ADMA对自发性高血压大鼠血小板聚集的影响及氯沙坦的干预作用

目的:以自发性高血压大鼠为动物模型,氯沙坦为干预药物,探讨非对称性二甲基精氨酸(asymmetricdimethylarginine,ADMA)对血小板聚集的影响以及氯沙坦的干预作用。方法:自发性高血压大鼠(SHR)随机分为SHR组、L-精氨酸组(SHR L-精氨酸)、氯沙坦组(SHR 氯沙坦);另设一组京都Wistar大鼠作为对照组(WKY),每组大鼠均16只。所有大鼠自由饮水、饮食,WKY组与SHR组每天10mL/(kg·d)蒸馏水灌胃1次,L-精氨酸组与氯沙坦组分别用1.0g/(kg·d)的L-精氨酸、30mg/(kg·d)的氯沙坦钾溶解于10mL蒸馏水灌胃1次,连续2周。分别检测血小板聚集率(Pt-Ag),血浆与血小板NO,NOS,血浆与血小板ADMA浓度;另取SD大鼠血小板,分别用上述4组大鼠血管内皮孵育血小板,检测Pt-Ag。结果:(1)SHR组Pt-Ag显著高于WKY组(P<0.01);L-精氨酸与氯沙坦干预后的Pt-Ag与SHR比较均显著降低(P<0.01);(2)SHR组血浆NO浓度与血小板NO含量均显著低于WKY组(P<0.05);L-精氨酸与氯沙坦干预后NO均显著升高(P<0.05);(3)SHR组血浆与血小板NOS活性显著低于WKY组(P<0.05);L-精氨酸与氯沙坦干预后均显著升高NOS活性(P<0.01);(4)SHR组血浆ADMA浓度与血小板ADMA含量显著高于WKY组(P<0.05);L-精氨酸与氯沙坦干预后均显著降低ADMA(P<0.05);(6)血管内皮体外孵育血小板后,与对照组相比,WKY内皮组Pt-Ag显著降低(P<0.05);SHR内皮组Pt-Ag显著增加(P<0.05);与SHR内皮组相比,L-精氨酸与氯沙坦内皮组Pt-Ag均显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论:(1)高血压大鼠ADMA浓度升高导致NOS活性降低和NO合成减少,这可能是引起血小板聚集率增高的重要原因;(2)氯沙坦在降压的同时显著降低血小板聚集率,该作用可能是通过降低体内ADMA浓度、增加NOS活性和NO合成而实现的。     

牛磺酸对自发性高血压大鼠血小板聚集的影响

目的:探讨牛磺酸对自发性高血压大鼠血小板聚集的影响。方法:8只Wistar为空白对照组、16只自发性高血压大鼠(SHR)随机分为模型组和牛磺酸组,每组8只。牛磺酸组以牛磺酸3 g/(kg.d)灌胃,其余两组均以等容积生理盐水灌胃。连续给药2 w后分别检测各组大鼠血小板聚集率(Pt-Ag),血浆NO与血小板浓度及NOS活性。结果:与空白对照组比较,模型组及牛磺酸组Pt-Ag显著升高(P0.05),血浆NO浓度、NOS活性均显著降低(P0.05);与模型组比较,牛磺酸组Pt-Ag降低(P0.05),血浆NO浓度、NOS活性均显著升高(P0.05)。结论:牛磺酸可显著降低自发性高血压大鼠的血小板聚集率,该作用可能是通过增加NO合成、提高NOS活性实现的。     

NO前体-左旋精氨酸相关肽对大鼠血小板聚集、血栓形成及血浆NO、cGMP、PGI2的影响

目的观察左旋精氨酸相关肽(L-ArgX)对大鼠血小板聚集、血栓形成及血浆一氧化氮(NO)、环磷酸鸟苷(cGMP)和前列环素(PGI2)的影响.方法24只SD雄性大鼠随机分为2组,分别灌服L-ArgX 61.4mg/kg@b@w及对同体积空白对照液,每日1次,共8 d.8 d后观察大鼠血小板聚集(比浊法)、血栓形成(丝线法)及血浆NO、cGMP、PGI2浓度的变化(分光光度法和放免法).结果 L-ArgX可显著抑制大鼠血小板聚集率及血栓形成,使血浆NO、cGMP浓度升高,血浆PGI2浓度有升高趋势,但与对照组相比无统计学差异.结论 L-ArgX可抑制血小板聚集,其作用机制可能由一氧化氮-环磷酸鸟苷代谢通路(NO-cGMP pathway)所介导,此外尚可能有其它作用机制参与.L-ArgX可视为一种NO前体,具有抗凝血作用.     

螺旋藻激酶对急性血瘀模型大鼠的影响

目的 探讨螺旋藻激酶(SPK)对急性血瘀模型大鼠的血液流变学、血小板聚集率和环磷酸腺苷(cAMP)的影响.方法 40只SD大鼠分为正常对照组、模型组、阿司匹林组和SPK高、低剂量组,灌胃给药7 d,采用肾上腺素冰水浴刺激复制急性血瘀大鼠模型,应用全自动血流变测定仪检测全血黏度、血浆黏度、红细胞压积(Hct)、红细胞聚集指数(EAI)、红细胞变形指数(DI)和红细胞刚性指数(ERI),酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆cAMP的水平,采用二磷酸腺苷诱导大鼠血小板聚集,用比浊法测定最大聚集率.结果 SPK可以降低急性血瘀大鼠的全血黏度,血浆黏度、Hct、EAI和血小板最大聚集率,升高血浆cAMP水平,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),对DI和ERI无明显影响.结论 SPK能明显改善急性血瘀大鼠血液流变学的异常变化且具有抗血小板聚集作用.     

miRNA-141通过调节TLR4信号通路抑制大鼠血栓形成

【摘要】 目的 研究微小RNA（miR）-141对血栓模型大鼠血栓形成、血小板聚集及血浆中一氧化氮（NO）、环磷酸〖JP2〗鸟苷（cGMP）和前列环素（PGI2）的影响。 方法 90只SD雄性大鼠随机进行分组，10只为正常对照组；模型组使用5 g/L的CMC-Na建立大鼠动静脉旁路血栓模型（20只）；治疗组在CMC-Na基础上分别静脉注射100 mg/kg阿司匹林（Asp）作为阳性对照（10只）、miR-141的拟似物mimic（20只）、mimic阴性对照mimic-NC（10只）、mimic联合Toll样受体4（TLR4）过表达重组质粒pcDNA3.1-TLR4（mimic+pcDNA3.1-TLR4）（20只），连续4周。观察各组血栓形成的影响，比浊法观察ADP诱导的血小板聚集变化，试剂盒法检测各组血浆中NO, cGMP, PGI2的水平；蛋白免疫印迹法检测TLR4、NF-κB、Rac1、IL-1β的蛋白水平。 结果 miR-141-mimic可显著抑制血栓形成和血小板聚集率（P＜0.05），升高血浆中NO（P＜0.05）、cGMP（P＜0.05）、PGI2（P＜0.05）浓度，miR-141-mimic组效果优于阿司匹林组（P＜0.05）。miR-141-mimic可显著抑制NF κB（P＜0.05），Rac1（P＜0.05），IL-1β（P＜0.05）的蛋白水平。mimic+pcDNA3.1-TLR4组的逆转miR-141-mimic组的效果（P＜0.05）。 结论 miR-141通过抑制TLR4信号通路发挥抗血栓作用。     

蓝萼甲素抗血栓作用研究

目的：研究蓝萼甲素的抗血栓作用。方法：考察蓝萼甲素对SD大鼠的血小板聚集性、血瘀模型大鼠血浆中TXB2、6-Keto-PGF1α以及NO和ET含量的影响,通过大鼠动-静脉旁路血栓形成实验、ADP-肾上腺素诱发小鼠体内血栓形成实验、急性血瘀模型大鼠血液流变学实验、大鼠离体动脉条的舒张实验,研究蓝萼甲素的抗血栓作用,并初步探讨其机制。结果 ：蓝萼甲素浓度依赖性降低ADP以及凝血酶所诱导的血小板聚集;降低血瘀模型大鼠血浆中TXB2含量,显著升高血浆中6-KetoPGF1α含量,升高血浆中NO的含量,降低血浆中ET含量;蓝萼甲素对大鼠动-静脉旁路血栓形成有抑制作用,对ADP-肾上腺素混合溶液诱导的小鼠血栓性偏瘫形成有保护作用;显著降低急性血瘀模型大鼠的全血及血浆黏度,蓝萼甲素依赖内皮细胞发挥舒张血管作用,而且与NO合成通路密切相关。结论：蓝萼甲素通过抑制血小板聚集,抑制血栓形成,降低全血及血浆黏度,舒张血管,从而发挥抗血栓作用。     

淫羊藿总黄酮对慢性心力衰竭大鼠肿瘤坏死因子-α、一氧化氮、环磷酸鸟苷通路的影响

目的:观察淫羊藿总黄酮(TFE)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠左心室重量指数(LVWI)及血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、左心室心肌一氧化氮(NO)、左心室心肌环磷酸鸟苷(cGMP)改变的影响.方法:用异丙基肾上腺素(ISO) (170mg/kg)对SD大鼠皮下注射2次,6周后依据超声心动图检测左心室短轴缩短率(FS)<45%确定CHF造模成功,按照FS顺序将48只大鼠随机分为4组:TFE低剂量组(TFE-L)、TFE中剂量组(TFE-M)、TFE高剂量组(TFE-H)、CHF组.空白对照(CON)组10只. 结果:与CON组相比,CHF组大鼠出现心率(HR)、左心室舒张末压力(LVEDP)、大鼠LVWI显著升高(P<0.01),左心室内压峰值(LVSP)和左心室压力上升/下降最大速率(±dp/dtmax)明显降低(P<0.01),血浆TNF-α及左心室心肌NO浓度显著增高(P<0.01),左心室心肌cGMP浓度显著降低(P<0.01).与CHF组相比,TFE各剂量组LVEDP和TNF-α显著降低(P<0.01),左心室±dp/dtmax 显著增加(P<0.01);TFE-H组HR降低(P<0.01)、LVSP升高(P<0.05),左心室心肌cGMP浓度明显增高(P<0.01) ,LVWI明显减低(P<0.01);TFE-M、TFE-H组左心室心肌NO明显降低(P<0.01).结论:TFE具有减轻CHF大鼠左心室重塑的作用,能改善大鼠的心功能,其机制与降低TNF-α、NO、升高左心室心肌cGMP浓度有关.     

NO前体—左旋精氨酸相关肽对大鼠血小板聚集、血栓形成及血浆NO、cGMP、PGI2

目的 观察左旋精氨酸相关肽（L-AraX)对大鼠血小板聚集、血栓形成及血浆一氧化氮（NO）、环磷酸鸟苷（cGMP)和前列环素（PGI2）的影响。方法 24只SD雄性大鼠随机分为2组，分别灌服L-ArgX61.4mg/kg.b.w及对同体积空白对照液，每日1次，共8d。8d后观察大鼠血小板聚集（比浊法）、血栓形成（丝线法）及血浆NO、cGMP、PGI2浓度的变化（分光光度法和放免法）。结果 L-ArgX可显著抑制大鼠血小板聚集率及血栓形成，使血浆NO、cGMP逍度升高，血浆PGI2浓度有浓度有升高趋势，但与对照组相比无统计学差异。结论 L-ArgX可抑制血小板聚集，其作用机制可能由一氧化氮-环磷酸鸟苷代谢通路（NO-cGMPpathway)所介导，此外尚可能有其它作用机制参与，L-ArgX可视为一种NO前体，具有抗凝血作用。     

阿司匹林改善2型糖尿病患者血小板上内皮型一氧化氮合酶的功能

目的:探讨阿司匹林对2型糖尿病患者血小板上内皮型一氧化氮合酶(endothelium-type nitric oxide synthase,eNOS)功能的影响.方法:分别用浓度为25、50、100 μmol/L阿司匹林处理正常人和2型糖尿病患者的血小板,用比浊法测定血小板聚集率;根据L-[3H]-精氨酸在eNOS的作用下转化为L-[3H]-瓜氨酸的原理检测eNOS活性;用试剂盒检测cGMP的含量.结果:与对照组相比,阿司匹林可明显降低正常人和2型糖尿病患者的血小板聚集率,增强eNOS的活性,增加cGMP的含量,并且随着阿司匹林浓度的增加,其作用更明显(差异有显著性).而同一浓度的阿司匹林对正常人血小板的作用比对2型糖尿病患者的作用更加明显.结论:阿司匹林可以浓度依赖性的改善2型糖尿病患者血小板上eNOS功能.     

川芎嗪对先心病肺动脉高压影响作用的研究

目的探讨川芎嗪对先心病肺动脉高压的影响。方法选取先天性心脏病45例。其中中、重度肺动脉高压30例;肺动脉压正常15例。分为川芎嗪治疗组(A组,n=15)及对照组(B组,n=15)。肺动脉压正常者为空白对照组(C组,n=15)。围术期不同时点测定血浆中ET1、NO、cAMP、cGMP含量,治疗组于用药前及术中测定肺动脉压。结果①A组及B组各时点血浆ET1含量明显高于C组,NO、cAMP、cGMP含量明显低于C组,差异均有显著性(P<0.01)。②A组术前1d及术后72h血浆ET1含量分别低于用药前及术后24h,NO、cAMP、cGMP含量分别高于用药前及术后24h,差异有显著性(P<0.01)。③A组及B组比较:用药前及术后24h血浆中各因子含量无明显变化(P>0.05)。A组术后72h血浆ET1的含量明显下降,cGMP含量明显升高,差异有显著性(P<0.01);NO及cAMP含量无明显变化(P>0.05)。结论川芎嗪降低血浆中ET1的含量,增加NO、cAMP及cGMP的含量,提示川芎嗪可降低肺动脉张力及肺动脉压力,减少围术期肺动脉高压危象的发生率,提高手术的成功率。     

注射用复方荭草冻干粉针剂对大鼠血小板聚集及小鼠耐缺氧能力的影响

目的：观察注射用复方荭草冻干粉针剂（Compound Hongcao Freeze-dried Powder,CHCFD）对大鼠血小板聚集功能和小鼠耐缺氧能力的影响。方法：采用比浊法观察CHCFD高、中、低剂量对二磷酸腺苷（ADP）诱导的大鼠血小板聚集率的影响;采用盐酸异丙肾上腺素皮下注射致小鼠心肌缺氧模型,观察CHCFD高、中、低剂量对小鼠存活时间的影响。结果：与对照组比较,CHCFD高、中剂量可明显抑制大鼠血小板聚集率,抑制率分别为18.25%和20.69%（P〈0.05）;与盐酸异丙肾上腺素组比较,CHCFD高、中剂量可明显延长小鼠的存活时间,延长率分别为15.27%和18.80%（P〈0.05）。结论：CHCFD对ADP诱导的大鼠血小板聚集具有抑制作用,CHCFD显著提高小鼠常压耐缺氧能力。     

红景天苷对正常动物血小板聚集的影响

目的:研究红景天苷对正常动物血小板聚集的影响.方法:给予红景天苷5 d,观察其对大鼠血小板聚集率、小鼠凝血时间和血小板数的影响;采用体外血小板聚集法,利用不同的诱导剂,观察红景天苷对血小板聚集率的作用.结果:红景天苷各剂量组均能降低大鼠血小板聚集率;对ADP、花生四烯酸和胶原诱导的家兔体外血小板聚集,红景天苷1.85、0.93 m g/mL能显著降低1 min、5 min体外血小板聚集率和最大聚集率;红景天苷48.0、24.0 mg/kg能明显延长小鼠的凝血时间,各剂量组对血小板数目无明显影响.结论:红景天苷明显降低大鼠和家兔血小板聚集率,延长小鼠凝血时间,具有一定的抗凝作用.     

Analysis of anti-platelet aggregation components of Rhizoma Zingiberis using chicken thrombocyte extract and high performance liquid chromatography

Background The conventional procedure for screening bioactive components from traditional Chinese medicine is time-consuming, expensive and low efficient. Therefore, some alternative strategies are needed urgently. A novel method for screening anti-platelet aggregation components from oleoresins was developed using chicken thrombocyte extract and high performance liquid chromatography.
Methods The anti-platelet aggregation components of oleoresins were combined with receptors, channels and enzymes of chicken thrombocytes under physiological environment. Unbound substances were washed away and bound compounds were eluted using specific phosphate buffered solution （PBS）. Compounds released from target sites were collected and analyzed by high performance liquid chromatography and LC-MS. The activity of three compounds which were screened from this model was confirmed using platelet aggregation pharmacology in vivo.
Results There were four typical compounds that bound to the thrombocytes： 6-gingerol, 8-gingerol, 6-shogaol and 10-gingerol, and all had shown anti-platelet aggregation activities. Eight-gingerol displayed the best anti-platelet aggregation effect.
Conclusions Chicken thromobcyte extract can be used to isolate chemicals that are ligands of the receptor or other bio-targets on the platelet. This may therefore be a simple and efficient method to screen for anti-platelet aggregation compounds from traditional Chinese medicine.     

离子型对比剂对血小板聚集功能影响的探讨

目的:通过多种诱导剂测量血小板聚集率,观察对比剂与血小板聚集功能之间的关系,探讨其作用机制,进一步指导临床选择药物。方法:选择患者22例,年龄14～64岁。静脉注射离子型对比剂复方泛影葡胺注射液30 mL,在注射对比剂前(Time 1)、10 min后(Time 2)、20 min后(Time 3)抽取静脉血5 mL,分别采用肾上腺素、二磷酸腺苷(ADP)和花生四烯酸为诱导剂测定血小板聚集率。结果:花生四烯酸通道的检测中发现,Time 1血小板聚集率最低,Time 2血小板聚集率最高,Time 3血小板聚集率有所降低,但仍高于Time 1。统计学分析结果显示:Time 1与Time 2比较存在统计学差异,Time 1与Time 3、Time 2与Time 3比较未达到统计学差异。肾上腺素通道的检测结果表明,Time 1血小板聚集率最低,Time 2达到最高,Time 3血小板聚集率有所降低,但仍高于Time 1,但3组之间比较未达到统计学差异。腺苷二磷酸为诱导剂的血小板聚集率检测中,Time 2血小板聚集率最低,Time 3血小板聚集率最高,但3组之间比较未达到统计学差异。结论:离子型对比剂泛影葡胺通过花生四烯酸途径促进血小板聚集。     

白术内酯3抗血小板作用及其机制

目的：观察白术内酯3在体外对人血小板活化的影响,并探讨其可能的分子机制。方法通过体外血小板聚集实验,采用比浊法测定不同浓度白术内酯3对血栓烷类似物（U46619）诱发的人血小板聚集的影响;运用荧光素酶检测白术内酯3对血小板ATP分泌的影响;运用Western印迹法检测分子细胞外调节蛋白激酶（Erk1/2）、蛋白激酶B（Akt473）的磷酸化水平。结果白术内酯3可抑制U46619诱导下人血小板的体外聚集,其抑制效果具有浓度依赖性,各个浓度的实验组与DMSO对照组相比较,差异具有统计学意义（P＜0.01）;白术内酯3可抑制人血小板在U46619诱导下ATP的分泌且具有浓度依赖性,各个浓度的实验组与DMSO对照组相比较,差异具有统计学意义（P＜0.01）;经白术内酯3处理后人血小板活化信号通路中的Akt473、Erk1/2分子的磷酸化水平明显降低;与DMSO对照组相比,其差异具有统计学意义（P＜0.01）。结论白术内酯3对U46619诱导的人血小板聚集及分泌均能产生显著抑制作用,并影响其血小板活化过程中MAPK和PI3K-Akt信号通路。提示白术内酯3是一种有效的抗血小板化合物,有望成为新型抗血小板药物。     

6-取代乙酰哌嗪苯基二氢哒嗪酮类化合物的合成及其抑制血小板聚集的作用

目的：设计合成6-[4-(4-取代乙酰胺基哌嗪基)苯基]-4，5-二氢-3(2H)-哒嗪酮和6-[4-(4-取代酰胺基哌嗪基)苯基]-5-甲基-4，5-二氢-3(2H)-哒嗪酮两类化合物，寻找作用更强的血小板聚集抑制剂。方法：以乙酰苯胺为原料，经傅克反应、满尼希反应、环合反应、酰化反应合成两类中间体(M)和(N)，再经缩合和取代反应得到两类目标化合物，参考Bonn方法进行体外抑制血小板聚集实验。结果：共合成目标化合物12个，其中10个属首次报道，通过元素分析，^1H-NMR确证结构。其中化合物(9)抑制血小板聚集作用的活性最强，为对照物CCI-17810的60多倍；化合物(6)、(7)、(10)、(11)、(12)的活性也优于CCI-17810．结论：目标化合物具有较强的抑制血小板聚集活性。     

574例血小板减少标本人工复检结果分析

目的:探讨改良人工推片法在血小板计数减少标本复检中的应用.方法:采用常规人工推片法和改良人工推片法,分别对我院住院患者仪器测定血小板计数≤60×109 L-1的574例标本进行复检并分析.结果:574例标本中,检出血小板聚集阳性标本常规人工推片法为21例,改良人工推片法为24例,3例血小板大量聚集成团分布的标本不能用常规法而可以经改良法检出.结论:改良人工推片法可降低血小板大量聚集标本的漏检率.     

丹皮酚肟衍生物的设计、合成及抗血小板聚集活性

以丹皮酚为起始原料,经结构修饰得到25个新的丹皮酚肟类衍生物4a ~ 4y,其结构经过高分辨质谱、核磁共振氢谱确证。所合成的目标化合物对二磷酸腺苷（ADP）和胶原诱导的血小板聚集均具有一定的抑制活性,其中化合物4h、4j对两种诱导剂诱导的血小板聚集优于阳性对照药阿司匹林,且化合物4h具有较好的水溶性和类药性,可作为新的抗血小板活性化合物进一步研究。     

谷胺酰胺预处理对兔脊髓缺血再灌注损伤后血小板聚集及活化功能的影响

目的：探讨血小板聚集及活化功能在脊髓缺血再灌注损伤（SCIRI）中的变化及谷氨酰胺预处理对其的影响．方法：利用Zivin法建立家兔SCIRI模型,动态监测SCIRI及谷氨酰胺预处理时血小板聚集试验（PAgT）及活化功能特异指标血浆GMP-140浓度的变化．结果：PAgT及GMP-140浓度在缺血45min逐渐升高,持续至再灌注6h,与Sham组相比差异显著（P〈0．01）,于再灌注12h下降到缺血前水平（P〉0．05）;谷氨酰胺预处理后血小板进一步活化,高峰期延迟．结论：血小板处于过度活化状态,聚集功能增强,引起凝血功能亢进,可能是参与了脊髓缺血再灌注后神经元损伤与修复过程,谷氨酰胺预处理后血小板进一步活化．     

6-[4-[4-(取代苯乙酮基)哌嗪基]苯基]哒嗪酮类化合物的合成及抑制血小板聚集作用

目的：设计合成一类６－（取代苯基）－４,５－二氢－３－（２Ｈ）哒嗪酮类化合物,以期发现作用更强的血小板聚集抑制剂。方法：以乙酰苯胺为原料,经酰化反应、傅－克反应、水解反应及水合肼环合反应、溴化反应、烷基化反应等一系列反应合成目标化合物,并参考Ｂｏｒｎ方法进行体外药理实验。结果：共合成６－「４－（取代哌嗪基）苯基」－４,５－二氢－３（２Ｈ）哒嗪酮类化合物１１个,均属首次报道,并通过元素分析、＾１ＨＮＭＲ确证结构。初步的体外药理实验表明：大部分目标化合物都有不同程度的抑制ＡＤＰ诱导的新西兰大白兔血小板聚集的作用。结论：首次合成了１１个６「４－「４－（取代苯乙酮基）哌嗪基」苯基」－４,５－二氢－３（２Ｈ）哒嗪酮类化合物,其中化合物（４）抑制抑制血小板聚集作用的活性最强,与先导化合物ＣＣＩ１７８１０相当,化合物（３）,