柴胡栽培种的RAPD和AFLP遗传关系研究

目的 应用不同的分子标记进行柴胡药材干根遗传多样性分析,为柴胡栽培种鉴别和药材鉴别奠定基础。方法 以柴胡栽培种干根为材料,采用RAPD和AFLP两种分析方法。结果 以筛选到的3条随机引物对9个柴胡栽培种进行RAPD分析,共扩增出28条DNA带,平均每条引物组合扩增9.33条带,其中多态性带为6.67条,多态性比率为71.43%;而在AFLP分析中,筛选出4对特异性引物,共获得107条DNA带,平均每对引物扩增26.75条带,其中多态性带为23.25条,多态性比率为86.92%。经统计分析,9个柴胡栽培种RAPD和AFLP分析的Jaccard遗传相似系数分别介于0.61～0.93和0.39～0.86。UPGMA聚类分析,两种标记方法均可将9个柴胡栽培种聚为3大类群,聚类结果相似但不完全相同。结论 以柴胡药材干根为材料,RAPD和AFLP两种分子标记均可用于植物种间及种下遗传关系分析,且AFLP条带较多,多样性丰富,更有利于柴胡属植物多样性的分析。     

RAPD技术在中药狼毒鉴别中的应用

目的 :为提高鉴别中药狼毒及同科植物和瑞香狼毒的准确性和可操作性 ,有必要建立一种科学的方法。方法 :用分子生物学技术随机扩增多态性DNA(RAPD)对 5个不同品种狼毒进行分析。结果与结论 :提供了 5种狼毒鉴别的RAPD扩增指纹图谱 ,具有鉴别意义     

石斛属植物的RAPD指纹图谱聚类分析

目的建立石斛属植物RAPD指纹图谱,探讨RAPD分子标记技术在石斛属种类鉴别上的应用。方法用RAPD方法构建石斛属内7种石斛及一种石仙桃植物RAPD指纹图谱,对其扩增条带进行分析。结果共扩增出53条带,分布在0.25～1.3kb之间,其中39个条带有遗传多样性,约占总数的73.6℅。经聚类分析不同石斛间的遗传距离分布在0.04762～0.68421,平均遗传距离为0.44380,而石仙桃与石斛属植物的平均遗传距离为0.71734。结论石斛属植物的遗传多态性丰富,与种外植物遗传距离较大,RAPD技术可作为石斛属植物鉴别的有效方法。     

金钗石斛及其相似种RAPD优化和DNA多态性分析

目的:以金钗石斛为材料,建立石斛的RAPD优化条件,应用于石斛相似种的DNA多态性分析.方法:分别设置模板DNA,Mg2 ,Taq DNA聚合酶,dNTPs,引物的浓度梯度,优化RAPD反应体系.结果:在25 μl总反应体系中,以上反应物的用量分别为100 ng,3.0 mmol/L,1.0 U,0.2 mmol/L,0.4 μmol/L时所获得的石斛属DNA指纹图谱谱带型清晰、重复性好.其中用S48 扩增的DNA指纹图谱具有更大的相似性,适合于石斛真伪鉴别;而S90 扩增的片段具有明显的多态性,适合于石斛遗传分化研究.结论:优化后的RAPD方法可作为研究石斛属植物的遗传多样性及真伪鉴别的有效方法.     

ISSR-PCR在石斛种间鉴别中的应用

目的 采用ISSR-PCR方法对石斛属9种植物进行鉴别,探讨不同种石斛在DNA分子水平上的差异。方法 选取10条由SSR组成的引物,对9种石斛进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析。结果 10条引物中有7条扩增出多态性条带。每条引物可检测的多态性位点最少7个,最多14个,扩增片段大小为220-1260 bp。其中,引物UBC-807和UBC-864具有较高的多态性条带比率,均可以独立将所有被测种区分开来。结论ISSR-PCR作为一种简便、可靠的分子标记鉴定技术,可以作为石斛属种间鉴别的方法之一。     

珍稀中草药金线莲的RAPD研究

为了鉴别金线莲的品种,探索同属植物之间的亲缘关系及同种植物不同产地的遗传变异,并制定正品金线莲的DNA指纹图谱,采用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对兰科开唇兰属植物花叶开唇兰Anoectochilus roxburghii(Wall．)．Lindl．、台湾开唇兰A.formosanus Hay．进行了鉴定,结果选择的7个引物对3个品种共扩增出98个位点,其中3个引物为高特异性引物。结论 RAPD技术不仅能鉴别种间差异,而且能揭示同种不同产地植物的遗传变异。     

小鼠肝癌H22细胞克隆株的RAPD分析

目的应用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术检测小鼠肝癌H22细胞克隆株的遗传变异。方法用47条引物对小鼠肝癌H22细胞的4个克隆株H22-H8D8,H22-H2G4,H22-H2E10,H22-H2C4基因组DNA进行RAPD分析。结果47条引物均能扩增出明显的条带,条带数多为4~10条,片段大小在200~2000 bp之间。其中4条引物的扩增条带具有多态性,表现为带的有无、移动和强弱差异。结论RAPD技术可以用来检测小鼠肝癌H22细胞克隆株基因组之间的差异。     

淋球菌RAPD分型的引物筛选与应用

目的为了研究不同淋球菌菌株的基因多态性,了解不同菌株之间的亲缘关系,选择适当的随机引物。方法以淋球菌基因组DNA为模板,对淋球菌进行RAPD扩增,选择多态性好、重复性好、稳定性强的随机引物,并用S38号引物对不同淋球菌基因组DNA进行指纹图谱区分。结果从Sagon公司50条RAPD随机引物中筛选出8条扩增效果良好的引物,经RAPD扩增出的淋球菌指纹图谱间有明显不同的DNA多态性,可对不同菌株进行聚类分析。结论利用RAPD技术对淋球菌进行随机引物的筛选,可为今后淋球菌的分子流行病学研究奠定基础。     

ISSR-PCR鉴别绞股蓝属7种植物

目的 采用ISSR-PCR技术对绞股蓝属(Gynostemma BI.)绞股蓝G.pentaphyllum、五柱绞股蓝G.pentagynum、心籽绞股蓝G.cardiospermum、长梗绞股蓝G.longipes、喙果绞股蓝G.yixingense、疏花绞股蓝G.laxiflorum、广西绞股蓝G.guangxiense 7种药用植物进行DNA分子水平鉴定.方法 CTAB法提取绞股蓝属植物总DNA,以57条ISSR引物进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析.结果 筛选出产物清晰稳定的14条引物,其中引物UBC-873与UBC-895具有较高的多态性条带比率,均可独立区分7种绞股蓝属植物.结论 ISSR-PCR分析可有效区分鉴别常见绞股蓝属植物.     

甘肃省半夏种质资源遗传多样性分析

运用荧光标记引物的扩增片段长度多态性(AFLP)分子标记技术,对50份甘肃半夏样品进行了DNA指纹图谱构建和遗传差异分析。选出的8对AFLP引物共扩增出517条带,其中396条具有多态性,多态性位点百分率为75．8％,平均每对引物扩增出64．6条带和49．5个多态性条带。系统聚类分析结果表明所有半夏AFLP指纹均不相同,来源地相同的半夏表现出相对密切的亲缘关系,甘肃省西和县的半夏同天水市的半夏遗传差异明显。聚类分析结果获得了Bootstrap校验的支持。甘肃省半夏遗传多样性十分丰富,AFLP分子标记可有效应用于半夏种质资源鉴别和遗传多样性分析。     

陕西产秦艽质量变异与遗传多样性研究

目的 研究陕西省不同产地秦艽的质量差异,对其遗传多样性进行检测,探讨药材质量和其遗传基础的关系。方法 采用HPLC法测定不同产区秦艽药材中的指标成分,进行HPLC指纹图谱分析,计算并比较相似度。依据指纹图谱中的共有峰特征,对不同药材样品进行聚类分析。对药材中提取的总DNA进行RAPD分析,计算遗传距离并聚类。结果 陕西省不同产区秦艽药材的质量具有一定的差异,不同产区秦艽药材也表现出一定的遗传多样性。陕西省不同产区的秦艽药材质量变异与遗传多样性之间不具有明显的相关性,而表现出与产地的相关性。结论 产地对陕西秦艽药材质量的影响更为重要,提示道地秦艽质量的形成可能属于生境主导型。     

大叶秦艽抗炎、调节免疫有效部位的初步研究

目的:研究大叶秦艽抗炎、调节免疫的有效部位。方法:复制大鼠佐剂性关节炎(AA)模型,观察大叶秦艽四个溶剂部位的抗炎作用;采用刀豆素A(ConA)诱导脾T淋巴细胞的增殖反应,通过体内、外实验,分析对脾T淋巴细胞增殖作用。结果:大叶秦艽石油醚部位(QS)、正丁醇部位(QZ)、水溶部位(QW)对福氏完全佐剂引起的局部炎症和免疫性炎症有抗炎作用;QZ体内对ConA诱导的大鼠脾T淋巴细胞增殖有抑制作用,而体外四种提取物对ConA诱导的脾T淋巴细胞增殖均呈现出抑制作用。结论:大叶秦艽石油醚、正丁醇、水提取物均有抗炎作用,正丁醇提取物有调节免疫作用。     

颈复康颗粒中羌活、秦艽的鉴别研究

目的：建立颈复康颗粒中羌活、秦艽的鉴别方法。方法：采用薄层色谱法对颈复康颗粒方中羌活、秦艽所含紫花前胡苷、龙胆苦苷进行定性鉴别。结果：斑点清晰,分离度理想,各斑点耐值适中。结论：本研究中用于鉴别颈复康颗粒中羌活和秦艽的方法操作简便、准确,具有较好的实用性。     

中药龙胆药效学及临床应用研究展望

[目的]介绍了中药龙胆现代研究概况,为开展龙胆的进一步研究与开发提供参考。[方法]以国内外有关文献为依据进行整理和归纳。[结果]阐述了龙胆药效学、中药制剂、中药临床等方面的研究概况。[结论]目前关于龙胆的中药药效学、中药临床等方面已进行了较多的研究,但对道地药材严龙胆的质量评价、商品消失的原因及其中药资源种群动态变化方面的研究,相对来说比较欠缺,值得开展研究。     

龙胆的形态组织学研究

目的：研究龙胆药材的形态组织学特征。方法：对不同产地及不同品种的龙胆进行了性状鉴别和显微鉴别。结果：通过性状鉴别研究发现,不同品种、不同产地的龙胆药材在根的粗细及长短、表面特征和断面等方面有差异;经显微鉴别发现,龙胆药材的横切面特征主要通过外皮层、内皮层、裂隙和髓来加以区分,龙胆药材的粉末显微特征在外皮层碎片、内皮层碎片、草酸钙针晶、厚壁细胞和纤维这几个方面有区别,并绘制了清源产粗糙龙胆、玉溪产坚龙胆和河南产条叶龙胆的横切面组织详图、横切面简图及粉末图。结论：不同品种龙胆在外观形态和显微组织上有较大区别,而同一品种龙胆在不同产地因其生长环境不同而使其外观形态也有所区别。     

甘肃产中药秦艽资源调查

通过野外采集考察、植物形态学研究、有关标本查阅及本草学考证,整理出甘肃秦艽组植物6种1变种,并对其分类、形态特征、分布、资源状况进行简要综述,以探讨甘肃产中药秦艽原植物资源,为中药秦艽的进一步开发利用提供科学依据。     

独活寄生颗粒的质量标准研究

目的:建立完善独活寄生颗粒的质量控制标准。方法:以薄层色谱法对处方中的独活、秦艽、地黄进行定性鉴别;以高效液相色谱法对秦艽中的龙胆苦苷进行含量测定。结果:在薄层色谱中均可检出独活、秦艽、地黄的特征斑点;龙胆苦苷在0.6408～9.612μg间线性关系良好,r=0.9994,平均加样回收率为99.91%,RSD=1.3%,结论:本方法简便可行、重复性好,可用于独活寄生丸的质量控制。     

龙胆草对人黑素细胞增殖及黑素合成的影响

目的探讨龙胆草对人黑素瘤细胞增殖及黑素合成的影响。方法采用MTT法测定龙胆草对人A375黑素瘤细胞增殖的影响,NaOH裂解法测定黑素合成,并与8-MOP的结果进行比较。结果0.1 mg/mL、0.2 mg/mL和0.5 mg/mL龙胆草对人A375黑素瘤细胞增殖无影响,0.1 mg/mL、0.2 mg/mL和0.5 mg/mL龙胆草对人A375黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑素生成均有较强的剂量相关性激活作用,0.2 mg/mL及0.5 mg/mL龙胆草与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论龙胆草对培养的人黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑素生成有较强的剂量相关性激活作用。     

超高效液相色谱法测定四川松潘3种秦艽中马钱苷酸和龙胆苦苷的含量

目的采用超高效液相色谱（ultra performance liquid chromatography,UPLC）法对四川省松潘地产3种秦艽中马钱苷酸和龙胆苦苷含量进行测定,并考察海拔高度对其含量的影响。方法采用BEH C18（2.1mm×50mm,1.7μm）色谱柱,乙腈-0.1%醋酸溶液为流动相;流速为0.35ml/min,检测波长为254nm,同时测定马钱苷酸和龙胆苦苷的含量。结果马钱苷酸和龙胆苦苷浓度分别在9.9～157.8μg/ml和15.8～252.5μg/ml范围内,与峰面积成良好的线性关系（r〉0.999 8）;平均加样回收率分别为101.23%、99.78%,相对标准偏差（relative standarddeviation,RSD）分别为1.69、1.94。结论四川省松潘地区所产3种秦艽中马钱苷酸和龙胆苦苷的含量符合《中华人民共和国药典》质量标准,且含量远远高于药典要求,其中（大叶）秦艽和粗茎秦艽指标性成分含量与海拔高度呈高度的相关性;所建立的质量控制方法快捷、准确、灵敏度高、重复性好,可用于秦艽药材的质量控制。     

加工方法对龙胆生药中龙胆苦甙含量的影响

报道加工方法对龙胆生药中龙胆苦甙的影响。结果表明：影响龙胆苦甙含量的主要因素是酶解，因此，龙胆生药加工应有采集洗净后，用暴晒或烘烤的方法尽快干燥，以避免酶解的破坏。龙胆药材加工饮片，浸洗时深出和酶解均是主要因素，因此，最好是直接切段，不宜再浸洗。研究结果为制定合理、规范的加工方法提供了科学依据。