Ⅰ,Ⅲ型前胶原mRNA在风心病心肌中表达及其与c—myc基因表达相关？…

目的：了解风湿性心脏病心肌中Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃ基因的表达定位情况及意义。方法；用人Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｃＤＮＡ探针和ｃ－ｍｙｃ基因探针，对３２例风湿性二尖瓣乳头肌进行分子原位杂交并进行图像分析，结果：（１）病变心肌间质中Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ阳性表达明显增强，Ⅰ型较正常成年心肌中增高１．６７倍，Ⅲ型增高４．３６倍；（２）病变心肌细胞核内出现Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃ基因阳性表达，     

Ⅰ型Ⅲ型前胶原mRNA在风心病心肌中表达的意义

目的 探讨风湿性心脏病心肌细胞Ⅰ，Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达和定位，以及胶原改建对心功能的影响。方法 用人Ⅰ，Ⅲ型前胶原ｃＤＮＡ探针，对３２例我湿性二尖瓣乳头肌进行分子原位杂交并进行图像分析。结果 病变心肌间质中Ⅰ，Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ阳性表达明显增多，１型较正常成年心肌中增高１．６７倍，Ⅲ型增高４．３６倍；病变心肌细胞核内出现Ⅰ，Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ阳性表达，胎儿心肌亦有类似表达，Ⅰ，Ⅲ型前胶原ｍＲＮ     

衰老真皮成纤维细胞胶原基因调控研究

目的 针对衰老真皮成纤维细胞胶原基因表达减少的特点，应用胎儿皮肤源性活性蛋白（ＳＣＦ）进行调控，以增加胶原基因的表达。方法 应用真皮成纤维细胞增养、胶原基因ｍＲＮＡ裂隙杂交和图像分析技术，观察胎儿皮肤源性活性蛋白对真皮胶原基因的调控作用。结果 以Ａｃｔｉｎ作为对照，ＳＣＦ对老年人成纤维细胞胶原基因有明显的调控作用，可以使Ⅰ、Ⅲ型胶原基因表达增加，处理后，Ⅰ型胶原基因表达增加１５０％，Ⅲ型胶原基因增     

人晶状体上皮细胞Ⅰ,Ⅲ型前胶原mRNA的表达

目的 旨在从基因转录水平确定培养的人太体上皮细胞是否具有表达Ⅰ、Ⅲ型胶原的生物学特性。方法采用人眼晶状体囊膜进行晶状体上皮细胞体外的原代培养;细胞融合后,抽提ＲＮＡ,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析技术进行探测人昌状体上皮细胞的基因转录产物。结果 人晶 状体上皮细胞的基因转录存在有Ⅰ、Ⅲ型胶胶原ｍＲＮＡ的表达,表达的二型前胶原ｍＲＮＡ均存在有长度为５．８、５．４、４．８ｋｂ的片段,Ⅰ型前胶原ｍＲＮ     

SD鼠未成熟心肌细胞缺氧/复氧期c-fos,c-myc mRNA的表达

目的 研究未成熟细胞缺氧／复氧期间ｃ－ｆｏｓ,ｃ－ｍｙｃ的表达。方法 建立Ｓ大鼠未成熟心肌细胞原代培养及缺氧／复氧模型应用原位分子杂交技术,观察ｃ－ｆｏｓ,ｃ－ｍｙｃ在心肌细胞核内的表达。结果 未成熟心肌细胞在缺氧前ｃ－ｆｏｓ,ｃ－ｍｙｃ,ｍＲＮＡ无表达,对照（１）组和（２组）ｃ－ｆｏｓ,ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ在缺氧１２０ｍｉｎ开始表达,复氧６０ｍｉｎ表达程度进一步升高。牛磺酸保护组（Ⅲ）组在缺氧１     

人宫颈癌组织中c-myc基因的表达

目的研究人宫颈癌组织中ｃ－ｍｙｃ基因的表达。方法应用Ｄｉｇ标记ｃＤＮＡ探针，ＤＮＡ－ｍＲＮＡ原位杂交技术检测３７例人宫颈鳞状细胞癌内癌基因ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ。结果３７例中１６例有ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达，检出率为４３．２４％，ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ主要分布在癌细胞胞浆内。结论ｃ－ｍｙｃ癌基因表达在宫颈癌发生中可能起作用，宫颈癌的发生可能还有更多的癌基因参与。     

风湿性心脏病二尖瓣和心肌间质病理组织学及免疫组化观察

为进一步了解风湿性心脏病二尖瓣和心肌间质的病理基础及Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原分布与病变间的关系，为临床防治该病提供新的理论依据。方法用ＨＥ和ＡＢＣ等特殊染色法，对２６例风湿性二尖瓣病变和１０例正常心脏二尖瓣进行病理形态学及Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ胶原的免疫组化观察。结果瓣膜结构和心肌间质中胶原纤维呈弥漫性增生，并呈透明变性及淀粉样变，有的伴局灶性坏死和钙化。这是慢性风湿性心脏病的显著病理特征之一。ＡＢＣ法作Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原免疫组化定位，发现Ⅰ、Ⅲ型胶原在风湿损害的瓣膜、腱索及心肌间质中均呈明显增生分布。成纤维细胞合成、分泌胶原活跃。心肌细胞亦有Ⅰ、Ⅲ型胶原抗原的阳性表达。结论胶原增生程度与炎症损伤程度呈正相关，且是瓣膜及心肌纤维化、硬化的病理基础。     

川芎嗪和764—3对成纤维细胞Ⅰ,Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响

川芎嗪和７６４－３均有抑制纤维化的作用。本工作观察了川芎嗪和７６４－３对体外培养的成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达的影响结果表明，加入川芎嗪２４ｈ对Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达均有明显抑制作用；加入７６４－３２４ｈ对Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达均有明显抑制作用；加入７６４－３（终浓度为１５μｇ／ｍｌ）２４ｈ对Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达无明显作用，对Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达非但不抑制反而有明显促进作用。作     

心肌缺血对左室心肌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的影响及其 …

目的：研究缺血对左室心肌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的影响,探讨心肌细胞凋亡的分子机制。方法：采用结扎冠脉左前降支（ＬＡＤ）法制作大鼠心肌缺血模型,运用ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳技术鉴定基因组ＤＮＡ的断裂情况;使用ＮｏｒｔｈｅｒＢｌｏｔ检测缺血心肌细胞ｐ５３,ｃ－ｍｙｃ及ｂｃｌ－２的表达活性,结果：ａ．缺血能够诱导左室心肌细胞凋亡,ｂ．缺血明显上调ｐ５３基因的转录;ｃ．缺血的左室心肌细胞ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ     

芦沙坦对心脏成纤维细胞胶原Ⅰ,Ⅲ型mRNA表达水平的影响

用培养的新生鼠心肌成纤维细胞,加血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）孵育,考察引起心肌肥厚的生长因子ＡｎｇⅡ对胶原基因转录水平的影响。ＲＴ－ＰＣＲ结果显示ＡｎｇⅡ可刺激胶原Ⅰ,Ⅲ型ｍＲＮＡ表达水平显著增加,此作用可被ＡＴ,受体拮抗剂芦沙坦所抑制。     

高血压大鼠心肌间质细胞形态及I、II型胶原基因表达

目的：探讨高血压心肌胶原重构的细胞分子机制。方法：将１９只自发性易卒中型高血压大鼠ＳＨＲｓｐ（Ｓ）及１３只正常血压大鼠ＷＫＹ（Ｗ）分为３４周龄（Ｓ３４６只；Ｗ３４４只；）和５４周龄（Ｓ５４１３只；Ｗ５４９只）２组心肌进行胶原特染，ｍＲＮＡ原位杂交及超微结构观察。结果：Ｓ和Ｗ比较，心肌间质胶原容积百分比：３４周龄组增加了３９倍，５４周龄组增加了５９倍；血管周围胶原面积／血管内径面积之比：３４周龄组增加了５４倍，５４周龄组增加了３４倍；间质成纤维细胞增生活跃；心肌间质细胞有丰富表达的Ⅰ及Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ。结论：高血压心肌胶原重构与心肌间质成纤维细胞增生活跃，胶原基因表达、合成和分泌增加有关。     

扩张型心肌病纤维化心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原及相关血清指标的变化

目的 了解扩张型心肌病（DCM）心肌纤维化Ⅰ、Ⅲ型胶原改建的病理基础及相关血清指标的变化，为防治该病提供新的理论依据。方法 用病理染色、免疫组化对7例扩张型心肌病行心脏移植的患者左室心肌和7例正常心肌进行病理形态学和Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组化观察，放免法检测血清Ⅲ型、Ⅳ型前胶原（PⅢP、PⅣP、层粘连蛋白（LN）的含量。结果 扩心病心肌细胞变性，肥大伴局灶性坏死。心肌间质中胶原纤维弥漫增生，排列紊乱，这是扩心病的主要病理特征，免疫组化定位发现Ⅰ、Ⅲ型胶原在扩心病心肌间质呈明显增生分布，Ⅰ型胶原多于Ⅲ型胶原（P＜0.01）。心肌细胞内亦有Ⅰ型胶原的阳性表达，血清PⅢP，PⅣP,LN 明显增高（P＜0.05）。结论 心肌细胞变性、肥大，间质胶原大量增生改建是扩张型心肌病心肌纤维化的病理基础，也是心功能障碍的主要原因。     

干扰素α对肝纤维化鼠星状细胞I和Ⅲ型前胶原mRNA表达及胶原？…

目的 观察干扰素α对大鼠纤维化时星状细胞增殖,Ｉ,Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达和肝脏胶原沉积的影响。方法 以ＣＣｌ４制造肝纤维化模型,培养肝星状细胞,抽提ＲＮＡ,用地高辛标记Ｉ,Ⅲ型前胶原和胶原酶ｃＤｎＡ探针,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析Ｉ,Ⅲ型前胶原和胶原酶ｍＲＮＡ表达,Ｄｏｔｂｌｏｔ测定大鼠肝Ｉ,Ⅲ型胶原沉积,分别用＾３Ｈ－ＴｄＲ和＾３Ｈ－脯氨酸掺入观察干扰素α对星状细胞增殖和胶原合成的影响。结果 干扰     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中Ⅰ,Ⅲ型前胶原mRNA原位表达？…

目的：了解Ⅰ,Ⅲ型前胶原基因在增生性瘢痕（Ｈ）和瘢痕疙瘩（Ｋ）组织中表达的空间分布,方法：非同位素原位杂交。结果：Ｋ与Ｈ组织中Ｉ型前胶原ｍＲＮＡ表达均增强,Ｈ中呈弥散分布,而Ｋ中却主要位于网状真皮层的上部,Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达增强仅见于Ｈ中,结论 Ｋ和Ｈ组织中胶原蛋白基因表达强度及空间分布的差异可能是两者不同临床表现及生物学行为的分子病理学基础。     

小儿急性淋巴细胞白血病bcl—2和c—myc转录水平表达及其意义

采用原位分子杂交方法，检测了５４例小儿急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）的ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平，并与患儿临床表现进行对比分析，结果表明：小儿ＡＬＬｂｃｌ－２ＭＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达与非白血病对照组比较普遍增高，呈显著性差异（Ｐ〈０．０１）；ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ与ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平呈明显相关（ｒ＝０．８０４８，Ｐ〈０．０１）；两者的表达水平表明复发病例明显高于初诊病     

人宫颈癌组织中c—myc基因的表达

目的 研究人宫颈癌组织中ｃ－ｍｙｃ基因的表达。方法 应用Ｄｉｇ标记ｃＤＮＡ探讨，ＤＮＡ－ｍＲＮＡ原位杂交技术检测３７例人宫颈鳞状细胞癌内癌基因ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ。结果 ３７例中１６例有ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达，检出率为４３．２４％，ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ主要分布在癌细胞胞浆内。结论 ｃ－ｍｙｃ癌基因表达在宫颈癌发生中可能起作用，宫颈癌的发生可能还有更多的癌基因参与。     

血小板源性生长因子对肺纤维母细胞前胶原合成的影响

观察血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）对肺纤维母细胞增殖、胶原合成的影响。以改良Ｋｕｍａｒ法，分离培养了大鼠肺纤维母细胞，并采用ＭＴＴ、免疫细胞化学、原位分子杂交等方法。结果：ＰＤＧＦ对肺纤维母细胞具有促增殖作用，其浓度在１～１０μｇ／Ｌ之间呈剂量依赖性。ＰＤＧＦ作用下的纤维母细胞胞浆内线粒体和粗面内浆网明显增多，树状突起和棘状突起也较对照组增多，ＰＤＧＦ作用２４ｈ，肺纤继母细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达增强，作用４８ｈ胞浆内布满Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ型前胶原蛋白，作用７２ｈ，大量前胶原则被分泌到细胞外基质中。结论：ＰＤＧＦ不仅可以促进大鼠肺纤维母细胞增殖、合成代谢旺盛和信息传递活跃，而且使其Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ型前胶原合成增加。其调控机制之一是在转录水平上增强了前胶原ｍＲＮＡ表达的结果。     

CCl4诱导大鼠肝纤维化过程中α1（I）,α1（Ⅲ）及α1（Ⅳ）前胶？…

利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术对ＣＣｌ４诱导大鼠肝纤维化过程中α１（Ⅰ）、α１（Ⅲ）及α１（Ⅳ）３种前胶原ｍＲＮＡ的表达状况进行观察。结果证实α１（Ⅰ）、α１（Ⅲ）及α１（Ⅳ）３种前胶原ｍＲＮＡ的表达均有增加，但三者的变化并不同步。纤维化早期首先是α１（Ⅳ）前胶原ｍＲＮＡ表达增加。随后是α１（Ⅲ）前胶原ｍＲＮＡ，后者在整个肝纤维化过程中呈优势性表达。α１（Ⅰ）前胶原ｍＲＮＡ的增加又滞后于α１（Ⅲ     

增殖细胞核抗原、α-平滑肌肌动蛋白在风湿性心脏病乳头肌中的表达及意义

目的阐明慢性风湿性心脏病（简称风心病）心肌细胞表型变化及其与心肌纤维化的关系。方法取风心病二尖瓣乳头肌，以成人及胎儿正常乳头肌为对照，用增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）和α平滑肌肌动蛋白（αＳＭＡ）单抗行免疫组化、免疫电镜观察，用图像分析仪定量分析。结果风心病心肌间质纤维化（２４４７％±３０５％）和小动脉内外径比值（０４０５±００３６），与正常心肌比较差异有显著意义。风心病组ＰＣＮＡ阳性表达不仅存在于间质细胞，且多见于心肌细胞中；αＳＭＡ在风心病组中阳性表达细胞增多。阳性细胞胞浆中粗面内质网明显增多，有大量核糖体和发达高尔基体。ＰＣＮＡ和αＳＭＡ阳性表达程度随心肌纤维化加重而增强（Ｐ＜００１）。结论ＰＣＮＡ和αＳＭＡ在慢性风心病乳头肌中呈阳性表达，亦见于胎儿心肌中。病变心肌细胞不仅有收缩表型，也有合成表型。阳性表达细胞进入增殖状态，参与了心肌纤维化和血管改建过程     

CCl_4诱导大鼠肝纤维化过程中α1（Ⅰ）、α1（Ⅲ）及α1（Ⅳ）前胶原基因表达的动态观察

利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术对ＣＣｌ４诱导大鼠肝纤维化过程中α１（Ⅰ）、α１（Ⅲ）及α１（Ⅳ）３种前胶原ｍＲＮＡ的表达状况进行观察。结果证实α１（Ⅰ）、α１（Ⅲ）及α１（Ⅳ）３种前胶原ｍＲＮＡ的表达均有增加，但三者的变化并不同步。纤维化早期首先是α１（Ⅳ）前胶原ｍＲＮＡ表达增加。随后是α１（Ⅲ）前胶原ｍＲＮＡ，后者在整个肝纤维化过程中呈优势性表达。α１（Ⅰ）前胶原ｍＲＮＡ的增加又滞后于α１（Ⅲ）且上升缓慢，至第２０周时才逐渐与α１（Ⅲ）前胶原ｍＲＮＡ含量相近。可能是由于存在反馈性抑制的缘故，使得前胶原基因表达的上调并非呈直线递增而是曲线上升。