中药病毒宁滴剂的抑菌、抗炎作用

病毒宁滴剂为广州中医药大学热带医学研究所和北京市宇维生科贸技术有限公司为寻求治疗感冒的有效手段而联合研制的 ,主要用于外感风热初起型感冒的中药滴鼻制剂 ,该药主要由清热解毒的柴胡、鱼腥草等中药提炼研制而成。为进一步探讨该药的药理机制 ,对其在体内体外的抑菌、抗炎作用进行了研究。结果发现病毒宁滴剂体外试验对 6种细菌菌株有不同程度的抑制作用 ,但作用不强 ;体内抗菌试验表明 ,病毒宁滴剂 2 5 0 0mg kg剂量组可降低金黄色葡萄球菌攻击小鼠的死亡率 (P <0 .0 0 5 ) ;病毒宁滴剂5 0 0mg kg剂量组具有抑制二甲苯致小鼠毛细血管通透性增加的作用 (P <0 .0 0 5 ) ;其 2 5mg kg、 5 0mg kg、10 0mg kg剂量组还具有抑制大鼠足跖肿胀形成的作用。表明病毒宁有一定的抑菌作用 ,尤其对金黄色葡萄球菌有较强体内保护作用 ,并有较明显的抗炎消除肿胀作用     

车前草对呼吸道合胞病毒体外抑制作用的研究

目的：研究车前草醇提液体外对呼吸道合胞病毒（ RSV）的作用。方法采用细胞培养技术,以利巴韦林为对照,通过观察细胞病变效应（CPE）,测定细胞半数中毒浓度（TC50）、药物半数抑制浓度（IC50）和抗病毒指数（ TI）,评判车前草抗RSV作用。结果车前草体外有抗RSV作用,浓度在0．0625～8．0 g／L呈量效关系。车前草的TC50＝4．57 g／L,IC50＝0．285 g／L,TI＝16．04。车前草与利巴韦林抗RSV作用差异无统计学意义（ P＞0．05）,但比利巴韦林毒性小,抗病毒指数大,安全范围大。结论车前草在 Hep－2细胞中对RSV有明显的抑制作用,既能抑制病毒的吸附和增殖,又能直接杀死病毒。     

盐藻多糖抗病毒实验研究

目的通过体内外抗病毒实验观察盐藻多糖抗副流感病毒的作用。方法接种副流感病毒1型(HVJ)于狗肾细胞(MDCK),观察盐藻多糖对病毒致细胞病变效应的作用;体内实验以副流感病毒滴鼻感染小鼠,观察盐藻多糖对感染病毒小鼠的死亡率、生存时间、肺指数和肺病变程度的影响。结果盐藻多糖10、30、100μg/mL的浓度均有明显抑制病毒致细胞病变的作用;盐藻多糖30、100 mg/kg剂量组能显著降低病毒感染小鼠的死亡率,延长小鼠的生存时间,降低肺指数,减轻肺病变程度。结论盐藻多糖具有良好的抗副流感病毒的作用。      

正柴胡饮体外抗甲型流感病毒和乙型流感病毒作用的研究

为探讨中药复方正柴胡饮(柴胡、陈皮、防风、芍药、甘草、生姜等)的抗病毒作用,从体外抗病毒实验对其抑制甲型流感病毒(FM1)和乙型流感病毒(昆科70B)的作用进行了研究。结果显示:中药复方正柴胡饮在无毒浓度1.56g/L、6.25g/L分别对FM、昆科70B有明显的抑制病毒致细胞病变作用。     

银芩胶囊抗流感病毒的活性

目的研究银芩胶囊在体内、外的抗流感病毒活性。方法采用噻唑蓝（MTT）比色法检测银芩胶囊对体外模型狗肾细胞（MDCK细胞）的毒性浓度；采用细胞病变效应（CPE）观察法测定银芩胶囊体外抑制流感病毒有效浓度；流感病毒感染动物模型为昆明种小鼠，口服给予银芩胶囊剂量分别为每日1．0、0．3和0．1g／kg，分2次给予，共给药6d，通过观察流感病毒FM1感染小鼠死亡率、生命延长情况及肺病变程度指标判定其抗流感病毒作用。结果银芩胶囊在1．25mg／mL浓度下对MDCK细胞无毒性，在0．6mg／mL浓度下能有效抑制流感凡病毒CPE产生；每日口服1．0、0．3和0．1g／kg银芩胶囊，对流感病毒FM1感染小鼠的死亡保护率分别为40％、20％和5％，生命延长率分别为51．1％、29．1％和23．4％，减轻小鼠肺病变分别为64．3％、56．1％和34．6％。结论银芩胶囊在体内、外均有良好的抗流感病毒活性。     

板蓝根含片的抗病毒作用研究

目的:观察板蓝根含片的抗病毒作用。方法:采用细胞病变抑制法、鸡胚法及感染小鼠保护试验法观察板蓝根含片的抗病毒作用。结果:板蓝根含片浓度在50 g/L时能完全抑制5种病毒在细胞内的复制作用,对鸡胚内流感病毒有抑制作用,对流感病毒感染小鼠有保护作用。结论:板蓝根含片有明显的抗病毒作用。     

知母宁的体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型作用

目的 检测知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)作用。方法 以Vero细胞为宿主细胞，阿昔洛韦为阳性对照药物，采用中性红染色法测定不同药物加入方式下知母宁的体外抗HSV-Ⅱ有效率，并检测其抑制病毒作用的时效关系及对病毒感染性的影响。结果 知母宁表现出对HSV-Ⅱ 333的综合抑制作用和抑制病毒吸附后的后续复制增殖作用，其抗病毒有效率(ER％)最高达80％，这两种作用的半数有效浓度(EC50)均约为0．8mg／ml。知母宁浓度≥2．08mg／m1时能显著抑制HSV-Ⅱ，ER％最高达95％。知母宁还有较弱的预防病毒吸附作用。知母宁抗病毒作用的时效关系研究表明，随药物作用时间延长，低浓度药物抗病毒有效率呈减小趋势，在高浓度时(≥2．08mg／ml)其病毒抑制强度基本维持稳定。随药物作用时间延长，知母宁可明显削弱病毒的感染性，知母宁组病毒的-lg TCID50值较病毒对照组的下降值呈增大趋势，其下降百分比维持稳定，约为40％。结论 知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型效果好，且其抗病毒作用具有多个作用点。     

银翘散抗甲1型流感病毒作用的实验研究

目的以MDCK细胞及小鼠流感肺炎模型为基础，观察不同浓度银翘散煎剂对流感病毒导致细胞病变的抑制作用和改善小鼠肺炎严重程度的情况，评价古方银翘散对甲1型流感病毒的抑制作用。方法接种甲1型流感病毒于MDCK细胞，观察银翘散体外抗流感病毒作用；以甲1型病毒滴鼻感染小鼠，观察对肺指数、病毒致小鼠死亡率等的影响。结果银翘散的最大无毒浓度为1．13g.L^-1，100TCID50病毒攻击量下，银翘散（在0．52～66g．L^-1浓度下）在MDCK细胞对甲1型流感病毒FM1株均无明显的抑制作用。银翘散对流感病毒致小鼠肺炎的抑制作用，其40、20、101mg．kg^-1三个剂量组的肺指数分别为1．35、1．36、1．52，其中银翘散40、20mg／kg两个剂量组与病毒对照组相比，差异有显著性（P〈0．01）；银翘散100mg．kg^-1与病毒对照组相比，在死亡保护率和平均存活时间均有统计学的差异显著性（P〈0．05）。结论银翘散可改善流感病毒引起的小鼠肺炎症状，延长生命率，对甲1型流感病毒感染小鼠有死亡保护作用，对病毒性感冒显示了较好的疗效。     

不同剂型银翘散抗菌、抗病毒作用的研究

目的 对比银翘散合煎剂，分煎剂与颗粒剂抗菌，抗病毒作用。方法 用金黄色葡萄球菌，流感病毒感染小鼠，观察银翘散3种不同剂型对感染金黄色葡萄球菌，流感病毒小鼠的影响以及对Hela细胞生长抑制，抗FM1，Adv-7增殖的影响。结果 银翘散3种不同剂型对模型组均有抗菌，抗病毒的作用（P＜0．05），但组间无显著性差异。结论 银翘散3种不同剂型在抗菌，抗病毒等药效作用无明显的差异。     

小儿金宁口服液抗菌抗病毒实验研究

目的 观察小儿金宁口服液体内外抗菌和抗病毒作用。方法 采用试管法测定小儿金宁口服液在体外对12种临床常见致病菌的影响;采用金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌致小鼠腹腔感染模型观察其体内抗菌作用;采用甲型、乙型流感病毒致细胞病变法观察其体外抗病毒作用;采用流感病毒、仙台病毒致小鼠呼吸道感染模型观察其体内抗病毒作用。结果 小儿金宁口服液对所试9种细菌、甲型、乙型流感病毒均有不同程度的抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌、甲型流感病毒的抑制作用较强。小儿金宁口服液能不同程度地减少金黄色葡萄球菌、流感和仙台病毒感染小鼠的死亡率,延长其存活时间,降低病毒感染小鼠的肺指数,减轻肺病变程度。结论 小儿金宁口服液具有一定的抗菌抗病毒作用。     

金银花、连翘配伍提取物体外抗甲型流感病毒FM1株的实验研究

目的:观察金银花、连翘配伍提取物(JLT)体外抑制甲型流感病毒FM1株的作用。方法:采用血凝试验方法,测定不同质量浓度JLT体外和鸡胚内抑制流感病毒效价,分析JLT对病毒增殖的影响。结果:与病毒对照组比较,JLT组血凝效价降低,其抑制作用时间可从1 h持续到24 h,其对病毒的抑制作用随着药物质量浓度的降低而逐渐减弱;JLT在400 mg/mL、200 mg/mL及100 mg/mL时,对感染流感病毒鸡胚具有预防和保护治疗作用(P<0.001),而在400 mg/mL时的预防作用明显优于阳性对照组(P<0.05)。结论:JLT可有效抑制甲型流感病毒FM1株。     

清透邪热方对甲型H1N1流感病毒感染Ana-1细胞TLR-7、MyD88及NF-κB mRNA及蛋白表达的影响

目的 研究清透邪热方体外抗甲型H1N1流感病毒效应机制。方法 将清透邪热方制备成0.388、0.194、0.097、0.0485、0.02425mg/mL不同浓度,用H1N1甲型流感病毒感染小鼠Ana-1巨噬细胞,给予不同浓度清透邪热方及达菲进行干预,检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素诱导蛋白-10（IP-10）和白细胞介素-6（IL-6）表达,Toll样受体7（TLR7）及其下游髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB（NF-κB）mRNA和蛋白表达。结果 清透邪热方能够抑制甲型H1N1流感病毒感染Ana-1细胞TNF-α、IP-10、IL-6的表达;其中清透邪热方0.02425mg/mL组降低H1N1病毒感染组TNF-α、IL-6显著（P＜0.01）;清透邪热方0.097mg/mL组降低IP-10显著（P＜0.01）。清透邪热方能够抑制H1N1流感病毒感染后Ana-1细胞后TLR-7、MyD88及NF-κB mRNA及蛋白表达升高;其中清透邪热方0.0485mg/mL组抑制H1N1病毒感染组TLR-7 mRNA、MyD88 mRNA表达显著（P＜0.01）;清透邪热方0.02425mg/mL组抑制H1N1病毒感染组NF-κB mRNA表达显著（P＜0.01）;清透邪热方0.0485mg/mL组抑制H1N1病毒感染组TLR-7蛋白表达升高显著（P＜0.01）,清透邪热方0.388mg/mL组抑制H1N1病毒感染组MyD88蛋白、NF-κB蛋白表达显著（P＜0.01）。结论 清透邪热方通过抑制甲型H1N1流感病毒感染Ana-1细胞TLR-7、MyD88及NF-κB mRNA及蛋白表达升高,减少TNF-α、IP-10和IL-6表达,起到抗病毒作用。      

当归对体外黑素细胞和酪氨酸酶的激活作用

目的观察中药当归对黑素细胞和酪氨酸酶的影响。方法采用MTT法测定黑素细胞增殖情况,NaOH裂解法测定黑素合成,以蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法测定酪氨酸酶活性。结果(1)当归对黑素细胞具有促增殖作用,其最佳促增殖浓度为1 g/L;(2)当归可增强黑素合成能力,其最佳促合成浓度为1 g/L;(3)当归对酪氨酸酶亦具有激活作用,其最佳激活浓度为1g/L(P<0.05)。结论当归可促进黑素细胞增殖、黑素合成以及激活酪氨酸酶活性,可能是当归治疗皮肤色素性疾病的机制之一。     

金刚烷胺修饰物对禽流感病毒感染小鼠免疫功能的影响

目的：观察金刚烷胺修饰物（NAM）对禽流感病毒感染小鼠免疫功能的影响,为抗禽流感病毒新药NAM的开发提供实验依据。方法：采用禽流感病毒（H5N1）感染小鼠模型,实验分正常对照组（NC）、模型组（PC）、金刚烷胺阳性药物组（AMA）及NAM 25、50、100和200 mg?kg-1剂量组。测定小鼠胸腺指数、脾指数、刺激指数(SI)、NK细胞杀伤活性和干扰素（IFN）活性。结果： NAM 100 mg?kg-1剂量组平均脾指数高于PC组(P<0.05);NAM各剂量组平均胸腺指数高于PC组(P<0.05)。NAM 25、100和200 mg?kg-1剂量组的刺激指数高于PC组(P<0.05);NAM 100和200 mg?kg-1剂量组刺激指数高于AMA组(P<0.05)。NAM 100和200 mg?kg-1剂量组NK细胞杀伤活性高于PC组(P<0.05);NAM 25、100和200 mg?kg-1剂量组NK细胞杀伤活性高于AMA组(P<0.05)。NAM 50、100和200 mg?kg-1剂量组IFN活性高
于PC组(P<0.01); NAM 50、100和200 mg?kg-1剂量组IFN活性高于AMA组(P<0.05)。结论：NAM可刺激禽流感病毒感染小鼠脾细胞和胸腺细胞增殖,对T淋巴细胞转化功能、NK细胞杀伤活性及IFN免疫活性均有不同程度的促进作用。     

白藜芦醇对小鼠肺泡巨噬细胞释放IL-6、TNF-α的影响

目的:探讨白黎芦醇(Res)对小鼠肺泡巨噬细胞释放细胞因子IL-6,TNF-α的影响。方法:经从小鼠支气管肺泡灌洗中获得肺泡巨噬细胞,分5组进行培养,A组(LPS 10mg/L),B组(LPS 10mg/L+Res 50μg/ml),C组(LPS 10mg/L+Res 100μg/ml),D组(LPS 10mg/L+Res 150μg/ml),E组(LPS 10mg/L+Res 200μg/ml).各组在培养4,6,12,24h提取上清液,应用ELISA法测定上清液中IL-6,TNF-α含量。结果:在LPS刺激下IL-6于12h达释放高峰,在高峰期随着白黎芦醇浓度的逐步加大,IL-6的含量相应逐渐降低,E组IL-6含量明显低于只有内毒素刺激的A组(P<0.05)。同样在LPS刺激下TNF-α于6h达释放高峰,在高峰期随着白黎芦醇浓度的逐步加大,TNF-α含量也相应逐渐降低,而C组、D组、E组TNF-α含量明显低于A组(P<0.05)。结论:白黎芦醇对小鼠肺肺泡巨噬细胞过度释放炎症性细胞因子IL-6,TNF-α具有明显抑制作用。     

小柴胡汤对内异症大鼠异位内膜的作用

目的 探讨小柴胡汤(XCHT)对大鼠子宫内膜异位症(内异症)异位内膜的作用。方法 建立大鼠内异症动物模型,通过透射电镜技术观察XCHT对异位内膜细胞结构的影响。结果 中、高剂量XCHT (500、750 g/L)组对异位内膜生长有非常显著的抑制作用,异位内膜体积明显减小(P<0.01),低剂量XCHT(250 g/L)组异位内膜体积也显著减小(P<0.05),而对照组体积无显著变化(P>0.05)。透射电镜下可见中、高剂量XCHT组治疗后腺上皮细胞出现凋亡特征,表现为细胞体积变小、核固缩、胞质和核染色质凝集、密度增高、细胞间有凋亡小体,同时间质细胞中也可见一些坏死细胞或退行性改变。结论 XCHT对内异症大鼠异位内膜有明显抑制作用,其作用机制可能是通过调整宿主局部环境中的免疫状态和功能而诱导细胞凋亡和坏死。     

抑菌中药银花泌炎灵片的体外和体内抗细菌内毒素作用

目的：探讨传统抑菌中药银花泌炎灵片的抗细菌内毒素（LPS）作用,为其应用提供理论依据。方法：以银花泌炎灵片为研究对象,体外采用鲎实验法检测其抗LPS活性。体内实验选取90只ICR小鼠,随机分为空白对照组,药物对照组,LPS对照组,LPS低、中、高剂量预防组和治疗组,每组10只。低、中、高剂量预防组和治疗组小鼠分别灌服低剂量（0.4 g/mL）、中剂量（0.5 g/mL）和高剂量（0.6 g/mL）银花泌炎灵片溶液,药物对照组小鼠灌服0.6 g/mL银花泌炎灵片溶液,LPS对照组和空白对照组小鼠分别灌服等体积生理盐水。除空白对照组和药物对照组外,各预防组（于末次给药后3h）、治疗组（于第1次给药前3 h）和LPS对照组均按18 mg/kg腹腔注射LPS溶液,记录给予LPS溶液后48 h内各组小鼠的体质量、血液指标和脏器指数。结果：体外鲎实验法,将100 g/L银花泌炎灵溶液稀释至6.25 g/L后仍然具有抗LPS活性。体内实验,与空白对照组比较,LPS对照组小鼠体质量、白细胞（WBC）数、红细胞(RBC)数、血红蛋白浓度（Hb）、红细胞比容（Hct）和血小板（PLT）数均降低（P<0.05或P<0.01）,脾脏和肺脏指数升高（P<0.01）。与LPS对照组比较,低剂量治疗组和中剂量预防组小鼠体质量在注射LPS后24 h升高（P<0.05）,高剂量和中剂量预防组小鼠体质量在注射LPS后36 h升高（P<0.05）,中剂量预防组小鼠体质量在注射LPS后48 h升高（P<0.05）;高剂量治疗组小鼠WBC数升高（P<0.05）;低剂量治疗组和中剂量预防组小鼠RBC数升高（P<0.01）,低剂量治疗组和低、中、高剂量预防组小鼠Hb数升高（P<0.05或P<0.01）,低、高剂量预防组小鼠Hct数升高（P<0.05或P<0.01）,低、高剂量预防组小鼠PLT数升高（P<0.05）;中剂量治疗组小鼠肝脏指数降低（P<0.01）;高剂量治疗组小鼠肺脏指数降低（P<0.05）;低、高剂量治疗组和低、中、高剂量预防组小鼠脾脏指数均显著降低（P<0.05或P<0.01）。结论：银花泌炎灵片在体外和体内均具有抗细菌LPS的活性。     

二甲双胍联合MCT1抑制剂α-氰基-4-羟基苯乙烯治疗小鼠Lewis肺癌的研究

目的 探讨二甲双胍联合单羧酸转运蛋白1(monocarboxylate transporter 1,MCT1)抑制剂α氰基-4-羟基苯乙烯(CHC)干扰乳酸代谢是否有抗肿瘤作用。 方法 体外检测对照组、二甲双胍组(1 mmol/L、5 mmol/L)、CHC组(5 mmol/L)及联合用药组(二甲双胍5 mmol/L和CHC 5 mmol/L)24、48 h LL/2细胞的增殖、乳酸代谢的改变及24 h细胞凋亡变化。C57BL/6小鼠于右背侧皮下接种LL/2肿瘤细胞(5×105/只),建立小鼠Lewis肺癌模型,将28只荷瘤小鼠随机平均分为4组:对照组(0.1 mL生理盐水灌胃,同时给予0.1 mL生理盐水腹腔注射)、二甲双胍治疗组(二甲双胍灌胃,200 mg/kg,0.1 mL/只,同时给予0.1 mL生理盐水腹腔注射)、CHC治疗组(CHC腹腔注射,100 mg/kg,0.1 mL/只,同时给予0.1 mL生理盐水灌胃)和联合治疗组(同时给予上述剂量二甲双胍灌胃和CHC腹腔注射)。观察各组小鼠肿瘤生长、测量体积大小并进行肿瘤组织原位凋亡检测。 结果 在体外,联合使用二甲双胍和CHC可以显著增加肿瘤细胞的乳酸生成,同时抑制肿瘤细胞的增殖,与对照组、二甲双胍组和CHC组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。体内动物模型证实联合使用二甲双胍和CHC可以早期减缓肿瘤的生长,与对照组、二甲双胍组和CHC组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);同时促进肿瘤细胞的凋亡。 结论 二甲双胍联合CHC可以改变肿瘤细胞乳酸代谢,诱导细胞凋亡,具有一定的抗肿瘤作用。     

FTY720对体外混合培养淋巴细胞增殖和凋亡的影响

目的观察FTY720对体外混合培养小鼠脾脏淋巴细胞的增殖、分化和凋亡的影响。方法将C57BL/6J小鼠与BALB/c小鼠的脾脏淋巴细胞体外混合培养5 d,培养液中加入不同浓度的FTY720。分别运用MTT法和流式细胞仪检测在不同浓度FTY720作用下,混合培养淋巴细胞的增殖状况、细胞表型和凋亡率。结果当FTY720为400 ng/mL时,体外混合培养淋巴细胞的增殖即受到明显抑制,抑制率为47.6%(P<0.05);当FTY720为3 200 ng/mL时,其抑制率达到为51.6%,呈剂量依赖性。FTY720为1 600 ng/mL时,混合培养淋巴细胞中的CD4 CD25 T细胞比例显著增加(P<0.05)。FTY720在200 ng/mL时,混合培养淋巴细胞的细胞凋亡率即显著增加(P<0.05)。结论在小鼠混合淋巴细胞培养体系中加入高浓度的FTY720,能显著抑制淋巴细胞增殖能力,增加调节性细胞的比例并促进细胞凋亡。