1,3,4-tri-O-galloyl-6-O-caffeoyl-β-D-glucopyranose,a new anti-proliferative ellagitannin,regulates the expression ofmicroRNAs in HepG2 cancer cells

目的miRNA在细胞的增殖,分化和凋亡中起重要作用。1, 3, 4-三-O-没食子酰基-6-O-咖啡酰基-β-D-吡喃葡萄糖
（BJA32515）是从日本蛇菰中分离的天然多酚化合物,该化合物对肿瘤细胞的增殖和miRNA的影响未见报道。本文旨在
研究BJA32515对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用以及对miRNA表达的影响。方法采用CCK-8的方法检测HepG2细
胞的增殖;用流式细胞法检测HepG2细胞的凋亡;采用miRNA 芯片分析方法测定HepG2细胞的miRNA 表达以及用
RT-PCR的方法验证miRNA的表达。结果BJA32515以时间和剂量依赖的方式抑制HepG2细胞的增殖,并促进细胞的凋
亡。miRNA芯片结果显示,BJA32515能诱导HepG2细胞33个miRNA的表达上调以及59个miRNA的下调。RT-PCR结
果也证实BJA32515 可诱导let-7a 和miR-29a 的上调以及miR-373 和miR-197 的下调,与芯片分析的结果一致。结论
BJA32515抑制HepG2细胞增殖的作用机制与miRNA的表达调控有关。     

内毒素血症大鼠心肌组织miRNA差异表达

目的分析内毒素又称脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）血症大鼠心肌组织miRNA表达谱变化,探讨miRNA在内毒素血
症心肌损伤中的作用。方法20只雄性SD大鼠随机分为对照组（n=10）和LPS组（n=10）。LPS组腹腔注射LPS 10 mg/kg,对照
组腹腔注射等量生理盐水。24 h后颈脱臼处死大鼠,取心肌组织。Real-time PCR检测TLR4、TNF-α、IL-1β表达水平,透射电镜
观察其超微结构变化。miRNA芯片筛选心肌组织中差异表达的miRNA,Real-time PCR验证候选miRNA实际表达水平。结
果LPS组大鼠心肌组织TLR4、TNF-α、IL-1β表达明显升高,心肌细胞发生胞质空泡,线粒体水肿、结构破坏等超微结构改变。
芯片技术及Real-time PCR 证实LPS 组大鼠心肌组织中miR-194-3p,miR-344a-3p,miR-465-3p,miR-501-5p,miR-3596c,
miR-185-3p,miR-877显著上调,miR-208b-3p,miR-547-3p,miR-141-3p,miR-28-5p,miR-3585-5p显著下调。结论内毒素血症
大鼠心肌组织中发现的这些差异表达miRNA可能与其心肌损伤发生有关。
     

肝移植术后稳定生存者外周血中差异表达miRNA及其功能预测

目的寻找肝移植术后长期稳定生存者外周血中有意义的生物学标志物。方法纳入肝移植术后稳定存活患者29例（STA
组）,反复排斥反应者10 例（RJ 组）,健康对照者17 例（HC 组）,利用芯片检测各组PBMCs 中microRNAs 的表达谱,并用
Real-time PCR对差异表达的microRNAs进行验证。结果芯片结果显示STA组对比于RJ组共13个microRNA表达明显下调,
经Real-time PCR验证3个microRNA（miR-106b, miR-18b, miR-340）表达下调。结论肝移植患者外周血miR-106b、miR-18b、
miR-340可作为肝移植术后潜在标志物。
     

血清miR-103可作为乳腺癌潜在的诊断标记物

摘要：目的探究血清miR-103在乳腺浸润性癌患者中表达的诊断价值及其与乳腺癌临床病理特征的关系。方法搜集50例首
治的乳腺癌患者的血清及相应的石蜡包埋组织和50例正常女性的血清作为对照,从血清中提取总RNA,运用荧光定量PCR的
技术检测miR-103在乳腺癌和正常人血清中的表达情况。运用SPSS16.0软件行t检验、ANOVA、χ2检验、秩和检验及MedCalc
软件进行受试者工作特征曲线（ROC）分析。结果与对照组相比,miR-103在乳腺癌患者血清中表达量显著上调（P<0.01）,血清
中miR-103 上调的相对表达量与乳腺癌临床分期(P<0.05)、淋巴结转移（P<0.05）相关。miR-103 所得ROC 曲线下面积为
84.3%,区别乳腺癌和正常人的敏感性和特异性分别为84%、70%。结论血清miR-103可作为乳腺癌一项潜在的诊断标记物,
并对乳腺癌的临床病理特征具有提示作用。
     

miR-216a在胰腺癌组织中的表达及临床意义

目的分析20例胰腺癌及胰腺良性病变组织中miR-216a的表达差异,探讨miR-216a在胰腺癌中表达的临床意义及潜在
应用价值。方法收集14例胰腺癌患者手术标本的癌组织,6例胰腺良性病变组织作为对照。采用Agilent人microRNA寡核苷
酸基因芯片(V12.0)在基因组范围内检测20例组织标本的miR-216a表达,并分析其与胰腺癌临床病理参数的关系。结果胰腺
癌组织中miR-216a的表达显著低于胰腺良性病变组织（P=0.000）,miR-216a在胰腺癌组织中的表达与患者年龄、性别、吸烟、临
床分期、局部淋巴结转移,远处转移、CA19-9浓度、肿瘤分化程度、神经束膜侵犯、脉管侵犯均无相关性（P>0.05）,而与肿瘤T分
期具有显著统计学意义（P=0.002）。结论miR-216a在胰腺癌的发生、发展过程可能发挥重要作用,检测miR-216a有望成为胰
腺癌新的肿瘤标记物或预后因子。
     

卵巢癌患者血浆miRNA水平与顺铂化疗敏感性的相关性研究

目的探讨卵巢癌患者血浆miRNA分子标志物水平与铂类化疗敏感性的相关性。方法应用实时定量PCR方法检测48例卵巢癌患者化疗前后血浆中miRNA的表达,13例体检正常者为内参对照,观察卵巢癌患者铂类化疗药物的疗效及预后的关系。结果初检的11种miRNA中,仅有5种miRNA（miR-124,miR-145,miR-22,miR-106a,miR-142）能够在外周血中检测出。其中3种miRNA（miR-22,miR-106a,miR-142）在正常人和卵巢癌患者的外周血中表达水平比较差异有统计学意义（P＜0．01）。患者化疗后外周血中仅miR-22水平显著升高（约3．2倍）,且miR-22水平高者对化疗反应多数敏感,反之不敏感。患者外周血miR-22的表达水平与其预后呈正相关（P＜0．05）。结论血浆中miR-22,miR-106a,miR-142水平升高可能参与了卵巢癌的发生发展,化疗患者敏感者仅miR-22呈高表达,不敏感者miR-22呈低表达,提示其可作为预测化疗敏感性及预后的指标之一。     

miR-128a在肝细胞癌中表达上调并通过靶向调控RND3 促进肝癌细胞增殖

目的检测MicroRNA-128a（miR-128a）在肝细胞癌中的表达情况并探讨其在肝癌细胞中的生物学功能及机制。方法收
集19例肝细胞癌及对应癌旁组织,运用qRT-PCR技术检测miR-128a 在肝细胞癌和对应癌旁组织及肝癌细胞株中的表达;应用
miR-128a mimics或inhibitor转染人肝癌细胞,MTT检测转染后细胞增殖活力变化;软件预测miR-128a的潜在靶点RND3,并用
双荧光素酶报告实验证实miR-128a与RND3 3’UTR结合,qRT-PCR和Western blot检测miR-128a潜在靶点RND3的表达变化;
Western blot检测细胞周期蛋白变化。结果在肝细胞癌组织中miR-128a的表达显著高于对应的癌旁组织（P<0.05）;miR-128a
促进肝癌细胞增殖（P<0.05）;在肝癌细胞中miR-128a通过与RND3 3’URT结合下调RND3 mRNA和蛋白的表达（P<0.05）;抑
制miR-128a的表达可以导致cyclin B1、cyclin D1 和CDK4表达下调。结论miR-128a在肝细胞癌中表达上调并通过靶向调控
RND3促进肝癌细胞增殖。
     

结直肠癌患者血浆与组织中微小RNA表达水平的临床研究

目的　探讨结直肠癌（CRC）患者术前、术后血浆微小RNA（miRNA）表达水平变化,以及术前血浆与癌组织miRNA表达水平的相关性。方法　选取2014年6月—2016年8月同济大学附属上海第十人民医院胃肠外科就诊的CRC患者32例,另选取同期体检健康者33例。采集健康者及CRC患者术前、术后1个月外周静脉血,留取CRC患者癌及癌旁组织。通过实时荧光定量聚合酶链反应检测血浆、癌组织与癌旁组织中miR-21、miR-17、miR-145、miR-15b、miR-150表达水平。结果　与健康者比较,CRC患者术前血浆miR-21、miR-17、miR-145、miR-15b表达水平上调（P<0.05）;与术前比较,CRC患者术后1个月血浆miR-21、miR-17、miR-15b表达水平下调（P<0.05）;与癌旁组织比较,CRC患者癌组织中miR-21、miR-17、miR-145、miR-15b表达水平上调,miR-150表达水平下调（P<0.05）。相关性分析显示,CRC患者术前血浆与癌组织miR-21（r=0.516,P=0.002）、miR-15b（r=0.526,P=0.001）表达水平呈正相关。结论　CRC患者血浆和癌组织miR-21、miR-17、miR-145、miR-15b表达水平失调,其中血浆miR-21、miR-15b有望成为CRC新型非侵袭性诊断标志物。     

鼻咽癌患者血浆miR-24异常表达的临床意义

目的探讨miR-24在鼻咽癌患者血浆中的表达及临床意义。方法收集2007年12月~2011年6月在南方医院耳鼻喉科住
院的初诊鼻咽癌患者血浆217例,以同期住院的慢性化脓性中耳炎或慢性鼻窦炎患者血浆73例作为对照,利用荧光定量PCR的
方法进行miR-24 表达的检测并结合临床资料分析其临床意义。结果血浆miR-24 在鼻咽癌组的相对表达水平为对照组的
4.808倍,差异具有显著统计学意义（P<0.001）;血浆miR-24在不同T分期之间有统计学差异（P=0.007）,miR-24与N分期呈负
相关（P=0.028）;鼻咽癌病人血浆EBV-DNA与血浆miR-24呈负相关（P=0.048）;治疗后血浆miR-24含量较治疗前下降差异有
显著统计学意义（P=0.001）。结论血浆miR-24可作为肿瘤分子标志物用于鼻咽癌早期诊断及预后分析。
     

高表达Ck2β与大肠癌发生和转移的相关性研究

摘要：目的探讨ck2β蛋白在正常大肠粘膜、大肠腺瘤和大肠癌组织中的表达及其在大肠癌发生及转移中的作用。方法
采用免疫组化方法检测46例正常大肠粘膜组织、20例大肠腺瘤及66例大肠癌组织中ck2β蛋白的表达。用RNA干扰技术
沉默大肠癌细胞中ck2β蛋白表达,Western blot 实验检测干扰效果;平板克隆形成实验检测细胞增殖能力的变化;Transwell
侵袭小室实验检测细胞侵袭能力的变化。结果ck2β在正常大肠粘膜组织中不表达或弱表达,核表达阳性率为
8.7%,浆表达阳性率为13.0%;在大肠腺瘤组织中中度表达,60%呈核阳性表达,40%呈浆阳性表达;而在大肠癌组织中,
ck2β呈强阳性表达,核表达阳性率为75.8%,浆表达阳性率为62.1%,三者间差异有统计学意义(P<0.05)。ck2β蛋白表达与
大肠癌的淋巴结转移密切相关,伴发淋巴结转移的大肠癌组织ck2β阳性表达明显高于无淋巴结转移者(P<0.05)。体外实
验发现,沉默大肠癌细胞中ck2β的表达能显著抑制细胞的增殖及侵袭能力。结论ck2β蛋白的表达与大肠癌的发生和转
移密切相关。
     

VEGF和miR-205及靶蛋白Ezrin和Lamin A/C在卵巢癌中的表达及意义

目的：分析血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),miR-205,Ezrin,Lamin A/C在卵巢
癌组织中的表达及意义。方法：采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测卵巢癌患者和
正常女性血清中VEGF的含量;免疫组织化学检测上皮性卵巢癌组织、卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中血管内
皮细胞生长因子受体-1(vascular endothelial cell growth factor receptor-1,VEGFR-1),VEGFR-2,Ezrin,Lamin A/C蛋白的
表达情况和CD31所标记的微血管密度(microvessel density,MVD);采用荧光定量PCR方法检测卵巢上皮性癌组织、
卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中miR-205,Ezrin和Lamin A/C的相对表达量。 结果：VEGF在上皮性卵巢癌患者
血清中的表达水平为(116.10±11.94),高于正常女性(40.04 ± 4.97,P<0.05);VEGFR-1和VEGFR-2在卵巢上皮性癌组织
中的阳性表达率分别为75.9%和91.4%,高于卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中的阳性表达率(P<0.05),VEGFR-1和
VEGFR-2在卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05);MVD在上皮性卵巢癌组织中的计
数为(7.56±0.51),高于正常卵巢组织(1.22±0.56,P<0.05),MVD在卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中的表达差异无
统计学意义(P>0.05);miR-205 在上皮性卵巢癌组织中的相对表达量为(0.106±0.035),高于正常卵巢组织中的相对表达
量(0.0007±0.0005,P<0.05),miR-205 在卵巢良性肿瘤组织中的相对表达量为(0.0002±0.0003),高于正常卵巢癌组织中
的相对表达量,但差异无统计学意义(P>0.05);免疫组织化学结果显示：Ezrin和Lamin A/C在上皮性卵巢癌组织中的
阳性表达率分别为51.7%和60.3%,低于卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中的阳性表达率(P<0.05),Ezrin和Lamin A/C
在卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05);RT-PCR结果显示：Ezrin和Lamin A/C在上
皮性卵巢癌组织中的相对表达量低于正常卵巢组织中的相对表达量(P<0.05);Ezrin和Lamin A/C在卵巢良性组织中的
相对表达量高于在上皮性卵巢癌组织,但差异无统计学意义(P>0.05)。 结论：VEGF在上皮性卵巢癌患者血清中表达
上调;miR-205在上皮性卵巢癌组织中表达上调;差异蛋白Ezrin和Lamin A/C在上皮性卵巢癌组织中表达下调,提示
VEGF和miR-205及靶蛋白Ezrin和Lamin A/C与卵巢癌的侵袭、转移相关。     

“看似正常者”外周血单个核细胞炎症因子的表达变化

目的观察“看似正常者”体内炎症因子表达是否已经发生变化。方法按照JUPITER研究的入选标准和排除标准,从西安
交通大学第一附属医院体检中心选取正常对照和“看似正常者”各14例,采集晨空腹静脉血5 ml后,密度梯度离心法提取外周
血单个核细胞,提取RNA并进行real-time PCR检测各炎症因子的表达。同时留取血浆行IL-6和TNF-α的ELISA检测。结果
“看似正常者”促炎因子TNF-α mRNA表达增高,血浆浓度升高;促炎因子IL-6 mRNA表达及血浆浓度,MCP-1 mRNA表达仅
表现出轻微升高趋势;MCPIP由MCP-1诱导产生,mRNA表达升高;抗炎因子IL-10 mRNA表达降低。结论“看似正常者”体
内炎症因子表达已发生变化,促炎因子表达相对升高,抗炎因子表达相对降低。
     

miR-199a在肾细胞癌中的表达与临床病理特征及预后的关系

目的检测miR-199a在肾细胞癌及癌旁相对正常肾组织中的表达量,分析其相对表达量和肾细胞癌相关的临床病理特征
及其对肾细胞癌预后判断的意义。方法采用RT-qPCR检测67例肾细胞癌及癌旁正常组织miR-199a表达,分析表达的差异与
临床病理特征间的关系。结果在肾细胞癌和癌旁相对组织中均有不同程度的表达,在肾细胞癌的表达显著低于癌旁相对正常
组织,均值13.7倍（P=0.003）。miR-199a的表达在不同肿瘤浸润程度及复发程度之间存在差别（P<0.05,χ2=4.215）,
而与年龄、组织学类型、淋巴结转移、远处转移、Fuhrman分级等无统计学关联（P>0.05）。miR-199a下调组生存期明显低于对照组（Log-rank
test,P=0.017）。结论miR-199a表达下调与肾癌患者原发肿瘤浸润程度、复发及预后不良有关,可作为评估肾癌预后有价值的
一种指标。
     

COX-2、PKC-α和miR-101 在胃癌中的表达及相关性

目的探讨miR-101、蛋白激酶C-α（PKC-α）和环氧合酶2（COX-2）在胃癌中的表达及相关性。方法（1）荧光定量RT-PCR
法检测57例胃癌组织标本对应的正常胃粘膜标本中miR-101的表达水平;（2）Western blotting检测57例胃癌组织标本对应的
正常胃粘膜标本中PKC-α蛋白和COX-2蛋白的表达水平。结果（1）胃癌组织中miR-101表达明显低于正常胃粘膜（P<0.05）;
胃癌组织中COX-2及PKC-α蛋白表达高于正常胃粘膜（P<0.05）;（2）胃癌中COX-2蛋白的表达与其分化程度、浸润深度、淋巴
结转移、肿瘤病理分期有关（P<0.05）;胃癌中PKC-α蛋白的表达与肿瘤分期和淋巴转移有关（P<0.05）;（3）胃癌组织中COX-2蛋
白相对表达水平与胃癌组织中PKC-α蛋白表达呈正相关,与胃癌组织中miR-101表达呈负相关,两者相关具有统计学意义（r=
0.531,P<0.05;r=-0.627,P<0.05）。结论miR-101、PKC-α和COX-2可能参与了胃癌的发生发展;miR-101和PKC-α可能是抑制
COX-2在胃癌中表达的新靶点。
     

WWOX和CD133在结直肠癌中的表达及临床意义

目的检测结直肠癌（CRC）组织中WWOX和CD133蛋白的表达情况及其相互之间的关系,并探讨它们与CRC患者临床
病理参数之间的关系。方法采用免疫组织化学ElivisionTM plus 法检测174 例CRC 组织和80 例正常结直肠黏膜组织中
WWOX和CD133蛋白的表达情况。结果在CRC组织中WWOX和CD133蛋白表达的阳性率分别为41.4%和53.4%;对照组
中WWOX和CD133 蛋白表达的阳性率分别为87.5%和5.0%,其表达差异在两组之间有统计学意义（P<0.05）。WWOX和
CD133蛋白表达与CRC患者肿瘤组织的不同分化程度、浸润深度、淋巴结是否转移以及不同Duke分期等之间差异均有统计学
意义（P<0.05）,且WWOX蛋白表达的阳性率与CD133蛋白的阳性率之间呈负相关关系（P<0.05）。Kaplan-Meier法生存分析结
果显示在CRC组织中WWOX蛋白阳性表达组患者术后总的存活时间明显高于其阴性组患者,而CD133蛋白阳性组患者术后
总的存活时间明显低于其阴性组患者,log-rank单因素分析差异有统计学意义。Cox多因素分析显示WWOX和CD133蛋白的
阳性表达及Duke分期是影响CRC患者术后生存的独立预后因子。结论反常表达的WWOX和CD133参与了CRC的发生、发
展、侵袭以及转移;在CRC患者中联合检测WWOX和CD133蛋白的表达对预测其进展和预后均有重要意义。
     

miR-146a在结肠癌中的表达及意义

目的探讨miR-146a在结肠癌中的表达与功能。方法qRT-PCR分析结肠癌组织、毗邻正常细胞组织以及结肠癌细胞系
miR-146a的表达水平,MTT法测定结肠癌细胞系SW620转染miR-146a模拟物后的增值,FACS法检测细胞周期与凋亡状况。
结果43 份结肠癌组织样品中,36 份呈现miR-146a 表达量下调,并且该下调表达情况与肿瘤增殖情况（P=0.010）相一致,
miR-146a表达量还与患者肿瘤大小、临床分期密切相关,同时miR-146a表达量较高的患者较比表达量低的患者寿命要长（P=
0.011）,MTT检测表明,miR-146a能抑制细胞增殖（P<0.005）,流式细胞仪检测结果表明,转染miR-146a的SW620细胞相比对
照组细胞,凋亡比例上升（11.9%∶5.9%）,但是对细胞周期没有什么影响。结论miR-146a可能是结肠癌新的抗癌靶标,能抑制结
肠癌细胞增殖,在结肠癌中具有重要作用。
     

miR-126/miR-126*在肝细胞癌中的表达及其与临床预后的相关性

目的研究miR-126/miR-126*在肝细胞癌中的表达,探讨其表达与相关临床病理参数的关系。方法用RT-QPCR方法检
测74例肝细胞癌手术切除的癌组织与相应的非癌组织中miR-126/miR-126*的表达,分析其表达与相关临床病理参数的关系。
结果miR-126/miR-126*在癌组织中表达水平显著低于相对应的非癌组织;miR-126/miR-126*在肝癌中的表达呈正相关关系;
复发组癌组织中miR-126/miR-126*的表达显著低于未复发组癌组织;miR-126/miR-126*高表达组无瘤生存时间显著优于低表
达组。结论miR-126/miR-126*的的低表达可能是影响肝细胞癌转移并导致患者不良预后的一个重要因素。
     

miR-223在肾透明细胞癌中的表达与功能

目的探讨miR-223在肾透明细胞癌中的表达与功能。方法用real-time RT-PCR法检测miR-223在肾透明细胞癌组织和
瘤旁组织中的表达以及细胞系中miR-223的表达量。用transwell迁移实验和划痕实验测转染miR-223模拟物的786-O细胞的
迁徙能力,MTS法测其增殖情况,流失细胞仪分析其细胞周期。并用SPSS统计软件分析其临床数据与miR-223 表达量的关
系。结果miR-223在肾透明细胞癌组织和细胞系中的表达量高于瘤旁组织和正常肾小管上皮细胞（P=0.0003）,其miR-223的
表达量与肿瘤的大小有关,肿瘤直径大于4 cm的肿瘤miR-223 表达量升高（P=0,0028）。转染miR-223 模拟物的786-O 细胞
transwell细胞迁移数比对照组多（P<0.0001）,划痕实验显示实验组愈合能力比对照组快,增殖实验表明实验组增殖速度快于对
照组（P=0.006）,细胞周期显示实验组细胞G1期减少,S期细胞增加,提示处于增殖的细胞数多（P<0.05）。结论miR-223可能
起着促进肾透明细胞癌发生发展的作用,可能是抗肾透明细胞癌治疗的新的抗癌靶标。