川芎嗪和764—3对成纤维细胞Ⅰ,Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响

川芎嗪和７６４－３均有抑制纤维化的作用。本工作观察了川芎嗪和７６４－３对体外培养的成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达的影响结果表明，加入川芎嗪２４ｈ对Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达均有明显抑制作用；加入７６４－３２４ｈ对Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达均有明显抑制作用；加入７６４－３（终浓度为１５μｇ／ｍｌ）２４ｈ对Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达无明显作用，对Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达非但不抑制反而有明显促进作用。作     

干扰素α对肝纤维化鼠星状细胞I和Ⅲ型前胶原mRNA表达及胶原？…

目的 观察干扰素α对大鼠纤维化时星状细胞增殖,Ｉ,Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达和肝脏胶原沉积的影响。方法 以ＣＣｌ４制造肝纤维化模型,培养肝星状细胞,抽提ＲＮＡ,用地高辛标记Ｉ,Ⅲ型前胶原和胶原酶ｃＤｎＡ探针,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析Ｉ,Ⅲ型前胶原和胶原酶ｍＲＮＡ表达,Ｄｏｔｂｌｏｔ测定大鼠肝Ｉ,Ⅲ型胶原沉积,分别用＾３Ｈ－ＴｄＲ和＾３Ｈ－脯氨酸掺入观察干扰素α对星状细胞增殖和胶原合成的影响。结果 干扰     

川芎嗪和764－3对成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响

川芎嗪和７６４－３均有抑制纤维化的作用。本工作观察了川芎嗪和７６４－３对体外培养的成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达的影响结果表明，加入川芎嗪（终浓度３０μｇ／ｍｌ）２４ｈ对Ｉ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达均有明显抑制作用；加入７６４－３（终浓度为１５μｇ／ｍｌ）２４ｈ对Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达无明显作用，对Ｉ型前胶原ｍＲ－ＮＡ表达非但不抑制反而有明显促进作用。作者对７６４－３这种作用的可能原因做了初步讨论。     

整合素诱导酪氨酸磷酸化蛋白在成纤维细胞原胶原基因表达中的作用

目的：研究粘附分子整合素的细胞内信号传导途径之一——酪氨酸磷酸化在成纤维细胞表达原胶原基因中的作用。方法：利用抗整合素单抗及相应二抗的交联作用,模拟整合素在成纤维细胞表面簇集而诱导酪氨酸磷酸化,用蛋白印迹和ＲＴ－ＰＣＲ技术分别检测诱导生成的酪氨酸磷酸化蛋白和Ⅰ型原胶原ｍＲＮＡ水平;并观察阻断酪氨酸磷酸化后,酪氨酸磷酸化蛋白和Ⅰ型原胶原ｍＲＮＡ的变化。结果：整合素β１亚基在成纤维细胞表面簇集可诱导相对分子质量分别为９８０００和６５０００的酪氨酸磷酸化蛋白,且Ⅰ型原胶原ｍＲＮＡ的表达显著增加（Ｐ＜０．０１）;阻断酪氨酸磷酸化,不仅酪氨酸磷酸化蛋白显著减少（Ｐ＜０．０１）,而且Ⅰ型原胶原ｍＲＮＡ的表达也降低（Ｐ＜０．０５）。结论：整合素β１亚基在成纤维细胞表面簇集诱导的酪氨酸磷酸化蛋白在Ⅰ型原胶原基因表达中具有重要作用。     

肺间质病病人肺泡巨噬细胞的条件培养基对肺成纤维细胞胶原基因表达的作用

作者研究了肺间质病病人肺泡巨噬细胞的条件培养基对成纤维细胞的作用。用人胚肺组织分离培养了肺成纤维细胞，并做了初步鉴定。与正常对照组相比，肺间质纤维化病人的肺泡巨噬细胞的条件培养基对肺成纤维细胞３Ｈ－ＴｄＲ掺入率平均增加了７１．４％，这说明成纤维细胞有明显的刺激增生作用（Ｐ＜０．０５），而肺癌组病人的肺泡巨噬细胞的条件培养基仅使成纤维细胞的３Ｈ－ＴｄＲ掺入率增加１４．３％，与对照比较差异无显著意义。使用胶原αｌ（Ⅰ）和αｌ（Ⅲ）－ｃＤＮＡ探针，检测了胶原的ｍＲＮＡ。与对照组相比，肺间质病病人的αｌ（Ⅰ）原胶原ｍＲＮＡ含量平均增加了２１．３％，αｌ（Ⅲ）原胶原ｍＲＮＡ水平增加了３７．２％。肺癌病人组原胶原ｍＲＮ人含量平均为４．６％。结果表明肺间质纤维化病人肺泡巨噬细胞的条件培养基对肺成纤维细胞胶原基因表达有促进作用，且Ⅲ型胶原比Ⅰ型胶原增加得多。     

CCl4诱导大鼠肝纤维化过程中α1（I）,α1（Ⅲ）及α1（Ⅳ）前胶？…

利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术对ＣＣｌ４诱导大鼠肝纤维化过程中α１（Ⅰ）、α１（Ⅲ）及α１（Ⅳ）３种前胶原ｍＲＮＡ的表达状况进行观察。结果证实α１（Ⅰ）、α１（Ⅲ）及α１（Ⅳ）３种前胶原ｍＲＮＡ的表达均有增加，但三者的变化并不同步。纤维化早期首先是α１（Ⅳ）前胶原ｍＲＮＡ表达增加。随后是α１（Ⅲ）前胶原ｍＲＮＡ，后者在整个肝纤维化过程中呈优势性表达。α１（Ⅰ）前胶原ｍＲＮＡ的增加又滞后于α１（Ⅲ     

Echistatin对人增生性瘢痕成纤维细胞的作用研究

目的研究Echistatin对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响。方法体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,设Echistatin处理组和对照组,MTT法、流式技术及RT-PCR法检测人增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达。结果Echistatin可明显抑制人增生性瘢痕成纤维细胞增殖,促进凋亡,降低Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达。结论Echistatin可作为防治增生性瘢痕的筛选药物。     

Ⅰ、Ⅲ 型前胶原 mRNA 在风心病心肌中表达及其与 c-myc 基因表达相关性的研究

目的：了解风湿性心脏病心肌中Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ和ｃ ｍｙｃ基因的表达定位情况及意义。方法：用人Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｃＤＮＡ探针和ｃ ｍｙｃ基因探针，对３２例风湿性二尖瓣乳头肌进行分子原位杂交并进行图像分析。结果：①病变心肌间质中Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ阳性表达明显增强，Ⅰ型较正常成年心肌中增高１６７倍，Ⅲ型增高４３６倍；②病变心肌细胞核内出现Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ和ｃ ｍｙｃ基因阳性表达，胎儿心肌亦有类似表达；③Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ阳性表达量与ｃ ｍｙｃ基因阳性表达呈正相关关系。结论：①发现在病理情况下心肌细胞参与了胶原的生成与代谢，对胶原的合成和分泌具有重要作用。②ｃ ｍｙｃ基因对风湿性病变心肌的胶原代谢过程起调控作用。③风心病心肌胶原增生和调控发生在转录和转录后水平，心肌细胞重现了胎儿期合成胶原的表型。     

Ⅰ,Ⅲ型前胶原mRNA在风心病心肌中表达及其与c—myc基因表达相关？…

目的：了解风湿性心脏病心肌中Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃ基因的表达定位情况及意义。方法；用人Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｃＤＮＡ探针和ｃ－ｍｙｃ基因探针，对３２例风湿性二尖瓣乳头肌进行分子原位杂交并进行图像分析，结果：（１）病变心肌间质中Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ阳性表达明显增强，Ⅰ型较正常成年心肌中增高１．６７倍，Ⅲ型增高４．３６倍；（２）病变心肌细胞核内出现Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃ基因阳性表达，     

CCl_4诱导大鼠肝纤维化过程中α1（Ⅰ）、α1（Ⅲ）及α1（Ⅳ）前胶原基因表达的动态观察

利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术对ＣＣｌ４诱导大鼠肝纤维化过程中α１（Ⅰ）、α１（Ⅲ）及α１（Ⅳ）３种前胶原ｍＲＮＡ的表达状况进行观察。结果证实α１（Ⅰ）、α１（Ⅲ）及α１（Ⅳ）３种前胶原ｍＲＮＡ的表达均有增加，但三者的变化并不同步。纤维化早期首先是α１（Ⅳ）前胶原ｍＲＮＡ表达增加。随后是α１（Ⅲ）前胶原ｍＲＮＡ，后者在整个肝纤维化过程中呈优势性表达。α１（Ⅰ）前胶原ｍＲＮＡ的增加又滞后于α１（Ⅲ）且上升缓慢，至第２０周时才逐渐与α１（Ⅲ）前胶原ｍＲＮＡ含量相近。可能是由于存在反馈性抑制的缘故，使得前胶原基因表达的上调并非呈直线递增而是曲线上升。     

Ⅰ型Ⅲ型前胶原mRNA在风心病心肌中表达的意义

目的 探讨风湿性心脏病心肌细胞Ⅰ，Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达和定位，以及胶原改建对心功能的影响。方法 用人Ⅰ，Ⅲ型前胶原ｃＤＮＡ探针，对３２例我湿性二尖瓣乳头肌进行分子原位杂交并进行图像分析。结果 病变心肌间质中Ⅰ，Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ阳性表达明显增多，１型较正常成年心肌中增高１．６７倍，Ⅲ型增高４．３６倍；病变心肌细胞核内出现Ⅰ，Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ阳性表达，胎儿心肌亦有类似表达，Ⅰ，Ⅲ型前胶原ｍＲＮ     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中Ⅰ,Ⅲ型前胶原mRNA原位表达？…

目的：了解Ⅰ,Ⅲ型前胶原基因在增生性瘢痕（Ｈ）和瘢痕疙瘩（Ｋ）组织中表达的空间分布,方法：非同位素原位杂交。结果：Ｋ与Ｈ组织中Ｉ型前胶原ｍＲＮＡ表达均增强,Ｈ中呈弥散分布,而Ｋ中却主要位于网状真皮层的上部,Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达增强仅见于Ｈ中,结论 Ｋ和Ｈ组织中胶原蛋白基因表达强度及空间分布的差异可能是两者不同临床表现及生物学行为的分子病理学基础。     

高血压大鼠心肌间质细胞形态及I、II型胶原基因表达

目的：探讨高血压心肌胶原重构的细胞分子机制。方法：将１９只自发性易卒中型高血压大鼠ＳＨＲｓｐ（Ｓ）及１３只正常血压大鼠ＷＫＹ（Ｗ）分为３４周龄（Ｓ３４６只；Ｗ３４４只；）和５４周龄（Ｓ５４１３只；Ｗ５４９只）２组心肌进行胶原特染，ｍＲＮＡ原位杂交及超微结构观察。结果：Ｓ和Ｗ比较，心肌间质胶原容积百分比：３４周龄组增加了３９倍，５４周龄组增加了５９倍；血管周围胶原面积／血管内径面积之比：３４周龄组增加了５４倍，５４周龄组增加了３４倍；间质成纤维细胞增生活跃；心肌间质细胞有丰富表达的Ⅰ及Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ。结论：高血压心肌胶原重构与心肌间质成纤维细胞增生活跃，胶原基因表达、合成和分泌增加有关。     

丹参成分抑制系统性硬皮病成纤维细胞增殖及胶原表达的研究

目的 研究丹参成分丹参酮ⅡA、丹参素、丹参多酚酸盐、原儿茶醛对系统性硬皮病（SSc）成纤维细胞增殖和I型、Ⅲ型前胶原mRNA合成的影响程度。方法 培养来自SSc患者及正常对照皮肤的或纤维细胞各5株四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法测定丹参酮ⅡA、丹参素、丹参多酚酸盐、原儿茶醛对成纤维细胞增殖的影响,逆转录-聚合酶链反应测定硬皮病组和正常对照组以及各药物对硬皮病组的成纤维细胞I型和Ⅲ型前胶原mRNA合成的影响。结果 丹参酮ⅡA、丹参素、丹参多酚酸盐和原儿茶醛都对硬皮病成纤维细胞的增殖具有抑制作用（均P〈0．01）,丹参酮ⅡA作用最强。4种成分都对成纤维细胞I型和Ⅲ型胶原mRNA基因表达具有抑制作用（均P〈0．01）,丹参酮ⅡA最强,可以使I型前胶原mRNA减少47％,Ⅲ型前胶原mRNA减少45％。结论 4种丹参成分中丹参酮ⅡA对系统性硬皮病成纤维细胞增殖和I、Ⅲ型前胶原mRNA的表达抑制作用最强,具有较强的抗纤维化作用。     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中Ⅰ、Ⅲ型前胶原及TGF-β_1 mRNA的表达

目的：探讨增生性瘢痕（Ｈ）和瘢痕疙瘩（Ｋ）组织中Ⅰ、Ⅲ型前胶原及ＴＧＦ－β１基因表达改变的相互关系及临床意义。方法：总ＲＮＡ抽提试剂盒抽提总ＲＮＡ,斑点杂交检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ稳态水平的改变。结果：Ｈ和Ｋ组织中ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ（１．１９７±０．２３７,１．２０４±０．２４３）表达均高于正常瘢痕和正常皮肤（０．３２７±０．０８１,０．３３１±０．０７８）,Ｐ＜０．０１;Ｋ选择性地Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达增强,而Ｈ组织中Ⅰ、Ⅲ前胶原ｍＲＮＡ表达均增强,导致ＫⅠ、Ⅲ前胶原ｍＲＮＡ比值明显高于Ｈ（８．１６４±０．３００,１．６６６±０．２０１,Ｐ＜０．０１）。结论：Ｋ和Ｈ组织中胶原蛋白基因表达类型及强度不同,提示在Ｋ和Ｈ发生发展中具有不同的分子机理：ＴＧＦ－β１在增生性瘢痕疙瘩的发病机理中具有不同的分子机理;ＴＧＦ－β１在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的发病机理中具有一定作用。     

IgA肾病患者肾小球胶原Ⅳ基因表达的改变

应用原位逆转录－多聚酶链反应技术对７例ＩｇＡ肾病、４例系膜增殖性肾炎患者肾小球胶原Ⅳ的α２、α３亚链ｍＲＮＡ表达进行检测，同时以看家基因－３－磷酸甘油醛脱氢酶表达作为内对照。结果发现，病理上呈Ⅲ级病变的ＩｇＡ肾病患者肾小球胶原Ⅳα２ｍＲＮＡ表达较Ⅱ级病变患者显著增强，而两组α３ｍＲＮＡ表达，以及肾小球胶原Ⅳ组化染色强度差异显显著意义。     

白黎芦醇对胶原合成及相关基因表达的影响

目的探讨白黎芦醇对人皮肤瘢痕组织成纤维细胞增殖及Ⅰ、Ⅲ型胶原合成及降解影响的机理.方法用MTT法检测及原位杂交技术,对增生性瘢痕用白黎芦醇作用不同时间后,成纤维细胞的增殖及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的原位表达进行了研究.结果(1)白黎芦醇对人皮肤瘢痕组织成纤维细胞的抑制率随浓度的增加和作用时间的延长而增强,最大抑制率可达到93.69%.(2)Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA 3 d已被明显抑制(P＜0.01),7 d后表达强度进一步下降,白黎芦醇对Ⅰ型前胶原mRNA的抑制作用要比Ⅲ型前胶原强.结论(1)白黎芦醇对人皮肤瘢痕组织成纤维细胞增殖有抑制作用,且呈剂量时间依赖性.(2)白黎芦醇对Ⅰ、Ⅲ型前胶原mBNA有明显抑制作用,对Ⅰ型前胶原mRNA的抑制作用要比Ⅲ型前胶原强.     

白黎芦醇对胶原合成及相关基因表达的影响

目的探讨白黎芦醇对人皮肤瘢痕组织成纤维细胞增殖及Ⅰ、Ⅲ型胶原合成及降解影响的机理.方法用MTT法检测及原位杂交技术,对增生性瘢痕用白黎芦醇作用不同时间后,成纤维细胞的增殖及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的原位表达进行了研究.结果(1)白黎芦醇对人皮肤瘢痕组织成纤维细胞的抑制率随浓度的增加和作用时间的延长而增强,最大抑制率可达到93.69%.(2)Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA 3 d已被明显抑制(P＜0.01),7 d后表达强度进一步下降,白黎芦醇对Ⅰ型前胶原mRNA的抑制作用要比Ⅲ型前胶原强.结论(1)白黎芦醇对人皮肤瘢痕组织成纤维细胞增殖有抑制作用,且呈剂量时间依赖性.(2)白黎芦醇对Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA有明显抑制作用,对Ⅰ型前胶原mRNA的抑制作用要比Ⅲ型前胶原强.     

抗纤维化短肽对血清诱导的心脏成纤维细胞增殖和胶原合成与Ⅰ、Ⅲ型胶原表达抑制作用的实验研究

①目的 探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对不同浓度血清(FBS)诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的调节作用.②方法 选用新生大鼠心脏成纤维细胞;采用3H-TdR掺入法检测心脏成纤维细胞的增殖;采用3H-脯氨酸掺入法检测心脏成纤维细胞胶原的合成,采用westernblot法检测心脏成纤维细胞Ⅰ型与Ⅲ型胶原的表达.③结果 在0.4%、2%和10%几种血清浓度的条件下,随着血清农度的增加,反映心脏成纤维细胞增殖3H-TdR掺入量和胶原合成的3H-脯氨酸掺入量增加.表明一定浓度的血清能诱导心脏成纤维细胞增殖和胶原合成.与0.4%血清的基础培养条件相比较,10%高浓度血清能刺激心脏成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达.在10-10～10-8mol/L浓度范围内.AcSDKP对10%诱导的心脏成纤维细胞增殖和胶原合成有抑制作用.并且在10-9mol/L时,AcSDKP对心脏成纤维细胞增殖、胶原合成抑制作用最强.同时10-9mol/L的AcSDKP对心脏成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达也有明显的抑制作用.④结论 AcSDKP对血清介导的心脏成纤维细胞增殖、胶原合成以及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达有明显抑制作用.     

人晶状体上皮细胞Ⅰ,Ⅲ型前胶原mRNA的表达

目的 旨在从基因转录水平确定培养的人太体上皮细胞是否具有表达Ⅰ、Ⅲ型胶原的生物学特性。方法采用人眼晶状体囊膜进行晶状体上皮细胞体外的原代培养;细胞融合后,抽提ＲＮＡ,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析技术进行探测人昌状体上皮细胞的基因转录产物。结果 人晶 状体上皮细胞的基因转录存在有Ⅰ、Ⅲ型胶胶原ｍＲＮＡ的表达,表达的二型前胶原ｍＲＮＡ均存在有长度为５．８、５．４、４．８ｋｂ的片段,Ⅰ型前胶原ｍＲＮ