益元起痿丸治疗糖尿病性勃起功能障碍大鼠作用机制

目的 观察益元起痿丸对糖尿病性勃起功能障碍（DMED）大鼠的治疗作用,并探讨其对一氧化氮（NO）/环磷酸鸟苷（cGMP）信号通路的调控作用。方法 55只2~3月龄清洁级、健康SD雄鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立DMED大鼠模型,另取10只2~3月龄清洁级、健康SD雄鼠记为正常组;建模成功后随机分组,西地那非组予以西地那非5 mg·kg^-1灌胃,益元起痿丸低、中、高剂量组予以1.5、3.0、6.0 g·kg^-1益元起痿丸灌胃,模型组与正常组均予以生理盐水灌胃,各10 mL·kg^-1,每天1次,共2个月。干预后,采用压力检测系统测定各组大鼠的阴茎勃起功能;苏木素-伊红（HE）染色观察阴茎海绵体病理变化,透射电镜观察大鼠阴茎海绵体超微结构;硝酸还原酶法检测阴茎海绵体组织NO水平,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测cGMP及晚期糖基化总产物（AGEs）水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠阴茎组织内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）、神经源型一氧化氮氧合酶（nNOS）、总一氧化氮氧合酶（NOS）、5型磷酸二酯酶（PDE5）信使核糖核酸（mRNA）表达;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测上述蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠阴茎海绵窦内压（ICP）,阴茎海绵体组织NO、cGMP含量及nNOS、NOS mRNA和蛋白表达均降低,PDE5 mRNA和蛋白表达均升高,上述差异均有统计学意义（P<0.05）;与模型组比较,西地那非组、益元起痿丸低、中、高剂量组ICP,阴茎海绵体组织NO、cGMP含量及nNOS、NOS mRNA和蛋白表达均升高,PDE5 mRNA和蛋白表达均降低（P<0.05）。正常组阴茎海绵体组织及细胞超微结构均未见病理改变,模型组有严重病理改变,西地那非组、益元起痿丸各剂量组均较模型组改善,且益元起痿丸高剂量组病理改变更轻更佳。结论 益元起痿丸可以改善DMED大鼠阴茎勃起功能,减轻阴茎海绵体病理损伤,作用机制可能与促进nNOS、NOS表达,抑制PDE5表达,激活NO/cGMP信号通路有关。     

安寐丹调控OXA/CREB/PER1信号通路改善SD模型大鼠昼夜节律紊乱＊

目的 观察中医经典名方安寐丹对睡眠剥夺（Sleep disruption，SD）模型大鼠食欲素（Orexin）及其介导的食欲素A（Orexin A，OXA）/cAMP反应元件结合蛋白（cAMP Response Element Binding Protein，CREB）/Period1（period circadian regulator 1， PER1）基因信号通路的作用。方法 40只雄性6月龄SD大鼠随机等分为空白组、模型组、艾司唑仑组、安寐丹组，空白组常规进食进水，其他三组采用对氯苯丙氨酸（PCPA）腹腔注射叠加多平台水环境剥夺法构建SD模型，自主活动仪监测昼夜活动节律。空白组、模型组给予等容的0.9%氯化钠灌胃，艾司唑仑组给予艾司唑仑0.09 mg·kg^-1、安寐丹组给予安寐丹水煎剂9.09 mg·kg^-1灌胃治疗，连续4周。4周后运用Morris水迷宫检测其学习记忆，免疫荧光检测下丘脑Orexin神经元表达，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组大鼠下丘脑组织OXA、食欲素B（Orexin B，OXB）含量，蛋白质免疫印迹（Western Blot，WB）和实时荧光定量（Quantitative Real-time PCR，RT-PCR）检测各组大鼠下丘脑组织OXA/CREB/PER1信号通路蛋白和mRNA表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠24 h自主活动时间和活动距离均高于空白组；活动时间、活动距离显著增加（P<0.01），上平台潜伏期与游泳总路程显著延长（P<0.01），穿越站台次数和站台活动时间均减少（P<0.01）；下丘脑组织OXA、OXB含量高于空白组（P<0.01）；且OXA、CREB 蛋白和mRNA表达均显著升高（P<0.01），PER1 蛋白和mRNA表达均显著下调（P<0.01）。与模型组比较，安寐丹组大鼠上平台潜伏期缩短（P<0.01）、游泳总路程减少（P<0.05）、穿越平台数量增加（P<0.05）；下丘脑组织OXA、OXB含量降低（P<0.05），OXA蛋白表达下调（P<0.05）、CREB蛋白表达下调（P<0.01）、PER1蛋白表达上调（P<0.01），OXA和CREB mRNA表达降低（P<0.05），PER1 mRNA表达升高（P<0.05）。结论 安寐丹改善SD模型大鼠昼夜节律紊乱可能与调节Orexin及其介导的OXA/CREB/PER1信号通路相关。     

新鲜洋葱汁对帕罗西汀所致雄性大鼠性功能障碍的影响及其机制研究

目的探讨新鲜洋葱汁对正常雄性大鼠和帕罗西汀所致性功能障碍雄性大鼠性功能和血清睾酮水平的影响,为后期临床研究提供实验依据。方法将有性行为能力的70只雄性大鼠随机分为7组,每组10只。对照组给予蒸馏水灌胃,0.5 m L洋葱汁组、1.0 m L洋葱汁组血清睾酮水平2.0 m L洋葱汁组分别给予相应剂量的新鲜洋葱汁灌胃,帕罗西汀组给予帕罗西汀悬浮液10 mg/kg灌胃,帕罗西汀加1.0 m L洋葱汁组、帕罗西汀加2.0 m L洋葱汁组分别给予帕罗西汀悬浮液10 mg/kg和相应剂量的新鲜洋葱汁灌胃,均1次/d,连续灌胃20 d。在末次灌胃结束后3 h,记录各组大鼠性行为参数及血清睾酮水平。结果 1.0 m L洋葱汁组和2.0 m L洋葱汁组大鼠的骑跨潜伏期、骑跨次数均明显低于对照组和0.5 m L洋葱汁组(P均0.05),交配有效率和血清睾酮水平均明显高于对照组和0.5 m L洋葱汁组(P均0.05);1.0 m L洋葱汁组和2.0 m L洋葱汁组大鼠的插入潜伏期和1.0 m L洋葱汁组大鼠的射精潜伏期均明显低于对照组(P均0.05);1.0m L洋葱汁组大鼠的插入潜伏期和射精潜伏期均明显低于0.5m L洋葱汁组(P均0.05)。帕罗西汀组大鼠的射精潜伏期明显长于对照组(P0.05),血清睾酮水平明显低于对照组(P0.05);帕罗西汀加1.0 m L洋葱汁组、帕罗西汀加2.0 m L洋葱汁组大鼠的骑跨潜伏期和帕罗西汀加2.0 m L洋葱汁组大鼠的骑跨次数均明显少于对照组和帕罗西汀组(P均0.05);帕罗西汀加1.0 m L洋葱汁组、帕罗西汀加2.0 m L洋葱汁组大鼠的射精潜伏期均明显低于帕罗西汀组(P均0.05),血清睾酮水平均明显高于帕罗西汀组(P均0.05)。结论新鲜洋葱汁可以明显增强雄性大鼠的性功能,并可以通过提高血清睾酮水平来缓解帕罗西汀引起的性功能障碍,增强性交配行为。     

六味地黄汤促进自噬调控小胶质细胞表型减轻糖尿病抑郁大鼠ACC髓鞘损伤及抑郁行为

目的 观察六味地黄汤对糖尿病抑郁（DD）大鼠抑郁样行为的影响，并探讨其作用机制。方法 50只SPF级雄性SD大鼠采用高脂饮食喂养加尾静脉注射小剂量链脲佐菌素（STZ）的方法制备糖尿病模型，随后糖尿病大鼠予28 d慢性不可预测的轻度应激（CUMS）的方法建立DD模型。随机分为5组，分别为模型组、氟西汀组（氟西汀10 mg·kg^-1·d^-1）、六味地黄汤低、中、高剂量组（3.375、6.75、13.5 g·kg^-1·d^-1），每组10只。另取正常组10只，生理盐水灌胃。连续灌胃4周后，强迫游泳实验用于评估大鼠的抑郁表型，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测前扣带回皮层（ACC）肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-10（IL-10）表达水平；免疫荧光检测ACC区髓鞘碱性蛋白（MBP）表达、小胶质细胞离子钙结合衔接分子1（Iba1）与微管相关蛋白1轻链3（LC3）共定位；蛋白免疫印迹法检测ACC区MBP、髓鞘脂蛋白（PLP）、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）和Beclin-1、LC3、p62及小胶质细胞（MG）表型相关蛋白诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶1（Arg1）蛋白表达水平。结果 与正常组比较，模型组大鼠在强迫游泳实验中游泳时间下降、不动时间增加（P<0.01）。与模型组比较，六味地黄汤中、高剂量组不动时间均有不同程度地降低（P<0.05，P<0.01）。与正常组比较，模型组大鼠ACC区MBP、PLP、MOG蛋白表达降低（P<0.01）；与模型组比较，氟西汀组、六味地黄汤中、高剂量组MBP、PLP、MOG蛋白表达不同程度上调（P<0.05，P<0.01）。与正常组比较，模型组大鼠ACC区MBP荧光强度显著降低（P<0.01）；与模型组比较，六味地黄汤中、高剂量组和氟西汀组MBP荧光表达强度不同程度地增加（P<0.05，P<0.01）。与正常组比较，模型组大鼠iNOS表达增加（P<0.01），Arg1蛋白的表达轻度增加。与模型组相比，六味地黄汤中、高剂量组和氟西汀组iNOS表达下调，Arg1蛋白表达上调（P<0.05，P<0.01），氟西汀组与六味地黄汤中、高剂量组之间差异无统计学意义。与正常组比较，模型组大鼠ACC促炎因子IL-1β、TNF-α表达显著增加（P<0.01），抗炎因子IL-4、IL-10水平轻度增加。与模型组比较，氟西汀组、六味地黄汤中、高剂量组IL-1β、TNF-α表达下调（P<0.05，P<0.01），IL-4、IL-10表达水平明显增加（P<0.05，P<0.01）。与正常组比较，模型组大鼠Beclin-1和LC3 Ⅱ蛋白的表达降低（P<0.01），p62蛋白的表达增加（P<0.01）。与模型组比较，六味地黄汤中、高剂量组和氟西汀组Beclin-1和LC3 Ⅱ表达上调（P<0.01），p62表达下调（P<0.01）；与正常组比较，模型组ACC区LC3⁺Iba1⁺细胞数明显减少（P<0.01）；与模型组比较，氟西汀组和六味地黄汤中、高剂量组LC3⁺Iba1⁺细胞数不同程度地增加（P<0.05，P<0.01）。结论 六味地黄汤改善DD大鼠抑郁样行为，其机制可能是通过促进MG自噬，调控MG表型变化，增加MG对髓鞘碎片的清除；同时MG表型转换还抑制DD大鼠ACC炎症水平，改善少突胶质细胞增殖、分化的局部微环境，并最终促进受损髓鞘修复及再髓鞘化。     

泽泻及其炮制品对肾阴虚水肿模型大鼠的作用机制

目的 通过研究泽泻及其炮制品对肾阴虚水肿模型大鼠的药效作用,探讨泽泻及其炮制品改善肾阴虚水肿的作用机制。方法 将42只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药六味地黄丸组、泽泻低、高剂量组,盐泽泻低、高剂量组,每组6只。除正常组外,其余各组大鼠均通过尾静脉注射阿霉素和灌胃甲状腺素复制肾阴虚水肿模型,正常组和模型组给予等体积蒸馏水,阳性药组给予六味地黄丸（1.4 g·kg^-1）,药物治疗组分别给予泽泻低、高剂量（1、4 g·kg^-1）,盐泽泻低、高剂量（1、4 g·kg^-1）,连续给药4周。末次给药后取大鼠肾脏,通过苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠肾脏组织病理变化,放射免疫法检测血清中三碘甲状腺原氨酸（T₃）、甲状腺素（T₄）、促卵泡生成激素（FSH）、睾酮（T）的含量,全自动生化分析仪测定血清中肌酐（CREA）、尿素（UREA）、胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）的含量;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中促性腺激素释放激素（GnRH）,血浆中环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）的含量,分别用免疫组织化学法和实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肾脏中水通道蛋白（AQP）-1、AQP-2的表达和mRNA的转录水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠体质量、尿量显著降低（P<0.01）,饮水量明显增加（P<0.05）,肾脏有大量炎症细胞浸润及纤维组织增生;T₃、T₄、cAMP/cGMP、CREA、FSH、AQP-1、AQP-2表达及转录水平显著上升（P<0.01）,CHOL、TG含量明显升高（P<0.05）,GnRH和T的含量显著降低（P<0.01）。与模型组比较,泽泻和盐泽泻低、高剂量组体质量均有所增加,其中泽泻低剂量组和盐泽泻低剂量组显著增加（P<0.01）,各组大鼠尿量均有所增加,但差异无统计学意义,肾脏组织炎症细胞浸润减少;明显降低T₄、cAMP/cGMP、UREA、CREA、FSH、CHOL、TG的含量（P<0.05,P<0.01）,升高GnRH的水平（P<0.01）,其中泽泻高剂量组和盐泽泻低、高剂量组大鼠肾脏AQP-1、AQP-2 mRNA的转录水平显著下降（P<0.01）。结论 泽泻及其炮制品对肾阴虚水肿模型大鼠均有改善作用,其机制可能与下调AQP-1、AQP-2表达和纠正下丘脑-垂体-性腺（HPG）轴紊乱有关。     

基于Ghrelin水平调控探讨玉液汤对2型糖尿病大鼠认知障碍的影响

目的 观察玉液汤对2型糖尿病认知障碍（DCI）大鼠胃饥饿素（Ghrelin）表达水平的调控，探讨其防治DCI的作用途径。方法 以高脂高糖饲料结合链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型，除正常组外，造模成功后按照血糖均匀分模型组、二甲双胍组（200 mg·kg^-1）、玉液汤低、中、高剂量组（4.575、9.15、18.3 g·kg^-1），每组10只。连续灌胃给药30 d，观察并记录各组大鼠体质量及血糖。给药结束即采用Morris水迷宫法测试大鼠学习记忆能力，测试结束后取大鼠全脑进行苏木素-伊红（HE）染色观察海马CA1区病理变化，同时以免疫组化法检测胃组织和海马CA1区Ghrelin的表达。结果 与正常组比较，模型组大鼠血糖显著上升（P<0.01），体质量显著下降（P<0.01），水迷宫逃避潜伏期明显增加（P<0.05，P<0.01），目标区域停留时间及运动路程、穿越平台次数显著下降（P<0.01），海马CA1区细胞形态结构异常，排列紊乱，数量减少，大鼠血清、海马CA1区及胃组织Ghrelin蛋白表达明显降低（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，玉液汤中、高剂量组大鼠体质量均增加，各剂量组血糖显著下降（P<0.01），各组大鼠逃避潜伏期均明显缩短（P<0.05），目标区域停留时间、运动路程及穿越平台次数均明显增加（P<0.05，P<0.01），海马CA1区细胞结构形态均改善，正常细胞数量增加，血清、胃组织及海马CA1区Ghrelin水平明显提高（P<0.05，P<0.01）。结论 玉液汤可有效改善DCI大鼠的认知能力，其机制可能与其调节血清、海马CA1区及胃组织Ghrelin有关。     

6味山姜属中药对胃实寒证大鼠胃组织PDE,cAMP,cGMP,cAMP/cGMP的影响

目的：研究高良姜、草豆蔻、红豆蔻、大高良姜、建砂仁、益智6味山姜属中药对胃实寒证模型大鼠胃组织磷酸二酯酶（PDE）、环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）、cAMP/cGMP的影响,揭示6味山姜属中药所含挥发油与温中散寒功 效的相关性。方法：实验分2批进行,第1批取SD雄性大鼠160只分为16个组：模型Ⅰ组,模型Ⅱ组,阳性对照组,高良姜、草豆蔻、红豆蔻3味药物各个挥发油高、低剂量组、去挥发油水液高、低剂量组;第2批除了观察药为大高良姜、建砂仁、益智挥发油高、低剂量组、去挥发油水液高、低剂量组外,其余分组均同第1批。采用灌服2~3 ℃寒凉药（石膏、知母、黄柏、龙胆草,给药剂量为36 g·kg^-1,2次/d）加冷冻的方法制造大鼠胃实寒证模型;分别予以6味药物挥发油、去挥发油水液,低剂量组给药剂量为20 g·kg^-1,高剂量组给药剂量为60 g·kg^-1,阳性对照药选用附子水煎液,剂量为8 g·kg^-1;每隔12 h给药1次,连续给药3次。测定大鼠胃组织PDE,cAMP,cGMP含量,计算cAMP/cGMP。结果：①对磷酸二酯酶（PDE）的影响：与正常组相比,第1,2批模型组胃组织中PDE明显升高（P<0.05或P<0.01）,分别为32.27,52.80 nmol·L^-1。高良姜、草豆蔻、红豆蔻、大高良姜、益智的挥发油高、低剂量组对于模型组大鼠胃中PDE有显著的降低作用（P<0.05或P<0.01）,大高良姜去挥发油高剂量组对其也有一定的降低作用,但无显著性差异;②对cAMP,cGMP及cAMP/cGMP的影响：与空白组比较,第1,2批模型组胃组织中cAMP的浓度明显降低（P<0.05）,分别为0.68,0.81 nmol·L^-1。6味中药挥发油高、低剂量组与模型组相比,cAMP浓度均明显升高（P<0.05或P<0.01）,cGMP无明显变化,cAMP/cGMP增大（P<0.05或P<0.01）;高良姜、草豆蔻、建砂仁去挥发油高剂量组对cAMP浓度也有一定的影响,但无显著性差异。结论：6味中药所含挥发油可升高胃组织中cAMP的含量、cAMP/cGMP及降低PDE的含量,其中部分中药的去挥发油高剂量组也有相似的影响,揭示了6味山姜属中药所含的挥发油与温中散寒功效有密切的相关性,且发现此6味药的去挥发油提取液对部分检测指标也有良好的改善作用,揭示其功效也与其所含的其他成分有关。     

龙生蛭胶囊对血管痴呆大鼠认知功能的影响及作用机制

目的 研究龙生蛭胶囊对血管性痴呆（VD）大鼠的认知功能的影响及其可能的作用机制。方法 采用双侧颈总动脉永久结扎法造血管性痴呆模型，并将造模大鼠随机分为模型组（灌胃生理盐水）、喜得镇组（0.54 mg·kg^-1）、龙生蛭胶囊高、中、低剂量组（2.16、1.08、0.54 g·kg^-1），同时设置假手术组（灌胃生理盐水），每组大鼠15只，连续灌胃给药4周。Morris水迷宫实验测定大鼠的认知功能，苏木素-伊红（HE）染色考察大鼠脑组织海马区病理变化。检测大鼠血清中氧化应激指标超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的变化和炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、IL-1β的水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测脑组织中炎症蛋白、凋亡蛋白、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和黏附分子-1（ICAM-1）的蛋白表达。结果 Morris水迷宫结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠逃避潜伏期和明显延长，且穿越平台次数明显降低；与模型组比较，龙生蛭胶囊高、中剂量组大鼠逃避潜伏期所用时间明显缩短，大鼠穿越平台次数明显增多。与假手术组比较，模型组大鼠血清SOD和GSH-Px水平明显降低（P<0.05，P<0.01），MDA水平明显升高（P<0.05），TNF-α、IL-6和IL-1β水平显著升高（P<0.01）；与模型组比较，龙生蛭胶囊高剂量组大鼠血清中SOD水平明显升高（P<0.05），龙生蛭胶囊高、中、低剂量组大鼠血清中GSH-Px水平明显升高（P<0.05，P<0.01），MDA水平明显降低（P<0.05），TNF-α、IL-6和IL-1β水平明显降低（P<0.05，P<0.01）。HE染色发现，龙生蛭胶囊能够改善VD大鼠海马区病理损伤。Western blot结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠脑组织Bax、NF-κB、MMP-9及ICAM-1蛋白表达均显著升高（P<0.01），Bcl-2、Akt和p-Akt蛋白表达均明显降低（P<0.05，P<0.01），与模型组比较，龙生蛭胶囊高、中、低剂量组明显降低Bax、NF-κB、MMP-9及ICAM-1蛋白表达（P<0.05，P<0.01），明显提高Bcl-2蛋白表达（P<0.05，P<0.01），龙生蛭胶囊高、中剂量组Akt蛋白表达明显升高（P<0.05），龙生蛭胶囊高剂量组组p-Akt蛋白表达显著升高（P<0.01）。结论 龙生蛭胶囊可改善VD大鼠的认知功能，其机制可能与对氧化应激、炎症反应和细胞凋亡的抑制有关。     

基于PI3K/Akt/mTOR通路探讨补肾通络方对血管性痴呆大鼠海马神经元突触可塑性的影响

目的 探讨补肾通络方对血管性痴呆（VD）模型大鼠海马神经元突触可塑性的影响及其作用机制研究。方法 选用SPF级SD大鼠,采用双侧颈总动脉分次结扎法,建立VD大鼠模型。选取造模成功的大鼠,随机分为模型组,补肾通络方高、中、低剂量组,胰岛素样生长因子-1（IGF-1）组,并设假手术对照组,分别给予对应的药物灌胃,1次/d,连续4周;其中补肾通络方高、中、低剂量组的灌胃剂量分别为3,1.5,0.75 g·kg^-1,IGF-1组灌胃剂量20 μg·kg^-1,模型组和假手术组给予同体积的生理盐水灌胃。末次灌胃结束后,采用Morris水迷宫法观察各组大鼠空间学习记忆能力,原位末端标记法（TUNEL）检测海马神经元细胞凋亡情况,高尔基染色法（Golgi）观察海马神经元突触形态及树突棘数量变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）,蛋白激酶B（Akt）,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）,突触素（SYP）及淀粉样前体蛋白（APP）蛋白的表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期、游泳路程明显延长,撤除平台后跨越原平台次数明显减少（P<0.05）,细胞凋亡数目明显增多（P<0.05）;树突棘数量明显减少（P<0.05）;PI3K,Akt,mTOR,SYP蛋白表达明显减少,APP表达明显增多（P<0.05）;与模型组比较,补肾通络方组,IGF-1组逃避潜伏期、游泳路程明显缩短,撤除平台后跨越原平台次数明显增多（P<0.05）,细胞凋亡数目明显减少（P<0.05）;PI3K,Akt,mTOR,SYP蛋白表达明显增多,APP表达明显减少（P<0.05）;与IGF-1组比较,在大鼠逃避潜伏期、游泳路程、撤除平台后跨越原平台次数,细胞凋亡数目,树突棘数量,PI3K,Akt,mTOR,SYP,APP蛋白表达等,补肾通络方高剂量组差异均无统计学意义;补肾通络方中、低剂量组差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 补肾通络方能够改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与激活PI3K/Akt/mTOR自噬通路,改善海马神经元细胞突触可塑性有关。     

无比山药丸对肾阳虚模型小鼠勃起功能障碍的作用及机制研究

目的 研究无比山药丸对“房事不节＋劳倦过度”导致的肾阳虚模型小鼠勃起功能障碍的作用及作用机制。方法 选取性功能良好的雄性ICR小鼠60只,随机分为对照组、模型组、金匮肾气丸（1.7 g/kg）组和无比山药丸低、中、高剂量（0.75、1.50、3.00 g/kg）组。采用强迫小鼠游泳致力竭的方法造成劳倦过度,并以Colldege效应诱导雄性小鼠房事不节,建立肾阳虚勃起功能障碍模型小鼠。造模同时ig相应药物,连续8周。测定小鼠肛温、抓力、自主活动次数、尾部微循环血流量及性行为等肾阳虚证候指标;检测血清中尿酸（uric acid,UA）、肌酐（creatinine,CR）和尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）水平;检测肾脏组织中丙二醛（malonaldehyde,MDA）水平和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathion peroxidase,GSH-PX）活性;采用苏木素-伊红（HE）染色观察肾组织病理变化;采用TUNEL染色观察肾组织细胞凋亡情况;采用试剂盒检测阴茎组织中鸟苷酸环化酶（guanylate cyclase,GC）、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）活性和一氧化氮（nitric oxide,NO）、环磷酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate,cGMP）水平;采用Western blotting检测阴茎组织中内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）和GC蛋白表达。结果 无比山药丸显著增加肾阳虚模型小鼠的肛温、抓力、自主活动次数、尾部微循环血流量及捕捉、骑跨次数（P＜0.05、0.01）,显著缩短捕捉、骑跨潜伏期（P＜0.01）;降低血清中UA、CR、BUN水平（P＜0.05、0.01）;降低肾脏组织MDA水平（P＜0.01）,升高SOD和GSH-PX活性（P＜0.05、0.01）;改善肾脏病变及细胞凋亡情况;增加阴茎组织NO、cGMP水平和NOS及GC活性（P＜0.01）;上调阴茎组织eNOS、GC蛋白表达（P＜0.01）。结论 无比山药丸能够改善“房事不节＋劳倦过度”致肾阳虚证候,调节勃起功能障碍,其作用机制可能与UA介导的NO-cGMP途径有关。     

Elevation of intracavernous pressure and NO-cGMP activity by a new herbal formula in penile tissues of aged and diabetic rats

We investigated the mechanisms underlying the effects of an herbal formula (HF) in improving erectile dysfunction (ED), particularly in terms of nitric oxide (NO)-cGMP pathways. Two different rat models, 24-month-old rats (aging) and 10-month-old rats maintained chronically high plasma glucose levels (328 +/- 89 mg/dL) diabetes mellitus (DM), were treated with HF (100 mg/kg per day) for 10 days. We examined the electrostimulated penile responses, expression and activity of three enzymes: neuronal NO synthase (nNOS), endothelial NO synthase (eNOS) and caveolin-1 (CaV-1), and cGMP concentration that act upon the major NO-cGMP signaling pathways in penile tissue. Effect of HF on cGMP degradation was also examined using bovine vascular smooth-muscle cells pretreated with an NO donor, S-nitroso-N-acetylpenicillamine (SNAP). In aging and DM rats, the severely reduced peak intracavernous pressures (ICPs) in penile tissues were restored completely after HF treatment, and HF treatment significantly made the latency period earlier. Furthermore, the penile expression levels of nNOS, eNOS and CaV-1, Ca2+ -dependent NOS activities and cGMP concentrations were increased significantly in the HF-treated rats. Particularly, inhibitory effect of HF on cGMP degradation was confirmed also in cell system. These results indicate that new HF originated from a Korean traditional medicine (Ojayounjonghwon described in 'Dong Ui Bo Gam') can ameliorate the ED impaired by peripheral neuropathy and/or angiopathy, via the activation of NO-cGMP pathways.     

平刺与直刺三阴交穴对寒凝证类痛经大鼠子宫微循环及NO、NOS的影响

目的:观察平刺、直刺三阴交穴对寒凝证类痛经模型大鼠血清、子宫组织中一氧化氮(NO)及其合成酶(NOS)的影响,探讨不同刺法即刻镇痛作用的机制。方法:60只SD雌鼠随机分为空白组、模型组、直刺组、平刺组,每组15只。采用全身冷冻加雌二醇注射法制备寒凝证类痛经模型。针刺组分别直刺或平刺"三阴交"穴,留针20min。记录各组大鼠的扭体反应情况并采用超高速动态可视化微循环研究系统观察子宫微循环状况。采用生化比色法测定大鼠血清NO、NOS含量,Western blot法检测子宫组织eNOS蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组扭体潜伏期缩短、扭体评分升高(P<0.01),微血流速度减慢(P<0.01),微血管、毛细血管(cap)管径缩小(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,直刺、平刺组扭体潜伏期均延长(P<0.05,P<0.01),扭体评分均显著降低(P<0.01),微血管、cap管径均显著扩张(cap管径5min时除外)(P<0.01)。平刺组针刺后15min血流状态优于直刺组(P<0.01,P<0.05),针刺后35min微血管管径较直刺组显著扩张(P<0.01)。两针刺组间扭体潜伏期及评分差异无统计学意义。与空白组比较,模型组血清NO、NOS与子宫组织eNOS蛋白表达含量显著降低(P<0.01)。与模型组比较,两针刺组血清中NO、NOS含量与子宫组织eNOS蛋白表达均升高(P<0.01,P<0.05)。平刺组NOS含量与eNOS蛋白表达均显著高于直刺组(P<0.05,P<0.01)。结论:直刺与平刺类痛经大鼠"三阴交"穴均显示出即刻镇痛效应,平刺法改善子宫微循环效果更佳,其机制可能与其更好地升高NO、NOS含量,上调子宫e NOS蛋白表达有关。     

马鬃蛇对下丘脑抑制大鼠性功能的改善作用机制探讨

目的:研究马鬃蛇石油醚提取物(CVPEE)对下丘脑抑制的幼年雄性大鼠性功能的改善作用机制.方法:建立下丘脑抑制致大鼠睾丸功能障碍模型,连续灌胃给药21天后测定血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)水平,测定血清和阴茎组织中NO含量,换算其生殖器官的脏器系数,镜下观察睾丸、附睾的组织病理学改变.结果:CVPEE可明显升高血清睾酮水平,降低FSH水平,与模型组比较P＜0.05,血清和阴茎组织NO含量有升高趋势,给药组睾丸组织受损程度比模型组轻.结论:CVPEE可升高下丘脑抑制大鼠的血清睾酮水平及阴茎组织NO含量,对性功能障碍有一定改善作用,其作用机制可能通过下丘脑-垂体-性腺轴的调节.     

肉苁蓉不同提取部位改善肾阳虚大鼠性能力的影响

目的:观察肉苁蓉不同提取部位对氢化可的松致肾阳虚模型大鼠性能力的影响。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为正常组、阳虚模型组、肉苁蓉总寡糖组、肉苁蓉总多糖组、肉苁蓉苯乙醇总苷组。连续14 d肌肉注射氢化可的松制备肾阳虚动物模型,给药组按肉苁蓉生药量2.3 g·kg-1对应给予肉苁蓉总寡糖103.82 mg·kg-1,肉苁蓉总多糖115.64 mg·kg-1,肉苁蓉苯乙醇总苷201.48 mg·kg-1水溶液,每日1次。14 d后测定各组大鼠的勃起潜伏期,交配能力各指标(包括捕捉潜伏期、捕捉次数、射精潜伏期、射精次数、捕捉率、射精率等),脏器湿重及精浆果糖含量,血浆环磷酸腺苷(c AMP)/环磷酸乌苷(c GMP)值,血清激素睾酮(T),雌二醇(E2),促卵泡生成素(FSH),促黄体生成素(LH)及促性腺激素释放激素(GnRH)水平,观察睾丸病理形态变化。结果:肉苁蓉不同提取部位对肾阳虚大鼠的勃起功能、交配能力、脏器湿重及精浆果糖含量,血浆c AMP/c GMP值,血清激素水平,睾丸病理形态变化均有作用。其中肉苁蓉苯乙醇总苷提取物能够显著缩短大鼠的勃起潜伏期(P0.05)及捕捉潜伏期(P0.01),显著增加捕捉次数(P0.01),睾丸(P0.05),精囊腺(P0.01)湿重及精浆果糖含量(P0.05),显著升高血浆c AMP/c GMP值(P0.01)及血清T(P0.01),FHS(P0.01),GnRH(P0.05)水平,显著降低血清E2(P0.05),LH(P0.05)水平,显著改善睾丸病理形态。结论:肉苁蓉不同提取部位可通过调控氢化可的松致肾阳虚大鼠模型的激素水平不同程度提高其性能力,其中苯乙醇总苷可显著改善肾阳虚大鼠性能力相关指标。     

填精通络方及其拆方对糖尿病性勃起功能障碍大鼠的性激素及阴茎海绵体eNOS 酶表达的影响

目的：通过观察填精通络方及其拆方对糖尿病性勃起功能障碍大鼠性激素及阴茎海绵体eNOS酶表达的影响,探讨填精通络方在治疗糖尿病性勃起功能障碍的作用机制。方法：将60只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、对照组、填精组、通络组及填精通络组6组,每组10只。除正常组外,其余组以腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,任意时间血糖＞16.67 mmol·L-1为糖尿病成模标准,然后用阿朴吗啡阴茎勃起实验筛选糖尿病性勃起功能障碍大鼠模型。成模后,对照组予以0.2 mg·kg-1他达拉非灌胃,每周两次;填精通络组予以填精通络方以9.3 g·kg-1·d-1灌胃,填精组予以拆方Ⅰ号以7.2 g·kg-1·d-1灌胃,通络组予以拆方Ⅱ号以2.1 g·kg-1·d-1灌胃,正常组与模型组分别灌服等体积蒸馏水,连续30天。取腹主动脉血清,用酶联免疫分析法测定各组大鼠的性激素水平的差异;便携式血糖仪检测各组大鼠的血糖水平;免疫荧光检测离体阴茎组织eNOS 酶含量。结果：与模型组比较,填精组、通络组及填精通络组的血糖明显降低（P < 0.01）,阴茎海绵体eNOS酶的表达改善,血清睾酮（T）含量明显上升（P < 0.05）,而卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）含量变化不明显（P > 0.05）;与对照组比较,填精通络组的血糖明显降低（P < 0.01）,阴茎海绵体eNOS酶的表达改善,血清T含量明显上升（P < 0.05）,而血清FSH、LH含量变化不明显（P > 0.05）;与通络组比较,填精组和填精通络组的血糖明显降低（P < 0.05）,但填精组阴茎海绵体eNOS酶的表达改善不如通络组,而填精通络组阴茎海绵体eNOS酶的表达改善优于通络组。结论：填精通络方能明显降低大鼠血糖水平,改善大鼠性激素水平和阴茎海绵体eNOS酶表达,从而改善大鼠的勃起功能障碍。     

黑木耳多糖对青春期雄性大鼠性功能影响的研究

目的观察黑木耳多糖对幼年雄性大鼠性功能的影响及其药理作用。方法将雄性大鼠40只随机分为空白对照组、多糖低剂量组、多糖高剂量组和木耳组,连续给药30d,测定血清中睾酮（T）、黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）及血清和阴茎组织中NO水平,检测精子的计数、活动度、畸形率等指标。结果高剂量组和木耳组的FSH明显低于对照组（P均〈0.01）,高剂量组的T明显低于对照组（P〈0.05）。高剂量组和木耳组血清中NO明显低于对照组（P均〈0.05）,木耳组的阴茎组织中的NO明显低于对照组（P均〈0.05）。高剂量组和木耳组附睾精子密度、良好精子的比例明显下降（P均〈0.05）。结论黑木耳多糖可降低大鼠的睾丸功能、精子质量,影响青春期大鼠生殖器官的发育,对雄性大鼠的性功能有一定影响。     

乌药挥发油对寒凝气滞血瘀证大鼠血液流变学及NO-sGC-cGMP信号通路的影响

目的 探讨乌药挥发油对寒凝气滞血瘀证大鼠中医证候积分、血液流变学及一氧化氮（nitric oxide,NO）-可溶性鸟苷酸环化酶（soluble guanylate cyclase,sGC）-环磷酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate,cGMP）信号通路的影响。方法 将48只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组及乌药挥发油高、中、低剂量（3.76、1.88、0.94 g/kg）组和复方丹参片（1.20 g/kg）组,每组8只。除对照组外,其余组大鼠采用sc肾上腺素加冰水浴双因素复合刺激14 d制备寒凝气滞血瘀证模型。从造模第15天开始,各给药组ig相应药物,对照组和模型组ig等体积2%聚山梨酯-80溶液,1次/d,连续7 d;在给药过程中间隔2 d给予1次造模条件,维持大鼠血瘀证表现。末次给药后的第2天对各组大鼠进行中医证候评分,测定各组大鼠血液流变学及血浆NO、内皮素（endothelin,ET）水平;采用苏木素-伊红（HE）染色法观察胸主动脉组织形态;采用ELISA法检测胸主动脉组织中环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphat...     

太极拳锻炼联合还少胶囊对心理性勃起功能障碍患者勃起功能及性激素水平的影响

目的 观察还少胶囊联合太极拳锻炼对心理性勃起功能障碍(ED)患者勃起功能及心理、性激素水平的影响,探讨其改善ED患者勃起功能的可能机制.方法 选取夜间阴茎勃起(NPT)监测属于心理性ED患者53例,随机分为对照组(还少胶囊)26例和试验组(还少胶囊+太极拳运动)27例.连续治疗3个月,分别于治疗前后进行性激素水平检测,同时应用国际勃起功能评分(IIEF评分)和心理和人际关系问卷(SEAR问卷)对勃起功能进行评价.结果 与治疗前比较,两组性激素水平均有显著改善(P＜0.01);治疗后试验组血清睾酮(T)水平高于对照组(P＜0.01).与治疗前比较,两组轻度、中度、重度障碍型治疗后IIEF评分、SEAR评分明显升高(P＜0.05);试验组轻度、中度、重度障碍型IIEF治疗前后评分差值均高于对照组(P＜0.05).试验组中度、重度障碍型治疗前后SEAR评分差值显著高于对照组(P＜0.05).结论 心理性ED患者服用还少胶囊联合太极拳锻炼可改善勃起功能、性激素水平及心理和人际关系.     

Effect of black tea brew of Camellia sinensis on sexual competence of male rats

AIM: In Sri Lankan traditional medicine black tea brew (BTB) of Camellia sinensis (L.) O. Kuntze (Theaceae) is claimed to have male sexual stimulant activity. As this claim is not scientifically tested and proven, this study was undertaken to evaluate the effects of BTB on male sexual competence. MATERIAL AND METHODS: Different doses of BTB made from Sri Lankan high grown dust grade no 1 tea (84, 167 and 501 mg/ml) or water were orally administered to separate groups of rats (n=9 per group) and 3h later their sexual behaviour were monitored (for 15 min) using receptive females. RESULTS: The overall results showed that BTB possesses marked aphrodisiac activity (in terms of prolongation of latency of ejaculation shortening of mount- and intromission latencies and elevation of serum testosterone level). The aphrodisiac action had a rapid onset and appears to be mediated via inhibition of anxiety and elevation of serum testosterone level. Further, this aphrodisiac action was not associated with impairment of other sexual parameters like libido, sexual motivation, sexual arousal, sexual vigour or penile erection. BTB was also nontoxic (in terms of overt signs, liver and renal toxicity). CONCLUSIONS: It is concluded that BTB can function as a quick acting, safe, oral aphrodisiac which may also be useful in certain forms of sexual inadequacies such as premature ejaculation and impaired libido and other sexual functions.     

五味子甲素对结肠炎大鼠氧化应激水平的调控作用

目的探讨五味子甲素对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠结肠组织氧化应激水平的调控作用。方法用三硝基苯磺酸(Trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS)/乙醇混合液灌肠复制结肠炎SD大鼠模型,大鼠随机均分为正常对照组、模型组、阳性对照组及五味子甲素低剂量(20 mg·kg^-1)、中剂量(40 mg·kg^-1)、高剂量组(80 mg·kg^-1),每组10只。灌胃给药,正常组与模型组同期分别给予等体积蒸馏水,阳性对照组给予150 mg·kg^-1美沙拉嗪(5-ASA),连续治疗7 d后取大鼠结肠并评测其结肠重量、结肠长度、肠重指数、病理切片以及选择最佳剂量组的结肠组织检测SOD,GSH-PX,NO等氧化应激指标。结果经治疗后,与模型组比较,五味子甲素中剂量组治疗效果最佳,肠重减轻、长度增加、肠重指数明显下降,炎症因子明显减少,GSH-PX,SOD,eNOS,iNOS和T-AOC的水平明显升高(P<0.01 or P<0.05),而NO及MPO水平显著降低(P<0.01 or P<0.05)。结论五味子甲素可能通过降低结肠组织中性粒细胞数量和NO含量以及升高SOD和GSH-PX的表达量缓解机体的氧化应激水平治疗实验性大鼠结肠炎。