左旋紫草素对大鼠重症急性胰腺炎并发急性心肌损伤的保护作用研究

目的 探讨左旋紫草素对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)并发急性心肌损伤(AMI)的保护作用.方法 24只雄性SD大鼠随机分为假手术组、SAP模型组与左旋紫草素干预组(20 mg/kg),每组8只.采用L-精氨酸腹腔注射制备SAP模型,并于术后24 h内腹腔注射左旋紫草素进行干预治疗.HE染色观察胰腺及心肌组织病理变化;酶联免疫吸附剂测定法测定各组血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)水平;蛋白质印迹技术检测各组心肌半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase-1)、炎性小体(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)蛋白表达;DHE荧光探针法检测各组心肌活性氧ROS含量.结果 与假手术组相比,SAP模型组大鼠胰腺和心肌组织损伤严重,血清CK-MB、TNF-α、IL-1β水平增加,Caspase-1、NLRP3、ASC蛋白表达水平增高,心肌ROS水平增加,差异均有统计学意义(P<0.05).与SAP模型组比较,左旋紫草素干预组大鼠胰腺和心肌组织损伤程度得到改善,血清CK-MB、TNF-α、IL-1β水平降低,Caspase-1、NLRP3、ASC蛋白表达水平减少,心肌ROS水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 左旋紫草素可减轻SAP并发的AMI,其机制可能与抑制心肌组织NLRP3炎性小体过度活化有关.     

异氟醚全身麻醉对腰椎间盘突出症大鼠海马区小胶质细胞活化及炎症的影响

目的 探讨异氟醚全身麻醉对腰椎间盘突出症(LDH)大鼠海马区小胶质细胞活化及炎症的影响.方法 将40只大鼠随机分为对照组10只、模型组30只.模型组大鼠在异氟醚全身麻醉下行自体髓核移植术以建立LDH模型,对照组不进行麻醉和手术操作.建模后1 d,采用旷场实验及条件恐惧实验观察大鼠的行为学表现;检测对照组(实验后2 d)和模型组(建模后2、4、8 d)海马CA1区小胶质细胞数量,小胶质细胞中含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)活化情况,海马组织中的白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,以及NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase1)蛋白表达情况.结果 模型组环境诱发僵直时间占比较对照组降低(P<0.05),但两组大鼠中心区域活动时间、声音诱发僵直时间占比差异均无统计学意义(均P>0.05).模型组建模后2、4、8 d小胶质细胞数量均多于对照组,且建模后2、4、8 d小胶质细胞数量依次减少(均P<0.05).对照组海马组织细胞质内活化NLRP3较少,模型组建模后2 d海马组织细胞质内NLRP3大量激活,但随着时间的延长,细胞质内活化NLRP3逐渐减少.模型组建模后2 d海马组织IL-1β、TNF-α水平及建模后4 d TNF-α水平均高于对照组,且建模后4、8 d海马组织IL-1β、TNF-α水平均低于建模后2 d(均P<0.05).模型组建模后2、4、8 d海马组织NLRP3、ASC及Caspase1蛋白相对表达量均高于对照组,且建模后2、4、8 d大鼠海马组织NLRP3、ASC及Caspase1蛋白相对表达量依次降低(均P<0.05).结论 异氟醚全身麻醉可能通过促进LDH大鼠海马区小胶质细胞胞质中NLRP3的活化以上调IL-1β、TNF-α表达,从而导致中枢神经系统炎症反应的发生.     

慢性牙周炎牙龈卟啉单胞菌感染患者NLRP3炎症小体与炎症反应及焦亡指标的相关性

目的研究慢性牙周炎牙龈卟啉单胞菌感染患者NLRP3炎症小体与炎症反应及焦亡指标的相关性。 方法选择300例慢性牙周炎患者,按照牙龈卟啉单胞菌感染情况分为阳性组和阴性组。比较两组牙周健康指标、牙周组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Caspase-1 mRNA和GSDMD-N蛋白表达水平,以及龈沟液白细胞介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。采用Pearson检验进行相关性分析。 结果阳性组菌斑指数(PLI)、牙龈指数(GI)、附着丧失(AL)、牙周袋深度(PD)、牙周组织NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA、GSDMD-N蛋白,以及龈沟液IL-1β、IL-18、TNF-α水平均高于阴性组(P＜0.05)。NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA表达水平与PLI、GI、AL、PD、GSDMD-N蛋白、IL-1β、IL-18、TNF-α水平均呈正相关(P＜0.05)。 结论慢性牙周炎患者牙龈卟啉单胞菌感染加重病情、炎症反应及细胞焦亡,其作用可能与激活NLRP3炎症小体有关。     

冬凌草甲素通过NLRP3途径抑制脂多糖诱导的巨噬细胞炎症反应

目的研究冬凌草甲素(Oridonin)对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞炎症反应中核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)的作用。方法将Raw264.7巨噬细胞分成空白组、对照组、实验组(终浓度分别为4、10、15、20μmol/L Oridonin组),采用CCK8法检测细胞存活率,筛选Oridonin药物浓度。将小鼠Raw264.7巨噬细胞分为正常对照组、LPS组和LPS+Oridonin组,采用RT-qPCR法检测NLRP3、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、半胱氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)和白介素-1β(IL-1β)mRNA的表达;Western blot法检测NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白表达;免疫荧光染色检测NLRP3和Caspase-1蛋白共定位。结果 Oridonin浓度为20μmol/L细胞存活率急剧减少,浓度在4～15μmol/L之间细胞存活率较高,实验选用10μmol/L Oridonin处理小鼠巨噬细胞。与正常对照组比较,LPS组NLRP3、TNF-α、IL-6、Caspase-1和IL-1βmRNA基因表达显著上调(P0.05);与LPS组比较,LPS+Oridonin组NLRP3、TNF-α、IL-6、Caspase-1和IL-1βmRNA基因表达明显减少(P0.05)。与正常对照组比较,LPS组NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白表达显著增多(P0.05),与LPS组比较,LPS+Oridonin组巨噬细胞内NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白表达明显减少(P0.05)。与正常对照组比较,LPS组NLRP3和Caspase-1蛋白共定位明显增多,LPS+Oridonin组蛋白共定位明显减少。结论 Oridonin通过抑制NLRP3途径减轻LPS诱导的巨噬细胞炎症反应。     

除湿通痹方对急性痛风性关节炎大鼠炎症级联反应的作用

目的 探讨除湿通痹方对急性痛风性关节炎炎症级联反应的作用。方法 SD大鼠随机分为空白组、模型组、秋水仙碱组,除湿通痹方高、中、低剂量组共6组,每组10只,于给药前1d和给药第6天,除空白组给予生理盐水外,其余5组复制急性痛风性关节炎模型,连续灌胃22d后处死采取标本取材,观察各组大鼠关节肿胀度、功能障碍指数和炎症指数、测定IL-1β、TNF-α浓度,检测caspase-1、ASC、NLRP3基因表达,并分析其关系。结果 各给药组对急性痛风性关节炎大鼠活动障碍均有缓解作用;秋水仙碱组TNF-α表达水平显著低于模型组（P<0.05）：秋水仙碱组及除湿通痹方高剂量组IL-1β、caspase-1、ASC、NLRP3表达水平显著低于模型组（P<0.05）;caspase-1、ASC、NLRP3均与IL-1β存在相关性（P<0.05）;TNF-α与ASC存在相关性（P<0.05）。结论 秋水仙碱及除湿通痹方高剂量能通过抑制NLRP3炎性体的表达,从而抑制IL-1β相关的炎性过程,发挥其抗炎免疫作用。     

舒鹏教授健脾化瘀法治疗胃癌经验浅析

[目的]通过慢性束缚应激(chronic restraint stress,CRS)建立小鼠抑郁症模型,探究天麻水煎剂对小鼠抑郁样行为和神经递质5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)含量的影响。[方法]32只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性药物组和天麻组,每组8只。除正常对照组外,其他小鼠均进行连续21d、每天6h的束缚刺激,另外阳性药物组每天予10mg/kg盐酸氟西汀灌胃,天麻组每天予1g/kg的天麻水煎剂灌胃。记录小鼠体重变化,并进行悬尾试验、强迫游泳试验、旷场试验,造模结束后检测小鼠肝功能指标谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)的水平,并测定各组小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和脑组织TNF-α、IL-1β、5-HT含量。[结果]天麻水煎剂灌胃对CRS小鼠血清ALT和AST水平无显著影响(P0.05),表明在有效剂量下天麻水煎剂不具有肝毒性。与正常对照组比较,模型组小鼠表现出明显的抑郁样行为,糖水偏好指数降低(P0.01),悬尾不动和强迫游泳不动时间增加(P0.01),旷场试验中的中心区域移动距离和时间减少(P0.01)。与模型组比较,天麻组小鼠糖水偏好指数显著增加(P0.01),悬尾不动和强迫游泳不动时间显著降低(P0.05),旷场试验中的中心区域移动距离和时间显著增加(P0.05,P0.01)。进一步检测显示,天麻组小鼠血清和脑组织中TNF-α和IL-1β含量显著降低(P0.05,P0.01),脑组织5-HT含量显著升高(P0.05)。[结论]天麻水煎剂能够通过降低促炎细胞因子TNF-α和IL-1β含量,缓解炎症对中枢神经系统的压力,同时升高神经递质5-HT在海马区的含量,刺激5-HT能系统,缓解CRS小鼠的抑郁行为。     

白子菜提取物对急性痛风性关节炎大鼠模型的抗炎免疫作用

【目的】探讨白子菜提取物对急性痛风性关节炎的抗炎免疫作用及机制。【方法】复制急性痛风性关节炎大鼠模型,将72只Wistar大鼠随机分为9组(每组8只):空白组,模型组,秋水仙碱组(剂量为0.2 mg·kg-1·d-1),白子菜水提取物低、中、高剂量组(剂量分别为2.5、5、10 g·kg-1·d-1),白子菜醇提取物低、中、高剂量组(剂量分别为5、10、20 g·kg-1·d-1)。连续灌药7 d后取材,观察各组大鼠关节活动情况(炎症指数、功能障碍指数、足肿胀度),采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,定量聚合酶链反应(q PCR)法检测单核细胞半胱天冬酶-1(caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、NLRP3炎性体(NLRP3)表达,并分析其关系。【结果】各药物处理组对急性痛风性关节炎大鼠活动障碍均有缓解作用;秋水仙碱组TNF-α表达水平显著低于模型组(P<0.05);秋水仙碱组及白子菜醇提取物中剂量组IL-1β、caspase-1、ASC、NLRP3表达水平显著低于模型组(P<0.05);IL-1β与caspase-1、ASC、NLRP3存在显著相关性,TNF-α与ASC存在显著相关性(P<0.05)。【结论】秋水仙碱及中剂量白子菜醇提物能通过抑制NLRP3炎性体的表达,从而抑制IL-1β相关的炎性过程,发挥其抗炎免疫作用。     

黄芪甲苷通过NLRP3炎性小体调节糖尿病动脉粥样硬化早期大鼠血脂及炎症因子的研究

目的  探讨黄芪甲苷调节糖尿病动脉粥样硬化早期大鼠血脂及炎症因子的作用及机制。方法  将48只GK大鼠随机分为模型组、阳性药(格列喹酮片联合盐酸贝那普利片)组、黄芪甲苷低剂量组和黄芪甲苷高剂量组,每组12只,均为高脂饲料饲养。12只Wistar大鼠作为空白对照。给药组分别灌胃格列喹酮片(10 mg/kg)及盐酸贝那普利片(10 mg/kg)和黄芪甲苷(20、40 mg/kg),对照组及模型组灌胃生理盐水,每日1次,连续6周。动物体质量及血糖被监测。采用生化法测定大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)的含量;HE染色法观察大鼠腹主动脉病理形态;ELISA法测定大鼠腹主动脉IL-6、IL-10、CRP、TNF-α的含量;Western blot法检测大鼠腹主动脉NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白的表达。结果   与模型组相比,黄芪甲苷高、低剂量组均可明显改善大鼠腹主动脉病变, 降低大鼠血糖及血清TC、TG、LDL水平,升高HDL水平,降低腹主动脉IL-6、CRP、TNF-α水平,提高IL-10水平, 下调NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白的表达(P＜0.05~0.000 1)。结论   黄芪甲苷可调节糖尿病动脉粥样硬化早期大鼠的血脂及炎症状态,机制与调控NLRP3炎性小体相关蛋白的表达密切相关。      

黄芪甲苷通过NLRP3炎性小体调节糖尿病动脉粥样硬化早期大鼠血脂及炎症因子的研究

目的探讨黄芪甲苷调节糖尿病动脉粥样硬化早期大鼠血脂及炎症因子的作用及机制。方法将48只GK大鼠随机分为模型组、阳性药(格列喹酮片联合盐酸贝那普利片)组、黄芪甲苷低剂量组和黄芪甲苷高剂量组,每组12只,均为高脂饲料饲养。12只Wistar大鼠作为空白对照。给药组分别灌胃格列喹酮片(10 mg/kg)及盐酸贝那普利片(10 mg/kg)和黄芪甲苷(20、40 mg/kg),对照组及模型组灌胃生理盐水,每日1次,连续6周。动物体质量及血糖被监测。采用生化法测定大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)的含量;HE染色法观察大鼠腹主动脉病理形态;ELISA法测定大鼠腹主动脉IL-6、IL-10、CRP、TNF-α的含量;Western blot法检测大鼠腹主动脉NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白的表达。结果与模型组相比,黄芪甲苷高、低剂量组均可明显改善大鼠腹主动脉病变,降低大鼠血糖及血清TC、TG、LDL水平,升高HDL水平,降低腹主动脉IL-6、CRP、TNF-α水平,提高IL-10水平,下调NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白的表达(P0.05～0.000 1)。结论黄芪甲苷可调节糖尿病动脉粥样硬化早期大鼠的血脂及炎症状态,机制与调控NLRP3炎性小体相关蛋白的表达密切相关。     

银杏叶提取物对阻塞性睡眠呼吸暂停综合征合并高血压大鼠血压的影响

目的：研究银杏叶提取物( GBE)对阻塞性睡眠呼吸暂停综合征( OSAS)合并高血压大鼠血压的影响,及GBE可能的作用机制。方法30只健康雄性SD大鼠随机均分为正常对照( NC)组、慢性间歇性低氧( CIH)组、GBE灌胃组,各组10只。于实验前后采用无创血压分析仪观察大鼠血压变化;HE染色观察大鼠心肌、肾、腹主动脉的病理变化;同时检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α( TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)的含量;及外周脂肪组织中Toll样受体4(TLR4)、c-Jun 氨基末端激酶(JNK)蛋白及其mR-NA表达水平。结果 CIH组大鼠血压明显高于对照组( P<0．01),GBE灌胃组大鼠血压显著低于CIH组(P<0．01);与 NC 组相比,CIH组心肌细胞、肾小管明显水肿呈水样变性,GBE灌胃组与CIH组比较心肌细胞、肾小管水肿显著降低,各组腹主动脉均无明显病理改变;与NC组比较,CIH组大鼠血清中 TNF-α、IL-1、IL-6的含量均显著增高( P <0．01),GBE灌胃组与CIH组比较大鼠血清中TNF-α、IL-1、IL-6的含量显著降低(P<0．05),GBE灌胃组与NC 组比较TNF-α、IL-6的含量差异无统计学意义,而IL-1的含量GBE灌胃组明显高于NC 组(P<0．01);与NC组比较,CIH组外周脂肪组织中TLR4、JNK蛋白及其mRNA表达水平显著增高(P<0．01),而GBE灌胃组其表达含量显著低于CIH组(P<0．01)。结论 GBE可以抑制OSAS合并高血压大鼠脂肪组织TLR4、JNK蛋白及mRNA的表达,降低血清中TNF-α、IL-1、IL-6的水平,对OSAS合并高血压大鼠血压有显著降压作用。