混苯及噪声暴露对工人脂肪肝患病率影响

目的了解混苯和噪声联合暴露对工人脂肪肝患病率的影响。方法根据工作场所混苯与噪声暴露情况将634名工人分成4组,收集研究对象的基本情况,进行外周血谷丙转氨酶(ALT)、甘油三酯(TG)检测及肝脏B超检查。结果混苯与噪声联合暴露组工人脂肪肝患病率为33.3%,ALT偏高率为23.8%,明显高于对照组的18.0%和14.0%(均P<0.05);logistic回归分析表明,联合暴露组工人脂肪肝患病风险升高,OR=2.629(95%CI=1.412~4.898),外周血TG浓度和体质指数(BMI)升高者脂肪肝患病风险也增加,OR值分别为1.602(95%CI=1.320~1.946)和1.292(95%CI=1.187~1.406)。结论外周血TG、BMI及混苯与噪声联合暴露可增加接触工人患脂肪肝的风险。     

一种新的DNA-DNA交联检测法--改良单细胞凝胶电泳法

ＤＮＡ交联是细胞内发生的严重事件 ,它影响ＤＮＡ的正常复制功能 ,从而导致突变或肿瘤。多种致癌物质和抗肿瘤药物可引起ＤＮＡ ＤＮＡ交联 ,如砷、镍、铬、顺铂、丝裂酶素Ｃ等[1～ 4 ] 。因此 ,检测外环境因素所导致的ＤＮＡ ＤＮＡ交联是判断其是否为诱变剂或致癌因素的有效手段。传统检测ＤＮＡ交联物的方法是碱洗脱法 ,但该法昂贵、耗时、操作复杂 ,并涉及到同位素[5] 。发展新的ＤＮＡ ＤＮＡ交联物检测方法实有必要。单细胞凝胶电泳法是一种公认的检测ＤＮＡ链断裂的敏感、快速、简便和廉价的方法[6] 。在此基础上 ,多位学者对其进行…     

细胞色素P4501A1-Wt和Asn~(461)、Val~(462)真核表达载体的构建及人胚肺成纤维细胞转染

目的构建能够高效表达细胞色素P4501A1(CYP1A1)蛋白的细胞株,分析不同基因型蛋白表达的差异。方法首先将已经建立的T载体中CYP1A1-Wt和Asn461、Val462的CYP1A1片断重组至pBABE-neo载体上,转染入人胚肺成纤维细胞(HLF),G418筛选获得阳性细胞,Western-Blot检测CYP1A1蛋白的表达,观察细胞形态,生长曲线,恶变性等生物学特性的改变。结果CYP1A1野生型、变异型转染的HLF细胞均能高效表达CYP1A1蛋白,其生物学特性与正常细胞无显著差异,也不属于恶性细胞。结论通过细胞转染和筛选获得了表达CYP1A1蛋白的细胞株。     

细胞色素P450 1A1-Wt和Asn461、Vla462真核表达载体的构建及人胚肺成纤维细胞转染

目的构建能够高效表达细胞色素P450 1A1（CYP 1A1）蛋白的细胞株，分析不同基因型蛋白表达的差异。方法首先将已经建立的T载体中CYP1A1-Wt和Asn^461、Val^462的CYP1A1片断重组至pBABE-neo载体上，转染入人胚肺成纤维细胞（HLF），G418筛选获得阳性细胞，Western-Blot检测CYP1A1蛋白的表达，观察细胞形态，生长曲线，恶变性等生物学特性的改变。结果CYP1A1野生型、变异型转染的HLF细胞均能高效表达CYP1A1蛋白，其生物学特性与正常细胞无显著差异，也不属于恶性细胞。结论通过细胞转染和筛选获得了表达CYP1A1蛋白的细胞株。     

三氯乙烯对接触工人神经行为功能影响的初步研究

目的：了三氯乙烯（TCE）低浓度、长时间的暴露条件下对暴露人群的早期影响。方法：运用WHO推荐的神经行为功能测试组合（WHO－NCTB）对我国南方某市一区65名TCE作业工人及115名对照工人进行了神经行为功能测试,同时测定研究对象尿中TCE的代谢产物三氯乙酸（TCA）的含量。结果：接触工人车间空气中TCE平均浓度为90．8mg/m^3,接触工人班后尿TCA平均值为52．1mg/g肌酐;接触组NCTB测试项目中数字译码、简单反应时的标准差、优势手提转敏捷度、目标追踪错误数及总数得分显著差于对照组,通过等级相关分析,发现接触组班后尿TCA水平与目标追踪正确数、总数呈显著负相关;与情感问卷中困惑－迷茫项、目标追踪错误数呈显著正相关。结论：长时间接触较低浓度TCE早期可对暴露者神经行为功能产生明显影响,主要表现在短时间记忆力、注意力降低、手运动速度下降,手－眼运动协调性和稳定性差,并有一定的消极情感状态改变;尿TCA水平与以上改变呈一定的剂量－反应关系。     

P4501A1基因Thr~(461)→Asn~(461)及Ile~(462)→Val~(462)突变载体的构建

目的构建P4501A1基因cDNAThr461→Asn461及Ile462→Val462突变载体,为进一步研究CYP1A1的功能和致癌机制奠定基础。方法根据人CYP1A1基因(GeneBankNM-000499)cDNA序列设计通用引物Pm3/Pm4和突变引物Pt15/Pt16;Pt17/Pt18,内含酶切位点和突变位点,先用Pm3/Pt16,Pm3/Pt18组成两对引物,以pGEM-T-CYP1A1质粒为模板进行第一轮扩增,获得上游1397bp片断,再用Pt15/Pm4,Pt17/Pm4组成两对引物以10ngpGEM-T-CYP1A1质粒为模板进行第二轮扩增,得到下游177bp片断。然后用Pm3/Pm4做引物以第一、第二轮扩增产物为模板进行第三轮扩增,获得的1·5kb扩增产物用1%琼脂糖凝胶分离并回收纯化,将纯化的PCR产物与pMD-T载体连接后转化大肠埃希菌DHα5感受态细胞,挑单克隆扩增、质粒抽提后进行酶切和测序鉴定。结果三轮PCR扩增得到的1·5kb片断,经内切酶BamHI和SalI消化和T7p和SP6通用引物进行双向测序,证实克隆的目的片段与GeneBank中人CYP1A1基因cDNA的序列同源性为99·9%,且包含两个设计的突变位点Asn461、Val462。结论本实验成功地构建了含突变位点Asn461、Val462的CYP1A1基因cDNA的片断。     

健康大学生一次性X线胸透所致遗传损伤及修复效应的动态观察

目的探索一次X线体检胸透对健康成年人的遗传损伤效应及持续时间,为进一步评估医用X射线检查的健康风险提供线索。方法采用定组研究方法招募16名在校大学生,检测X线前后氧化应激水平及γ-H2AX表达变化,采用胞质阻滞微核试验、全血彗星实验法,观察胸透前1 h、胸透后1 h、15 d、2个月、7个月志愿者外周血细胞的遗传损伤及修复情况。结果 16名志愿者接受胸透的平均有效剂量为(1.55±0.53)mSv(0.99~3.16 m Sv),胸透前后血清中氧化应激指标总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽还原酶(GSH)含量均有明显升高(P0.05);与胸透前相比,γ-H2AX的表达在胸透后1 h迅速上调(P0.05);胸透后1 h及2个月后微核率及三个彗星参数(TI,TM,OTM)显著升高(P0.05)。广义估计方程回归在校正年龄、性别因素后提示随着体表入射剂量的升高,微核率及OTM值有显著升高,差异有统计学意义(P0.05);平均有效剂量每升高一个单位,彗星指标OTM升高0.333个单位,微核率升高1.094个单位(P0.05)。结论一次X线胸透即可引起健康人氧化应激水平升高,造成遗传损伤,且所致的DNA损伤修复时间可能需大于两个月,结论仍需进一步验证。     

代谢活化系统在人细胞转化模型中的应用

【目的】 探讨不同的代谢活化系统在人细胞转化模型中潜在的应用价值&#65377; 【方法】 在永生化人肝细胞L02中导入第12密码子突变的H-RAS癌基因(L02-R细胞),使其处于恶性转化前的易感状态&#65377;选择具有代表性的间接致癌物黄曲霉毒素B1 (aflatoxin B1, AFB1) 作用于永生化和转化前期细胞株,采用三种代谢系统:高表达代谢酶P450 CYP1A2,低剂量底物诱导和加入经典的大鼠S9代谢辅助系统,通过软琼脂克隆形成试验和裸鼠皮下成瘤试验来比较在不同的代谢活化系统下,间接致癌物诱导细胞转化的效能&#65377; 【结果】 蛋白印迹验证H-Ras稳定高表达的转基因细胞株构建成功&#65377;通过Ames试验,蛋白印记和CYP1A2酶活性等方法比较三种代谢系统酶活性&#65377;在未加代谢系统的条件下,经AFB1染毒后第17周L02-R细胞发生转化,而对照组细胞L02-V在染毒20周未能发生转化&#65377;而加入S9代谢系统时,AFB1诱导L02-R细胞在第8周发生转化,比未加代谢系统缩短了9周;经低剂量0.1 μmol/L AFB1诱导和高表达CYP1A2均使L02-R的转化间期缩短6周,于第11周发生转化&#65377; 【结论】 三种代谢系统都能够促进间接致癌物AFB1的代谢活化,缩短细胞转化的时间,提高细胞转化效率&#65377;与传统的S9代谢活化系统相比,低剂量诱导作为新的代谢活化的方法在细胞转化试验中有着良好的应用前景&#65377;     

光污染——健康的隐形杀手

之前,广州有人发起了名为“广州夜十二小时”的拒绝光污染行动,得到了不少人的支持。早在2009年就有调查报告显示,全球70％的人口生活在光污染中。大气污染、水污染、噪声污染等名词,很多人耳熟能详,但是,光污染到底是怎么一回事？