原发性高血压分子生物学的研究进展

原发性高血压是一种多基因及多种环境影响的疾病，其发病具有明显的家族倾向，并与种族相关，目前原发性高血压的分子生物学研究主要是在特定人种中找到与原发性高血压相关的基因，目前大多数研究是利用定位克隆来寻找与原发性高血压相关的基因，包括候选基因法和全基因扫描两种方法，并有研究人员已开始进行有关基因功能的研究。     

东方田鼠部分BAC文库的微卫星筛选

目的从东方田鼠的部分BAC文库中筛选微卫星。 方法应用非放射性的菌落杂交方法和磁珠富集法从东方田鼠的BAC文库中筛选高质量的微卫星标记。结果以地高辛标记的寡聚核苷酸(CA)20 为探针,通过菌落杂交法从136个东方田鼠BAC克隆中筛选出杂交信号最强的20个阳性克隆。再将这20个阳性克隆分别通过链霉亲和素磁珠法构建亚克隆文库,从中选取400个经PCR鉴定为阳性的亚克隆进一步测序分析,共得到220个微卫星序列,阳性率55%。选取重复次数高,侧翼序列完整的微卫星序列设计74对引物,共有35对引物能扩增出清晰的条带,其中16对引物具有多态性。结论成功且高效地从阳性BAC克隆中筛选出微卫星序列,这些微卫星和阳性BAC克隆可用于后续的定位研究。     

小鼠白内障基因突变方式、分布及基因定位

哺乳动物发育相关的功能基因的鉴定多来源于自发或诱发突变的小鼠。小鼠白内障作为较易鉴定的性状,目前业已明确的突变多达140余个。自发突变的小鼠主要来源于大规模饲养,诱发突变主要通过X射线与ENU处理获得,基因敲除与转基因小鼠亦可获得白内障性状。已知的白内障相关基因分布于小鼠20条染色体,其中以1号染色体最多,并常于小鼠胚胎时期起始表达。小鼠白内障表型多由单基因突变引起,突变的确定主要通过F2代家系全基因组扫描、精细定位、单倍型分型与测序验证等程序。本文从小鼠白内障基因突变来源、基因分布、基因定位与基因表达等角度较为全面的阐述了小鼠先天性白内障的研究进展。     

小家鼠群体基因组连锁不平衡研究

模式动物小鼠是复杂性状相关疾病遗传研究的重要资源.连锁不平衡(linkage disequilib-rium,LD)是群体基因组遗传的重要信息.如果群体LD程度高,相关连锁区段大,有助于用少量遗传位标来对目标基因进行初步定位;反之,如果群体LD程度低,相关连锁区段小,则利用高密度的遗传位标可以对目标基因进行精细定位.本文介绍了实验小鼠群体和野生小鼠群体相关的LD、与LD相关的部分遗传参数以及利用LD进行相关基因定位研究.并提示实验小鼠和野生小鼠各具优势,都是复杂性状基因定位的重要遗传资源.     

构建基于荧光多重cPCR的小鼠基因拷贝数检测方法

目的： 建立基于竞争性聚合酶链式反应(competitive polymerase chain reaction, cPCR)小鼠基因拷贝数变异（copy number variaitons, CNVs）的检测方法，用于检测“野生来源小家鼠一号染色体替换系”群体（Population of specific chromosome 1 substitution strains, PCSSs）的CNVs。 方法：选取小鼠一号染色体上11个CNVs位点，及7、9和X染色体上各1个内对照位点，分别构建克隆质粒为竞争性粒模板，应用cPCR技术，建立荧光通用引物多重cPCR 检测方法。结果：多重cPCR 方案适用于小鼠一号染色体上11个CNV位点的拷贝数检测，且能准确检测X染色体的拷贝数。结论：实现小鼠快速、高通量的CNVs检测，可准确检测小鼠1号染色体中11个CNV位点的拷贝数变异。     

β2-肾上腺素能受体基因编码区+1053位和 +1239位单核苷酸多态性与高血压的关系

目的　检测β2-肾上腺素能受体(β2-AR)基因编码区部分序列单核苷酸多态性(SNPs),并探讨这些SNPs与中国汉族人群原发性高血压的关系。方法　应用荧光标记自动测序法测定β     

东方田鼠指名亚种的线粒体基因组序列分析及系统进化研究

目的 获得东方田鼠指名亚种的线粒体基因组序列,为东方田鼠的遗传结构和系统进化研究提供分子数据.方法 照近缘的台湾田鼠的线粒体基因组序列(Microtus kikuchii,NC_003041.1)设计9对引物,利用传统和长距离PCR结合引物步移的策略,首次完成了东方田鼠指名亚种的线粒体基因组测序(Genbank:JF261174),并对该物种的线粒体基因组序列进行了分析,并利用线粒体基因组上的细胞色素b(Cytb)基因序列构建系统进化树,探讨中国东方田鼠的系统进化关系.结果 东方田鼠指名亚种的线粒体基因组全长16 312 bp,含有13个蛋白质编码基因、2个rRNA基因、22个tRNA基因和一个非编码控制区.同时,在其控制区,分别发现了终止序列区(EATS1、EATS2)、中央保守区1(CSB1)的相关保守序列和一个保守的Poly(C)10区段.在比较了东方田鼠指名亚种和长江亚种以及近缘物种的线粒体轻链复制起点(OL)序列的二级结果,发现茎环结构在茎和邻近序列处表现出高度保守性,而在环上的序列却存在着一定差异.通过Cyt b基因构建的系统进化树表明中国的东方田鼠与分布于俄罗斯的Microtus middendoffi田鼠,表现出最亲缘的系统进化关系.结论 中国东方田鼠指名亚种线粒体基因组各编码基因的长度、位置符合典型的脊椎动物特征,本研究的结果将为中国东方田鼠的系统进化、亚种分类研究提供重要的数据参考.     

野生小家鼠遗传多样性与复杂性状研究

模式动物小鼠已成为复杂性状相关疾病（complex trait）遗传研究的主要资源,过去20年中已有数千个调控各种复杂性状的数量性状座位（QTLs）在小鼠组被初步定位,但现有实验小鼠遗传多样性缺乏已成为复杂性状进一步研究的主要障碍。本文重点介绍野生小家鼠遗传多样性,及野生小家鼠遗传多样性应用于复杂性状研究的前景。     

STR和SNP对3个小鼠1号染色体替换系筛选结果的比较

目的 比较STR和SNP对3个1号染色体替换系的分型结果,并为每个替换系选择合适的基因分型方法.方法 采用20个SNP和10个STR位点分别对3个1号染色体替换系N2代各40个样本进行分型.结果 采用20个SNP位点,从C3H/He替换系中筛选到6个样本,从FVB/N替换系中筛选到9个样本,从AKR替换系中筛选到4个样本.采用10个STR位点,从C3H/He替换系中筛选到6个样本,从FVB/N替换系中筛选到10个样本,从AKR替换系中筛选到6个样本.结论 根据每个品系基因组背景不同,可选择三组多重STR方案作为C3H/He替换系的基因分型方法,三组多重SNP方案作为FVB/N和AKR替换系的基因分型方法.     

用LA-PCR方法克隆东方田鼠部分Y染色体序列

目的 克隆东方田鼠长江亚种(Microtus fortis calamorum)和宁夏指名亚种(Microtus fortis fortis)Y染色体的部分序列,并挖掘这两个亚种间的单核苷酸多态性位点(SNPs).方法 本研究利用依据Y染色体保守性靶标位点(YCATS)设计的引物,测得Y染色体上的8个内含子短片段序列,进而设计长片段PCR(LA-PCR)引物来获得相距几kb的两个内含子之间的长片段序列.结果 获得东方田鼠长江亚种和宁夏指名亚种Y染色体上的7300 bp序列,比对这两个亚种的序列后发现4个SNPs位点.结论 获得了田鼠Y染色体上的7 300 bp序列和4个SNPs位点.