桑黄酮抑制NLRP3炎症小体活化并缓解感染性休克的作用研究

目的探究桑枝提取物桑黄酮对NLRP3炎症小体活化的影响, 为相关炎性疾病的治疗提供新思路。方法在细胞水平上, 使用Western blotting和ELISA方法, 检测小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)和人THP-1细胞在尼日利亚菌素、单钠尿酸盐和腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)3种刺激剂诱导下的半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)和白细胞介素(IL)-1β表达水平。在动物实验中, 构建脂多糖(LPS)诱导的感染性休克模型, 将实验小鼠分为安慰剂组、感染性休克组和桑黄酮干预组, 利用ELISA检测小鼠腹腔灌洗液及血清中IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果在BMDM和THP-1细胞中, 桑黄酮可以抑制尼日利亚菌素、单钠尿酸盐和ATP这3种炎症小体激动剂诱导的Caspase-1和IL-1β的加工和成熟(P < 0.01), 而对非炎症小体相关的细胞因子TNF-α的分泌无影响(P>0.05)。在动物实验中, 发现桑黄酮可以缓解LPS诱导的小鼠感染性休克(P < 0.01), 明显抑制LPS诱导的小鼠血清及腹腔液中IL-1β的表达(P < 0.01), 延长LPS造模后小鼠的存活时间(P < 0.01)。结论桑黄酮作为一种中草药活性成分提取物, 可以在体外和体内抑制NLRP3炎症小体的活化, 为NLRP3相关疾病的治疗提供了实验依据。     

降钙素相关基因肽在小鼠巨噬细胞炎症调控中的作用研究

目的 探讨降钙素相关基因肽（CGRP）在炎症调控中的作用,验证CGRP可通过活性氧簇-核苷酸结合低聚体结构域样受体3（ROS-NLRP3）信号通路抑制小鼠巨噬细胞炎症因子的分泌。方法 实验分为对照组、脂多糖（LPS）100?ng/ml组（LPS组）、CGRP 10?ng/ml组（CGRP 10组）、CGPR 30?ng/ml组（CGRP 30组）、CGRP 100?ng/ml组（CGRP 100组）及CGRP 30?ng/ml+LPS 100?ng/ml组（CGRP 30+LPS组）。作用12?h后,分别收集各组细胞的培养上清,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测上清液中白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的蛋白表达。同时收集各组细胞,实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测炎症因子IL-1β、TNF-α和炎症复合体NLRP3 mRNA的表达水平。流式细胞术检测各组细胞内活性氧簇（ROS）水平,Western blotting检测ROS-NLRP3信号通路相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β及TNF-α的蛋白表达。结果 与对照组比较,LPS组细胞中IL-1β、TNF-α及NLRP3 mRNA表达水平升高,培养上清液中IL-1β和TNF-α的蛋白表达水平升高,细胞内ROS水平升高,且细胞内NLRP3、Caspase-1、IL-1β及TNF-α的蛋白表达水平升高（P?<0.05）;与LPS组比较,CGRP 10组、CGRP 30组、CGRP 100组、CGRP 30+LPS组细胞中IL-1β、TNF-α及NLRP3 mRNA表达水平降低,培养上清液中IL-1β和TNF-α蛋白表达水平降低,细胞内ROS水平降低,且细胞内NLRP3、caspase-1、IL-1β及TNF-α蛋白表达水平也降低,所有指标中CGRP 30组降低最明显（P?<0.05）。结论 CGRP可降低巨噬细胞内ROS和NLRP3的表达,使炎症因子IL-1β和TNF-α的释放减少,CGRP可能在减弱局部炎症反应中发挥重要的调控作用。     

NLRP3炎症小体在高糖诱导小鼠肾小管上皮细胞EMT中的作用

目的:观察NLRP3炎症小体在高糖诱导小鼠肾小管上皮细胞上皮间质转化(EMT)中的作用.方法:以小鼠肾小管上皮细胞为研究对象,高糖处理24 h后,采用real-time PCR法检测细胞表型标志分子(E钙粘素和α-SMA)和NLRP3炎症小体mRNA的表达,ELISA法检测细胞上清液中IL-1β含量.采用NLRP3炎症小体特异性抑制剂MCC950探讨NLRP3炎症小体在高糖诱导小鼠肾小管上皮细胞ETM中的作用.结果:高糖处理24 h可降低小鼠肾小管上皮细胞E钙粘素mRNA表达,上调α-SMA mRNA表达;同时上调NLRP3、pro-IL-1β和pro-caspase-1 mRNA表达,以及IL-1β分泌;抑制NLRP3炎症小体可部分逆转高糖诱导的小鼠肾小管上皮细胞EMT.结论:高糖应激可能通过激活NLRP3炎症小体促进IL-1β分泌诱导肾小管上皮细胞发生EMT.     

亚精胺通过抑制NF-κB/NLRP3炎症小体通路减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤

目的 ：本研究旨在观察亚精胺对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）小鼠NLRP3表达与活化的影响。方法 ：采用小动物呼吸机检测亚精胺对ALI小鼠呼吸功能的影响;检测小鼠的生存率;采用肺组织病理评分评估亚精胺对ALI小鼠肺组织形态变化的影响;ELISA检测ALI小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-1β和IL-18的蛋白水平;qPCR检测小鼠肺组织IL-1β、IL-18、NLRP3、ASC及pro-caspase-1、NF-κB的表达;Western Blots检测小鼠肺组织IκB的表达。结果 ：亚精胺可改善ALI小鼠的呼吸功能,提高生存率;减轻LPS诱导的肺病理损伤;降低ALI小鼠炎症因子IL-1β和IL-18的表达;减少ALI小鼠肺组织NLRP3、ASC、pro-caspase-1、NF-κB及IκB的表达。结论 ：亚精胺可通过抑制ALI小鼠肺组织NF-κB的激活,使NLRP3炎症小体的表达及活化减少,从而抑制炎症因子的表达,最终达到减轻ALI的作用。本研究可为从调节内源性能量代谢角度,探索ALI的发生机制提供实验基础     

NLRP3炎症小体介导的巨噬细胞极化在ITP中的作用

目的 探讨在免疫性血小板减少症(ITP)中NLRP3炎症小体的活化水平及抑制NLRP3介导的炎症小体活化对M1型巨噬细胞极化与免疫功能的影响。方法 RT-qPCR法检测ITP患者(ITP组)和健康对照组(Control组)外周血单个核细胞(PBMC)与CD14⁺单核细胞中NLRP3 mRNA的表达；ELISA法检测两组血清中IL-1β与IL-18的含量；Pearson相关系数分析NLRP3、IL-1β与IL-18表达水平与血小板计数的相关性；将ITP患者来源的M0型巨噬细胞(MDMs)分为4组：IgG对照组(IgG组),MCC950处理组(MCC950组),LPS、IFN-γ与IgG处理组(LPS+IFN-γ+IgG组)和LPS、IFN-γ与MCC950处理组(LPS+IFN-γ+MCC950组);RT-qPCR与Western blot检测4组MDMs中M1型巨噬细胞标志物CD86、iNOS、MCP-1 mRNA与蛋白水平；Western blot检测各组MDMs中NLRP3炎症小体相关蛋白NLRP3、ASC、cleaved caspase-1与IL-β的表达；...     

雷公藤甲素对IgA肾病大鼠的肾保护作用及对NLRP3炎症小体的影响

目的探讨雷公藤甲素对IgA肾病（IgAN）大鼠的肾保护作用及其与NLRP3炎症小体的关系。方法40只SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组和雷公藤甲素低、高剂量组。采用口服牛γ-球蛋白（BGG）8周及尾静脉注射BGG方法建立IgAN大鼠模型。于造模完成后灌胃给予低、高剂量雷公藤甲素治疗8周。观察大鼠血清中肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、总蛋白（TP）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）及24 h尿蛋白（24 h TUP）水平;血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-17A、γ干扰素（IFN-γ）及IL-4水平;肾组织中IgA沉积情况;肾脏中IL-1β、Caspase-1、IL-18及NLRP3的表达情况。结果与模型组相比,雷公藤甲素组血清Scr、BUN及尿液中24 h TUP含量明显降低（P < 0.05~P < 0.01）;雷公藤甲素能降低血清中TNF-α、IL-17A、IFN-γ和L-4水平（P < 0.05~P < 0.01）,减轻IgA的沉积（P < 0.01）,抑制IL-1β、Caspase-1、IL-18及NLRP3的表达（P < 0.05~P < 0.01）。结论雷公藤甲素对IgA肾病大鼠肾脏具有保护作用,其作用机制可能是通过抑制NLRP3炎症小体的激活,进而抑制炎症反应。     

银杏酮酯对抑郁症大鼠抑郁样行为及NLRP3炎症小体的作用

目的:观察银杏酮酯(GBE50)对脂多糖(LPS)诱导的抑郁症模型大鼠行为学及NLRP3炎症小体的作用,探讨GBE50抗抑郁的作用机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、GBE50组、氟西汀组,每组10只。除对照组外,均采用LPS腹腔注射诱导大鼠抑郁。GBE50组每天以GBE50(100 mg/kg)灌胃,氟西汀组每天以氟西汀(10 mg/kg)灌胃,其余各组大鼠每天以1%CMC灌胃。4周后进行强迫游泳实验、旷场试验;Western-blot检测各组大鼠海马组织NLRP3、凋亡相关微粒蛋白(ASC)、Caspase-1、白介素-1β(IL-1β)的蛋白表达量;Elisa检测大鼠血清促炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平。结果:模型组大鼠强迫游泳的不动时间、旷场试验中总路程和垂直站立次数较对照组明显下降,GBE50组大鼠的强迫游泳不动时间、旷场试验中总路程和垂直站立次数较模型组明显改善,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。Western-blot结果显示,与对照组比较,模型组大鼠海马组织NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β的蛋白表达明显增加(P0.05);GBE50组NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β蛋白表达较模型组明显降低,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。Elisa结果显示,与对照组相比,模型组大鼠血清促炎性因子TNF-α、IL-6分泌明显增加(P0.05),GBE50组TNF-α、IL-6较模型组明显降低,两组比较差异具有统计学差异(P0.05)。结论:GBE50可以抑制抑郁症大鼠的抑郁样行为,其作用机制可能与抑制NLRP3炎症小体活性及促炎性因子分泌有关。     

刺甘草查尔酮调节自噬和NLRP3炎症小体减轻脓毒症心肌损伤

目的 探究刺甘草查尔酮对自噬、NLRP3炎症小体和脓毒症大鼠心肌损伤的影响。方法 将大鼠按照随机数表法分为Col、LPS、Ech L、Ech M、Ech H、阳性对照组。检测大鼠心功能指标（LVEDD、LVESD、FS、EF）;ELISA检测血清中炎症因子（TNF-α、IL-1β）水平和心肌损伤标志物（cTnΙ、CK-MB）含量;HE染色检测心肌组织病理学变化;TUNEL检测心肌细胞凋亡率;蛋白质印迹检测心肌组织中自噬相关蛋白及炎性小体相关蛋白表达。结果 和Col组相比,LPS组大鼠心功能指标LVEDD、LVESD和血清中TNF-α、IL-1β、cTnΙ、CK-MB水平明显升高,FS、EF明显降低,心肌组织中p62、NLRP3、ASC、cleaved caspase-1蛋白表达和心肌细胞凋亡率均明显升高,组间差异有统计学意义（P <0.05）;和LPS组相比,Ech L、Ech M与Ech H组心功能指标LVEDD、LVESD和血清中TNF-α、IL-1β、cTnΙ、CK-MB水平明显降低,FS、EF明显升高,心肌组织中LC3Ⅱ/LC3Ι比值、Becline-1、p62均逐渐升高...     

NLRP3炎症小体在早期动脉粥样硬化ZDF大鼠中的表达及阿托伐他汀的干预

目的 观察NLRP3炎症小体及其介导的炎症因子在早期动脉粥样硬化(AS)Zucker糖尿病肥胖(ZDF)大鼠主动脉组织中的表达,以及阿托伐他汀(ATV)的干预作用。方法 高脂饲喂联合小剂量多次注射VD3建立ZDF大鼠早期AS模型,并给予ATV干预;检测血糖血脂、胰岛素、ox-LDL和hs CRP,并进行主动脉组织病理学检查和NLRP3、caspase 1、IL-1β和TNF-α基因表达的检测。结果 高脂饲喂后ZDF大鼠血糖、血脂、胰岛素和oxLDL水平均显著上升(P<0.05)。注射VD3后,hs CRP水平均显著上升(P<0.05),主动脉组织出现明显的早期AS病变,且NLRP3、caspase 1、IL-1β和TNF-α基因表达显著上调(P<0.05),而ATV组ZDF大鼠血脂、ox-LDL和hs CRP水平均明显下降(P<0.05),AS病变程度减轻,且主动脉组织中NLRP3、Caspase 1、IL-1β和TNF-α基因表达显著下调(P<0.05)。结论 NLPR3炎症小体及其介导的炎症因子参与了ZDF大鼠早期AS的炎症反应,而ATV可抑制NLRP3炎症小体的表达,抑制AS的炎症反应。     

异落新妇苷通过调节NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路减轻尿酸钠诱导的小鼠急性痛风性关节炎机制研究

[目的] 基于NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor pyrin domain 3,NLRP3)炎症小体和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路,研究异落新妇苷(isoastilbin,IA)对小鼠急性痛风性关节炎模型的抗炎作用及机制。[方法] 通过关节腔注射尿酸钠(monosodium urate,MSU)混悬液,建立小鼠急性痛风性关节炎模型,以自制足趾容积测量装置测定踝关节肿胀度;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察踝关节炎性浸润情况;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测踝关节中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平;免疫印迹法检测踝关节中NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路中相关蛋白的表达情况。 [结果] 踝关节注射MSU混悬液诱导小鼠产生急性痛风性关节炎。与正常组比较,模型组小鼠踝关节肿胀率明显升高(P＜0.01),炎性浸润增加,IL-1β、IL-6、TNF-α分泌水平显著增高(P＜0.01),NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路相关蛋白表达增加(P＜0.01)。与模型组比较,IA具有较强的抗炎效果,剂量依赖性地降低小鼠踝关节肿胀率(P＜0.05,P＜0.01),减轻炎性浸润情况,减少相关炎症因子的分泌(P＜0.01),下调NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路相关蛋白表达(P＜0.01)。 [结论] IA对小鼠急性痛风性关节炎模型表现出较强的抗炎效果,其机制与调节NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路相关。     

线粒体活性氧在心肌成纤维细胞NLRP3炎症小体激活中的作用

目的: 探讨线粒体活性氧在心肌成纤维细胞NLRP3炎症小体激活中的作用。方法: 培养原代小鼠心肌成纤维细胞，细胞分为对照组（正常培养组），使用脂多糖刺激的引发组，使用脂多糖加三磷酸腺苷的激活组，以及再加用mito-TEMPO的干预组。通过MitoSOX染色检测各组细胞线粒体活性氧水平;通过蛋白质印迹法检测细胞内NLRP3、凋亡相关微粒样蛋白（ASC）、Pro-caspase-1、Pro-IL-1β及上清液中caspase-1 p20、IL-1β蛋白水平; 用酶联免疫吸附法检测上清液中IL-1β蛋白的含量; 使用免疫共沉淀法观察ASC与NLRP3蛋白的结合情况。结果： 激活组细胞胞内线粒体活性氧水平较对照组明显增加（P＜0.05），而干预组线粒体活性氧水平较激活组明显下降（P＜0.05）；心肌成纤维细胞经脂多糖刺激后，细胞内NLRP3和Pro IL 1β蛋白较对照组明显升高（P＜0.05），干预组中Pro-IL-1β较激活组明显升高（P＜0.05）。激活组上清液中caspase-1 p20和IL-1β较对照组明显升高（P＜0.05），干预组caspase-1 p20和IL-1β较激活组明显减少（P＜0.05）。激活组NLRP3-ASC连接形成复合体，干预组NLRP3和ASC的结合减少。结论： 心肌成纤维细胞中线粒体活性氧通过促进NLRP3蛋白和ASC蛋白的结合，使NLRP3炎症小体激活。     

黄芩苷对脂多糖诱导的人单核细胞THP-1的炎症反应的作用

目的 探讨黄芩苷(baicalin)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的人单核细胞THP-1的炎症反应的作用。 方法 利用LPS建立人单核细胞THP-1的炎症模型,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitatFive polymerase chain reaction, RT-qPCR)方法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-8、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的相对表达,确定最优的LPS刺激浓度。乳酸脱氢酶检测试剂盒检测黄芩苷的细胞毒性,优选其最佳使用浓度范围。对LPS诱导的人单核细胞THP-1炎症模型予以不同浓度的黄芩苷预处理,利用RT-qPCR法检测黄芩苷对LPS诱导的人单核细胞THP-1的IL-1β、IL-6、IL-8、GM-CSF和TNF-α的表达升高的影响。 结果 与对照组相比,1 μg/mL的LPS处理人单核细胞THP-1 24 h后均可显著引起IL-1β、IL-6、IL-8、GM-CSF和TNF-α的表达升高(P<0.05),黄芩苷在浓度为10、30、100 μmol/L时处理人单核细胞THP-1 24 h和48 h,无明显细胞毒性。30 μmol/L和100 μmol/L的黄芩苷可降低LPS诱导的人单核细胞THP-1的IL-1β、IL-6、IL-8、GM-CSF和TNF-α的表达升高。 结论 黄芩苷可显著抑制LPS诱导的人单核细胞THP-1的炎症反应。     

胆固醇敏感器SCAP功能失调通过上调P2X7受体表达促进THP-1源性巨噬细胞炎症小体活化

目的 探讨胆固醇调节原件结合蛋白裂解激活蛋白(sterol regulatory element binding proteins cleavage-activating protein,SCAP)功能失调促进THP-1源性巨噬细胞炎症小体活化及IL-1β成熟的分子机制.方法 采用基因转染方法在THP-1源性巨噬细胞中过表达SCAP,结合使用P2X7受体(P2X7 receptor,P2X7R)激动剂ATP(5 mmol/L)或抑制剂A438079(100 μmol/L)处理THP-1源性巨噬细胞,将细胞分为:①对照组、②ATP处理组、③A438079处理组、④ATP+A438079组、⑤过表达SCAP组、⑥过表达SCAP+ATP组、⑦过表达SCAP+ A438079组、⑧过表达SCAP+ATP+A438079组.RT-PCR检测过表达SCAP以及激动或抑制P2X7R对P2X7R、pro-IL-1β、NLRP3、pro-caspase-1基因表达水平的影响.流式细胞术检测细胞表面P2X7R的表达.Western blot检测SCAP、pro-IL-1β、NLRP3、caspase-1(p20)以及培养上清中IL-1β的蛋白水平.同一实验在细胞水平重复4次.结果 ①过表达SCAP组与对照组比较,其pro-IL-1β、P2X7R基因表达水平显著升高(P＜0.01),细胞表面P2X7R表达明显上调.②P2X7R激动剂ATP与抑制剂A438079对THP-1源性巨噬细胞SCAP及P2X7R mRNA表达无影响(P＞0.05).P2X7R激动剂ATP能够显著促进THP-1源性巨噬细胞pro-IL-1β mRNA表达(P＜0.05),在过表达SCAP基础上激动P2X7R能够进一步激活pro-IL-1β基因转录(P＜0.01),同时显著促进细胞内pro-IL-1β剪切成熟并向细胞外分泌(P＜0.01),抑制P2X7R活性并不影响过表达SCAP致pro-IL-1β表达上调的作用,但将减少上清中成熟IL-1β的含量.过表达SCAP并不影响NLRP3及caspase-1表达(P＞0.05),但在过表达SCAP基础上充分激动P2X7R将显著上调NLRP3及caspase-1基因及蛋白水平(P＜0.01),上述变化能够被P2X7R抑制剂A438079抵消.结论 胆固醇敏感器SCAP功能失调能够促进THP-1源性巨噬细胞内pro-IL-1 β表达,同时通过上调细胞表面P2X7R表达激活NLRP3炎症小体,促进pro-IL-1β成熟及其向细胞外分泌.     

芹菜素对脂多糖诱导的炎性体活化调节的实验观察

目的 探讨芹菜素对脂多糖诱导的炎症中炎性体活化是否有调节作用,并初步研究其作用机制。方法 利用药物处理急性单核白血病细胞株THP-1,设置脂多糖处理组,脂多糖+25μmol/L芹菜素处理组,脂多糖+50 μmol/L芹菜素处理组及脂多糖+Z-VAD[半胱氨酸蛋白酶（caspase）抑制剂]处理组,以二甲基亚砜(DMSO)处理作为对照组。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中白细胞介素1β(IL-1β)的含量;通过Western印迹检测IL-1β及caspase-1的剪切;通过报告基因方法检测芹菜素对炎症转录因子核因子(NF)κB活性的影响。结果 四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法表明芹菜素对细胞未见明显毒性。在THP-1细胞中,芹菜素对于脂多糖诱导的炎性体活化产物IL-1β的产生具有显著的抑制作用[上清中IL-1β浓度：对照组为(362±64) pg/ml,脂多糖组为(1549±320) pg/ml,脂多糖+25 μmol/L芹菜素组为(397±150) pg/ml,脂多糖+50 μmol/L芹菜素组为( 268±142) pg/ml,P＜0.05]。芹菜素能够显著抑制IL-1β前体(pm-IL-1β)以及炎性体成分caspase-1前体（pro-caspase-1）的成熟过程,并且能够抑制脂多糖诱导的NF-κB的活化（NF-κB活性相对荧光值：对照组为0.6±0.1,脂多糖组为32.7±0.8,脂多糖+25μmol/L芹菜素组为12.9±1.8,脂多糖+ 50 μmol/L芹菜素组为10.0±3.2,P＜0.05）。结论 芹菜素能够通过抑制caspase-1的成熟抑制脂多糖诱导的炎性体的活化。     

激活大麻素受体2可减轻实验性脓毒症大鼠的急性肺损伤

目的 探讨激活大麻素受体2（CB2）对大鼠脓毒症急性肺损伤的保护作用及机制。方法 将48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、CB2激动剂组和P38 MAPK抑制剂组（12只/组）。对照组腹腔注射生理盐水,其余3组均腹腔注射脂多糖造模6 h;CB2激动剂组在注射脂多糖前30 min腹腔注射CB2激动剂JWH133（3 mg/kg）,P38 MAPK抑制剂组在CB2激动剂组基础上提前30 min腹腔注射P38 MAPK抑制剂SB203580（5 mg/kg）。观察和检测肺组织病理学、含水率、液体清除率、炎症因子的变化情况,肺组织CB2、紧密连接的基因及蛋白表达情况以及P38 MAPK磷酸化情况。结果 与对照组相比,模型组大鼠的肺泡结构破坏严重,液体清除率、肺组织中CB2、occludin和ZO-1蛋白的mRNA及蛋白表达降低,肺组织含水率、P38 MAPK的磷酸化程度、肺灌洗液中TNF-α、IL-1β均增加,差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组相比,CB2激动剂组肺泡形态有所恢复,但仍有炎性浸润,肺组织含水率、P38 MAPK磷酸化程度、肺灌洗液中TNF-α、IL-1β降低,液体清除率、肺组织CB2、occludin和ZO-1蛋白的mRNA及蛋白表达增加,差异均有统计学意义（P<0.05）。与CB2激动剂组相比,P38 MAPK抑制剂组肺泡结构有所恢复,肺组织P38 MAPK磷酸化程度、肺灌洗液中TNF-α、IL-1β水平降低,occludin、ZO-1蛋白表达增加,差异均有统计学意义（P<0.05）,而CB2的mRNA及蛋白表达无变化（P>0.05）。结论 CB2激活后可通过抑制P38 MAPK信号通路,降低肺组织炎症因子释放,促进紧密连接蛋白表达,对实验性脓毒症大鼠急性肺损伤起到保护作用。     

NLRP3炎症体与糖尿病并发症的研究进展

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症体包含NLRP3、细胞凋亡相关的斑点样蛋白质和caspase-1前体,可以通过激活胱天蛋白酶caspase-1,促进白细胞介素(IL)1β和IL-18的成熟和分泌,引起炎性反应。糖尿病及其并发症(如动脉粥样硬化、糖尿病肾病)通过高血糖、高胆固醇血症、高尿酸血症等激活NLRP3炎症体,引起IL-1β、IL-18水平升高,诱发炎性反应。目前研究发现,减少对NLRP3炎症体激活的刺激,可以预防和减轻糖尿病并发症,为糖尿病及其并发症的防治开拓了新的空间。     

和厚朴酚可体外减轻阿霉素诱导的心肌毒性：基于激活AMPK/Nrf2信号通路抑制细胞焦亡

目的 探讨和厚朴酚（HKL）改善阿霉素（DOX）诱导的H9c2心肌细胞毒性的作用及机制。方法 采用DOX处理H9c2细胞心肌毒性模型,随机分为4组：正常对照组、DOX处理组（DOX）、HKL和DOX共处理组（DOX+HKL）以及HKL、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）抑制剂和DOX共处理组（DOX+HKL+AMPK抑制剂）。24 h后观察细胞形态变化,用CCK-8法检测细胞活力,RT-PCR检测炎性因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素-1β（IL-1β）的mRNA水平,Western blot检测裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase-3）、细胞色素c和细胞焦亡分子NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（Caspase-1）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）以及p-AMPK、红系衍生核因子相关因子2（Nrf2）的表达,免疫荧光染色观察NLRP3和p-AMPK的表达。结果 和正常对照组相比,DOX组H9c2细胞变得肿胀且细胞活力明显降低（P< 0.05）,TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平显著增加（P<0.05）,同时裂解的caspase-3、细胞色素c、NLRP3、Caspase-1和ASC表达增加（P<0.05）,p-AMPK和Nrf2表达降低（P<0.05）,NLRP3荧光染色强度增加,p-AMPK荧光强度降低;和DOX组相比,DOX+HKL组细胞肿胀减轻,细胞活力明显增加（P<0.05）,TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平显著降低（P<0.05）,裂解的caspase-3、细胞色素c、NLRP3、Caspase-1和ASC表达降低（P<0.05）,而p-AMPK和Nrf2表达增加（P<0.05）,另外NLRP3荧光染色强度降低,p-AMPK荧光强度增加;和DOX+HKL组相比,AMPK抑制剂可以逆转HKL对DOX心肌的保护作用。结论 HKL可通过抑制细胞焦亡减轻DOX引起的H9c2心肌细胞毒性损伤,这一作用与激活AMPK调控Nrf2信号有关。     

右美托咪定预处理通过抑制NLRP3炎性小体激活减轻大鼠肠缺血再灌注诱导的急性肺损伤

目的 探讨右美托咪定（Dex）对大鼠肠缺血再灌注（II/R）所致急性肺损伤（ALI）的保护作用以及核苷酸结合域样受体蛋白3（NLRP3）炎性小体活性的影响。方法 将32只健康雄性SD大鼠,随机分为4组（8只/组）。假手术组（Sham组）仅暴露肠系膜上动脉（SMA）,肠缺血再灌注组（II/R组）阻断SMA 1 h后再灌注2 h,II/R+右美托咪定处理组（Dex+II/R组）右美托咪定干预后行再灌注,Dex假手术组（Dex组）右美托咪定预处理假手术组。Sham组和II/R组腹腔注射等量生理盐水。采取夹闭SMA 1 h再灌注2 h的方法建立肠缺血再灌注损伤模型。测定各组大鼠肺部组织湿/干质量比值（W/D）、髓过氧化物酶（MPO）活性,HE染色评估肺组织病理学变化以及行肺损伤评分;ELISA检测肺部组织中炎性因子TNF-α、IL-18、IL-1β水平;Western blot检测肺部组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、Caspase-1及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）蛋白的表达水平。结果 相较于Sham组,II/R组肺组织病理损伤明显,W/D值、MPO活性及肺组织中的TNF-α、IL-18、IL-1β表达显著升高（P<0.05）,肺组织中NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达增加（P<0.05）,p-AMPK蛋白表达减少（P<0.05）;相较于II/R组,Dex+II/R组肺组织病理损伤轻微,W/D值、MPO活性及肺组织中的TNF-α、IL-18、IL-1β表达明显下降（P<0.05）,肺组织NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达明显下降（P<0.05）,p-AMPK蛋白表达明显增加（P<0.05）。结论 右托美咪定通过对NLRP3炎性小体激活的抑制,减轻炎性反应,进而改善大鼠II/R所致的ALI。