草苁蓉提取物对阿尔茨海默病模型大鼠海马神经干细胞巢蛋白及学习记忆的影响

目的探讨草苁蓉提取物对β淀粉样肽(β-AP)所致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的脑内巢蛋白(Nestin)表达的影响,并对其保护作用提供理论依据。方法取健康的SD大鼠60只,随机分为正常组、假手术组、模型组和草苁蓉提取物高、中、低剂量组。用Aβ1~40微量注射至大鼠双侧Meynert基底核,建立AD模型,用草苁蓉提取物进行治疗,于治疗后用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,用免疫组化染色法检测Nestin阳性神经细胞数的表达。结果各治疗组的逃避潜伏期较模型组明显缩短,大鼠在原平台象限游泳时间占整个游泳时间的百分比显著升高,穿过原平台所在位置的次数明显增加(P<0.01)。草苁蓉提取物高剂量组大鼠海马区Nestin阳性神经元数量在治疗组中表达最强,与模型组相比,具有显著性差异(P<0.01)。结论草苁蓉提取物能增强AD模型大鼠海马神经干细胞Nestin的表达,提高AD大鼠的学习记忆能力,其机制尚需进一步研究。     

草苁蓉提取物对AD大鼠海马区bFGF及学习记忆的影响

目的:探讨草苁蓉提取物对β淀粉样肽(β-AP)所致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马区bFGF蛋白表达的影响,并对其保护作用提供理论依据。方法:取健康的SD大鼠60只,随机分为正常组,假手术组,模型组和草苁蓉提取物高、中、低剂量组。用微量Aβ1-40注射至大鼠双侧Meynert基底核,建立AD模型,经草苁蓉提取物治疗,于治疗后用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,采用免疫组化染色法观察bFGF阳性神经细胞数的表达。结果:1学习记忆观察:各治疗组的逃避潜伏期较模型组明显缩短,大鼠在原平台象限游泳时间占整个游泳时间的百分比显著升高,穿过原平台所在位置的次数明显增加。2bFGF免疫组化检测:与正常组、假手术组及模型组相比,各治疗组大鼠海马区bFGF阳性神经元数量显著提高,且高剂量组最为明显。结论:草苁蓉提取物能增强AD模型大鼠海马区bFGF的表达,提高AD大鼠的学习记忆能力,其机制尚需讨论。     

穴位埋线合并胰岛素对拟阿尔茨海默病大鼠学习记忆的影响

目的 观察穴位埋线和胰岛素联合应用对拟阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠学习记忆的影响,并探讨其可能的治疗机制.方法 大鼠海马CA1区微量注射冈田酸(Okadaic acid,OA)建立拟AD模型大鼠.肾腧、大椎穴位埋线、胰岛素侧脑室注射.用Morris水迷宫实验检测其学习记忆能力,电镜观察海马CA1区神经元超微结构变化,免疫组化方法观察胆碱乙酰转移酶(ChAT)的表达.结果 与模型组比较,穴位埋线组、联合组的学习记忆能力明显改善(P <0.01),海马CA1区神经元凋亡现象明显改善,ChAT表达增加(P<0.05),联合组更为显著(P<0.05).结论 穴位埋线和胰岛素联合应用对拟AD大鼠学习记忆的改善作用强于单用穴位埋线,可能和改善海马CA1区神经元超微结构及胆碱能系统功能有关.     

养血培本健脑方对AD大鼠学习记忆、神经元凋亡及GFAP蛋白表达的影响

目的探讨养血培本健脑方对阿尔兹海默症(Alzheimer's disease, AD)大鼠学习记忆、神经元凋亡及GFAP蛋白表达的影响。方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,中药方低、中、高剂量治疗组,西药组。除正常组外采用双侧海马Aβ_(25-35)注射建立AD模型,中药方低、中药方中、高剂量治疗组分别灌胃养血培本健脑方水煎液0.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)、1.0 mg·kg~(-1)·d~(-1)、2.0 mg·kg~(-1)·d~(-1),西药组灌胃盐酸多奈哌齐片1.67 mg·kg-1·d-1,正常组灌胃等体积生理盐水,给药28d,采用Morris水迷宫、HE染色、TUNEL染色、免疫荧光化学,分别观察大鼠学习记忆能力、神经元退行性改变、凋亡及GFAP蛋白表达。结果与模型组相比,中药方中、高剂量组学习记忆能力改善(P0.05或P0.01),中、高剂量组海马CA1区神经元退行性改变、凋亡比例下降(P0.05或P0.01),中剂量组海马CA1区GFAP表达下降(P0.05)。结论养血培本健脑方可改善AD大鼠学习记忆能力,其机制可能与星形胶质细胞活化水平下降有关,进而抑制神经元退行性改变和凋亡,并且呈现剂量依赖关系性,中药方中、高剂量疗效更佳。     

益肺宣肺降浊方对血管性痴呆大鼠行为学及海马病理和神经元凋亡的影响

目的:观察益肺宣肺降浊方对血管性痴呆大鼠行为学及海马病理和神经元凋亡的影响。方法:采用双侧颈总动脉夹闭再通法制备痴呆模型,随机分为模型组、石杉碱甲组、中药高剂量组、中药中剂量组和中药低剂量组(注:中药为益肺宣肺降浊方)。药物治疗30 d后,采用Morris水迷宫实验观察大鼠的学习、记忆能力,光镜下观察大鼠海马CA1区的病理变化,用TUNEL法检测神经细胞凋亡。结果:在定位航行试验中,中药3个组的平均潜伏期较模型组明显缩短,与模型组比较有统计学差异(P0.01)。在空间探索实验中,中药3个组与模型组比较,成功次数差异均具有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,各中药组大鼠海马CA1区神经细胞坏死、变性和凋亡明显减轻。结论:益肺宣肺降浊方具有改善痴呆大鼠学习、记忆能力及减轻海马损伤和神经元凋亡的作用。     

羊栖菜多糖对老年痴呆模型大鼠Bcl-2和Bax基因表达的分析

目的:探讨羊栖菜多糖提取物(SFPS)对阿尔茨海默病(AD)大鼠模型行为的干预作用及脑皮质Bcl-2和Bax基因表达的影响。方法:制作D-半乳糖阿尔茨海默病大鼠模型,设计正常对照组、模型组、吡拉西坦片、羊栖菜多糖提取物不同剂量组,观察大鼠行为学及脑皮质Bcl-2和Bax基因表达指标的改变。结果:与正常对照组相比,模型组学习记忆能力显著下降(P0.05),其Bcl-2/Bax值下降;与模型组相比,0.8g/kg、1.6g/kg羊栖菜多糖提取物治疗组均能较好的改善学习记忆能力,且具有一定剂量依赖性,其Bcl-2/Bax值增加。结论:SFPS能调节海马组织Bcl-2和Bax的表达,显著提高Bcl-2/Bax值,抑制海马神经元的凋亡,改善AD大鼠学习记忆能力。     

益智方对阿尔茨海默病大鼠学习记忆的影响

目的 探讨益智方对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力的影响.方法 在基础饲料中添加三氯化铝,Al3+剂量为111.9 mg/kg体重,连续染毒3个月复制大鼠AD模型.采用Y-电迷宫仪检测正常对照组、模型组、低剂量中药组、中剂量中药组、高剂量中药组大鼠学习记忆能力,观察脑区病理形态学改变.结果 益智方能明显增加大鼠逃避正确率、缩短逃避潜伏期,明显减轻大鼠脑神经元损伤.结论 益智方是防治AD模型大鼠学习记忆能力减退的有效药物.     

电针对链脲霉素AD模型大鼠学习记忆及海马CA_1区神经元的影响

目的:探讨电针对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆影响的机制。方法:将48只Wistar大鼠随机分成4组:空白组、模型组、西药组和电针组,每组12只。通过侧脑室注射链脲霉素(STZ)的方法制备动物模型。电针组选取"百会"、"大椎"、"肾俞"、"太溪"、"足三里"电针治疗。以Morris水迷宫评价各组大鼠学习记忆能力,HE染色法观察海马CA1区神经元细胞排列。结果:与空白组比,模型组海马CA1区神经元细胞排列紊乱,学习记忆能力减退(P0.01)。治疗后与治疗前相比较,电针组与西药组细胞排列较规则,学习记忆能力增强(P0.01)。结论:电针治疗可改善AD大鼠海马CA1区神经元细胞形态学变化,增强学习记忆能力。     

电针对阿尔茨海默病大鼠学习记忆力改善及海马神经元损伤保护的作用及机制

目的探讨电针保护海马神经元和改善阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)大鼠学习记忆力的作用机制。方法将大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和电针组,采用Morris水迷宫检测空间学习和记忆能力的变化。Hoechest33342染色观察各组海马神经元的凋亡;Western blot检测Bcl-2和Bax的水平;免疫组织化学染色分析Caspase-3阳性神经元的个数和光密度值。结果电针治疗可明显提高AD大鼠学习和记忆功能,并可降低海马CA1区凋亡细胞的数目、上调Bcl-2的表达和下调Bax和凋亡执行蛋白Caspase-3的表达。结论电针可通过调节Bax和Bcl-2的平衡比值,降低Caspase-3的表达,对抗β-淀粉样蛋白诱导的神经元凋亡,改善AD大鼠学习和记忆功能。     

针刺对阿尔茨海默病模型大鼠神经细胞凋亡的影响

目的观察阿尔茨海默病(AD)模型大鼠大脑皮质和海马神经细胞凋亡情况及针刺对细胞凋亡的影响。方法SD大鼠被随机分为空白组、模型组与针刺组;AD模型采用腹腔注射0.96%D半-乳糖与双侧M eynert基底核注射鹅膏蕈氨酸(IBO)损毁复合造模;在造模的同时,针刺组选用百会、大椎、风府针刺治疗;行为学检测采用Y型电迷宫法;细胞凋亡检测采用TUNEL法。结果(1)与空白组比较,模型组大鼠学习与记忆能力均明显降低(均P<0.01),针刺组大鼠学习与记忆能力均较模型组大鼠明显提高(均P<0.01)。(2)模型组大鼠脑组织皮质及海马中可见分布有大量的凋亡细胞,而针刺组皮质和海马中仅见少量凋亡细胞,模型组皮质中凋亡细胞数目(45.34±6.28)明显多于针刺组(20.39±5.48)与空白组(9.46±1.86)(均P<0.01);模型组海马中凋亡细胞数目(53.64±8.20)也明显多于针刺组(11.38±6.36)与空白组(3.62±0.89)(均P<0.01);针刺组皮质与海马凋亡细胞数明显高于空白组(均P<0.01)。结论针刺能一定程度减少复合型AD模型大鼠皮质和海马神经细胞凋亡,从而防止AD模型大鼠学习记忆能力下降。     

草苁蓉乙醇提取物对大鼠肝星状细胞体外增殖与凋亡的影响

目的:探讨草苁蓉乙醇提取物对体外培养的大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)生长抑制及诱导凋亡的影响.方法:选用大鼠HSC-T6进行体外培养,用MTT法测定0.25,0.5,0.75,1.0 g·L-1草苁蓉乙醇提取物作用12,24,36,48 h后对细胞增殖的抑制作用;应用Annexin V与碘化丙啶(PI)双染色荧光显微镜及透射电镜技术观察药物作用后细胞形态学改变;应用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率的变化.结果:①MTT实验表明草苁蓉乙醇提取物能抑制HSC-伪细胞增殖,并显出量效和时效关系.0.75 g·L-1草苁蓉刺激12,24,36,48 h对HSC-T6增殖的抑制率分别为(44.58 ±1.42)％,(51.56±1.34)％,(63.83±0.99)％,(74.77±3.40)％(P＜0.05).②荧光显微镜及透射电镜观察发现草苁蓉乙醇提取物作用于HSC -T6细胞后呈现出典型的细胞凋亡形态学改变,细胞表面微绒毛消失,细胞体积变小,细胞质浓缩,核染色质边集、细胞核固缩、核碎裂、出泡等.③草苁蓉处理后HSC-T6被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率上升,且表现出明显量效关系.0.75 g·L-1草苁蓉乙醇提取物改变HSC-T6周期分布,使G0/G1期细胞由(50.33±0.80)％增至(61.46±1.07)％,表现出G0/G1期阻滞;同时诱导HSC-T6凋亡,凋亡率由(1.44±0.43)％增至(14.20±0.98)％(P＜0.05).结论:草苁蓉乙醇提取物可明显抑制HSC-T6细胞增殖,其作用可能与诱导细胞凋亡,并使细胞周期阻滞于G0/G1期有关.     

耳针对阿尔茨海默病大鼠记忆能力及ChAT和GFAP表达的影响

目的:观察耳针对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力的影响,并探讨其可能机制.方法:30只SD大鼠随机分为对照组、模型组、耳针组,每组10只.模型组、耳针组采用海马CA1区微量多次注射冈田酸(OA)建立AD大鼠模型,对照组注入等体积的对照液二甲亚砜(DMSO).耳针组采用针刺"脑""肾"耳穴治疗,模型组、对照组大鼠耳部未做处理.通过Morris水迷宫观察大鼠行为学改变,免疫组化方法观察胆碱乙酰转移酶(ChAT)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果:耳针治疗后,与模型组比较,耳针组Morris水迷宫定向航行试验中AD大鼠平均逃避潜伏期明显缩短(P＜0.01),空间探索试验中撤去站台后原站台象限活动时间明显延长(P＜0.05),穿越站台次数明显增多(P＜0.01),海马及皮层ChAT表达增多(P＜0.01,P＜0.05),而海马CA1区GFAP阳性反应物表达明显减少(P＜0.01).结论:耳针可以改善AD大鼠学习记忆能力,其可能机制是耳针降低胆碱能神经元的损伤以及减少星形胶质细胞的异常活化与增生.     

基于BDNF/TrkB/PI3K/Akt信号通路的滋肾醒脑汤对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力的影响

目的基于BDNF/TrkB/PI3K/Akt信号通路观察滋肾醒脑汤对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力的影响,探讨其可能的作用机制。方法采用侧脑室注射β-淀粉样蛋白制备AD大鼠模型,假手术组注射等体积生理盐水,将成模大鼠随机分为模型组、中药组及阳性对照组,每组6只,中药组及阳性对照组分别予滋肾醒脑汤(16.74 g/kg)和盐酸多奈哌齐混悬液(0.45 mg/kg)灌胃,假手术组和模型组灌胃等体积蒸馏水,每日1次,连续4周。采用Morris水迷宫实验进行大鼠行为学检测,TUNEL染色检测海马组织神经细胞凋亡情况,Western blot检测海马组织脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶受体B(TrkB)蛋白表达,免疫组化检测海马组织PI3K、Akt蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长,跨越平台次数减少,目标象限停留时间缩短(P<0.05,P<0.01),海马组织神经细胞凋亡率明显升高,BDNF、TrkB、PI3K、Akt蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,中药组及阳性对照组大鼠逃避潜伏期明显缩短,跨越平台次数增加,目标象限停留时间延长(P<0.01,P<0.05),海马组织神经细胞凋亡率明显降低,BDNF、TrkB、PI3K、Akt蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),中药组与阳性对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论滋肾醒脑汤可改善AD大鼠学习记忆能力,其机制可能与上调BDNF/TrkB/PI3K/Akt信号通路蛋白表达,减少神经细胞凋亡有关。     

中药天年饮对衰老大鼠学习记忆及脑单胺类神经递质含量的影响

目的观察中药天年饮(Tiann ianyin,TNY)对D-半乳糖衰老大鼠学习记忆及脑单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)含量的影响。方法选用成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只:正常组、衰老模型组、TNY用药组、阴性对照组。D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型,采用Morris水迷宫检测各组大鼠的空间学习记忆能力及采用高效液相色谱-电化学法检测各组大鼠下丘脑、海马NE,DA,5-HT的含量。结果D-半乳糖衰老大鼠空间学习记忆能力明显下降并且衰老大鼠下丘脑,海马NE,DA,5-HT的含量明显降低(与正常大鼠相比P<0.01);TNY可明显改善衰老大鼠的空间学习记忆能力及提高脑单胺类神经递质的含量(P<0.01或P<0.05)。结论TNY可有效调整中枢神经递质的合成及提高学习记忆能力,具有良好的延缓衰老的作用。     

天参益智方对老年性痴呆模型大鼠神经细胞凋亡的抑制作用

目的研究天参益智方(TSYZ)对AD模型大鼠神经细胞凋亡的抑制作用和抗氧化作用。方法以慢性铝中毒法复制老年性痴呆模型大鼠,用TUNEL法观察模型大鼠海马和皮质内细胞凋亡水平,并检测脑线粒体超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量。结果模型组大鼠海马和皮质具有典型的细胞凋亡特征,T-SOD活性降低,MDA含量升高;而天参益智方治疗组海马和皮质神经细胞凋亡数减少,T-SOD活性升高,MDA含量降低(P<0.05或P<0.01)。结论天参益智方具有明显抑制神经细胞凋亡作用和抗氧化作用,其改善AD大鼠学习记忆功能可能是通过多个环节整体治疗来实现的。     

中药天年饮对衰老大鼠睾丸生精细胞凋亡及相关因素的影响

目的研究中药天年饮对衰老大鼠睾丸生精细胞凋亡及相关因素的影响。方法40只SD大鼠随机分为4组,正常组、衰老模型组、天年饮用药组及阴性对照组,每组均为10只。D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型。采用ELISA方法检测各组大鼠血清睾酮含量、SP免疫组化法检测睾丸生精细胞p53蛋白的表达情况、TUNEL法检测各组大鼠睾丸生精细胞的凋亡情况。结果衰老大鼠血清睾酮含量明显降低(模型组与正常组比较:P<0.05),衰老大鼠睾丸p53阳性细胞率及凋亡指数明显高于正常大鼠(P<0.01)。天年饮用药组大鼠血清睾酮含量较衰老大鼠明显升高(P<0.05),天年饮用药组大鼠睾丸p53阳性细胞率及凋亡指数较衰老大鼠明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论中药天年饮可改善衰老大鼠的生精功能,具有一定延缓衰老的作用。     

复方地黄对老年痴呆大鼠学习记忆及海马GDNF mRNA表达的影响

目的:探讨复方地黄对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠海马GDNF mRNA表达的影响.方法:通过Morris水迷宫筛选40只健康Wistar大鼠随机分出正常组10只(常规饮水和饲料,不给予任何处理),其余3组大鼠均采用链脲佐菌素(STZ)致AD模型,模型组10只造模后不进行治疗.造模后第6天开始治疗,安理申组(0.4 g·kg-1·d-1)和复方地黄组(含生药10 g·kg-1 ·d-1),每组10只,疗程4周.用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,用原位杂交法和RT-PCR检测大鼠海马胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)GDNF mRNA的表达.结果:模型组大鼠学习能力比正常组降低(P＜0.05),复方地黄大鼠上述变化明显改善,与模型组差异显著(P＜0.05).与正常组大鼠比较,模型组大鼠海马GDNF mRNA表达降低明显(P＜0.05);与模型组比较,复方地黄组大鼠海马GDNF mRNA表达明显增加(P＜0.05).结论:复方地黄可能通过增强AD大鼠海马GDNF mRNA表达而起到对神经保护作用.     

脑灵汤对Alzheimer病模型大鼠行为学及海马胆碱能神经系统的影响

目的观察脑灵汤对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力,以及对海马部位乙酰胆碱酯酶(AChE)和胆碱乙酰基转移酶(ChAT)的影响。方法D-半乳糖腹腔注射联合三氯化铝(AlCl3)皮下注射诱导建立大鼠AD模型,造模前后进行Y-电迷宫实验检测各组大鼠学习记忆能力,药物干预后检测各组大鼠学习记忆能力、海马区AChE及ChAT活力。结果治疗30 d后脑灵汤组学习记忆成绩比西药组及模型组显著提高(P均<0.05),海马区AChE活力较模型组及西药组显著降低(P均<0.01),ChAT活力较模型组及西药组显著升高(P均<0.01)。结论脑灵汤能降低大鼠海马组织区乙酰胆碱酯酶活力,升高胆碱乙酰基转移酶活力,改善脑内胆碱能系统的功能,从而提高AD模型大鼠学习记忆能力。     

草苁蓉乙醇提取物对四氯化碳中毒小鼠肝组织的抗脂质过氧化作用

 连续５ｄｉｇ给予草苁蓉乙醇提取物，明显降低四氯化碳（ＣＣｌ＿４）中毒小鼠肝脏过氧化脂质产物硫代巴比妥酸－反应物质（ＴＢＡ－ＲＳ）、共轭二烯和老年脂褐素的生成，使超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的活性恢复至正常。表明草苁蓉乙醇提取物有诱导肝脏清除活性氧自由基酶活性的能力。     

补肾活血方对SAMP8小鼠学习记忆及海马神经干细胞影响实验研究

目的观察补肾活血方对快速老化SAMP8小鼠行为学及海马内神经干细胞的影响,以期为补肾活血方治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的临床应用提供实验依据。方法7月龄的SAMP8雄性小鼠随机分为3组,分别为模型组、中药组和西药对照组,同月龄的SAMR1小鼠作为正常对照组。中药组按照6 g/kg补肾活血方灌胃给药,西药组给予3 mg/kg的盐酸多奈哌齐灌胃,正常组和模型组小鼠给予同体积的生理盐水灌胃。连续灌胃4周后采用水迷宫、免疫组织化学法和Western Blot法观察小鼠行为学、海马区NeuN和Nestin的表达。结果与正常老化SAMR1小鼠相比,模型组SAMP8小鼠学习记忆能力明显下降,海马组织Nestin和NeuN的表达减少(P<0.05);与模型组相比,给予补肾活血方和盐酸多奈哌齐西药干预后,SAMP8小鼠学习记忆能力有所改善,海马组织内Nestin和NeuN的表达增多(P<0.05);中药组和西药对照组SAMP8小鼠相比,学习记忆、海马组织Nestin和NeuN的表达无显著性差异(P>0.05)。结论补肾活血方通过上调SAMP8快速老化小鼠海马组织Nestin和NeuN的表达,促进神经干细胞的增殖和向神经元分化,从而改善SAMP8小鼠的学习认知记忆能力,对AD起治疗作用。