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目的观察沉默肝癌SMMC-7721细胞中叉头框Q1(FOXQ1)基因的表达对奥沙利铂敏感性的影响。方法 (1)构建靶向FOXQ1基因的shRNA重组慢病毒载体及阴性对照重组慢病毒载体,再筛选最佳的干扰序列。(2)将细胞分为3组:干扰组(转染FOXQ1-sh RNA-1重组慢病毒载体)、阴性对照组(转染阴性对照重组慢病毒载体)及空白对照组(未做任何处理)。检测3组细胞中FOXQ1 mRNA及其蛋白的表达。(3)将另一部分细胞分为干扰组、阴性对照组、空白对照组、干扰+奥沙利铂、阴性对照+奥沙利铂组与空白对照+奥沙利铂组,给予相应处理,培养48 h后检测细胞凋亡率。细胞活力实验方法同细胞凋亡率实验。结果 (1)FOXQ1-shRNA-1组细胞中FOXQ1 mRNA及其蛋白的表达水平均低于FOXQ1-shRNA-2组和FOXQ1-shRNA-3组(P0.05),为最佳干扰序列。(2)干扰组细胞中FOXQ1 mRNA及其蛋白的表达水平均低于阴性对照组和空白对照组(P0.05),但阴性对照组和空白对照组比较差异均无统计学意义(P0.05)。(3)不管是在加入OXA条件下,还是在未加入OXA条件下,干扰组细胞的凋亡率均高于阴性对照组与空白对照组(P0.05),细胞活力均低于阴性对照组和空白对照组(P0.05),但同条件下阴性对照组和空白对照组的细胞凋亡率和细胞活力比较差异均无统计学意义(P0.05);在干扰组、阴性对照组和空白对照组中,均是加入OXA组的细胞凋亡率高于未加入OXA组(P0.05),加入OXA组的细胞活力低于未加入OXA组(P0.05)。结论沉默FOXQ1基因的表达能够有效诱导SMMC-7721细胞的凋亡,并增加其对奥沙利铂的化疗敏感性。 相似文献
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目的研究双氢青蒿素对胶质瘤GL261细胞凋亡的影响与作用机制。方法 0、30、60、90μmol/L双氢青蒿素处理GL261细胞,倒置显微镜下观察细胞形态改变,CCK-8法检测处理后GL261细胞活力的改变,Annexin V PI法检测双氢青蒿素对GL261细胞凋亡的影响,免疫荧光显微镜观察双氢青蒿素处理后激活型Caspase-3的表达改变与亚细胞定位,Western blot检测激活型Caspase-3与抗凋亡蛋白Bcl-xL的表达变化。结果双氢青蒿素能有效诱导胶质瘤GL261细胞凋亡,抑制细胞活性,具有浓度依赖性(P<0.05);30μmol/L双氢青蒿素作用12 h即可诱导Caspase-3激活并与细胞核共定位;双氢青蒿素能够下调Bcl-xL、上调激活型Caspase-3的表达水平,且具有浓度依赖性(P<0.05)。结论双氢青蒿素通过抑制抗凋亡蛋白Bcl-xL、诱导Caspase-3激活途径介导胶质瘤GL261细胞凋亡。 相似文献
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目的 通过体外研究初步探讨缺氧可以诱导胶质瘤细胞逆分化形成肿瘤干样细胞.方法 ①采用CD133+细胞免疫磁珠分选法分离胶质瘤细胞得到CD133-细胞群.②缺氧处理CD133-细胞48 h后行免疫荧光染色鉴定肿瘤干细胞样标记蛋白(SOX2,OCT-4,KLF-4,Nanog,CD133)表达情况,并分别缺氧处理0、3、6、9、12、24 h及0、12、24、48、72 h行qRT-PCR及Western blot检测.流式细胞术检测胶质瘤细胞缺氧培养后CD133+细胞比例变化,检测时间为缺氧培养1、3、5、7d.③缺氧处理胶质瘤细胞1、3、5、7d后流式分析细胞周期及凋亡改变.结果 ①荧光检测结果表明,肿瘤干细胞样标记蛋白在CD133-胶质瘤细胞缺氧处理48 h后高表达;qRT-PCR及Western blot检测结果表明,缺氧处理胶质瘤细胞可以明显上调肿瘤干细胞样蛋白表达(P<0.05),其中qRT-PCR显示SOX-2,OCT-4及Nanog最高表达在缺氧后9h,KLF-4及CD133在缺氧后12h表达最高.Westem blot蛋白检测显示OCT-4最高表达在缺氧后12 h,CD133表达最高在缺氧24h后,KLF-4及Nanog最高表达则在缺氧48 h后,SOX-2在缺氧72 h后表达量最高.另外随着缺氧时间的延长,CD133+细胞数比例逐渐升高(P<0.05).②细胞周期结果提示缺氧处理肿瘤细胞后,Go/G1期延长,G2/M+S缩短(P<0.05);凋亡结果提示常氧培养组更易凋亡(P<0.05).结论 缺氧可以诱导CD133-胶质瘤细胞肿瘤干样细胞形成. 相似文献
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目的:探讨视频脑电图(V—EEG)与单光子发射计算机断层扫描(SPECT)联合应用在顽固性癫痫术前致痂灶定位中的价值。方法:对103例顽固性癫痫患者,在MRI扫描的基础上,术前行V—EEG和SPECT检查,联合定位致痫灶,通过术中皮层脑电图(ECoG)检查验证致痫灶定位的准确性。结果:103例患者发作间期V—EEG检查均有异常,85例患者检查过程中有癫痫发作1~3次。SPECT检查异常95例,其中表现为放射性核素稀疏区86例,放射性核素浓聚区9例。术前两者联合定位致痫灶91例,与术中ECoG所确定的致痫灶部位一致者85例,符合率为93.4%。结论:术前V-EEG与SPECT的联合应用可以较准确地定位顽固性癫痫的致痫灶,该法对于MRI无异常的癫痫患者之术前致痫灶定位尤其具有重要意义。 相似文献
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fMRI功能导航下切除汉语运动性语言区附近病变 总被引:3,自引:0,他引:3
目的探讨功能磁共振(functional magnetic resonance imaging,fMRI)导航在汉语运动性语言区附近病变手术中的应用价值。方法对43例大脑皮层运动性语言区附近病变患者,通过组块设计的汉语朗读任务,利用血氧水平依赖性功能磁共振成像(BOLD-fMRI)获得运动性语言区激活,利用磁共振弥散张量成像技术(diffusion tensori maging,DTI)获得白质纤维束走行,将结构影像、fMRI功能影像与DTI的各项异性系数(FA)图像同时传入导航系统,术中定位fMRI确定的语言区,在唤醒状态利用皮层电刺激技术进行语言区验证,避开运动性语言区在显微镜下切除病变。结果本组患者29例术前语言功能正常,14例有不同程度语言功能障碍。38例获得了有效的fM-RI语言区激活,进行了36例核心激活脑区与皮层电刺激比较:25例为重叠关系,11例为邻近关系。手术全切除17例,次全切除14例,大部份切除12例。术后语言功能8例较术前好转,31例无变化,4例出现短暂性运动性失语。结论汉语朗读任务所获得的fMRI运动性语言区激活具有良好的敏感性与准确性;fMRI导航手术可以提高汉语运动性语言区附近病变切除程度,减少术后运动性失语的发生。 相似文献
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目的观察高压氧辅助治疗对脑内种植GL261胶质瘤细胞系C57小鼠尼莫司汀(嘧啶亚硝脲)化疗后平均生存期的影响。方法于C57小鼠右侧尾状核种植GL261胶质瘤细胞,术后第7天分别接受单纯高压氧或单次尼莫司汀化疗或高压氧与尼莫司汀联合治疗,观察不同治疗方法对荷瘤鼠生存期的影响。结果大体标本观察显示,不同处理组荷瘤鼠肿瘤体积均较大、占位效应明显,正常脑组织受压严重、中线结构偏移,但不同处理组肿瘤体积比较差异无统计学意义(F=0.602,P=0.618)。平均生存期(F=12.177,P=0.000)评价和Kaplan-Meier生存曲线分析(χ2=13.604,P=0.003)显示,单纯高压氧治疗(χ2=0.365,P=0.546)和单次尼莫司汀化疗(χ2=0.884,P=0.347)对荷瘤鼠生存期无明显影响;高压氧联合尼莫司汀化疗(χ2=9.962,P=0.002)可延长荷瘤鼠生存时间,且疗效优于单纯高压氧治疗(χ2=6.925,P=0.008)和单次尼莫司汀化疗(χ2=7.152,P=0.007)。结论高压氧对颅内种植GL261胶质瘤细胞系的C57小鼠生存期和生长无明显影响和促进作用,联合尼莫司汀化疗则可使荷瘤鼠平均生存期明显延长,提示高压氧对尼莫司汀化疗具有增效作用。 相似文献
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目的 评价fMRI定位感觉性语言中枢的敏感性与准确性,探讨fMRI神经导航系统在感觉性语言中枢邻近区域胶质瘤手术中的应用价值.方法 采用组块设计的语言理解任务和血氧水平依赖性功能磁共振成像(BOLD-fMRI)激活31例感觉性语言中枢邻近区域胶质瘤患者的感觉性语言中枢,于神经导航系统下进行结构像与功能像融合以定位感觉性语言中枢;手术中采用皮质电刺激定位感觉性语言中枢.根据fMRI与皮质电刺激吻合度进行分类,以避开感觉性语言中枢,于显微镜下切除胶质瘤.结果 31例患者中感觉性语言中枢功能像达"非常好"标准19例,图像"清楚"10例,图像"采集不成功"2例.感觉性语言中枢与皮质电刺激相关性评价显示,28例中24例为重叠关系,4例为邻近关系.肿瘤完全切除11例,次全切除10例,大部切除10例.手术后语言功能较手术前明显改善9例,无变化19例,短暂性感觉性失语3例.感觉性语言中枢与切除大脑皮质间距离>10 mm者,手术后均未出现语言功能恶化.结论 fMRI定位感觉性语言中枢具有良好的敏感性与准确性.fMRI神经导航系统下切除胶质瘤可以减少感觉性语言中枢邻近区域胶质瘤患者手术后语言理解障碍的发生,提高肿瘤完全切除率.感觉性语言中枢与切除大脑皮质之间的相对安全距离为10 mm. 相似文献
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目的 探讨缺氧对C57小鼠胶质瘤肿瘤形成及生存期的影响.方法 ①培养GL261胶质瘤细胞系,转染荧光素酶基因,制备GL261-Luc细胞.②42只清洁健康级雌性C57小鼠[6周龄,体质量(17.5±2.3)g]脑内注射GL261-Luc细胞荷瘤,分成常氧饲养组(21%O2)和低氧饲养组(10%O2),每组21只,其中6只分别于7、14、21 d后行活体成像图像采集以观察小鼠肿瘤形成能力;另外15只用于生存期观察,时限30 d.③取材并HE染色观察肿瘤形成情况,免疫组化GFAP鉴定胶质瘤.结果 活体成像显示缺氧饲养组小鼠有明显肿瘤形成,而常氧饲养组无肿瘤形成,计算颅内荷瘤细胞病毒活性并统计分析得缺氧饲养组肿瘤形成能力强于常氧饲养组(P<0.05);生存期分析显示缺氧饲养组小鼠平均生存期为22.5 d,生存率明显低于常氧饲养组(P<0.01);脑组织大体标本和HE染色发现缺氧组小鼠共18只有脑肿瘤形成,常氧组仅2只形成肿瘤,免疫组化GFAP胶质瘤鉴定示肿瘤内高表达.结论 GL261胶质瘤细胞系C57小鼠成瘤模型缺氧饲养后肿瘤形成能力明显强于常氧饲养组,且生存率较常氧组更低,提示缺氧可以增加肿瘤恶性. 相似文献
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皮层脑电图监测在顽固性癫痫手术中的应用(附155例报告) 总被引:1,自引:1,他引:0
目的总结皮层脑电图在顽固性癫痫手术中的应用经验并评价手术疗效。方法 155例顽固性癫痫患者,术前行MRI、视频脑电图、单光子发射计算机断层成像与脑磁图检查,明确致痫灶,在皮层脑电图监测下手术。54例颞叶癫痫患者行颞叶前部与海马杏仁核显微切除术,47例颅内病灶患者行病灶与癫痫灶切除术,35例行癫痫灶切除术,19例致痫灶位于功能区的患者行皮层电凝及软脑膜下横纤维切断术。结果术后随访1~2年,按Engel分级:Ⅰ级88例,Ⅱ级46例,Ⅲ级13例,Ⅳ级8例。术后患者神经功能保持良好,未出现明显后遗症。结论在术前多种方法联合定位癫痫灶的基础上,应用皮层脑电图可以提高顽固性癫痫患者的手术疗效。 相似文献