丹参的抗肿瘤作用

丹参味苦,性微寒,入心、心包及肝经,具有祛瘀、止痛、活血通经之功效.丹参的化学成分有脂溶性和水溶性两类.脂溶性成分有丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡB、隐丹参酮、二氢丹参酮等,多为共轭醌、酮类化合物;水溶性成分有原儿茶醛及丹参素等,多具有酚酸性结构[1].其药理作用多,治病谱广,笔者就丹参抗肿瘤的研究进展作一综述.……     

隐丹参酮对人皮肤瘢痕胶原基因表达的影响

目的研究隐丹参酮对人皮肤增生性瘢痕I、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响。方法用RT-PCR法检测隐丹参酮对人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞I、Ⅲ型前胶原mRNA的表达。结果隐丹参酮能明显抑制人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞I、Ⅲ型前胶原mRNA的表达,并呈剂量依赖性。结论隐丹参酮可通过抑制人皮肤增生性瘢痕I、Ⅲ型前胶原mRNA的表达而起到抑制皮肤增生性瘢痕增殖的作用。     

丹参酮ⅡA磺酸钠对大鼠肺成纤维细胞转化生长因子β_1信号通路的作用

目的:研究丹参酮ⅡA磺酸钠注射液(STS)对大鼠肺成纤维细胞转化生长因子β1(TGF-β1)Smad信号通路的影响,探讨STS抑制肺成纤维细胞(LFB)增殖、转化的可能机制。方法:体外分离培养大鼠肺成纤维细胞,实验分为3组:①空白对照组;②TGF-β1刺激组;③联合处理组:STS+TGF-β1刺激组,培养48h,待细胞生长同步化后,用MTT法检测丹参酮ⅡA对肺成纤维细胞增殖的影响,用RT-PCR法分析丹参酮ⅡA磺酸钠和TGF-β1作用后肺成纤维细胞Smad3、Smad7 mRNA表达水平的变化,以及对Ⅰ型胶原mRNA的影响。结果:丹参酮ⅡA磺酸钠在80-640mg/L浓度范围对5μg/L TGF-β1刺激的肺成纤维细胞增殖均具有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性(P<0.05);丹参酮ⅡA磺酸钠在浓度160mg/L时能明显下调TGF-β1刺激的肺成纤维细胞内Smad3 mRNA、Smad3/Smad7 mRNA及Ⅰ型胶原mRNA的表达(P<0.05),并能上调Smad7 mRNA表达(P<0.05)。结论:丹参酮ⅡA磺酸钠能抑制LFB的增殖、转化及胶原的合成,机制可能是丹参酮ⅡA磺酸钠下调了大鼠TGF-β1 Smad信号通道的Smad3/Smad7水平,从而抑制LFB的增殖、转化。     

丹参中总酚酸测定的前处理方法研究

丹参是唇形科植物丹参Salvia miltiorrhizaBunge的干燥根茎,其有效成分包括水溶性成分和脂溶性成分.脂溶性成分是以丹参酮为代表的醌类化合物,具有很好的抗炎作用;水溶性成分总称为总酚酸,主要有丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B[1].     

温阳通络方对硬皮病成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP-1mRNA的影响

目的：观察温阳通络方对系统性硬皮病（SSc）患者皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及MMP-1mRNA的影响。方法：12例SSc患者分成SSc对照组（初诊未治疗者）、西药组、中药组和中西药联合组,每组3例。除对照组外,其他三组分别给予青霉胺和强的松、温阳通络方煎剂、青霉胺和强的松加温阳通络方煎剂口服,疗程2个月。SSc对照组在治疗前取血分离血清备用;西药组、中药组和中西药联合组治疗2个月后取血分离血清。另取正常及SSc患者皮肤进行成纤维细胞原代培养并以上述血清处理,正常对照组不予处理,然后提取总RNA,以设计的引物逆转录生成cDNA,然后PCR扩增、凝胶电泳后图像分析Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP-1mRNA表达。结果：与正常皮肤比较,SSc皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP-1mRNA表达量明显增多（P〈0.01）;与SSc对照组比较,20%含药血清处理后各组Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达量明显减少（P均〈0.01）;中药组Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达量显著高于西药组和中西药组（P均〈0.01）,中西药组显著低于西药组（P〈0.01）;各组间SSc皮肤成纤维细胞MMP-1mRNA表达量差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：SSc患者皮肤成纤维细胞胶原合成量增加,温阳通络方在一定程度上干扰SSc患者皮肤成纤维细胞I、III型胶原mRNA表达,而对MMP-1干预作用不明显。     

HPLC法测定丹参中原儿茶醛

丹参是临床上常用的活血化瘀的要药,为唇形科植物丹参SalviamiltiorrhizaBunge的根。丹参的活性成分主要分为脂溶性和水溶性两类。其脂溶性成分主要是丹参酮、隐丹参酮、丹参酮A等。然而中医传统用药方法是用其水煎剂,即丹参的水溶性部位。所以研究丹参的水溶性成分更有意义。丹参水溶性成分主要是丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸以及丹酚酸A、B、C、D、E、F、G等。《中国药典》2000年版中对丹参仅测定丹参酮A一种成分,在《中国药典》2005年版中增加了丹酚酸B的HPLC测定,但原儿茶醛一直未做要求,该成分在制剂(丹参注射液)中作为…     

丹参的药理作用

近代从丹参中分离得到多种脂溶性菲酮类成分，如丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡB、隐丹参酮、二氢丹参酮等。此外，从丹参的水溶性部位还分离出原儿茶醛及一种具有生理活性的成分——丹参素。     

白黎芦醇对胶原合成及相关基因表达的影响

目的探讨白黎芦醇对人皮肤瘢痕组织成纤维细胞增殖及Ⅰ、Ⅲ型胶原合成及降解影响的机理.方法用MTT法检测及原位杂交技术,对增生性瘢痕用白黎芦醇作用不同时间后,成纤维细胞的增殖及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的原位表达进行了研究.结果(1)白黎芦醇对人皮肤瘢痕组织成纤维细胞的抑制率随浓度的增加和作用时间的延长而增强,最大抑制率可达到93.69%.(2)Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA 3 d已被明显抑制(P＜0.01),7 d后表达强度进一步下降,白黎芦醇对Ⅰ型前胶原mRNA的抑制作用要比Ⅲ型前胶原强.结论(1)白黎芦醇对人皮肤瘢痕组织成纤维细胞增殖有抑制作用,且呈剂量时间依赖性.(2)白黎芦醇对Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA有明显抑制作用,对Ⅰ型前胶原mRNA的抑制作用要比Ⅲ型前胶原强.     

白黎芦醇对胶原合成及相关基因表达的影响

目的探讨白黎芦醇对人皮肤瘢痕组织成纤维细胞增殖及Ⅰ、Ⅲ型胶原合成及降解影响的机理.方法用MTT法检测及原位杂交技术,对增生性瘢痕用白黎芦醇作用不同时间后,成纤维细胞的增殖及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的原位表达进行了研究.结果(1)白黎芦醇对人皮肤瘢痕组织成纤维细胞的抑制率随浓度的增加和作用时间的延长而增强,最大抑制率可达到93.69%.(2)Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA 3 d已被明显抑制(P＜0.01),7 d后表达强度进一步下降,白黎芦醇对Ⅰ型前胶原mRNA的抑制作用要比Ⅲ型前胶原强.结论(1)白黎芦醇对人皮肤瘢痕组织成纤维细胞增殖有抑制作用,且呈剂量时间依赖性.(2)白黎芦醇对Ⅰ、Ⅲ型前胶原mBNA有明显抑制作用,对Ⅰ型前胶原mRNA的抑制作用要比Ⅲ型前胶原强.     

中药丹参、川芎对硬皮病成纤维细胞增殖的影响

目的 观察中药丹参、川芎嗪对硬皮病患者体外培养的成纤维细胞增殖的抑制作用.方法 原代培养成纤维细胞,加入不同浓度的丹参、川芎嗪注射液24h后,用MTT法检测其增殖活性.结果 丹参在10mg/mL以上时对成纤维细胞增殖有抑制作用;川芎嗪在0.5mg/mL以上时对成纤维细胞增殖有抑制作用,达到5.0mg/mL则能完全抑制成纤维细胞的增殖.结论 丹参、川芎嗪对硬皮病患者成纤细胞增殖有抑制作用,这可能是中药治疗硬皮病的机制之一.     

脂多糖对正常人皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶mRNA表达的调控及意义

目的研究细菌脂多糖（LPS）对增生性瘢痕患者正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶mRNA表达的影响,以了解LPS在增生性瘢痕形成中的生物学作用。方法体外培养增生性瘢痕患者瘢痕组织及正常皮肤成纤维细胞,应用不同浓度（0．005—1．0μg／m1）的大肠杆菌LPS（E．coli055：B5）对正常皮肤成纤维细胞进行刺激,并对刺激后细胞传代至表型稳定（第8代）,采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测LPS对正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶mRNA的表达的调控作用,观察剂量一效应关系。分别以同一个体相同代数的瘢痕组织成纤维细胞和未经LPS刺激的正常皮肤成纤维细胞做阳性对照和阴性对照。结果LPS刺激浓度在0．005．0．5μg／ml范围内促进正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达,抑制胶原酶mRNA表达（均P〈0．01）,均在0．1μg／ml浓度点作用达高峰;当LPS刺激浓度到达1．0μg／ml时,抑制正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达,促进胶原酶mRNA表达,且均显著低于阴性对照组（均P〈0．01）。当LPS刺激浓度为0．1μg／ml时,正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原酶mRNA表达量与阳性对照组近似（均P〉0．05）。结论在一定浓度范围内LPS促进成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达、抑制胶原酶mRNA表达。LPS可能是增生性瘢痕形成的原始诱导因素之一。     

干扰素α对肝纤维化鼠星状细胞I和Ⅲ型前胶原mRNA表达及胶原？…

目的 观察干扰素α对大鼠纤维化时星状细胞增殖,Ｉ,Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达和肝脏胶原沉积的影响。方法 以ＣＣｌ４制造肝纤维化模型,培养肝星状细胞,抽提ＲＮＡ,用地高辛标记Ｉ,Ⅲ型前胶原和胶原酶ｃＤｎＡ探针,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析Ｉ,Ⅲ型前胶原和胶原酶ｍＲＮＡ表达,Ｄｏｔｂｌｏｔ测定大鼠肝Ｉ,Ⅲ型胶原沉积,分别用＾３Ｈ－ＴｄＲ和＾３Ｈ－脯氨酸掺入观察干扰素α对星状细胞增殖和胶原合成的影响。结果 干扰     

进行性系统性硬化症皮损中前胶原基因和SMAD mRNA的表达

目的探讨进行性系统性硬化症（PSS）硬化皮肤组织中Ⅰ型和Ⅲ型前胶原基因以及细胞内信号转导分子SMAD mRNA的表达情况,分析它们在发病机制中的作用。方法用荧光实时定量聚合酶链反应法分别检测11例PSS患者硬化皮损及11例正常对照皮肤组织中Ⅰ型和Ⅲ型前胶原基因以及不同类型SMAD（SMAD2、SMAD3、SMAD4、SMAD7）mRNA的表达水平。结果Ⅰ型前胶原基因α1、Ⅲ型前胶原基因α1、SMAD4及SMAD7的mRNA在硬化皮损中的表达明显高于在正常皮肤组织的表达,差异有统计学意义（均P〈0．05）。SMAD4 mRNA的表达与Ⅰ型、Ⅲ型前胶原基因α1 mRNA的表达成正相关（r值分别为0．728和0．678,均P〈0．05）。SMAD3 mRNA的表达与Ⅰ型前胶原基因α1 mRNA的表达成正相关（r=0．859,P〈0．01）。结论PSS硬化皮肤组织中存在有SMAD4 mRNA的高表达,可能是导致Ⅰ型、Ⅲ型胶原在硬化组织中过度堆积的原因之一。     

MDI301调节MMP-1、MMP-2、TIMP-1和前胶原蛋白的表达

目的:检测MDI301对正常细胞和高糖细胞中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)和I、III型前胶原蛋白表达的影响。探讨MDI301对糖尿病皮肤溃疡和足溃疡的治疗潜力。方法:采用Real time PCR检测人成纤维细胞中MMP-1、MMP-2和TIMP-1 mRNA的表达水平;ELISA方法检测细胞培养基中TIMP-1蛋白表达量;Western blot检测I型和III型前胶原蛋白表达水平。结果:MDI301能降低高糖细胞中MMP-1和MMP-2 mRNA的表达(P<0.05),增加TIMP-1 mRNA和细胞培养上清中TIMP-1蛋白的表达(P<0.05);同时还能增加高糖细胞中I和III型前胶原蛋白的表达量(P<0.05)。结论:MDI301可能会对糖尿病患者体内MMP-1、MMP-2、TIMP-1和I、III型前胶原蛋白的表达有相似的作用,使其有望用于糖尿病皮肤溃疡和足溃疡的治疗。     

丹参对人粘连组织成纤维细胞MMP-1与TIMP-1mRNA表达的影响

目的 考察丹参及其化学成分对人粘连组织成纤维细胞（ATF）MMP-1与TIMP-1 mRNA表达的影响。方法 使用组织块培养的方法获取ATF，分别加入丹参提取物、丹参素钠、丹参酮IIA磺酸钠与地塞米松培养48 h，提取总RNA并逆转录为cDNA，采用Real-time PCR法检测各组MMP-1与TIMP-1 mRNA的表达水平。结果 与空白对照组比较，丹参提取物与丹参素钠10、40 μg？mL-1剂量组MMP-1 mRNA水平差异有统计学意义（p〈0.01），丹参素钠40 μg？mL-1剂量组TIMP-1 mRNA水平差异有统计学意义（p〈0.01），其余各组差异均无统计学意义（p〉0.05）。结论 上调MMP-1 mRNA水平是丹参抑制ATF胶原过度合成，防止粘连产生的作用机制之一，丹参素在其中起主要作用。     

Effect of hypoxia on proliferation and alpha 1 (I) procollagen gene expression by human fetal lung fibroblasts

OBJECTIVE: The effect of 2% hypoxia on the proliferation and alpha 1(I) procollagen gene expression by human fetal lung fibroblast was studied. METHODS: Cell proliferation was determined by cell counting and nonradioactive cell proliferation assay method. alpha 1(I) procollagen gene expression was detected by Northern blot hybridization analysis. RESULTS: Cell number and 490 nm OD expressing low oxygen values were markedly increased by the 24, 48 and 72 h exposure to 2% hypoxia respectively. An obvious increase of the alpha 1(I) procollagen mRNA expression was detected after 24 h exposure to 2% hypoxia. The increase of gene expression could be inhibited by Ligustrazin (30 micrograms/ml, 10 micrograms/ml). CONCLUSIONS: 2% hypoxia plays an important role in the outcome of wound healing and pulmonary vascular remodeling by affecting the function of human fetal lung fibroblasts.     

Effects of lower fluence pulsed dye laser irradiation on production of collagen and the mRNA expression of collagen relative gene in cultured fibroblasts in vitro

Background Lower fluence of 585-nm flashlamp-pumped pulsed dye laser has been successfully used as a nonablative technique in the treatment of wrinkles. The objective of this study was to evaluate the effect of the pulsed dye laser （585 nm） on the production of collagen and the mRNA expression of collagen related gene in fibroblasts in vitro. Methods Cultured fibroblasts were treated with a 585-nm flashlamp-pumped pulsed dye laser （ fluence 3 J/cm^2, 4 J/cm^2, spot size 7 mm, pulse duration 450 12s）. The production of collagen and the mRNA expression of transforming growth factor （TGF）-β1, SMAD2, SMAD3, SMAD4, SMAD7 and type Ⅰ procollagen α1, α2 in fibroblasts were investigated by colorimetry or real time polymerase chain reaction. Results The production of collagen was significantly up-regulated after treatment with a 585-nm flashlamp-pumped pulsed dye laser with a fluence of 3 J/cm^2 （P 〈0.001）. The mRNA expression of TGF- β1, SMAD2, SMAD3, SMAD4, SMAD7 and procollagen I was significantly up-regulated after treatment with a 585-nm flashlamp-pumped pulsed dye laser with a fluence of 3 J/cm^2 （P 〈0.001）. No significant difference of mRNA expression of SMAD2, SMAD3, SMAD4, SMAD7 and type Ⅰ procollagen was found between controls and fibroblasts treated with pulsed dye laser with a fluence of 4 J/cm^2 （P 〉0.05）. Conclusions Lower fluence （3 J/cm^2） pulsed dye laser increased the collagen production in fibroblasts by up-regulating TGF-β1, SMAD2, SMAD3, SMAD4, SMAD7 and type Ⅰ procollagen mRNA expression. These may be the reason it can be effectively used in the treatment of wrinkles.     

He-Ne激光重复照射抑制培养增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成的实验研究

目的 探讨Ｈｅ－Ｎｅ激光重复照射对培养增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成的抑制作用。方法 以不同功率密度（１０、５０、１００和１５０ｍＷ／ｃｍ＾２）Ｈｅ－Ｎｅ激光照射培养增生性瘢痕成纤维细胞３０ｍｉｎ,１／ｄ,连续照射３ｄ,在３ｄ重复照射后２４ｈ用＾３Ｈ－脯氨酸掺入法和斑点杂交法分别检测成纤维细胞胶原合成和Ⅰ型前胶原基因表达。结果 培养增生性瘢痕成纤维细胞的胶原合成、Ⅰ型前胶原基因表达水平在１０、５０ｍ