双氢青蒿素促进胶质瘤GL261细胞的凋亡

目的研究双氢青蒿素对胶质瘤GL261细胞凋亡的影响与作用机制。方法 0、30、60、90μmol/L双氢青蒿素处理GL261细胞,倒置显微镜下观察细胞形态改变,CCK-8法检测处理后GL261细胞活力的改变,Annexin V PI法检测双氢青蒿素对GL261细胞凋亡的影响,免疫荧光显微镜观察双氢青蒿素处理后激活型Caspase-3的表达改变与亚细胞定位,Western blot检测激活型Caspase-3与抗凋亡蛋白Bcl-xL的表达变化。结果双氢青蒿素能有效诱导胶质瘤GL261细胞凋亡,抑制细胞活性,具有浓度依赖性(P<0.05);30μmol/L双氢青蒿素作用12 h即可诱导Caspase-3激活并与细胞核共定位;双氢青蒿素能够下调Bcl-xL、上调激活型Caspase-3的表达水平,且具有浓度依赖性(P<0.05)。结论双氢青蒿素通过抑制抗凋亡蛋白Bcl-xL、诱导Caspase-3激活途径介导胶质瘤GL261细胞凋亡。     

基于太赫兹波谱差异的脑胶质瘤术中原位识别技术研究

目的 探索太赫兹波检测技术在胶质瘤切除术中辅助进行定位定性同步诊断的技术可行性.方法 采用反射式全光纤太赫兹时域光谱系统,于较为干燥的空气环境(湿度10％)中,获取在体条件下小鼠大脑半球凸面脑胶质瘤和正常脑组织的太赫兹时域脉冲信号,提取两者光谱参数,对折射率和吸收系数等光谱差异分析结果进行术中胶质瘤原位识别研究.结果 在信噪比可接受的范围内(0～1.5 THz),在体正常脑组织和脑胶质瘤的折射率主要在0.4～0.6 THz波段有差异,而二者的吸收系数在0.4 ～0.9 THz范围内有差异,说明基于太赫兹波谱差异可有效识别和定位肿瘤及正常脑组织.结论 太赫兹波谱识别技术在手术中进行胶质瘤原位识别具有可能性.     

高压氧对脑内种植GL261胶质瘤C57小鼠尼莫司汀化疗后生存期的影响

目的观察高压氧辅助治疗对脑内种植GL261胶质瘤细胞系C57小鼠尼莫司汀(嘧啶亚硝脲)化疗后平均生存期的影响。方法于C57小鼠右侧尾状核种植GL261胶质瘤细胞,术后第7天分别接受单纯高压氧或单次尼莫司汀化疗或高压氧与尼莫司汀联合治疗,观察不同治疗方法对荷瘤鼠生存期的影响。结果大体标本观察显示,不同处理组荷瘤鼠肿瘤体积均较大、占位效应明显,正常脑组织受压严重、中线结构偏移,但不同处理组肿瘤体积比较差异无统计学意义(F=0.602,P=0.618)。平均生存期(F=12.177,P=0.000)评价和Kaplan-Meier生存曲线分析(χ2=13.604,P=0.003)显示,单纯高压氧治疗(χ2=0.365,P=0.546)和单次尼莫司汀化疗(χ2=0.884,P=0.347)对荷瘤鼠生存期无明显影响;高压氧联合尼莫司汀化疗(χ2=9.962,P=0.002)可延长荷瘤鼠生存时间,且疗效优于单纯高压氧治疗(χ2=6.925,P=0.008)和单次尼莫司汀化疗(χ2=7.152,P=0.007)。结论高压氧对颅内种植GL261胶质瘤细胞系的C57小鼠生存期和生长无明显影响和促进作用,联合尼莫司汀化疗则可使荷瘤鼠平均生存期明显延长,提示高压氧对尼莫司汀化疗具有增效作用。     

980nm连续激光在金属医疗器械表面高效灭菌的实验研究

目的 探讨980 nm红外连续激光对金属医疗器械表面高效灭菌的功率和时间阈值关系.方法 采用人工污染实验法,以无菌钢制手术刀为载体,用金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别进行污染,经不同功率、对应不同辐照时间的激光消毒灭菌后用细菌培养基清洗刀片采样,采用增菌培养来检测红外激光对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的灭活情况.结果 980 nm激光在5.24 W时辐照29 s,6.87 W时辐照24 s,8.33 W时辐照14 s,10.11W时辐照14 s都能彻底杀死金黄色葡萄球菌;980 nm激光在5.24 W时辐照22 s,6.87 W时辐照12s,8.33W时辐照11s,10.11W时辐照9s都能彻底杀死大肠杆菌.大肠杆菌比金黄色葡萄球菌更易灭活.依据实验数据拟合,在同一激光功率下,两种细菌存活率与辐照时间的函数符合一阶反应动力学形式.结论 980 nm红外激光能够实现金属医疗器械表面的快速消毒灭菌,并且功率越高则时间越短、效果越好.     

人原代胶质瘤起始细胞的生物学行为初步研究

目的研究人原代胶质瘤起始细胞（GICs）的表型、自我更新能力、成瘤能力和耐药性等生物行为学特性。方法运用常规培养法和条件培养法对来自手术切除的同一胶质母细胞瘤组织分别进行培养,同时获得贴壁生长的人原代胶质瘤细胞（AGCs）和GICs;通过免疫荧光染色法测定其神经胶质酸性蛋白（GFAP）、CD133和巢蛋白的表达,通过单克隆形成实验和梯度密度成瘤实验检测其成球和成瘤能力,利用细胞计数药盒-8检测两种细胞在嘧啶亚硝脲（ACNU）和长春新碱（VCR）作用下的增殖曲线。结果 GICs呈神经球样生长且表达CD133和巢蛋白;47.8%±5.6%的GICs能够自我更新,而可表达GFAP的AGCs中仅有4.3%±1.6%能形成单克隆;ACNU对GICs的IC₅0=1×10^-3.1mol/L,对AGCs的IC₅0=1×10^-3.9mol/L,两者相比较,相差显著（P<0.05）;VCR对GICs的IC₅0=1×10^-4.3mol/L,对AGCs的IC₅0=1×10^-5.5mol/L,两者相比较,亦相差显著（P<0.05）。结论利用条件培养法可以获得具有明显干性的GICs,与分化的AGCs相比具有更强的自我更新能力和成瘤能力,且GICs对ACNU和VCR较AGCs更为耐药。     

漫反射光谱在体检测裸鼠胶质瘤

目的探索裸鼠正常脑组织与胶质瘤组织的可见近红外漫反射光谱特征及鉴别方法。方法制作裸鼠皮下U87胶质瘤模型,按光谱检测时间分为2周、3周、4周3组,每组10只,分别检测正常脑组织、肿瘤表面和肿瘤中心组织3个部位的可见光近红外波段的漫反射光谱。比较各组间光谱曲线特征及平均漫反射光谱强度比值R545/R575。结果肿瘤组织与正常脑组织的可见光近红外漫反射光谱曲线存在明显差异。肿瘤组织R545/R575比值较正常脑组织高,差异有统计学意义(P0.05)。结论漫反射光谱技术可实时、无创识别胶质瘤组织,在脑胶质瘤手术中可能有很好的应用价值。     

草麻黄水提物对大鼠蛛网膜下腔出血后继发性脑损伤的影响

目的：观察草麻黄水提物对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后继发性脑损伤的治疗作用并探讨其部分机制。方法SD 大鼠50只,分为模型组、对照组和3个不同浓度(4、12、36 mg/kg 草麻黄水提物)治疗组,术后3 d,各组动物脑含水量及脑组织匀浆检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)与羟自由基等的变化;HE 染色观测各组动物 SAH 与水肿情况;免疫组织化学及 Western blot 法检测各组动物脑组织补体 C3的表达变化。结果术后3 d,同模型组相比,12、36 mg/kg 治疗组脑组织 MDA 水平、GSH-Px 酶活力、羟自由基能力显著降低(P <0.01),4 mg/kg 治疗组的 MDA 水平变化不明显(P >0.05),但GSH-Px 酶活力与抑制羟自由基能力显著降低(P <0.01),同时,12、36 mg/kg 治疗组脑组织含水量较模型组明显降低;Western blot 与免疫组织化学显示36 mg/kg 治疗组补体 C3的表达较模型组明显降低。结论草麻黄水提物能降低脑水肿的严重程度,从而减轻炎性反应,对 SAH 动物具有较好的治疗效。     

丙戊酸钠通过p21调控大鼠神经干细胞的增殖

目的 探讨丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对体外培养的成年雌大鼠脊髓神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖的影响.方法 采用不同浓度的VPA(10-5、10-4、10-3、10-2、10-1、1、10 mmol/L)作用于NSCs,CCK-8法检测在不同时间点(0、24、48、72 h)对细胞增殖的影响；VPA(10-5、l mmol/L)作用于NSCs 48 h后,流式细胞仪测定细胞周期分布,PCR测定p21在基因水平的表达,Western blot测定p21在蛋白质水平的表达.结果 CCK-8检测显示,当VPA浓度＞ 10-5 mmol/L时,体外培养的成年大鼠脊髓NSCs的增殖受到明显抑制,且具有时间依赖性.流式细胞仪细胞周期检测显示,同样浓度下,VPA可阻滞NSCs由G0/G1期向S期转换,表现为G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞减少.PCR检测发现VPA可促进p21基因水平的表达.Western blot检测发现VPA可促进p21蛋白质水平的表达,各组间差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 VPA可能通过促进p21表达,使NSCs阻滞于G0/G1期,最终抑制NSCs增殖.