金钱莲文献考证,原植物及商品调查

金线莲文献考证结果确知花叶开唇兰Anoectochilusroxburghii（Wall．）Lindl．为民间使用的地道品种。资源调查结果显示：金线莲商品药材品种单一，但资源稀少。列出开唇兰属（Anoec－tochilus)8种植物的植物分布概况，分种检索表，澄清了该属3种种缘十分相近药用植物营养体的主要区别。     

RAPD法在金线莲的鉴别研究中的应用

目的：金线链母（金线莲）与金线莲公（无线金线莲）是否为同一种植物Anoectochilus roxburghii历来有争议，为了准确鉴别这两种植物并搞清楚二者之间遗传变异。方法：本文运用RAPD技术，对同一采集地的具有不同叶面特征的金线莲进行了DNA指纹鉴定。结果：两者的DNA指纹图谱具有部分共同的位点，但又有各自的特征性位点。结论：二者具有较大的遗传变异。     

用RAPD鉴别金线莲及A.koshunensis

全世界共有兰科开唇兰属Anoectochilus植物35种，台湾有4种，均作为民间药物用于治疗高血压、糠尿病、肺结核、肾炎、蛇咬伤等。金线莲A.formosanus为台湾民间所喜用，市场上价格较高。金线莲常在开花前收获，但它与同属植物A.koshunensis在花期以外的时期很难从形态上区分。作者报道使用RAPD（随机扩增多态性DNA）技术区分这两种植物的研究结果。该技术为植物的鉴别提供了一个快速、便利的手段。DNA提取：新鲜叶片在400μL2×十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）提取液中研磨碎，氯仿-异戊醇（24：1）抽提，离心及95％乙醇沉淀处理后在4…     

RAPD技术在中药狼毒鉴别中的应用

目的 :为提高鉴别中药狼毒及同科植物和瑞香狼毒的准确性和可操作性 ,有必要建立一种科学的方法。方法 :用分子生物学技术随机扩增多态性DNA(RAPD)对 5个不同品种狼毒进行分析。结果与结论 :提供了 5种狼毒鉴别的RAPD扩增指纹图谱 ,具有鉴别意义     

RAPD技术在中药狼毒鉴别中的应用

目的：为提高鉴别中药狼毒及同科植物和瑞香狼毒的准确性和可操作性，有必要建立一种科学的方法。方法：用分子生物学技术随机扩增多态性DNA(RAPD)对5个不同品种狼毒进行分析。结果与结论：提供了5种狼毒鉴别的RAPD扩增指纹图谱，具有鉴别意义。     

道地药材建泽泻的RAPD研究

目的：为了探讨道地药材与非道地药材之间遗传变异的大小，并建立道地药材的品质鉴定方法。方法：运用了随机扩增多态DNA（RAPD）技术，对福建、江西、四川产的泽泻科植物泽泻Alisma orientalis进行了研究。结果：同种异地药材所形成的不同的居群，具有不同的遗传特征。结论：RAPD技术可作为鉴别道地药材的参考方法。     

甘肃产秦艽的DNA指纹图谱鉴别

目的 对产于我国甘肃省的中药秦艽的3种基源植物秦艽、麻花秦艽与小秦艽进行RAPD分析,建立具有鉴别意义的DNA指纹图谱.方法 采用RAPD分子标记对秦艽的基因组DNA进行PCR扩增,利用NTSYSpc 2.1和Popgene 3.2软件分析3种秦艽间的亲缘关系,构建树系图.结果 从80条RAPD引物中筛选出4条具有鉴别意义的多态性引物,在3种秦艽中共得到39个DNA条带,其中共有条带2条,多态条带37条.据此获得了能有效区别3种秦艽的多态性RAPD指纹谱.结论 甘肃产秦艽的3种基源植物遗传分化明显,RAPD方法能有效地将它们区分鉴别.     

红景天属4种植物RAPD分析与分类鉴定

目的 用RAPD技术对红景天属(Rhodiola L．)的大花红景天R．crenulata、长鞭红景天R．fastigiata、狭叶红景天R．kirilowii和高山红景天R．sachalinensis 4种药用植物进行分子水平鉴定。方法 CATB法提取红景天属原植物总DNA，以200条随机引物进行随机扩增。结果 用OPA4(AATCGGGCTG)、OPB7(GGTGACGCAG)、OPB18(CCACAGCAGT)、OPX14(ACAGGTGCTG)和OPZ13(GACTAAGCCC)作随机扩增引物进行随机扩增时，可得到识别这些物种基因组DNA的多态片段。结论 RAPD法能有效地鉴别红景天类药材，把大花红景天、长鞭红景天、狭叶红景天和高山红景天区分开。     

RAPD扩增分枝杆菌DNA优化条件及菌型分型的诊断应用

目的探讨随机扩增多态性DNA（Randomly amplified polymorphic DNA，RAPD）技术在分枝杆菌分型诊断中优化条件及其应用价值。方法优化RAPD技术扩增分枝杆菌DNA的奈件，并分别扩增深圳市临床病人分离株DNA，对比RAPD电泳条带特征。结果以条带稳定、丰富、清晰为标准，确定引物1 RAPD最佳反应条件为：50出反应体系中，含100ng模板DNA，2．5mmol／L MgCl2，2U DNA聚合酶，引物0．5μmol／L，dATP、dGTP、dCTP和dTTP各250μmol／L，反应40个循环，每个循环为：94℃1min，36℃1min，72℃2min。所扩增结核杆菌临床分离株的DNA条带丰富、清晰，各条带差异较明显。结论RAPD技术能较好地鉴别MTB和NTM。     

金线莲提取物对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用

金线莲（Herba Anoectochili）为兰科开唇兰属植物花叶开唇兰（Anoectochilus roxburghii（Wall．）lindl．）的全草，在民间素有“药王”、“神草”、“乌人参”等美称，其性甘、平，具有清热凉血、固肾平肝、祛风利湿等功效，常被应用于肝炎、肾炎、肺炎及小儿急惊风等症，是一味名贵珍稀中草药。由于野生金线莲药源稀少，曾一度限制了对金线莲的研究开发。     

ISSR-PCR在石斛种间鉴别中的应用

目的 采用ISSR-PCR方法对石斛属9种植物进行鉴别,探讨不同种石斛在DNA分子水平上的差异。方法 选取10条由SSR组成的引物,对9种石斛进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析。结果 10条引物中有7条扩增出多态性条带。每条引物可检测的多态性位点最少7个,最多14个,扩增片段大小为220-1260 bp。其中,引物UBC-807和UBC-864具有较高的多态性条带比率,均可以独立将所有被测种区分开来。结论ISSR-PCR作为一种简便、可靠的分子标记鉴定技术,可以作为石斛属种间鉴别的方法之一。     

不同产地和不同环境生长的金线莲的ISSR遗传特性分析

研究不同产地及生长方式的金线莲样本间遗传多样性和亲缘关系。 方法 以20份福建金线莲新鲜叶片为实验材料,采用ISSR-PCR分子标记技术,筛选出15条多态性好、扩增条带清晰的ISSR引物。经琼脂糖凝胶电泳成像后,统计其扩增条带数,运用NTSYS-Pc 2.1和POPGENE 32软件进行UPGMA聚类分析。 结果 共扩增出130条清晰可见的条带,多态性比率达100%,遗传相似系数分布在0.647 6～0.971 4,遗传距离分布在0.029 0～0.434 5,其中编号为3和4的样本具有较近的亲缘关系。聚类分析结果显示,当相似系数取0.78时,20份样本被分为3类,可以区分不同的产地和种类。 结论 运用ISSR标记技术,可以从分子水平上揭示福建省内金线莲的遗传多样性。     

随机扩增多态性DNA技术在中药红曲基原菌系统分类中的应用

目的：建立中药红曲基原菌的随机扩增多成性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析方法。方法：以ＣＴＡＢ法提取紫色红曲霉等７种红曲霉和１株土曲霉的基因组ＤＮＡ;溴化乙啶荧光强度和分光光度双重测定法确定ＤＮＡ浓度;琼脂糖凝胶电泳法检测ＰＣＲ扩增产物,ＰＨＹＬＩＰ３．５ｃ进行聚类分析。结果：从６０个随机引物中筛选出Ｓ２８２等１０个引物的扩增产物谱带多,特征好;红曲霉属种间指纹图谱差异较大,呈现出明显的ＤＮＡ扩增产物多态性。结论：ＲＡＰＤ分析技术可作为真菌系统分类的客观而有效的手段之一。     

15个STR基因座的种属特异性研究

目的研究15个STR基因座对常见9种动物的种属特异性，探讨其在法医学中的应用价值。方法对9种常见动物肌肉组织的DNA进行PCR扩增，ABI310遗传分析仪进行DNA分型，测定15个STR基因座的种属特异性。结果用15对SIR基因座引物分别对9种常见动物肌肉组织的DNA进行PCR扩增检测CSFIPO，B8S1179，D19S433基因座时，9种动物均有PCR扩增产物；检测1321S11，197S820，D13S317，D16S539，TPOX，D18S51，D5s818，FGA，D3S1358基因座时，部分动物有PCR扩增产物，其中TPOX，D21S11基因座扩增产物片段长度明显与人的不同。这9种动物在D2S1338、vWA、TH01基因座均没有扩增产物。结论在15个STR基因座中，3个基因座只对人DNA有扩增产物，有较好的种属特异性；9个基因座对人和部分动物均有扩增产物，但产物的片段大小与人不同，在进行个人识别时，可以用其分析DNA的种属来源；3个基因座对人和动物均有扩增产物，且片段长度相近，在进行个人识别时，应先作DNA种属来源检查。     

长爪沙鼠与实验大小鼠RAPD图谱比较研究

目的比较长爪沙鼠与实验大、小鼠的RAPD图谱，为实验室日常鉴别动物品种品系提供一种分子生物学方法。方法提取基因组DNA（封闭群沙鼠、近交系小鼠BALB／c和C57BL／6、封闭群小鼠KM、近交系大鼠F344和BN以及封闭群大鼠SD），用6条随机引物对其进行PCR扩增。结果在6条随机引物中，p1、p2、p3、p4和p6这5条引物扩增的条带差异较为明显，表现为不同的RAPD图谱。结论RAPD方法可用于鉴定长爪沙鼠与实验大小鼠的差异。     

贵州天麻野生与栽培品种的简单序列重复标记鉴定

目的:利用简单序列重复(SSR)分子标记鉴定贵州天麻4个居群的野生和栽培品种.方法:合成8对SSR引物用于天麻基因组DNA的PCR扩增.结果:除引物对16外均能很好地区分野生天麻、无性繁殖天麻及有性繁殖天麻,其中有性繁殖天麻均扩增出2条带,为杂合子;野生天麻及无性繁殖天麻只扩增出1条带,为纯合子.结论:天麻的自交及杂交是形成纯合与杂合的原因.SSR分子标记可有效地区分纯合子及杂合子,从而使其能够在分子水平鉴定野生和栽培天麻.     

Clinical Identification of Common Species of Dermatophytes by PCR and PCR-RFLP

Summary: To find a fast and efficient way of identifying seven common dermatophytes in clinical practice, we used the techniques of polymerase chain reaction (PCR) and PCR-restriction fragment length polymorphism (RFLP) targeting Topoisomerase Ⅱ gene. The DNA of 7 dermatophytes, along with Candida albicans, Aspergillus terreus and Aspergillus flavus were amplified by consensus primer dPsD1. They were then subjected to a second PCR with primers dPsD2 and species-specific primers PsT and PsME separately. 6 of the products generated by dPsD2 were digested with restriction enzyme Hinc Ⅱ. DNA fragments of 3390 bp and 2380 bp was amplified by using consensus primer dPsD1 and dPsD2 from the genomic DNA of each dermatophyte species separately. By combining the results of the two species-specific primer sets (PsT and PsME), all species of dermatophyte yielded unique sizes-set of PCR products expect for T. mentagrophytes and T. tonsurans.From the restriction profiles of Hine Ⅱ , 6 of the 7 dermatophytoses were diagnosed to species levelincluding T. mentagrophytes and T. tonsurans. By combining the results of the PCR and PCR-RFLP, the 7 common dermatophytes can be identified to species level. It is conclude that the multiplex PCR and PCR-RFLP identification targeting the DNA topoisomerase Ⅱ gene is rapid and efficient.     

对5个S180克隆细胞株RAPD特征的研究

目的运用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术建立S180的5个克隆细胞株的特异性图谱。方法运用23条引物对S180-S2D9、S180-S2D7、S180-S1F11、S180-S1H10、S180-S1B115个克隆细胞株的基因组DNA进行RAPD-PCR扩增,以琼脂糖电泳观察结果。结果筛选出3条在各克隆株扩增产物间有差异的引物。结论5个S180克隆细胞株的RAPD特征有明显区别。     

BALB/c突变无毛小鼠特异性免疫功能的研究

选用9条随机引物，对Wistar,WKY,F344三个品系的近交系大鼠进行了随机扩增多态性DNA（RAPD）分析。结果显示同一品系大鼠不同个体之间的RAPD图谱都相同，表明所测的三个品系大鼠内部遗传背景均一，在不同品系大鼠之间的RAPD结果有差异。Wistar与WKY之间，Wistar与F344之间，WKY与F344之间的共享度分别为87.9%,98.5%和89.2%。RAPD方法可以作为一种检测近交系大鼠种群内的遗传变异及区分不同品系近交系鼠的遗传检测方法。     

川木通的随机扩增多态性DNA与序列特征性扩增区域标记研究

目的采用随机扩增多态性DNA（random amplified polymorphic DNA,RAPD）法建立川木通的分子鉴定方法,为川木通的快速鉴定奠定基础。方法从100对随机引物中筛选出5对多态性丰富的RAPD引物进行川木通10个种的扩增分析,最终得到C13为阳性序列特征性扩增区域（sequence characterized amplified regions,SCAR）标记。结果阳性SCAR标记均可以进行川木通原植物与药材的分子鉴定引物,C13可以鉴定上述2种药典品种和商品主流品种（粗齿铁线莲、钝萼铁线莲）。结论RAPD法简便易行,为亲缘关系较近的多基原药材的鉴定提供了一种新方法。