Med19基因沉默对p53野生型和突变型乳腺癌细胞紫杉醇化疗疗效的影响

目的：探讨下调中介体（mediator,Med）19表达是否增加紫杉醇(pacliatxel, PTX)对p53野生型和突变型乳腺癌细胞化疗的疗效。方法：构建Med19RNA干扰（RNAi）慢病毒,分别感染p53野生型的乳腺癌细胞MCF-7和p53突变型的乳腺癌细胞MDA-MB-231,两种细胞均分为Med19基因敲减组（KD组：细胞感染pGcscil-Med19-siRNA-GFP ）、空载体感染组（NC 组：细胞感染pGcscil-Med19-NC-GFP）、对照组（CON组：未感染慢病毒的乳腺癌细胞）,荧光显微镜观察慢病毒感染效率。Western blotting检测Med19基因沉默后各组细胞内P53、磷酸化P53（pP53）、P21蛋白表达水平的变化。紫杉醇分别作用于Med19基因沉默前后的MCF-7和MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率的变化,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率的变化。结果：KD组和NC组细胞的荧光感染效率均大于90%,表明获得了满意的感染效率。与CON组和NC组相比,两种细胞KD组的Med19蛋白表达水平均下降,差异有统计学意义（均P<0.05）。MCF-7细胞KD组P53、pP53、P21蛋白表达上调,差异有统计意义（均P<0.05）。在0.01～50 μg/ml 范围内,紫杉醇抑制两种乳腺癌细胞的生长增殖并呈浓度依赖性（P<0.05）,对KD组的抑制率和细胞凋亡率均高于NC组及CON组,差异有统计学意义（均P<0.05）;但MDA-MB-231细胞各组间抑制率差异无统计学意义（均P>0.05）。10 μg/ml紫杉醇导致两种细胞的KD组和NC组均出现G2/M期阻滞,并且MCF-7细胞KD组G0/G1期细胞较NC组显著增加（P<0.05）。结论：Med19基因沉默增强紫杉醇对p53野生型乳腺癌MCF-7细胞化疗的疗效,其机制可能为增强了p53基因的表达活化,通过其下游基因p21 调节细胞周期、促进细胞凋亡。     

GSTA1基因多态性对环磷酰胺辅助化疗的乳腺癌患者预后的影响

目的 探讨GSTA1基因多态性与接受CTX类药物辅助化疗乳腺癌患者预后的关系.方法 对采用CTX类药物为主的方案进行辅助化疗的137例确诊乳腺癌患者(浸润性导管癌患者124例,浸润性小叶癌患者5例,其他类型癌症患者8例),用PCR-LDR检测其GSTA1基因多态性,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,log-rank法比较不同基因型组间生存差异,并用Cox比例风险回归模型进行预后影响因素的多因素分析.结果 137例乳腺癌患者中,GSTA1*A/*A、*A/*B和-B/*B基因型频率分别为67.2%(92/137)、31.4%(43/137)和1.5%(2/137).乳腺癌患者的GSTA1基因型频率在按年龄、临床分期、淋巴结转移、雌、孕激素受体状态等临床病理特征分组的分布差异均无统计学意义(x2值分别为0.722、1.967、3.303、0.226、0.709,P均＞0.05);经Fisher精确概率分析,肿瘤大小、病理组织类型、病理分级的差异均无统计学意义(P均＞0.05).携带GSTA1-A/*A基因型和*A/*B或*B/-B基因型的乳腺癌患者复发率分别为47.8%(44/92)和31.1%(14/45),死亡率分别为22.8%(21/92)和17.8%(8/45).Kaplan-Meier生存曲线和log-rank分析显示,携带GSTA1*A/*B+*B/*B基因型乳腺癌患者的无复发生存率和总生存率均高于携带GSTA1*A/*A基因型患者,且差异均有统计学意义(x2值分别为18.723、7.352,P均＜0.01).经Cox多因素分析,GSTA1基因多态性是影响乳腺癌患者无复发生存[OR=0.222,95%CI:0.108～0.458,P＜0.01]和总生存[OR=0.362,95%CI:0.145～0.902,P＜0.05]的独立因素.结论 GSTA1基因多态性是乳腺癌患者CTX药物辅助化疗无复发生存和总生存的预测标志.

Abstract：

Objective To investigate the association between the genetic polymorphisms in GSTA1 and the clinical outcome of breast cancer patients treated with cyclophosphamide-based adjuvant chemotherapy. Methods A total of 137 breast cancer patients receiving cyclophosphamide-based adjuvant chemotherapy were recruited ( 124 cases with infiltrative ductal carcinoma, 5 cases with infiltrative lobular carcinoma and 8 cases with other histological types). PCR-LDR method was used to detect the genotypes of GSTA1. Survival curves were generated by the Kaplan-Meier method, and verified by the log-rank test. Cox proportional hazards regression analysis was used to estimate the prognostic factors in multivariate analysis. Results Of the 137 breast cancer patients, the genotypic frequencies of the GSTA1 * A/* A,* A/* B and * B/* B were 67.2% ( 92/137 ), 31.4% ( 43/137 ) and 1.5% ( 2/137 ), respectively. No significant differences were found between the genotypic frequencies and groups categorization according to age, stage, lymph node metastasis, ER or PR status (x2 = 0. 722,1. 967, 3. 303, 0. 226 and 0. 709, all P ＞0. 05 ) ;through Fisher exact test, also no significant differences were found between the genotypic frequencies and group categorization according to tumor size, histological types and grading ( all P ＞ 0. 05 ) . The recurrence rates in patients with GSTA1 * A/* A and * A/* B or * B/* B genotypes were 47. 8% (44/92) and 31.1% ( 14/45 ), respectively, and the mortality rates were 22. 8% ( 21/92 ) and 17. 8% ( 8/45 ),respectively. Patients with GSTA1 * A/* B and * B/* B genotypes were significantly associated with reduced hazard of relapse (x2 =18.723, P＜0. 01)and mortality (x2 =7.352, P＜0.01), compared to cases with the common * A/* A genotypes, according to Kaplan-Meier survival analysis and log-rank test. Moreover,Cox multivariate analysis showed that GSTA1 polymorphisms appeared to be an independent risk factor for recurrence-free survival ( OR =0. 222, 95% CI:0. 108-0. 458, P ＜0. 01 ) and overall survival ( OR =0. 362,95% CI:0. 145-0. 902, P ＜ 0. 05 ). Conclusion These data indicate that GSTA1 polymorphism may be a potential prognostic factor for recurrence-free survival and overall survival in breast cancer patients treated with cyclophosphamide-based adjuvant chemotherapy.     

STAT3shRNA增强胰腺癌细胞Panc-1对吉西他滨化疗敏感性

目的 观察shRNA下调胰腺癌Panc-1细胞STAT3 mRNA表达后对吉西他滨化疗敏感性的影响.方法 构建靶向STAT3 mRNA的shRAN和阴性质粒,分别转染Panc-1细胞(A组和B组);另将非转染的正常Panc-1细胞分为C组和D组.A,B,C三组细胞与吉西他滨共孵育.RT-PCR和Western blot检测Panc-1中STAT3 mRNA和蛋白的表达;MTT法检测Panc-1细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期.结果 A组STAT3 mRNA水平下降了61.9%,STAT3蛋白水平下降了85.7%(P＜0.01),细胞增殖能力低于B、C组(P＜0.01).与B、C组比较,A组G1期细胞比率增加(P＜0.05),细胞存活率降低(P＜0.01).结论 靶向STAT3 mRAN的shRNA可特异性降低Panc-1细胞中STAT3 mRNA及其蛋白的表达,抑制Panc-1细胞增殖,使其阻滞于G1期,从而增强吉西他滨对G1期细胞的细胞毒效应,增加吉西他滨的化疗敏感性.     

经胃胆管引流在胆总管下段损伤中的应用

胆总管下段损伤发生率较低,症状隐匿,多在术中发现[1].及时处理,预后较好;发现较晚或(和)合并感染,预后差,病死率较高.2002年10月至2009年3月我科采用改良的经胃胆管引流治疗7例胆总管下段损伤患者,效果满意.     

清胰汤对行脉冲式高容量血液滤过重症急性胰腺炎患者的疗效

目的：探讨清胰汤在行脉冲式高容量血液滤过的重症急性胰腺炎（ SAP）患者中的治疗作用及其作用机制。方法将SAP患者46例随机分为治疗组和对照组,两组均行脉冲式高容量血液滤过清除炎症因子,治疗组在此基础上加用清胰汤,比较两组治疗前及治疗4d后的临床指标、炎症因子、胃肠激素水平变化。结果治疗4d后,两组生命体征好转,白细胞计数、血淀粉酶均降低（P均＜0．01）,治疗组呼吸频率及白细胞计数较对照组降低明显（P均＜0．05）;两组TNF-α、IL-6、IL-10及血管活性肠肽（VIP）均明显下降（P均＜0．01）,胃动素（MTL）明显升高（P＜0．01）,以治疗组为著（P＜0．05或＜0．01）。治疗组平均胃肠道功能恢复时间、脉冲式高容量血液滤过时间及住院时间均短于对照组（ P＜0．05或＜0．01）。结论清胰汤可能通过清除炎症因子对SAP患者能起到保护胰腺、加快胃肠功能恢复、减轻肺损伤等作用。     

胆总管一期缝合胃胆管引流在老年人胆道手术中的应用

胃胆管引流是指从胆总管经乳头经十二指肠到胃腔,于胃前壁、腹壁开孔引出体外形成胆道的引流体系.从2004年1月至2008年12月共做182例胃胆管引流手术,其中≥60岁老年人有55例,使用情况报道如下.     

124例肝癌切除术后并发胸腔积液的非条件Logistic回归分析

目的探讨肝癌切除术后胸腔积液的成因及防治措施。方法对124例行肝癌切除术病例进行回顾性研究。结果肝癌术后胸腔积液发生率40.32%(50例),其中右侧胸腔积液82%(41例),肝癌术后胸腔积液的发生与手术部位、膈下积液、术后肝功能、第一肝门阻断时间、腹水、手术失血量有关(P0.05);其中手术部位(OR=8.709)、肝门阻断时间(OR=3.924)、术中失血量(OR=2.043)、术后腹水(OR=0.215)、膈下积液(OR=1579.66)是影响胸腔积液发生的独立因素(P0.05)。结论可以通过术前术后积极改善肝功能、改进手术操作方法、减少术中出血量、缩短肝门阻断时间、避免腹腔及膈下积液的发生来降低肝癌切除术后胸腔积液的发生率。     

The atenuative effect of purified protein derivative sensitization on T helper 2 reaction and eosinophil infiltration of the lung in ovalbumin sensitized mice

Ａｓｔｈｍａｉｓａｃｈｒｏｎｉｃｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｔｈｅａｉｒｗａｙｓ．Ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎｏｆａｌｅｒｇｉｃａｓｔｈｍａｔｉｃａｉｒｗａｙｓｒｅｖｅａｌｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｄａｍａｇｅ，ｍｉｃ...