一种病毒运送培养基的改良及其评价

目前我国临床实验室常用的病毒运送培养基多以商业化产品为主,但其效果未见相应的实验数据.本研究利用流感病毒PR8株、呼吸道合胞病毒Long株作为试验用病毒的代表,根据临床实际应用情况对病毒运送培养基的最适条件进行筛选和评价.     

甲型H1N1流感与严重急性呼吸综合征和人禽流感的异同

目的：评价^18F-脱氧葡萄糖（FDG）双探头符合线路断层显像（DHTC）结合血清肿瘤标志物分析对肺部肿块良恶性鉴别的应用价值，并对两种方法进行比较。方法：160例胸部X线或CT怀疑肺癌的患行FDG DHTC检查及三项肿瘤标志物－－癌胚抗原（CEA）、CYFRA21－1及神经特异性烯醇化酶（NSE）测定，两种检查间隔时间不超过2周。对肺部病变的FDG浓聚程度及特征进行分析，以局部斑块状明显浓聚灶且靶／非靶比值（T／N比）≥1．3为阳性（肺癌）；反之，肺部病变无明显放射性浓聚，或浓聚呈云片状、散在性模糊的影像且T／N比＜1．3为阴性（良性病变）。三项肿瘤标志物中有1项或1项以上超过正常值上限即为阳性（肺癌）。上述检查完成后1个月内得到病理等最终诊断结果。结果：127例患最终确诊为肺癌，另外33例为肺部良性病变。FDG DHTC对肺癌诊断的灵敏度、特异性和准确性分别为94．5％、84．8％和92．5％。血清肿瘤标志物测定对肺癌诊断的灵敏度、特异性和准确性分别为67．7％、84．8％和71．3％。卡方检验显示FDG DHTC对肺癌诊断的灵敏度和准确性均明显优于血清肿瘤标志物测定，但两的特异性一致。在7例FDG DHTC检查假阴性的肺癌患中，有4例血清肿瘤标志物测定为阳性，提示后对肺癌的诊断仍有一定的参考价值。结论：FDG DHTC检查对肺癌的诊断是一种灵敏可靠的方法。虽然血清肿瘤标志物测定对肺癌诊断的灵敏度和准确性均远低于FDG DHTC检查，但二综合分析仍有助于提高肺癌诊断的阳性率。     

中药抗流行性感冒作用机制研究进展

流行性感冒(简称"流感")是由流感病毒引起的感染性呼吸系统疾病。每次流感爆发都会在全球造成高发病率以及致死率,严重危害人类健康。中医药用于流感防治已有千年历史,其活性成分不仅可以直接靶向病毒,还具有调节炎症信号通路、抑制炎症因子风暴和提高免疫力的作用。本文对常见抗流感单味中药及中药复方在流感治疗中的作用及其机制进行综述,旨在为中西医结合防治流感提供思路与理论依据。     

板蓝根多糖的系统分离纯化与组成分析

目的建立板蓝根多糖的系统分离纯化方法,并对分离得到的均一多糖进行组成测定。方法以抗病毒活性较好的80%醇沉板蓝根粗多糖为研究对象,对其进行DEAE-Sepharose Fast Flow柱色谱、Sephacryl-200葡聚糖凝胶柱色谱以及高效凝胶色谱系统分离纯化。分别采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)和邻苯二甲醛(OPA)衍生化HPLC法对分离得到的板蓝根均一多糖进行单糖组成和氨基酸组成测定。结果利用系统分离纯化策略,从80%醇沉板蓝根粗多糖中分离得到2种均一板蓝根多糖(IRPS1A和IRPS1B)和2种均一板蓝根糖蛋白(IRPS2A和IRPS3A)。其中,IRPS1A与IRPS1B的单糖组成均为甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖;IRPS2A的单糖组成为半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖;IRPS3A的单糖组成为甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖。糖蛋白IRPS2A与IRPS3A均含有天门冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、组氨酸、甘氨酸、苏氨酸、精氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸,共14种氨基酸残基。同时,IRPS2A还含有酪氨酸残基。结论该系统分离纯化的策略可应用于板蓝根均一多糖(糖蛋白)的获取,为板蓝根多糖的结构分析及药理活性研究奠定基础。     

结直肠癌T分期评估中双源CT个体化低剂量扫描可行性测试探讨

目的探讨在结直肠癌患者双源CT扫描和T分期评估中应用个体化剂量调节方案降低患者辐射剂量的可行性。方法随机分配40例于术前行双源CT低剂量扫描,应用电流自动调制装置(CareDose 4D)并依据身体质量指数(BMI)分级制定个体化剂量调节方案;另40例术前行常规MSCT扫描作为对照组。以术后病理分期作为金标准,分别计算普通CT扫描组和低剂量扫描组的敏感度和特异度,然后比较两组诊断正确率有无统计学差异。扫描时测定每位患者的辐射剂量,并计算其有效剂量,比较普通CT扫描组和低剂量扫描组患者有效剂量有无统计学差异。结果与术后病理学T分期比较,普通MSCT扫描组的准确度为93.75%,DSCT低剂量扫描组的准确度为92.5%,两组之间无统计学差异(t=0.81,P>0.05)。DSCT低剂量扫描组患者的平均有效剂量为3.12mSv,常规MSCT扫描组患者的平均有效剂量为6.44mSv,前者显著低于后者(t=2.566,P<0.05)。结论应用个体化剂量调节方案对结直肠癌患者进行双源CT低剂量扫描可在不影响T分期评估准确率的情况下显著降低患者辐射剂量。     

基于NF-κB通路探讨六神胶囊对脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7炎症反应的影响

目的探讨六神胶囊的抗炎作用及机制。方法RAW264.7细胞分为六神胶囊组和地塞米松组,六神胶囊按9.76、4.88、2.44、1.22、0.61、0.31、0.15μg/ml梯度稀释;地塞米松按250、125、62.5、31.25、15.63、7.81、3.91μg/ml梯度稀释,选择细胞存活率大于90%的最大3个六神胶囊浓度和最大无毒剂量的地塞米松进行后续实验。RAW264.7细胞分为空白组,地塞米松组,模型组及六神胶囊高、中、低剂量组。除空白组外,其余各组采用脂多糖诱导建立炎症模型。造模后六神胶囊高、中、低剂量组分别加入筛选浓度的高、中、低浓度六神胶囊溶液各1 ml;地塞米松组加入筛选浓度的地塞米松溶液1 ml;模型组和空白组加入1 ml培养液。24 h后收集细胞上清液检测一氧化氮(NO)的浓度,ELISA法检测细胞中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的含量,实时荧光定量PCR法检测细胞中IL-1β、TNF-α、IL-6和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达,蛋白印迹实验检测核因子κB p65(NF-κB p65)、磷酸化核因子κB p65(p-NF-κB p65)、核因子抑制蛋白κB(IκBα)和磷酸化核因子抑制蛋白κB(p-IκBα)表达。结果选择六神胶囊1.22、0.61、0.31μg/ml浓度,地塞米松31.25μg/ml浓度进行后续实验。与空白组比较,模型组细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6及NO水平,TNF-α、IL-1β、IL-6和iNOS mRNA表达,p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达显著升高,IκBα蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,地塞米松组及六神胶囊中、高剂量组细胞TNF-α、IL-1β、IL-6及NO水平,TNF-α、IL-1β、IL-6和iNOS mRNA表达,p-IκBα和p-NF-κB p65蛋白表达均显著降低,IκBα蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01);与地塞米松组比较,六神胶囊高剂量组IL-1β水平降低、IL-6水平升高,TNF-αmRNA及p-NF-κB p65蛋白表达显著降低(P<0.01);六神胶囊高剂量组TNF-α、IL-1β含量,IL-6、TNF-αmRNA表达,p-NF-κB p65蛋白表达低于六神胶囊中、低剂量组(P<0.01)。结论六神胶囊在体外具有良好的抗炎活性,可能通过抑制NF-κB信号通路的激活,降低iNOS的表达,进一步抑制NO的合成和炎性细胞因子的产生,从而改善炎症反应,以高剂量效果较佳。     

银翘散体内抑制甲1型流感病毒FM1株复制作用的实验研究

目的：观察中药银翘散体内抑制甲1型流感病毒FM1株复制的作用。方法：以甲1型流感病毒FM1鼠肺适应株滴鼻感染BALB／c小鼠,并用病毒唑及高、中、低剂量银翘散干预相应组别小鼠,观察生存状态及检测肺指数,以苏木素-伊红染色（HE染色）法观察病理改变;将鼠肺悬液以空斑减少试验定量检测感染性病毒滴度,蛋白免疫印迹技术检测核蛋白（nucleoprotein,NP）表达。结果：银翘散可以减轻全身症状,降低肺指数;减少鼠肺病变范围及肺泡腔渗出物;降低鼠肺病毒滴度及鼠肺流感病毒NP表达量。结论：银翘散有体内抑制甲1型流感病毒FM1株复制的作用。     

支撑钢板治疗桡骨远端不稳定骨折

目的探讨桡骨远端不稳定骨折切开复位支撑钢板内固定治疗的疗效。方法对2001年1月至2005年9月通过手术治疗的桡骨远端不稳定骨折26例病例进行回顾性分析。按AO分型为C2或C3型,采用支撑钢板掌侧固定17例,背侧固定9例。结果26例患者全部获得随诊,握力恢复平均为对侧的78%,11例腕关节伸屈活动达健侧的70%~80%,4例背伸及掌屈均只达健侧的60%~80%,3例活动度在健侧60%以下。23例屈伸活动时无疼痛,3例有轻度疼痛。患者对手术后腕关节功能满意者21例(80.78%),较满意者4例(15.36%),不满意1例(3.86%)。按改良G reen和O’brien标准,18例患者(69.2%)为优,5例(19.2%)为良,3例(11.6%)为一般,优良率88.4%。结论切开复位支撑钢板内固定治疗桡骨远端不稳定疗效好,并发症少,术后配合合理的康复锻炼,能使腕关节功能达到最大的恢复。     

徐长卿水提物抗肝癌作用初探

目的 探讨徐长卿水提物抗肝癌的作用。方法 以徐长卿水提物作用于体外培养的HepG-2细胞株，观察其对HepG-2细胞生长曲线的影响及评价其抗肝癌作用。结果 徐长卿水提物浓度为60g／L和30g,／L时，能使HepG-2细胞的生长受到抑制，15g／L和7．5g／h时对细胞增殖没有明显的抑制作用。结论 徐长卿水提物浓度为60g／L和30g／L时，在体外细胞培养中对HepG-2细胞增殖有较好的抑制作用。     

流感病毒A/FM/47(H1N1)血凝素基因克隆、序列分析

目的对流感病毒A/Font Monmouth/47(H1N1)血凝素基因进行变异分析。方法用SPF鸡胚增殖毒株,提取病毒基因组总RNA,应用RT-PCR技术扩增该病毒株的HA基因,并克隆到pMD18-T载体上,测定HA基因核苷酸序列。结果该毒株的HA基因全长为1677bp,含有完整的阅读框架,编码545个氨基酸;BLAST序列比对结果显示,该毒株HA基因与其他H1基因核苷酸的同源性为98%。结论该毒株HA核苷酸序列发生了变异,出现多处碱基替换,可能是病毒毒力增强的原因。