康脑液2号对脑缺血再灌注大鼠VEGF mRNA及Ang-1 mRNA的影响

目的：观察康脑液2号对局灶性脑缺血再灌注大鼠的治疗作用并研究其对缺血再灌注大鼠血管内皮生长因子（VEGF）mRNA及血管生成素-1（Ang-1）mRNA的影响。方法：150只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和康脑液2号高、中、低剂量组,除假手术组外线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉闭塞模型。大鼠缺血2h,于再灌注24h后观察各组神经功能,再灌注1d、3d、7d、14d、21d原位杂交技术观察各组大鼠VEGFmRNA、Ang-1mRNA表达。结果：与模型组相比,康脑液2号各剂量组神经功能明显改善,VEGFmRNA及Ang-1mRNA明显高于模型组。结论：康脑液2号能治疗脑缺血再灌注大鼠,其机制可能是促进脑缺血再灌注大鼠缺血周围区域VEGFmRNA及Ang-1mRNA表达,从而促进脑组织血管新生。     

电针对大鼠脑缺血再灌注后早期功能恢复及VEGF表达的影响

目的 探讨电针对脑局灶性缺血再灌注模型大鼠早期神经功能恢复和脑组织血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组16只.采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型.电针刺激在造模成功90 min内进行,电针组针刺双侧内关、水沟、三阴交及百会,留针30 min,每日针刺1次.假手术组和模型组不进行任何干预治疗.各组大鼠在7、14 d两个时间点取8只进行神经功能评估及免疫组化SP法观察VEGF的表达.结果 假手术组大鼠无神经功能缺损症状.7d时模型组和电针组神经功能评分比较无明显差异.14 d时,电针组大鼠神经功能恢复明显优于模型组.假手术组可见少量VEGF的表达,模型组大鼠脑梗死后7d,模型组脑缺血周围出现VEGF表达增多,14 d持续增加,与假手术组比较均有明显差异.电针组VEGF表达在各时间点较模型组显著增加.结论 电针能通过促进脑局灶性缺血再灌注大鼠脑组织内VEGF的表达,有效改善大鼠局灶性脑梗死后的神经功能.     

疏血通注射液对糖尿病下肢缺血大鼠VEGF表达的影响

目的研究疏血通注射液对糖尿病下肢缺血大鼠缺血后血管内皮因子（VEGF）表达的影响及其促血管新生作用。方法取健康雄性SD大鼠30只，体质量200g～250g，随机取10只为正常对照组（A组），其余20只腹腔注射链脲佐菌素（STZ）制备SD大鼠糖尿病模型，然后将其后肢股动脉及其分支结扎，制成血管病变模型。将模型随机分为两组，生理盐水对照组（B组）与疏血通组（C组），14d后处死动物，运用Western blot法检测大鼠后肢腓肠肌VEGF的表达，并于显微镜下观察毛细血管数。结果A组未见VEGF的表达，C组较B组VEGF表达增加明显（P〈0．05），毛细血管数增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论疏血通注射液可以促进糖尿病后肢缺血大鼠腓肠肌中VEGF表达增加，促进毛细血管生成，发挥保护作用。     

针刺涌泉、重灸百会对局灶性脑缺血大鼠VEGF表达的影响

目的探讨针刺对缺血性脑卒中的作用机制。方法将雄性Wistar大鼠40只，随机分为模型组和针灸组，每组20只。以线栓法闭塞大脑中动脉（middle cerebral artery occlusion，MCAO）制作局灶脑缺血再灌注损伤模型。采用免疫组织化学染色SABC法检测缺血脑组织血管内皮细胞生长因子（VEGF）蛋白表达，RT—PCR法检测缺血脑组织VEGFmRNA表达，TTC染色测定脑梗死面积。结果脑组织VEGFmRNA表达与模型组相比，针灸组缺血半暗带区VEGFmRNA表达明显增强，差异有统计学意义（P〈0．05）;脑组织VEGF蛋白表达与模型组相比，针灸组VEGF蛋白表达明显增强，差异有统计学意义（P〈0．05）;模型大鼠的脑组织出现大面积梗死灶，与正常组比较，差异明显（P〈0．01）;与模型组比较，针灸组脑梗死面积明显缩小，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论针刺涌泉、重灸百会能显著增强脑组织VEGF蛋白及VEGFmRNA表达，促进缺血半暗带区血管生成，这可能是针灸治疗脑缺血的作用机制之一。     

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠神经血管单元的保护作用

目的:观察电针对大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)模型大鼠神经行为学及脑组织血管内皮生长因子(VEGF)、神经生长相关蛋白-43(GAP-43)、突触囊泡蛋白(SYN)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、勿动蛋白A(Nogo-A)表达的影响,探讨电针对MCAO/R模型大鼠神经血管单元的保护作用及其机制。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组20只。采用线栓法制作大鼠MCAO/R模型。电针刺激在造模成功90min后进行,针刺双侧"内关"水沟"三阴交"及"百会"穴,留针30min,每天针刺1次,共14d。各组大鼠在7、14d两个时间点各取10只进行神经功能评估并行免疫组化SP法检测缺血脑组织VEGF、GAP-43、SYN、MBP、Nogo-A的表达。结果:模型组出现明显神经功能缺损症状,14d电针组大鼠神经功能恢复明显优于模型组(P<0.05)。与假手术组比较,模型组7、14d缺血组织VEGF、GAP-43、Nogo-A的表达增多,SYN在两个时间点的表达均减少(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,电针组7、14d缺血组织VEGF、GAP-43、SYN、MBP阳性表达均增多(P<0.01,P<0.05),Nogo-A的表达减少(P<0.01)。结论:①电针能有效改善局灶性脑缺血再灌注大鼠的神经功能;②电针能通过上调各时间点局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织内VEGF、GAP-43、SYN、MBP的表达,下调Nogo-A的表达,促进血管、神经元、神经胶质细胞的恢复,从而保护脑缺血再灌注大鼠的神经血管单元。     

预先电刺激小脑顶对局灶缺血／再灌注大鼠脑蛋白激酶C同工酶表达的影响

目的：观察预刺激脑缺血大鼠小脑顶核不同时相蛋白激酶C同工酶γ、δ蛋白表达。方法：采用线栓法大鼠大脑中动脉栓塞，再灌注模型，缺血时间均为1.5hr／再灌注24hr；于缺血前1，4，7天分别刺激小脑顶核，齿状核1hr。以尾状核冠状切面作为观察对象，应用免疫组织化学方法观察单纯缺血／再灌注组，假手术组，刺激小脑顶核组和刺激齿状核组PKCγ、δ的表达情况。结果：缺血前1，4，7天刺激小脑齿状核各组，单纯缺血／再灌注组，假手术组PKCγ、δ阳性细胞数比较无显著性差异（P＞0．05），而缺血前1，4，7天预刺激小脑顶核能明显抑制KCγ、δ蛋白的表达（P＜0．05）。结论：缺血性脑损害能诱导PKCγ、δ蛋白表达上调，预先电刺激小脑顶核的缺血脑保护作用可能与其下调PKCγ、δ蛋白表达有关。     

电针对大鼠局灶脑缺血再灌注后脑内血管生长因子和血管抑制因子表达的影响

目的:探讨电针对缺血性脑卒中的作用机制。方法:线栓法制备Wistar大鼠局灶脑缺血再灌注模型。将大鼠随机分为正常组、模型组、电针组。选取双侧“合谷”穴为电针穴位,采用原位杂交法检测血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达,免疫组化法检测血管生成素(Ang-1)和内皮抑素(Endostatin)蛋白的表达。结果:模型组VEGFmRNA、Ang-1蛋白、Endostatin蛋白的表达较正常组增加(P<0·05),电针组VEGFmRNA、Ang-1蛋白比模型组增加更明显(P<0·05),而En-dostatin蛋白表达增加较模型组明显下降,差异有显著性意义(P<0·05)。结论:电针可能通过上调血管生长因子和下调血管抑制因子的表达来促进局灶脑缺血再灌注后的血管新生。     

电针刺激“足三里”和“内关”对脑梗塞大鼠GAP-43表达的影响

目的：探讨电针刺激“足三里”和“内关”对脑梗塞大鼠梗死区周围神经生长相关蛋白43（GAP-43）表达情况的影响，从而进一步揭示电针对脑梗塞大鼠脑神经可塑性的影响及其机制。方法：将60只大鼠，随机分为假手术组，针刺组和非针刺组,每组大鼠再随机分为1d、7d和14d共9个亚组；用线栓法制备脑梗塞模型；针刺组大鼠进行电针刺激“足三里”和“内关”治疗,20min/次/天；非针刺组和假手术组在相同时间予以捆绑固定，不进行针刺治疗。采用NSS评分来评价神经功能缺损情况、免疫组化法测定各组大鼠脑梗死区周围GAP-43表达的变化情况。结果： 1d时大鼠脑组织梗死区周围GAP-43的表达3组之间没有明显差别(P>0.05)；7d和14d时针刺组均明显高于假手术组和非针刺组(P<0.01)。结论：电针刺激“足三里”和“内关”能够改善脑脑梗塞大鼠神经功能，促进其神经功能重塑，其机制可能与增加脑梗塞大鼠脑梗死区GAP-43表达水平有关。     

电针对急性脑梗死大鼠VEGF/Flt-1基因及其蛋白表达的影响

[目的]以大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠为研究对象,通过观察血管内皮生长因子及其受体(VEGF/Flt-1)基因及其蛋白表达的变化以探讨电针对急性脑梗死大鼠血管新生的干预机制。[方法]将120只Wistar大鼠随机分为3组,即空白组、模型组、电针组,模型组和电针组按术后3 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d、12 d各分为7个时相组,每时相各8只。各组造模后,电针组依时相进行电针人中穴的治疗。各组大鼠依时间段处死后,进行实时荧光定量聚合酶连反应(PCR)及免疫组化的检测。[结果]电针组VEGF/Flt-1的mRNA及蛋白表达均较模型组有显著上调。[结论]电针对急性脑缺血大鼠VEGF/Flt-1的表达有良性调整作用,可促进缺血半暗带的血管新生。     

益气活血组方对急性心梗模型大鼠SDF-1、CXCR4、VEGF变化的影响

目的观察益气活血组方对AMI大鼠缺血区心肌组织SDF-1、CXCR4、VEGF含量变化的影响。方法 80只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、麝香保心丸组和益气活血组方组,每组20只。根据处死时间再将各组分为3 d,7 d,14 d 3个时相组;药物干预后通过聚合酶链式反应(PCR)检测大鼠心肌组织SDF-1、CXCR4、VEGFmRNA的表达;Western-blot法检测大鼠心肌组织SDF-1、CXCR4、VEGF蛋白的表达。结果麝香保心丸和益气活血组方表达SDF-1/CXCR4 mRNA水平均与假手术组、对照组比较差异有统计学意义(P0.05),麝香保心丸与益气活血方比较,其表达SDF-1/CXCR4 mRNA水平差别不大(P0.05)。麝香保心丸组表达CXCR4 mRNA水平高于益气活血组方组(P0.05)。益气活血组方组、麝香保心丸干预组较假手术组和模型组的CXCR4和SDF-1蛋白表达量明显增高(P0.05)。结论益气活血组方对急性心肌梗死模型大鼠有较好的治疗作用,其作用机理可能是通过增加VEGF和CXCR4、SDF-1来发挥促进毛细血管新生、EPCs动员和趋化的作用。     

活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察中药复方活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白表达的影响。探讨中医药治疗糖尿病视网膜病变(DR)的机制。方法:采用链脲佐菌素(65mg/kg)一次性腹腔注射的方法,建立糖尿病大鼠模型,将78只SD大鼠随机分为模型组和活血解毒方高剂量组(15.4g/kg)、中剂量组(7.70g/kg)、低剂量组(3.85g/kg)及导升明组(0.167g/kg),每组13只,另设13只正常对照组。造模成功后,灌胃给药,24周后处死动物。检测血清和视网膜全层中VEGF的表达;采用Real-time PCR法检测视网膜VEGF mRNA的表达。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠血清中VEGF的含量增加(P<0.01),与模型组相比,各用药组VEGF的含量均下降,但差异无统计学意义。与正常对照组相比,模型组的视网膜全层VEGF表达增加(P<0.01),各用药组与模型组相比显著降低(P<0.01)。与正常对照组相比,模型组的VEGF mRNA表达升高,而各用药组的表达比模型组降低(P<0.01)。结论:活血解毒方可能通过降低糖尿病大鼠视网膜VEGF的表达,延缓DR的发生和发展。     

乳宁Ⅱ号对TA2小鼠乳腺癌MA-891移植瘤中血管内皮生长因子表达的影响

目的研究乳宁Ⅱ号对TA2小鼠乳腺癌移植瘤中血管内皮生长因子(VEGF)表达及肺转移的影响。方法将体外培养的MA-891小鼠乳腺癌细胞接种于TA2小鼠右腋部皮下,造成小鼠移植瘤肺转移模型,同时予乳宁Ⅱ号治疗。结果乳宁Ⅱ号可抑制移植瘤生长,减少肺转移的发生(P<0．05),降低肿瘤组织中VEGF蛋白及VEGF mRNA表达(P<0．05)。结论乳宁Ⅱ号可通过降低肿瘤组织中VEGF蛋白及VEGF mRNA表达,发挥抑瘤和抗转移作用。     

白芨胶对大鼠皮肤成纤维细胞VEGFmRNA表达的影响

目的:研究白芨胶对体外培养的大鼠皮肤成纤维细胞VEGFmRNA表达的影响,探讨白芨胶促进伤口愈合的分子机制。方法:体外培养大鼠皮肤成纤维细胞,分别给予不同浓度的白芨胶进行干预,然后用RT-PCR技术分别检测各组细胞的VEGFmRNA表达,并进行定量分析。结果:白芨胶在不同浓度时连续干预至第3d,以0.5mg/ml浓度条件下,VEGFmRNA表达最强。结论:白芨胶对体外培养的大鼠皮肤成纤维细胞VEGFmRNA表达有明显促进作用,其作用强度随浓度而改变。     

绞股蓝总皂苷对高糖培养条件下小鼠足细胞nephrin、VEGF mRNA表达的影响

目的:观察绞股蓝总皂苷对高糖培养条件下小鼠永生足细胞nephrin、VEGF(vascular endothelial growth factor,血管内皮生长因子)mRNA表达的影响。方法:利用体外培养条件性永生小鼠足细胞,高糖干预24小时,模拟糖尿病肾病足细胞损伤,分为正常组、高糖模型组、高渗对照组、绞股蓝治疗组(绞股蓝总皂苷高、中、低剂量组)及缬沙坦对照组,Real Time PCR法检测足细胞nephrin、VEGF mRNA的表达。结果:绞股蓝总皂苷干预组nephrin mRNA含量显著升高,VEGF mRNA表达有一定程度提高,与模型对照组比较,差异有显著统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:绞股蓝总皂苷可有效调节肾脏足细胞nephrin、VEGF mRNA表达。     

川芎嗪注射液对心梗后大鼠缺血心肌血管新生及VEGF-mRNA表达的影响

目的:观察川芎嗪注射液对心肌梗死后大鼠缺血心肌血管新生和缺血心肌血管内皮生长因子mRNA(VEGF mRNA)表达的影响。方法:结扎大鼠左冠状动脉,造成急性心肌梗死动物模型,随机分为川芎嗪注射液组20 mg.kg-1,ip,麝香保心丸组(阳性对照)30 mg.kg-1,ig,模型组,并设假手术组。6周后检测各组大鼠缺血心肌中微血管密度(MVD)及VEGF mRNA的表达及其灰度值。结果:模型组、麝香保心丸组及川芎嗪注射液组大鼠心肌梗死边缘区MVD较假手术组明显增多(P<0.05);川芎嗪注射液组较模型组明显增加(P<0.05),与麝香保心丸组作用相似。模型组VEGF mRNA表达及其灰度值高于假手术组(P<0.05);川芎嗪注射液组明显高于模型组(P<0.05),低于麝香保心丸组,但无统计学差异。结论:川芎嗪注射液可促进心肌梗死后大鼠缺血心肌血管新生,其机制可能与促进VEGFF mRNA的表达有关。     

桃红四物汤对实验性骨折愈合过程中VEGFmRNA表达的影响

为了解研究桃红四物汤对骨折断端骨痂组织内VEGFmRNA表达的影响.将日本大耳白兔39只随机分成4组,其中3组分别作左侧桡骨中段手术骨折造模后给予桃红四物汤、炎迪宁片、蒸馏水灌胃.另1组为正常对照组,在骨折后7、15、21、35天采用RT-PCR方法检测骨痂组织内VEGFmRNA的表达及变化,并进行半定量对比分析.结果显示桃红四物汤干预后,各时相点骨痂中VEGFmRNA表达量均高于其他各组,并且15天达峰值后下降不显著.表明桃红四物汤能提高骨折愈合各时期断端VEGFmRNA的表达水平,使骨折断端在愈合过程始终保持VEGFmRNA高表达状态,从而促进骨折愈合.     

桃红四物汤有效成分的交互作用及其对骨痂VEGF蛋白表达的影响

目的:探讨桃红四物汤主次要有效成分的交互作用及其对骨痂微血管新生调控因子VEGF蛋白表达的影响。方法:从桃红四物汤中提取了4类有效成分:总生物碱(A)、总苷(B)、总多糖(C)和总挥发油(D),按照前期实验所得结果(主要成分为A,次要成分为B、C、D),对清洁级小白鼠徒手定点折骨造模后进行实验。按照L8(27)正交设计方案分组,观察分析骨折断端骨痂微血管新生调控因子VEGF蛋白表达,探讨主次要成分之间是否存在交互作用。结果:骨折造模后断端局部出现VEGF蛋白高表达,提取物组表达量显著高于模型组(P0.01);动态观察结果,第2时相点(15 d)以内表达量逐渐升高,在第15天出现表达峰值,此后表达量开始下降;各组间比较,1～8组、10组3个时相点表达量均明显高于9组;在表达峰值(15 d)后VEGF表达量下降过程中,提取物及浓缩剂药物使表达量下降程度减缓,使其在第3时相点(25 d)断端骨痂组织内仍维持高量VEGF蛋白表达。正交实验表明,B药取水平1与水平2差异有统计学意义(P0.05),C药和D药取水平1与水平2差异无统计学意义(P0.05)。结论:有效成分总生物碱与总苷有交互作用,与总多糖和总挥发油无交互作用;总苷、总多糖与总挥发油之间也无交互作用。     

莪术油对大鼠乳腺癌癌前病变组织中VEGF mRNA表达的影响

目的:通过观察莪术油对大鼠乳腺癌癌前病变组织中血管内皮生长因子(VEGF)及其mRNA表达的影响,探讨莪术油治疗乳腺癌前病变的机理。方法:275只SD大鼠随机分为空白对照组、疾病模型组、三苯氧胺组、康莱特组及莪术油小、中、大剂量组。采用DMBA诱导乳腺癌癌前病变造模,干预治疗4周,第8～14周分4批处死动物,采用原位杂交法测定标本中VEGF mRNA表达情况。结果:各试验组不同类型乳腺组织中VEGFmRNA表达阳性率及阳性细胞阳性率呈递增趋势。非典型增生乳腺组织中,各干预组VEGF mRNA表达阳性率均明显低于造模对照组(P0.05)。各干预组的VEGF mRNA阳性细胞阳性率均明显低于造模对照组(P0.05),莪术油组低于康莱特和三苯氧胺组(P0.05)。对VEGF mRNA表达阳性的非典型增生标本,莪术油大剂量组VEGF mRNA阳性细胞阳性率明显低于小剂量组(P0.05)。结论:莪术油能够有效的降低DMBA诱导大鼠乳腺癌前病变组织中VEGFmRNA表达强度,抑制血管生成,可能是其阻断乳腺癌发生的有效机制。     

Effect of calycosin on left ventricular ejection fraction and angiogenesis in rat models with myocardial infarction

OBJECTIVE:To evaluated the effect of calycosin on left ventricular ejection fraction and angiogenesis.METHODS:Adult male Sprague-Dawley rats were randomly assigned into calycosin-treated groups(0.5,1,2,and 4 mg/kg qd),a dimethyl sulfoxide(DMSO),or a sham-operated control group.The myocardial ischaemia(Ml) model was intraperitoneally administered calycosin for 28 days.The survival rates and left ventricular ejection fractions(LVEF)were compared between groups.The expression levels of vascular endothelial growth factor(VEGF)and cluster of differentiation 31(CD31) in ischaemic myocardium were also measured and compared.RESULTS:The construction of MI model resulted in a LVEF reduction of 50% compared with the sham-control.After 28 days,the LVEF value was 10% higher when calycosin(4 mg/kg) was administered compared with the DMSO group.The expression of VEGF and CD31 showed a dose-dependent manner when calycosin was administrated.The calycosin-treated(4 mg/kg) group displayed a twofold increase in VEGF expression at both the mRNA and protein levels compared with the DMSO group.In addition,CD31 expression in the microvascular increased 1.5-fold in the 4 mg/kg calycosin-treated group.CONCLUSION:Calycosin improved left ventricular ejection fraction in the MI rat models,induced VEGF expression in the ischaemic myocardium,increased CD31 expression and promoted angiogenesis.     

糖耐康对大鼠胸主动脉血管内皮生长因子蛋白表达的影响

目的 通过对自发性2型糖尿病GK大鼠干预治疗,观察并探讨中药复方糖耐康对糖尿病大血管病变的保护作用.方法 将51只GK大鼠随机分为模型组、吡格列酮组、中药糖耐康低、中、高剂量组共5组.另设10只Wistar大鼠为正常组.灌胃8周后,观察大鼠精神状态、体重、饮水量、活动情况,每周监测体重变化,每4周监测空腹血糖变化.HE染色观察胸丰动脉病理改变,免疫组化法测定胸主动脉血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达.结果 模型组空腹血糖显著升高,24 h饮水量明显增加,体重增长变缓,各治疗组上述情况均有不同程度改善.HE染色高倍镜下,模型组动脉壁内膜增厚,内皮细胞肿胀脱落,内弹力板呈波浪状或交织状排列,有断裂,中膜浅层平滑肌增生、排列紊乱.各治疗组上述病理改变均有不同程度减轻.免疫组化图像分析结果显示,与模型组相比较,各治疗组主动脉VEGF蛋白表达均显著降低(P<0.01).结论 中药复方糖耐康可能通过下调GK大鼠胸主动脉VEGF蛋白表达而发挥大血管保护作用.