-3-苯甲酰胺基-2-羟基-3-苯基丙酸异丙酯2.方法:以反式肉桂酸异丙酯为原料,N-溴代苯甲酰胺为助氧化供氮试剂,在配体4存在下进行锇催化的不对称氨羟化反应,可以得到很高光学产率的抗癌药物紫杉醇的C13片段2.当反应结束后,向体系加入少量乙醚,过滤,就可使配体4得到回收.结果:C13片段2化学产率39%,对映体过量98%.配体回收率76%.结论:这种合成方法成本低,操作简便.特别是配体容易合成,不但能够象高聚物支载配体一样可以方便地回收和重复使用而且克服了高聚物支载配体的很多缺点.     

紫杉醇C_(13)边链的合成

目的：合成紫杉醇C13边链。方法：反式肉桂酸（1）经单过氧化硫酸氢钾复盐氧化，得到消旋环氧酸（2），化合物2经K-α-苯乙胺拆分、碱化制得钾盐（4），4与叠氮钠的反应产物经酸化得到叠氮酸（5），化合物5用4mol／L的HCL／MeOH溶液酯化得到叠氮酸甲酯（6），化合物6在含水（15％）四氢呋喃中经Zn／NH4Cl还原、苯甲酰化得到2S-羟基-3S-N-（苯甲酰基）-苯丙酸甲酯（8），化合物8在吡啶中与甲磺酰氯反应即得紫杉醇C13侧链（9）。结果：首次以反式肉桂酸（1）为原料制备了紫杉醇C13边链（4S-反式）-4，5-二氢-2，4-二苯基-1，3-噁唑-5-甲酸甲酯（9）。结论：此方法原料易得，反应每件温和并且成本低，易于生产化生产．     

基于4-氨基-5-甲酰基-8,10-二去氮杂四氢叶酸二乙酯侧链的水解反应条件优化

目的：改进经典抗叶酸类药物关键中间体4-氨基-5-甲酰基-8,10-二去氮杂四氢叶酸二乙酯侧链的水解条件。方法：以经典叶酸拮抗剂侧链N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸二乙酯(1)为反应原料,尝试了氢氧化钠（NaOH）和氢氧化钾（KOH）2种碱催化、20~180 min 5种反应时间和0.175~1 mol/L 3种碱浓度的反应条件,用高效液相色谱法检测目标产物和副产物,最终确定副产物为单酯水解产物以及酰胺键水解产物,并以此为依据完成了4-氨基-5-甲酰基-8,10-二去氮杂四氢叶酸二乙酯(5)水解条件的优化。结果:改进后的4-氨基-5-甲酰基-8,10-二去氮杂四氢叶酸二乙酯侧链的水解条件为0.3 mol/L KOH溶液中室温条件反应60 min,在该反应条件下,水解反应收率为95.6%。反应产物通过磁共振氢谱（1H nuclear magnetic resonance,1H NMR）、磁共振碳谱（13C nuclear magnetic resonance,13C NMR）和电喷雾飞行时间质谱（electrospray ionization time of flight mass spectrometry,ESI-MS）分析鉴定后结构正确,并通过高效液相色谱法确定其纯度为96%。新的水解反应条件避免了副产物的生成,提高了反应收率。结论：利用新的水解条件可以简便、高效地完成4-氨基-5-甲酰基-8,10-二去氮杂四氢叶酸二乙酯的水解反应,该条件对经典叶酸拮抗剂的合成和生产工艺的改进也有重要的意义。     

多西紫杉醇与紫杉醇联合吡柔比星和环磷酰胺在局部进展期乳腺癌化疗中的对比观察

目的 比较多西紫杉醇与紫杉醇联合吡柔比星(THP)和环磷酰胺(CTX)的新辅助化疗方案治疗局部进展期乳腺癌的临床疗效和毒性.方法 97例ⅡB期至ⅢC期女性乳腺癌患者随机分为两组:多西紫杉醇组49例给予多西紫杉醇+THP+CTX方案;紫杉醇组48例紫杉醇+THP+CTX方案.两组新辅助化疗均为21 d一疗程,共完成4个疗程.结果 多西紫杉醇组原发病灶完全缓解率和病理完全缓解率分别为28.6%和26.5%,均显著高于紫杉醇组(10.4%和8.3%);化疗后区域淋巴结病理转阴性率多西紫杉醇显著高于紫杉醇组(40.6%和12.9%).但多西紫杉醇组Ⅲ、Ⅳ度血液系统毒性反应、Ⅱ度以上肝功能损伤、水肿发牛率分别为71.4%、53.1%和24.5%,均显著高于紫杉醇组(46.9%、27.1%和4.2%).结论 相对于紫杉醇,多西紫杉醇联合吡柔比星和环磷酰胺治疗局部进展期乳腺癌的疗效更显著.

Abstract：

Objective To compare the efficacy and toxicity of neoadjuvant chemotherapy of docetaxel with paclitaxel plus pirarubicin hydrochloride (THP) and cyclophosphamide ( CTX) in locally advanced breast cancer ( LABC). Methods A total of 97 LABC cases were randomly divided into 2 groups: docetaxel group (n = 49, taxotere plus THP & CTX ) and paclitaxel group (n = 48, paclitaxel plus THP & CTX). Neoadjuvant chemotherapy had four cycles of 21 days each. Results The clinical and pathological complete remission rates of docetaxel group was 28. 6% and 26. 5% respectively. They were significantly higher than those of paclitaxel group ( 10. 4% and 8. 3% ) . Furthermore the pathological negative rate of regional lymph node in docetaxel group was also significantly higher than that of paclitaxel group (40.6% vs. 12.9%). However, grade Ⅲ - Ⅳ blood system toxic reaction was found in 71.4% cases, grade Ⅱ - Ⅳ liver dysfunction in 53. 1% cases and edema in 24. 5% cases among docetaxel group.They were higher than those among paclitaxel group (46. 9%, 27. 1% & 4. 2% ). Conclusion Compared with paclitaxel, the combined regimen of docetaxel plus THP and CTX offers better outcomes for locally advanced breast cancer.     

紫杉醇联合顺铂治疗46例乳腺癌的疗效观察

目的 观察紫杉醇联合顺铂治疗乳腺癌的疗效及不良反应.方法 采用紫杉醇联合顺铂治疗乳腺癌46例.紫杉醇135～175mg/ml静脉滴注第1天,顺铂70mg/ml静脉滴注第2天,21～28天为一周期. 结果 总有效率76.1%(35/46),SD 5例(10.9%),PD 6例(13%).常见不良反应为骨髓抑制、心脏毒性、周围神经毒性、肌肉关节疼痛、胃肠道反应,主要为白细胞减少和胃肠道反应,发生率分别为65%和61%.结论紫杉醇联合顺铂治疗乳腺癌具有较好的疗效,不良反应可耐受.     

地黄地炮制研究：Ⅰ.熟地黄中5—羟甲基糠醛的提取分离及含量测定

从短叶红豆杉韧皮部分离到的内寄生真菌在半合成液体培养基中产生紫杉醇及其相关化合物，以质谱，色 谱以及对紫杉醇特异的单克隆抗体反应鉴定了紫杉醇，真菌培养物中的[1-^14C]乙酸和L-[U-^14C]苯丙氨酸为紫杉醇的前体。     

L-正缬氨酸不对称合成研究

目的:合成光学纯的L-正缬氨酸.方法:以正丁醛、氰化钾为起始原料,(S)-(-)-α-甲基苄胺作为手性辅助剂通过选择性Strecker反应制备光学纯度的氨基腈,再通过水解及脱苄制得光学纯的L-正缬氨酸.结果:通过对不同溶剂系统的选择获得了最佳反应溶剂系统,并采用两次重结晶操作得到了光学纯度较高的L-正缬氨酸.结论:该方法步骤短、选择性强、收率高(47.4%).     

卡培他滨联合紫杉醇治疗晚期转移性宫颈癌的临床研究

目的探讨观察紫杉醇联合希罗达对比紫杉醇联合顺铂治疗晚期转移性宫颈癌的疗效及不良反应。方法对2003年7月至2006年12月本院确诊晚期转移性宫颈鳞癌患者52人双盲随机分为两组,试验组(n=26)口服希罗达每日1650mg/m2,连服1～14d,紫杉醇80mg/m2静脉滴注,第1天应用,每3周为1周期,连用2～4周期;对照组(n=26)顺铂20mg/m2静脉注射,第1～5天,紫杉醇80mg/m2静脉滴注,第1天应用,每3周为1周期,连用2～4周期,治疗结束2周后评价疗效。结果试验组可评价26例,有效率46.15%(12/26),中位生存时间11.6月,1年生存率43.33%(13/26);安全性方面Ⅲ反应占38.4%(9/26),Ⅳ反应占15.4%(4/26),主要为手足综合征、骨髓抑制和消化道毒性。对照组疗效可评价26例,有效率42.31%(11/26),中位生存时间11.9月,1年生存率43.33%(13/26);安全性方面Ⅲ反应占34.4%(10/26),Ⅳ反应占17.2%(5/26),主要为脱发、消化道毒性、骨髓抑制。结论希罗达联合紫杉醇对晚期转移性宫颈癌的疗效与紫杉醇联合顺铂疗效相当,但是不良反应较轻...     

卡培他滨联合紫杉醇治疗晚期转移性鼻咽癌37例

目的探讨卡培他滨(希罗达)联合紫杉醇治疗晚期转移性鼻咽癌的疗效及不良反应。方法联合组37例确诊蒽环类耐药的转移性乳腺癌,口服希罗达每日1650mg/(m2·d),连服1-14天,紫杉醇80mg/m2静脉滴注,第1天应用,每3周为1周期,连用2-4周期;对照组31例DDP20mg/m2静脉注射,第1-5天,5-Fu0.5mg/m2第1-5天,3周为1周期,连用2-4周期;治疗结束2周后评价疗效。结果联合组疗效可评价35例,有效率(CR PR)45.7%(16例),中位生存时间>14.3月;安全性方面Ⅲ反应占25.7%(9例),Ⅳ反应占20.0%(7例),主要为手足综合征、骨髓抑制和消化道毒性。对照组疗效可评价29例,有效率(CR PR)31.0%(9例),中位生存时间>10.9月,安全性方面Ⅲ反应占34.4%(10例),Ⅳ反应占17.2%(5例),主要为脱发、消化道毒性、骨髓抑制。结论希罗达联合紫杉醇对晚期转移性鼻咽癌的疗效较DDP 5-Fu有优势,且不良反应可以耐受。     

紫杉醇对喉癌细胞CK13mRNA表达的影响

目的 探讨紫杉醇对喉癌细胞Hep-2生长抑制作用;紫杉醇对细胞角蛋白基因13（cytokeratin13,CK13）mRNA表达的影响.方法 应用MTT法检测紫杉醇对Hep-2细胞的抑制率;采用半定量RT-PCR法检测紫杉醇作用Hep-2细胞后CK13mRNA的表达.结果 紫杉醇在10-7 mol/L以上浓度时,对Hep-2细胞抑制率大于30%（P＜0.01）;10-8mol/L以上浓度的紫杉醇可下调CK13mRNA的表达,其作用呈剂量依赖性.结论 Hep-2细胞对10-7 mol/L以上浓度紫杉醇具有高度敏感性;紫杉醇可能通过抑制CK13mRNA表达从而抑制肿瘤的侵袭及转移.     

卡培他滨联合国产紫杉醇治疗晚期胃癌26例临床疗效观察

目的 探讨研究卡培他滨联合紫杉醇治疗晚期胃癌的疗效及毒副反应.方法 采用紫杉醇75mg·m-2静脉滴注3h,第1、8天;卡培他滨1000mg·m-2,每日2次,第1～14天.21d为1个周期,连用2个周期后评价疗效,有效病例4周后确认.结果 26例中获得完全缓解1例(3.8%),部分缓解16例(61.5%),稳定5例(19.2%),进展4例(15.4%),有效率65.3%.药物主要不良反应为胃肠道反应及骨髓抑制,基本为Ⅰ度和Ⅱ度毒副反应,无化学治疗相关死亡.结论 卡培他滨联合紫杉醇治疗晚期胃癌疗效确切,安全性好,不良反应可耐受.     

多西紫杉醇联合奥沙利铂和5-氟尿嘧啶治疗晚期胃癌41例

目的观察多西紫杉醇联合奥沙利铂和5-氟尿嘧啶方案治疗晚期胃癌的客观疗效、疾病进展时间、生存时间和毒性反应。方法41例晚期胃癌患者给予多西紫杉醇35 mg.m-2(第1天,第8天,第15天),奥沙利铂85 mg.m-2(第1天,第8天,第15天),5-氟尿嘧啶500 mg.m-2(第1天至第5天),28 d为1周期,疗程4周期。结果41例患者中完全缓解3例,部分缓解21例,稳定10例,进展7例,总有效率58.54%;中位疾病进展时间为5.73个月。常见的毒性反应为白细胞和中性粒细胞减低、腹泻和周围神经毒性反应等。结论多西紫杉醇联合奥沙利铂、5-氟尿嘧啶化疗方案治疗晚期胃癌的疗效显著,耐受性较好。     

紫杉醇+顺铂诱导化疗晚期鼻咽癌的近期疗效

目的探讨紫杉醇+顺铂及5-氟尿嘧啶(5-Fu)+顺铂方案诱导化疗晚期鼻咽癌的临床疗效及不良反应。方法Ⅲ~Ⅳa期鼻咽癌患者291例随机分为紫杉醇+顺铂+放疗(紫杉醇组)、5-Fu+顺铂+放疗(5-Fu组)以及单纯放疗三组。诱导化疗药用量:紫杉醇100~120 mg.m-2.d-1,顺铂80 mg.m-2.3 d-1,5-Fu 0.5~0.75g.m-2.d-1×3 d;第15天重复以上剂量的化疗周期,第18天即开始放疗。放疗采取Co60或(和)X线6 MV常规照射,鼻咽部总剂量约DT 70 Gy/35次/7周。结果紫杉醇组与5-Fu组鼻咽及颈部肿瘤消失的平均剂量均小于单纯放疗组(P<0.01);3组临床肿瘤全消率分别为87.3%,76.9%和58%(P<0.01)。不良反应主要为粒细胞下降、脱发、口腔黏膜反应及胃肠道反应,均能耐受。结论紫杉醇+顺铂及5-Fu+顺铂短程诱导方案对晚期鼻咽癌均能加快肿块消失及提高肿瘤消失率。紫杉醇方案主要副作用为粒细胞下降及脱发;5-Fu方案主要副作用为口腔黏膜反应及胃肠道反应。     

药物中间体S-苯基-L-半胱氨酸的酶法合成

目的 利用在大肠杆菌中高效重组表达的O-乙酰丝氨酸(硫醇)裂解酶A(OASS-A)合成药物中间体S-苯基-L-半胱氨酸,并对合成产物进行纯度及结构鉴定.方法 通过PCR扩增目的基因Cys K,并连接到pET-22b(+)载体上构建原核表达质粒,重组体转到感受态大肠杆菌BL21(DE3)中进行蛋白诱导表达,重组蛋白采用Ni2-树脂柱亲和层析纯化,利用SDS-PAGE鉴定表达纯化蛋白,通过HPLC对合成产物纯度进行检测,应用1H NMR技术对化合物进行结构鉴定.结果 成功构建了OASS-A原核表达载体,在IPTG诱导下获得了高效表达.重组酶高效合成非蛋白质氨基酸S-苯基-L-半胱氨酸.合成的化合物以晶体形式析出,采用HPLC和1HNMR技术对其结构进行了鉴定,合成产物的纯度为100％.结论 利用大肠杆菌中重组表达的OASS-A能够高效合成药物中间体S-苯基-L-半胱氨酸.     

碳青霉烯类抗生素厄他培南的合成

目的:合成碳青霉烯类抗生素厄他培南。方法:以4R-羟基-L-脯氨酸(1)为原料,在碱性条件下与氯甲酸对硝基苄酯反应,得到氨基保护的4R-羟基-L-脯氨酸(3)。经氯甲酸异丙酯活化化合物3的羧羟基后胺解,所得中间体4用甲烷磺酰氯酰化得到化合物(5)。化合物5与硫代醋酸钾置换得到4-羟基构型反转的化合物(6),化合物6经碱性水解,得到厄他培南侧链(7)。侧链7与培南母核MAP(12)反应,得到保护的厄他培南(13),再经催化氢化得到目的物厄他培南(14)。结果:以4R-羟基-L-脯氨酸(1)为原料,合成了对硝基苄氧羰基保护的厄他培南侧链(7),进而制备了碳青霉烯类抗生素厄他培南。结论:此方法原料易得、反应条件温和、成本低,易于放大生产。     

多西紫杉醇联合TRAIL诱导人胃癌细胞SGC7901的凋亡观察

目的:探讨多西紫杉醇联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Tumor Necrosis Factor-related poptosis-inducing ligand,TRAIL)体外诱导胃癌细胞凋亡的作用及可能机制.方法:采用MTT法检测不同浓度(1、5、10、20、40ìg/ml),不同时间(12、24、36、48h)T多西紫杉醇的抗癌活性并计算其亚毒性剂量.用流式细胞仪检测多西紫杉醇(亚毒性剂量)及TRAIL(200ng/ml)单独及联合应用后SGC7901的凋亡率.RT-PCR法检测DR4,DR5在加药前后的表达.结果:对照组(C组)、亚毒性剂量的多西紫杉醇(P组)、TRAIL(T组)及二者联合(T P)作用24h后胃癌细胞的凋亡率分别为2.09%、10.65%、7.79%和24.51%,T P组凋亡率明显升高,与C组、T组、P组两两比较时,差异具有统计学意义(P<0.05):多西紫杉醇处理组DR5表达增加.结论:多西紫杉醇与TRAIL具有协同抗胃癌作用,其机制可能与DR5表达的上调有关.     

细胞增殖类显像剂3''-脱氧-3''-18F-氟代胸腺嘧啶的合成

以5'-O-苯甲酰-2,3′-脱水-胸腺嘧啶脱氧核苷(BAThy)为前体,用自动化合成装置TRACERlabFXFN,在同一反应瓶中经亲核氟化、NaOH水解制备出3′-脱氧′3′-18F-氟代胸腺嘧啶(18F-FLT)注射液.总放射合成时间小于50 min,未经校正的放化产率约12%,放化纯度大于99%,合成过程操作简便,实现了自动化完成.     

高效液相色谱法测定曼地亚红豆杉中紫杉醇的含量

目的 建立曼地亚红豆杉中紫杉醇的含量测定方法.方法 其检测条件为,用DiamonsilTM C18 (5μm,250mm×4.6mm)色谱柱,流动相:乙腈:水＝51:49,检测波长:227nm,柱温:室温,流速:1.0ml/min.结果 该地区紫杉醇含量为0.01475%,紫杉醇在0.2455～1.304μg 内具有良好的线性关系, r＝0.9997;平均回收率为97.6%(RSD=1.14%).结论 测定方法 快速,结果 准确、可靠,可作为紫杉醇的定量分析方法.     

紫杉醇联合卡培他滨治疗晚期胃癌疗效观察

目的观察紫杉醇联合卡培他滨治疗晚期胃癌的疗效及毒副反应。方法采用紫杉醇80 mg.m-2静脉滴注3 h,第1、8天;卡培他滨1 000 mg.m-2,每日2次,第1~14天。21 d为1个周期,连用2个周期后评价疗效,有效病例4周后确认。结果 38例中获得完全缓解3例(7.9%),部分缓解16例(42.1%),稳定13例(34.2%),进展6例(15.8%),有效率50.0%。主要药物不良反应为骨髓抑制及胃肠道反应,多为Ⅰ度和Ⅱ度毒副反应,其他有脱发、手足综合征和肌肉酸痛等,所有患者无化学治疗相关死亡。结论紫杉醇联合卡培他滨治疗晚期胃癌疗效确切,安全性好,不良反应可耐受。     

高速逆流色谱法纯化曼地亚红豆杉枝叶提取物中紫杉醇

目的研究从紫杉醇浸膏中分离紫杉醇的方法。方法利用高速逆流色谱技术,采用正己烷-酯酸乙酯-甲醇-水(4:5:3.5:5)为溶剂体系。结果经过高速逆流色谱一次纯化,紫杉醇的质量分数由5.1%上升到85.5%,回收率达到98.6%。结论为制备高纯度紫杉醇提供了一条新途径。